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1、.一、判断题 1、原核细胞和真核细胞的差异之一是前者无染色体构造，后者有染色体构造。2、基因组是指*一种生物所具有的全部基因的总称。3、真核生物基因的大小通常是外显子的数目和长度决定的。4、在所有的真核生物中，含子的长度和序列是高度保守的。5、酵母的基因普遍要比人的基因小，因此，酵母基因组编码的蛋白质普遍要比人基因组编码的蛋白质要小。6、在自由的四种核苷酸混合溶液中，任何碱基之间都可以形成氢键而发生配对。7、PCR 只能扩增双链 DNA，不能扩增单链 DNA。8、富含 GC 的 DNA 双螺旋比富含 AT 的 DNA 双螺旋稳定的主要原因是 GC 碱基比照AT 碱基对多一个氢键。9、用氯化铯梯
2、度超离心纯化质粒 DNA 时，蛋白质在离心管的最上部，RNA 悬浮在中间，而 DNA 沉在底部。10、mRNA 的剪接总是产生套索构造。11、冈崎片段只由 DNA 组成。12、端粒酶带有自己的 DNA 模板。13、细胞的 DNA 复制既需要 DNA 聚合酶，也需要 RNA 聚合酶。14、同源重组和位点特异性重组都形成Holliday 中间体构造。15、与 tRNA 相连的氨基酸本身在决定何种氨基酸参入到正在延伸的肽链上不起任何作用。16、转座重组既可以导致基因的失活，也可以导致基因的激活。17、只有用一样的限制性酶获得的 DNA 片段末端才能用 DNA 连接酶连接起来。18、在一个基因的编码区
3、发生的核苷酸的插入或缺失总是导致移码突变。19、PCR 和末端终止法测序都需要 RNA 引物。20、只有用一样的限制性酶获得的 DNA 片段末端才能用 DNA 连接酶连接起来。21、管家基因在细胞里始终表达，因此没有也不需要对其表达进展调控。22、含子在剪接反响中被切除，所以一种蛋白质的基因如果在含子发生突变，一.般不会影响到这种蛋白质的功能。23、限制性酶只能切开双链 DNA。24、RNA 病毒因为无 DNA 基因组，其生活史省去了从 DNA 到 RNA 的过程。25、细菌中弱化子的作用方式是在翻译水平来控制转录。26、单核苷酸多态性SNP可导致限制性片段长度多态性RFLP。27、激活蛋白参
4、与正调控，其浓度越高，激活基因表达的效果就越好。28、CCGG 和 GGCC 序列受同一种限制性酶的识别、切割。29、如果将细胞质中的 mRNA 导入到线粒体基质翻译，通常得不到有功能的蛋白质产物。30、含子大都是遗传“垃圾，所以在 RNA 剪接的时候不必进展准确的切除。31、密码子第一位碱基发生的突变要比第三位发生的突变的危害要大得多。32、抑制转肽酶活性的抗生素通常与核糖体的大亚基结合。33、根据摆动法则，tRNA 上的反密码子在第三个位置的核苷酸处于摇摆的位置。34、核糖体大亚基的主要功能是催化肽键的形成，而小亚基主要是结合 mRNA 和tRNA。35、Southern 印迹和 Nort
5、hern 印迹的主要差异是前者使用特定的 DNA 分子为探针，后者使用 RNA 分子为探针。36、编码区以外的突变不会导致细胞或生物体表型改变。37、T4 DNA 连接酶和 E.coli 连接酶作用时都需要 ATP 和 NAD+作为辅助因子。38、DNA 多态性就是限制性片段长度多态性。二、单项选择题 1、有关蛋白质组不正确的表达是 C A、翻译后加工可导致同一个翻译产物形成几种不同的蛋白质 B、蛋白质之间的相互作用可形成组织特异性蛋白质复合物 C、环境因素对一个细胞的蛋白质组无影响 D、一个病态细胞的蛋白质组可能与一个安康细胞的蛋白质组有所不同 2、以下哪项不是原核生物 DNA 复制是所必需
6、的(C)A.单链结合蛋白.B DNA 聚合酶 C.DNA 聚合酶D.Dna G 蛋白 E.ATP.3、噬菌体基因组 DNA 上的碱基发生糖基化和甲基化修饰的主要功能是 B A、促进基因组 DNA 整合到宿主基因组上 B、保护病毒 DNA 不受到限制性酶的水解 C、有利于核酸正确的排列 D、稳定 DNA，防止突变 4、双螺旋 DNA 具有的典型特征包括 C A、沿着一条链是大沟，另外一条链是小沟 B、碱基对的排列与螺旋轴平行 C、嘌呤碱基和嘧啶碱基的数目一样 D、螺旋的方向总是右手 5、在许多不同物种中，具有高度保守的序列一般是 D A、假基因 B、特定的间隔序列 C、不重要的蛋白质的基因 D、
7、非常重要的蛋白质的基因 6、原核生物 DNA 复制不需要 D A、DNA 聚合酶 B、DNA 解链酶 C、DNA 连接酶 D、端粒酶 7、大肠杆菌染色体 DNA 复制所需要的 DNA 聚合酶有 D A、DNA 聚合酶 B、DNA 聚合酶C、DNA 聚合酶 D、DNA 聚合酶和 8、DNA 连接酶需要被连接的两个 DNA 片段分别具有 A A、3-OH 和 5-P B、5-OH 和 3-P C、3-OH 和 5-OH D、5-P 和 3-P 9、端粒酶是一种 C A、依赖于 DNA 的 DNA 聚合酶 B、依赖于 DNA 的RNA 聚合酶 C、依赖于 RNA 的 DNA 聚合酶 D、依赖于 RN
8、A 的 RNA 聚合酶 10、细胞的突变主要发生在 A A、DNA 复制 B、DNA 修复 C、转录 D、翻译 11、碱基类似物导致 DNA 发生突变的主要原因是 C A、插入到碱基之间，使 DNA 发生断裂 B、使 C 变成 TC、能够与不同的碱基配对 D、促进 DNA 的脱嘌呤 12、SNP 的实质是 C A碱基缺失 B碱基插入 C碱基替换 D移码突变 E转录异常 13、在正常的生长条件下，*一细菌基因的启动子的普里布诺框由 TCGACT 突变成TATACT，由此而引起该基因转录水平发生变化，以下正确的选项是 A A、该基因的转录增加 B、该基因的转录降低 C、该基因不能转录 .D、该基因
9、的转录没有变化 14、如果你想设计一种新的抗菌药物，其作用对象是原核细胞的 RNA 聚合酶，则，你所设计的药物作用的最正确靶点应该是 C A、亚基 B、亚基 C、亚基 D、因子 15、真核细胞的 TATA 框B A、与-35 区一道起作用 B、存在于所有编码蛋白质基因的启动子上 C、将 RNA 聚合酶定位到启动子上 D、存在于-10 区 16、原核细胞受 RNA 聚合酶全酶浓度的提高而加速的转录步骤是 B A、封闭的转录起始复合物的形成 B、启动子清空 C、转录延伸 D、转录终止 17、RNA 聚合酶和 DNA 聚合酶所具有的共同性质是 C A、都需要模板和引物 B、都具有自我校对的活性 C、
10、都需要 Mg2+D、都能够导致 DNA 发生解链 18、以下属于转录后基因表达调控的机制是 C A、DNA 分子上的 C 发生甲基化修饰 B、转录因子与启动子结合 C、RNA 分子上的 C 脱氨基转变成 U D、基因扩增 19、大肠杆菌 16S rRNA 的 3端序列是 5-CACCUCCUUAOH-3，则 mRNA 分子上的 SD 序列是 D A、UCCUU B、UCCUCC C、GGAAU D、AGGAGG 20、在核糖体上，mRNA 的结合部位和转肽酶的活性中心分别位于 D A、两个亚基之间；大亚基 B、两个亚基之间；小亚基 C、大亚基；小亚基 D、小亚基；大亚基 21、在一个真核细胞，
11、由一种特定的 mRNA 翻译出来的蛋白质的量局部取决于(B)A、DNA 甲基化的程度 B、mRNA 降解的速率 C、*些转录因子的存在 D、mRNA含有的含子的数目 22、双链 DNA 的构造基因中，信息链的局部序列是 5AGGCTGACC3，其编码的 RNA相应序列是(D )A.5AGGCTGACC3 B.5UCCGACUGG3 C.5AGGCUGACC3 D.5GGUCAGCCU3 E.5CCAGUCGGA3 23、以下关于 RNAi 的表达中，错误的选项是 D A、可特异性地导致 mRNA的降解 B、可特异性地抑制 mRNA 的翻译 C、只存在于真核生物 D、通常.抑制特定 mRNA 的
12、转录 24、一种典型的限制性酶切割 DNA，切点切开后的构造是 C A、上面一条链是 5-P，下面一条链是 3-P B、上面一条链是 3-P，下面一条链是 5-P C、两条链都是 5-P D、两条链都是 3-P 25、PCR 实验不需要的成分是 A A、RNA 引物 B、DNA 模板 C、dNTP D、变性和复性循环 26、以下用来确定人肝细胞所有的基因的表达水平的技术手段是 C A、Northern印迹 B、Western印迹 C、基因芯片 D、噬菌体展示 6、以下最可能是限制性酶识别位点的碱基序列是 B A、AGTC B、ACGT C、ATCG D、AACC 27、在大肠杆菌中用于表达外源
13、基因的载体在启动子下游通常含有SD 序列，这个序列的作用是 A A、为核糖体提供识别位点 B、提供转录位点 C、增强启动子活性 D、提高 RNA 稳定性 28、原核和真核生物共有的转录调控序列是(B)A.poly(A)信号 B.启动子 C.操纵子 D.终止子 E.增强子 29.上游启动子元件是 A A.一段核酸序列 B.TATA 盒的组成局部 C.位于转录起始点下游 D.不一定被转录 E.转录后可以被剪接加工 30.关于开放读框表达正确的选项是(A)A.是 mRNA 的组成局部 B.部有间隔序列 C.真核生物的开放读框往往串联在一起 D.部靠近 5 端含有翻译起始调控序列 E.由三联体反密码子
14、连续排列而成 31.哪种情况会导致移码突变(C)A.倒位 B.颠换 C.插入一个碱基 D.连续缺失三个碱基 E.以上都不对 三、填空 1、1在 DNA 合成中负责复制和修复的酶是 DNA 聚合酶。2染色体中参与复制的活性区呈 Y 开构造，称为复制叉。3在 DNA 复制和修复过程中，修补 DNA 螺旋上缺口的酶称为 DNA 聚合酶 在 DNA 复制过程中，连续合成的子链称为前导链 ，另一条非连续合成的子链称为后滞链 。4 在 DNA 修复过程中，需要第二种酶，DNA 连接酶 ，作用是将 DNA 中相邻的碱基 连接 起来。原核生物 DNA 聚合酶具有外切核酸酶的活性。有两种外切核酸酶的活性，它们分
15、别从 5-3 和 3-5降解 DNA。DNA 聚合酶只有 3-5 外切核酸酶活性。5如果 DNA 聚合酶把一个不正确的核苷酸加到 3端，一个含 35活性的独立催化区会将这个错配碱基切去。这个催化区称为校正核酸外切酶酶。.6DNA 后随链合成的起始要一段短的 RNA 引物，它是由 DNA 引发酶以核糖核苷酸为底物合成的。四 简答 切除修复：通过切除修复切酶使 DNA 损伤消除的修复方法。一般是切去损伤区，然后在 DNA 聚合酶的作用下以露出的单链为模板合成新的互补链，最后用连接酶将缺口连接起来。sos 修复：SOS 修复是指 DNA 受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种DNA 修复方式，
16、修复结果只是能维持基因组的完整性，提高细胞的生成率，但留下的错误较多，故又称为错误倾向修复，使细胞有较高的突变率 同源重组：同源重组是指发生在非姐妹染色单体之间或同一染色体上含有同源序列的 DNA 分子之间或分子之的重新组合。同源重组反响通常根据穿插分子或Holliday 构造的形成和拆分分为三个阶段，即前联会体阶段、联会体形成和Holliday 构造的拆分。位点特异性重组：DNA 节段的相对位置发生了移动，从而得到不同的结果DNA序列发生重排。位点特异性重组不依赖于 DNA 顺序的同源性虽然亦可有很短的同源序列，而依赖于能与*些酶相结合的 DNA 序列的存在。逆转录酶：以 RNA 为模板指导
17、三磷酸脱氧核苷酸合成互补 DNAcDNA的酶。选择性剪接：也叫可变剪接是指从一个 mRNA 前体过不同的剪接方式。选择不同的剪接位点组合产生不同的 mRNA 剪接异构体的过程，而最终的蛋白产物会表现出不同或者是相互拮抗的功能和构造特性，或者，在一样的细胞中由于表达水平的不同而导致不同的表型。RNA 编辑：在 mRNA 水平上改变遗传信息的过程。具体说来，指基因转录产生的mRNA 分子中，由于核苷酸的缺失，插入或置换，基因转录物的序列不与基因编码序列互补，使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成，不同于基因序列中的编码信息现象。开放阅读框：是构造基因的正常核苷酸序列，从起始密码子到终止密码子的阅读框可编码
18、完整的多肽链，其间不存在使翻译中断的终止密码子。SD 序列：mRNA 中用于结合原核生物核糖体的序列。分子伴侣：细胞核能与组蛋白结合并能介导核小体有序组装的核质素。广泛存在于原核生物和真核生物的一类保守蛋白，分布于细胞的各个区域。衰减子：是位于细菌操纵子上游的一段核苷酸序列。原核生物过翻译前导肽而实现控制 DNA 的转录的调控方式称衰减作用。RNA 干扰：在进化过程中高度保守的、由双链 RNA 诱发的、同源 mRNA 高效特异性降解的现象。增色效应：由于 DNA 变性引起的光吸收增加，也就是变性后 DNA 溶液的紫外吸收作用增强的效应。减色效应：假设变性 DNA 复性形成双螺旋构造后，其 26
19、0nm 紫外吸收会降低,这种现象叫减色效应 限制性核酸切酶：是可以识别 DNA 的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA 的一类切酶，简称限制酶。启动子：是基因gene的一个组成局部，控制基因表达转录的起始时间和表达的程度。终止子：是给予 RNA 聚合酶转录终止信号的 DNA 序列.Southern 杂交、Northern 杂交、FISH、Western 杂交区别 Southern 杂交(637)：利用标记的核酸 做探针，与转化细胞的 DNA 进展杂交，直接筛选和鉴定目的序列克隆 Northern 杂交637：利用标记的核酸做探针，与转化细胞的 RNA 进展杂交，直接筛选和鉴定目的序列克
20、隆 FISH：荧光标记的原位杂交技术，一种用能和染色体特定序列高度特异性结合的荧光标记的探针来鉴定和定位染色体上特定 DNA 序列的存在或缺失 Western 杂交：利用标记的抗体和特定目标蛋白结合以检测组织匀浆样本或提取物样本中特定蛋的一种技术 蛋白质糖基化类型与功能 一,类型：N-糖基化,O-糖基化 二，功能：火把一定分解 1.活性必需 介导*些蛋白质的生物活性起直接作用HCG 2.靶向转运 帮助目的蛋白到达其功能场所(溶酶体酶转运 3.分子识别 直接参与配体-受体识别，底物-酶结合*些细胞因子受体与细胞因子的识别 4.构造稳定 寡糖有助于稳定蛋白质构象，保护其免受蛋白酶攻击，延长寿命。5
21、.易于溶解 增强蛋白质的水溶性 6.定向嵌膜 防止膜蛋白在转运和发挥作用时翻转 蛋白质泛素化的生理意义：在蛋白质的定位、代、功能、调节和降解中都起着十分重要的作用.参与细胞周期、增殖、凋亡、分化、转移、基因表达、转录调节、信号传递、损伤修复、炎症免疫等几乎一切生命活动的调控.通过泛素化的修饰能使一些生命过程中起决定作用的酶特定识别要作用的蛋白质以发生作用,意义重大.原核基因表达在翻译水平上的调控机制:SM 饭饭盒饭 1、SD 序列核糖体结合位点的影响 2、mRNA 的稳定性 3、翻译阻遏 4、反义 RNA 5、核糖开关 6、翻译移码 真核细胞翻译水平的调控方式有哪些：是 M 小框林干(1)对翻
22、译起始的调控，包括阻遏蛋白的调控、翻译起始因子(IF)的功能调控、起始密码子及上游 5-UTR 和下游 3-UTR 对翻译的调控；(2)mRNA 稳定性与翻译控制；(3)小分子 RNA 对翻译的影响。(4)上游开放阅读框(5)翻译起始因子，核糖体蛋白磷酸化(6)RNA 干扰 五 综述就本学期自己所学知识,谈谈分子生物学在中医中药研究中的应用 分子生物学是从分子水平来研究生命现象的一门根底学科.把分子生物学的新技术引入到中医药研究中,不仅为阐释中医药理论、加深对疾病本质的认识、探讨中药的作用机理和研制新药提供了一种新的研究工具和手段,而且还将启迪新的思想和开展新的诊疗技术,并将对中医药学的变革和
23、进步起到巨大的推动作.用.Se*tama 盒：原核生物启动子上-35bp 处的 TTGACA 区，又称-35 区。RNA 聚合酶转录起始的识别序列。Probnow 盒：原核生物中，在启动子上游有一个由 5-6 个核苷酸组成的共有序列位于起点上游 10bp 处，所以又称10 序列，是转录的解旋功能部位，具有高度保守性和一致性。TATA 盒：是构成真核生物启动子的元件之一。其一致顺序为 TATAATAAT非模板链序列。它约在多数真核生物基因转录起始点上游约-30bp-25-32bp处，根本上由 A-T 碱基对组成，是决定基因转录始的选择，为 RNA 聚合酶的结合处之一，RNA 聚合酶与 TATA
24、框结实结合之后才能开场转录。共翻译转运：质网膜上的膜结合核糖体在合成蛋白质时，由于蛋白质 N 端的信号序列的作用，使得在多肽链合成完成之前就在进展转运。翻译后转运：合成的蛋白质穿过生物膜的转移。游离核糖体上合成的蛋白质必须等蛋白质完全合成并释放到胞质溶胶后才能被转运,所以将这种转运方式称为翻译后转运。顺式作用原件：存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列。顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等，它们的作用是参与基因表达的调控。：反式作用因子：是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。多为转录因子 正调控：当阻遏蛋白从操纵基因上脱离后
25、，激活蛋白与启动子结合以及和 RNA聚合酶的相互作用，帮助构造基因的转录起始，促进相应蛋白的合成。负调控：是指 阻遏蛋白与操纵基因的结合，阻止了 RNA 聚合酶对操纵子构造基因的转录。锌指构造：一种常出现在 DNA 结合蛋白中的一种构造基元。是由一个含有大约30 个氨基酸的环和一个与环上的 4 个 Cys 或 2 个 Cys 和 2 个 His 配位的 Zn2+构成，形成的构造像手指状。亮氨酸拉链：出现在 DNA 结合蛋白质和其它蛋白质中的一种构造基元，即模体。当来自同一个或不同多肽链的两个两用性的-螺旋的疏水面相互作用形成一个圈对圈的二聚体构造时就形成了亮氨酸拉链。原位 PCR：在组织细胞里
26、进展 PCR 反响，它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的 PCR 技术的优点，是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。多重 PCR：又称多重引物 PCR 或复合 PCR，它是在同一 PCR 反响体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的 PCR 反响，其反响原理，反响试剂和操作过程与一般 PCR 一样。PCRRFLP：RFLP 是指基因型之间限制性片段长度的差异，这种差异是由限制性酶切位点上碱基的插入、缺失、重排或点突变所引起的。PCR-SSCP：指单链构象多态性检测是一种基于 DNA 构象差异来检测点突变的方法。定量 PCR：是指用外标法荧光杂交探针保证特异
27、性通过监测 PCR 过程监测扩增效率 到达准确定量起始模板数的目的，同时以对照有效排除假阴性结果 扩增效率为零。逆转录 PCR：是聚合酶链式反响PCR的一种广泛应用的变形。在 RT-PCR 中，.一条 RNA 链被逆转录成为互补 DNA，再以此为模板通过 PCR 进展 DNA 扩增。真核细胞染色质水平调控的方式有哪些 6 1.染色质活化 2.染色质缺失 3.基因扩增 4.基因重排 5.基因组印记 6.组蛋白修饰和 DNA 的甲基化 简述基因诊断常用的方法技术和 PD 鸡心 核酸杂交 是从核酸分子混合液中检测特定大小的核酸分子的传统方法。PCR 技术 扩增微量核酸，用于检测序列或局部序列的基因，
28、简便快捷，本钱低廉。DNA 测序 目前在实验室手工测序常用 Sanger 双脱氧链终止法。基因芯片技术 基因芯片技术是近年来开展十分迅速的大规模、高通量分子检测技术。其根本原理是核酸杂交，其根本过程是将许多特定的寡核苷酸片段或基因片段作为探针，有规律的排列固定于支持物上，形成矩阵点。PCR 原理 该技术是在模板 DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下，依赖于 DNA 聚合酶的酶促合成反响。DNA 聚合酶以单链 DNA 为模板，借助一小段双链 DNA 来启动合成，通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链 DNA 模板中的一段互补序列结合，形成局部双链。在适宜的温度和环境下，DNA 聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物 3-OH 末端，并以此为起始点，沿模板 53方向延伸，合成一条新的 DNA互补链。