《最新《食品安全国家标准》GB23200.105-2016.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《最新《食品安全国家标准》GB23200.105-2016.pdf（10页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、沸中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准GB0521-200食品安全国家标准肉及肉制品中甲萘威残留量的测定液相色谱-柱后衍生荧光检测法National food safety standardsDetermination of carbaryl residue in meat and meat productsHPLC-fluoresce detector with post column derivation2016-12-18 发布2017-06-18 实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会中华人民共和国农业部发布国家食品药品监督管理总局GB 23200.1052016代替SN/T
2、 01222011GB 23200.105-20161前言本标准代替SN/T 0122-2011 进出口肉及肉制品中甲萘威残留量检验方法 液相色谱-柱后衍生荧光检测法。本标准与SN/T 0122-2011相比，主要变化如下：标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式；标准名称中“进出口肉及肉制品”改为“肉及肉制品”；标准范围中增加“其它食品可参照执行”。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN 0122-1992；SN/T 0122-2011。GB 23200.105-20161食品安全国家标准食品安全国家标准肉及肉制品中甲萘威残留量的测定肉及肉制品中甲萘威残留量的测定液相色谱液相色谱-柱后
3、衍生荧光检测法柱后衍生荧光检测法1 1范围范围本标准规定了进出口肉及肉制品中甲萘威残留量的液相色谱-柱后衍生荧光检测法。本标准适用于进出口牛肉、鸡肉、虾肉、鱼肉及火腿罐头中甲萘威残留量的测定，其它食品可参照执行。2 2规范性引用文件规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 2763-2014 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法3 3原理原理用丙酮-石油醚混合溶液提取样品中的甲萘威残留物，经凝胶层析
4、柱净化后，浓缩，高效液相色谱分离，经柱后衍生后，用荧光检测器检测，外标法定量。4 4试剂和材料试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯试剂，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。4.14.1试剂试剂4.1.1乙腈（CH3CN）：色谱纯。4.1.2乙酸乙酯（C4H8O2）：色谱纯。4.1.3环己烷（C6H12）:色谱纯。4.1.4丙酮（CH3COCH3）：色谱纯。4.1.5石油醚：沸程3060。4.1.6无水硫酸钠（Na2SO4）：650灼烧4 h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。4.1.7氯化钠（NaCl）。4.1.8柱后衍生试剂。4.1.9邻苯二甲醛（C8H602，O-Phth
5、aladehyde,OPA）。4.1.10 巯基乙醇（C2H6OS，Thiofluor）。4.24.2溶液配制溶液配制4.2.1NaOH溶液（0.2%,m/v）：取2 gNaOH，以水定容至1000 mL。4.2.2邻苯二甲醛稀释液：硼砂溶液（0.4%,m/v）。4.2.3邻苯二甲醛试液：溶剂储罐中注入 945 ml OPA 稀释剂，用惰性气体(氮气)吹扫至少 10 min，100 mg OPA 固体溶解于约 10 mL 的色谱纯甲醇中，将 OPA 溶液加入除氧的 OPA 稀释剂中，溶解 2 g 巯基乙醇固体于 5mL OPA 稀释剂中，加入到储罐中，盖上瓶盖，打开气流，再不断的吹扫几分钟，关
6、闭排气阀，轻轻地搅动溶剂以使其完全混合。4.2.4乙酸乙酯-环己烷混合溶液（1+1,v/v）：取100 mL乙酸乙酯，加入100 mL环己烷，摇匀备用。GB 23200.105-2016114.34.3标准品标准品4.3.1甲萘威：分子式 C12H11NO2，CAS 63-25-2，纯度99.5%。4.44.4标准溶液配制标准溶液配制4.4.1甲萘威标准储备液：准确称取适量的甲奈威标准品，以乙腈溶解，4冰箱保存，有效期为6个月。保存于4冰箱内。4.4.2甲萘威标准工作液：取一定量的标准储备液，用乙腈稀释至适当浓度，4冰箱保存，有效期为1周。保存于4冰箱内。4.54.5材料材料4.5.10.45
7、 m尼龙滤膜。5 5仪器和设备仪器和设备5.1液相色谱仪：配有荧光检测器和柱后衍生单元。5.2分析天平：感量 0.01 g 和 0.0001 g。5.3全自动凝胶色谱仪（配有馏分收集浓缩器）。5.4旋转蒸发装置。5.5氮吹仪。5.6组织匀浆机。5.7振荡器。6 6试样制备与保存试样制备与保存6.16.1试样制备试样制备6.1.16.1.1肉肉将所取全部样品，充分搅碎混匀，取有代表性的样品，总量不少于500 g，装入清洁容器内，密封并标明标记。6.1.26.1.2罐头罐头将所取全部样品整罐倒出，充分搅碎混匀，取有代表性的样品，总量不少于500 g，装入清洁容器密封并标明标记。注：以上样品取样部位
8、按GB 2763附录A执行。6.26.2试样保存试样保存试样应于-18以下保存。在抽样和制样的操作中，应防止样品受到污染或发生含量的变化，以保证实验样品能代表总体样本。7 7分析步骤分析步骤7.17.1提取提取称取试样 20 g（精确到 0.01 g）,于 100 mL 具塞三角瓶中，加水 6 mL（视样品水分含量加水使总水量约 20 g，肉通常在 70%左右，加水 6 mL），加 40 mL 丙酮，匀浆 1 min,加氯化钠 6 g，充分摇匀，再加 30 mL 石油醚，振摇 30 min。取 35 mL 有机层上清液，经无水硫酸钠滤于旋转蒸发瓶中，浓缩至约 1 mL，加 2 mL 乙酸乙酯-
9、环己烷溶液再浓缩，如此重复 3 次。乙酸乙酯-环己烷定容为 5 mL，0.45 m 滤膜过滤，待净化。7.27.2凝胶色谱（凝胶色谱（GPCGPC）净化）净化7.2.17.2.1凝胶色谱净化参考条件凝胶色谱净化参考条件a）净化柱：400 mm30 mm,Bio Beads S-X3,或相当者。b）流动相：乙酸乙酯-环己烷。GB 23200.105-201611c）流速：5.0 mL/min。d）样品定量环：5 mL。e）馏分收集段：10.0 min15.0 min。f）净化柱平衡时间：5 min。7.2.27.2.2凝胶色谱浓缩参考条件凝胶色谱浓缩参考条件a）样品浓缩条件见表 1。b）浓缩终点
10、判定：液位传感模式。c）溶剂替换：2 mL 乙腈，重复两次。d）定容体积：1 mL。7.2.37.2.3凝胶色谱净化步骤凝胶色谱净化步骤将 5 mL 待净化液按 7.2.1 和 7.2.2 规定的条件进行净化与浓缩，最后得到 1 mL 净化液待测定。表表 1 1 馏分浓缩条件馏分浓缩条件浓缩时间段浓缩杯区域温度（）真空度（Torr）样品浓缩过程1 区502802 区522203 区54210浓缩终点到达过程1 区522202 区532207.37.3测定测定7.3.17.3.1液相色谱液相色谱参考参考条件条件a)色谱柱：C18，250 mm4.6 mm5m，或相当者；b)柱温：42；c)荧光检
11、测器：ex330nm，em465nm；d)流动相：乙腈+水（40+60，体积比）；e)流速：1.0 mL/min；f)进样量：20 L。7.3.27.3.2柱后衍生柱后衍生a)衍生试剂1：水解试剂，0.4%的氢氧化钠溶液，流速0.4 mL/min；b)衍生试剂2：OPA 试剂，流速0.4 mL/min；c)反应器温度：水解温度为100，衍生温度为室温。7.3.37.3.3色谱测定色谱测定根据样液中被测甲萘威的含量情况，选定浓度相近的标准工作液，其响应值应在方法检测的线性范围内。在上述液相色谱条件下，甲萘威保留时间为 11.1 min，色谱图见附录 A 中的图 A.1。7.3.47.3.4空白试
12、验空白试验除不加试样外，均按上述步骤进行。8 8结果计算和表述结果计算和表述GB 23200.105-201611按式（1）计算试样中甲萘威的含量：mAVCAXss（1）式中：X 试样中甲萘威的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)；A 试样中甲萘威的色谱峰面积；Cs 标准工作溶液中甲萘威的浓度，单位为微克每毫升(g/mL)；V 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；As 标准工作溶液中甲萘威的色谱峰面积；m 最终样液所代表的量，单位为克(g)。注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。9 9精密度精密度9.1在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与
13、其算术平均值的比值（百分率），应符合附录C的要求。9.2在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录D的要求。1010 定量限定量限、回收率、回收率10.110.1定量限定量限本方法的定量限：0.005 mg/kg。10.210.2回收率回收率甲萘威的添加回收率参见附录B。GB 23200.105-201611附录附录 A A（资料性附录）（资料性附录）甲萘威标准色谱图甲萘威标准色谱图图图 A.1A.1 甲萘威标准的液相色谱图（甲萘威标准的液相色谱图（0.10.1 g/mLg/mL）GB 23200.105-201611附附录录 B B（资料性附录）
14、（资料性附录）样品的添加浓度及回收率的实验数据样品的添加浓度及回收率的实验数据表表 B.1B.1 样品的添加浓度及回收率的实验数据样品的添加浓度及回收率的实验数据样品添加水平（mg/kg）回收率范围（%）样品添加水平（mg/kg）回收率范围（%）鱼肉0.00582.0110.0火腿0.00590.096.00.01089.0107.00.010100.0114.00.02094.0112.50.02097.0115.50.05090.0105.60.050101.6113.60.10092.0111.20.10092.5107.3牛肉0.00582.098.0虾肉0.00586.0100.00
15、.01086.099.00.01085.096.00.02084.5109.50.02087.0105.00.05090.698.00.05088.694.60.10088.498.00.10086.795.1鸡肉0.00586.096.00.01089.097.00.02095.5112.50.05092.097.20.10085.995.05.00087.7102.5GB 23200.105-201611附附录录 C（规范性规范性附录）附录）实验室内实验室内重复性要求重复性要求表表C.1 实验室内实验室内重复性要求重复性要求被测组分含量被测组分含量mg/kg精密度精密度%0.001360.001 0.01320.01 0.1220.1 118114GB 23200.105-201611附附录录 D（规范性规范性附录）附录）实验室间实验室间再现性要求再现性要求表表D.1 实验室间实验室间再现性要求再现性要求被测组分含量被测组分含量mg/kg精密度精密度%0.001540.0010.01460.010.1340.1125119