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1、显微观察类实验显微观察类实验目标要求目标要求1、掌握显微镜的使用技术、掌握显微镜的使用技术2、掌握常用的染色技术、生物装片制作技术、掌握常用的染色技术、生物装片制作技术3、能熟练使用相关技术进行显微观察、能熟练使用相关技术进行显微观察目镜目镜 镜筒镜筒转换器转换器物镜物镜通光孔通光孔载物台载物台镜座镜座反光镜反光镜压片夹压片夹遮光器遮光器（光圈）（光圈）粗准焦螺旋粗准焦螺旋细准焦螺旋细准焦螺旋镜臂镜臂镜柱镜柱一、显微镜的基本操作一、显微镜的基本操作1、显微镜的结构、显微镜的结构（1）光学系统）光学系统（2）机械系统）机械系统2、显微镜的使用、显微镜的使用相关问题：相关问题：（1）说出制片的过程
2、？）说出制片的过程？（2）低倍镜转换成高倍镜的如何操作？）低倍镜转换成高倍镜的如何操作？（3）低倍镜与高倍镜观察效果的比较？）低倍镜与高倍镜观察效果的比较？（4）如何计算放大倍数？）如何计算放大倍数？操作步骤：操作步骤：取镜取镜安放安放对光对光制片制片观察观察取清洁载玻片取清洁载玻片向中央滴一滴水（生理盐水）向中央滴一滴水（生理盐水）取材并置取材并置于液滴中于液滴中加盖玻片加盖玻片1、临时装片的制作、临时装片的制作2、低倍镜转换成高倍镜观察的操作过程、低倍镜转换成高倍镜观察的操作过程3、低倍镜与高倍镜观察效果的比较、低倍镜与高倍镜观察效果的比较在低倍镜下观察到清晰的图像，把图像移到视野中央，转
3、在低倍镜下观察到清晰的图像，把图像移到视野中央，转动转换器换上高倍镜，调节细准焦螺旋，观察清楚物象。动转换器换上高倍镜，调节细准焦螺旋，观察清楚物象。视野视野范围范围细胞细胞数目数目视野视野明暗明暗细胞细胞结构结构物镜与玻物镜与玻片距离片距离高倍镜比高倍镜比低倍镜低倍镜小小少少暗暗清晰清晰短短1、载玻片的移动与像移动的关系、成像的特点：、载玻片的移动与像移动的关系、成像的特点：2、实验材料的选择原则：、实验材料的选择原则：显微镜下观察到的像是显微镜下观察到的像是倒像倒像显微镜的使用中要注意以下问题：显微镜的使用中要注意以下问题：3、能够解决一些实际中遇到的问题：、能够解决一些实际中遇到的问题：
4、部分细胞清楚，部分不清楚。部分细胞清楚，部分不清楚。视野太亮或太暗。视野太亮或太暗。视野中没有图像。视野中没有图像。薄而透明薄而透明练习练习1.用测微尺测量某个洋葱表皮细胞的长度时，下列目用测微尺测量某个洋葱表皮细胞的长度时，下列目镜的组合中，视野目镜测微尺每小格所代表的实际长度镜的组合中，视野目镜测微尺每小格所代表的实际长度最小的是最小的是目镜目镜10物镜物镜10目镜目镜16物镜物镜40A.B.C.D.D2使用显微镜观察洋葱根尖细胞染色体的基本步骤包使用显微镜观察洋葱根尖细胞染色体的基本步骤包括：括：调节细准焦螺旋；调节细准焦螺旋；转换高倍镜；转换高倍镜；把分裂中把分裂中的细胞移至视野中央；
5、的细胞移至视野中央；将洋葱根尖永久装片放在低将洋葱根尖永久装片放在低倍镜下观察。正确的操作顺序是倍镜下观察。正确的操作顺序是ABCDD3 3、在视野中，标本物像偏向视野左上方，欲将其移到视、在视野中，标本物像偏向视野左上方，欲将其移到视野中央，应将装片移动的方向是（野中央，应将装片移动的方向是（）A A、左上方左上方 B B、左下方左下方 C C、右上方右上方 D D、右下方右下方 A4、D使用显微镜观察验证的实验使用显微镜观察验证的实验1、观察观察DNA和和RNA在细胞的分布在细胞的分布(p26)2、观察细胞质流动、观察叶绿体和线粒体、观察细胞质流动、观察叶绿体和线粒体(p47)3、观察植物
6、细胞的质壁分离和质壁分离复原观察植物细胞的质壁分离和质壁分离复原(p61)4、观察植物细胞的有丝分裂和减数分裂观察植物细胞的有丝分裂和减数分裂(必修一必修一p115，必修二，必修二P21)5、低温诱导染色体加倍低温诱导染色体加倍（必修二（必修二P88）二、观察二、观察DNA、RNA在细胞的分布在细胞的分布1、实验原理：、实验原理：2、实验材料：、实验材料：3、方法和步骤：、方法和步骤：4、实验结果：、实验结果：甲基绿使甲基绿使DNA呈绿色，吡罗红使呈绿色，吡罗红使RNA呈红色呈红色口腔上皮细胞口腔上皮细胞制片制片水解水解冲洗冲洗染色染色观察观察细胞核区被染成绿色，细胞质区被染成红色。细胞核区被
7、染成绿色，细胞质区被染成红色。取口腔上皮细胞制片取口腔上皮细胞制片 水解水解 冲洗涂片冲洗涂片 染色染色 观察观察（8%8%HCl，能改变细胞膜的通透性，能改变细胞膜的通透性，同时使同时使DNADNA与蛋白质分离）与蛋白质分离）人口腔上皮细胞人口腔上皮细胞DNADNA、RNARNA分布分布洋葱鳞片叶内表皮洋葱鳞片叶内表皮细胞细胞DNADNA、RNARNA分布分布（蒸馏水）（蒸馏水）（0.9%的的NaClNaCl）重点问题辨析重点问题辨析（1）制作人的口腔上皮细胞装片时，使用什么试）制作人的口腔上皮细胞装片时，使用什么试剂为什么？剂为什么？（2）用什么试剂进行水解、该试剂有什么作用？用什么试剂进
8、行水解、该试剂有什么作用？（3）用叶肉细胞可以作为实验材料吗，为什么？）用叶肉细胞可以作为实验材料吗，为什么？不可以，叶绿体色素会干扰实验结果。不可以，叶绿体色素会干扰实验结果。试剂：试剂：0.9%NaCL溶液。作用：该溶液与细胞内液溶液。作用：该溶液与细胞内液浓度基本相同，可以浓度基本相同，可以维持细胞原状维持细胞原状。水解试剂：水解试剂：8%盐酸盐酸。作用：增加细胞膜的通透。作用：增加细胞膜的通透性，使蛋白质和性，使蛋白质和DNA分离，分离，便于染色便于染色。2 2、“观察观察DNADNA和和RNARNA在细胞中的分布在细胞中的分布”的实验中，没有用的实验中，没有用的试剂的试剂 A.0.9
9、A.0.9NaClNaCl B.8 B.8的的HClHCl C.C.吡罗红、甲基绿染色剂吡罗红、甲基绿染色剂 D.D.斐林试剂斐林试剂1 1、将用甲基绿和吡罗红染色的人口腔上皮细胞装片放在、将用甲基绿和吡罗红染色的人口腔上皮细胞装片放在显微镜下观察，可以看到显微镜下观察，可以看到 A.A.细胞核内呈现红色，细胞质内呈现绿色细胞核内呈现红色，细胞质内呈现绿色 B.B.细胞核内呈现绿色，细胞质内呈现红色细胞核内呈现绿色，细胞质内呈现红色 C.C.细胞核和细胞质都呈现绿色细胞核和细胞质都呈现绿色 D.D.细胞核和细胞质都呈现红色细胞核和细胞质都呈现红色三、观察线粒体和叶绿体三、观察线粒体和叶绿体方法
10、步骤与注意事项方法步骤与注意事项 观察叶绿体装片：观察叶绿体装片：取材：取材：取一片取一片 。（薄且有叶绿体）（薄且有叶绿体）制片：制片：载玻片中央滴一滴清水，将叶片放入，加上盖玻片，载玻片中央滴一滴清水，将叶片放入，加上盖玻片，制成临时装片制成临时装片观察：观察：先先 倍镜找到叶片细胞后高倍镜观察叶绿体（形倍镜找到叶片细胞后高倍镜观察叶绿体（形态和分布）态和分布）光强度的变化与叶绿体的位置关系光强度的变化与叶绿体的位置关系绘图：绘图：用铅笔画一个叶绿体形态和分布情况清楚的叶肉细胞用铅笔画一个叶绿体形态和分布情况清楚的叶肉细胞藓类小叶或波菜叶稍带叶肉的下表皮藓类小叶或波菜叶稍带叶肉的下表皮 低
11、低显微镜下的黑藻细胞显微镜下的黑藻细胞注意事项：注意事项：1）选用藓类的小叶或者菠菜叶的下表皮（稍带叶肉）作观）选用藓类的小叶或者菠菜叶的下表皮（稍带叶肉）作观察叶绿体的实验材料是实验成功的关键，因为藓类属阴生植物，察叶绿体的实验材料是实验成功的关键，因为藓类属阴生植物，菠菜叶的下表皮是菠菜叶的背阳面，这样的细胞中的叶绿体大菠菜叶的下表皮是菠菜叶的背阳面，这样的细胞中的叶绿体大且数目少，便于观察。另外，且数目少，便于观察。另外，实验材料要保鲜，避免细胞活性实验材料要保鲜，避免细胞活性受影响受影响）2）实验过程中的临时装片要始终保持有水状态，目的是为）实验过程中的临时装片要始终保持有水状态，目的
12、是为了防止叶绿体失水。如果叶绿体失水，叶绿体就缩成一团，无了防止叶绿体失水。如果叶绿体失水，叶绿体就缩成一团，无法观察叶绿体的形态和分布。法观察叶绿体的形态和分布。3）正确使用低倍镜：取镜）正确使用低倍镜：取镜对光对光安放装片安放装片下降下降镜筒镜筒调焦。下降镜筒时，必须双眼注视物镜和装片的距离，调焦。下降镜筒时，必须双眼注视物镜和装片的距离，以免压坏装片和碰坏物镜。以免压坏装片和碰坏物镜。4）正确使用高倍镜：将低倍镜下看到的物像移到视野）正确使用高倍镜：将低倍镜下看到的物像移到视野中央中央转动转换器，换用高倍物镜转动转换器，换用高倍物镜调整光圈和反光镜，调整光圈和反光镜，使视野亮度适宜使视野
13、亮度适宜调节细准焦螺旋，直至物像清晰。调节细准焦螺旋，直至物像清晰。1用高倍显微镜观察黑藻叶片细胞，正确的结论是用高倍显微镜观察黑藻叶片细胞，正确的结论是A叶绿体在细胞内是固定不动的叶绿体在细胞内是固定不动的B叶绿体在细胞是均匀分布的叶绿体在细胞是均匀分布的C叶绿体的存在是叶片呈绿色的原因叶绿体的存在是叶片呈绿色的原因D叶肉细胞含有叶绿体，不含线粒体叶肉细胞含有叶绿体，不含线粒体C 练习练习 2、在观察细胞质流动时，要使黑藻细胞质流动、在观察细胞质流动时，要使黑藻细胞质流动加快，最有效的措施是加快，最有效的措施是A、适当提高水温适当提高水温B、尽量减少光照尽量减少光照C、增加水中增加水中O2D
14、、增加水中矿质营养增加水中矿质营养A（三）观察植物细胞质壁分离与复原（三）观察植物细胞质壁分离与复原1实验原理实验原理渗透作用渗透作用2实验选材实验选材要观察细胞发生质壁分离和复原，对材要观察细胞发生质壁分离和复原，对材料有哪些要求？料有哪些要求？有有细胞壁（植物细胞细胞壁（植物细胞）；）；有有中央液泡中央液泡（颜色为深色）；（颜色为深色）；活细胞活细胞（原生质层相当于半透膜）（原生质层相当于半透膜）紫色洋葱鳞片叶紫色洋葱鳞片叶；如果是其它细胞液无色的细胞，；如果是其它细胞液无色的细胞，可用活体染色剂（亚甲基蓝）染色后观察。可用活体染色剂（亚甲基蓝）染色后观察。1、制作临时装片、制作临时装片（
15、正常状态下）（正常状态下）3、高倍镜观察、高倍镜观察（发生质壁分离）（发生质壁分离）质壁分离复原质壁分离复原对照组：质壁分离后不再复原对照组：质壁分离后不再复原2、滴加、滴加蔗糖溶液蔗糖溶液4、滴加清水、滴加清水不作任何处理不作任何处理方法步骤：方法步骤：正常细胞正常细胞初始质壁分离初始质壁分离显著质壁分离显著质壁分离观察植物的质壁分离与复原观察植物的质壁分离与复原2 2植物质壁分离的原因？植物质壁分离的原因？外因：细胞液浓度外因：细胞液浓度 外界溶液浓度外界溶液浓度1、将洋葱表皮浸泡在、将洋葱表皮浸泡在7%的尿素溶液中，表的尿素溶液中，表皮细胞发生质壁分离，随后又自动发生质壁皮细胞发生质壁分
16、离，随后又自动发生质壁分离复原。出现这种现象的原因可能是（分离复原。出现这种现象的原因可能是（）A.细胞液浓度下降细胞液浓度下降 B.尿素分子进入细胞尿素分子进入细胞C.细胞壁受到破坏细胞壁受到破坏 D.细胞膜受到破坏细胞膜受到破坏课堂练习课堂练习B2.当把紫色的洋葱鳞片叶的表皮置于质量浓度为当把紫色的洋葱鳞片叶的表皮置于质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液中后，原生质层和细胞壁之间的蔗糖溶液中后，原生质层和细胞壁之间将（将（）A.紧紧靠在一起紧紧靠在一起 B.充满细胞液充满细胞液 C.充满蔗糖溶液充满蔗糖溶液 D.充满清水充满清水3.浓盐水有杀菌防腐的作用，其原因是（浓盐水有杀菌防腐的作用，其
17、原因是（）A.浓盐水中含有较多的氯离子，使细菌毒素失效浓盐水中含有较多的氯离子，使细菌毒素失效B.浓盐水中没有细菌所需要的酶，细菌不能产生毒素浓盐水中没有细菌所需要的酶，细菌不能产生毒素C.浓盐水中含养料少，细菌迅速死亡浓盐水中含养料少，细菌迅速死亡D.由于渗透作用，使细菌失水死亡由于渗透作用，使细菌失水死亡CD4、（、（09江苏）按下面步骤进行质壁分离实验。江苏）按下面步骤进行质壁分离实验。步骤一：在洁净的载玻片中央加一滴清水，取一片藓类小叶，步骤一：在洁净的载玻片中央加一滴清水，取一片藓类小叶，盖上盖玻片。步骤二：从盖玻片一侧滴入盖上盖玻片。步骤二：从盖玻片一侧滴入0.3gmL的蔗糖溶液，
18、的蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次，使盖玻片下面在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次，使盖玻片下面的藓类小叶浸润在的藓类小叶浸润在0.3gmL的蔗糖溶液中。的蔗糖溶液中。步骤三：在显微镜高倍镜下观察，结果如图所示。步骤三：在显微镜高倍镜下观察，结果如图所示。图中图中A、B处的颜色分别是处的颜色分别是。如果上述实验步骤二中从盖玻片如果上述实验步骤二中从盖玻片的一侧滴入的是加有伊红（植物细的一侧滴入的是加有伊红（植物细胞不吸收的红色染料）的胞不吸收的红色染料）的0.3gmL的蔗糖溶液，则在显微镜下观察到的蔗糖溶液，则在显微镜下观察到A、B处颜色分别是处颜色分别是。无色、绿
19、色无色、绿色红色、绿色红色、绿色如果将上述实验步骤二中浸润在如果将上述实验步骤二中浸润在0.3gmL的蔗糖溶液中的藓类小叶的装片，放在的蔗糖溶液中的藓类小叶的装片，放在80条件下处理一段时间（装片中的藓类小叶保持在条件下处理一段时间（装片中的藓类小叶保持在0.3gmL的蔗糖溶液中）。在显微镜下清晰地观察到细胞的蔗糖溶液中）。在显微镜下清晰地观察到细胞结构后，为更准确地判断结构后，为更准确地判断A处颜色，对显微镜的操作方处颜色，对显微镜的操作方法是法是_、_。如果。如果A处处呈绿色，可能的原因是呈绿色，可能的原因是。改变光圈大小改变光圈大小调节反光镜调节反光镜高温下细胞膜、叶绿体膜失去高温下细胞
20、膜、叶绿体膜失去选择透过性，叶绿素等色素进入选择透过性，叶绿素等色素进入A处处四、观察植物细胞的有丝分裂四、观察植物细胞的有丝分裂1实验原理实验原理分生区细胞进行有丝分裂，利用高倍显微镜观察各分生区细胞进行有丝分裂，利用高倍显微镜观察各个时期染色体的变化情况，识别该细胞处于有丝分裂的个时期染色体的变化情况，识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。哪个时期。2、实验材料、实验材料根尖、芽尖的生长点、茎形成层等处根尖、芽尖的生长点、茎形成层等处于分裂期细胞比较多的部位。于分裂期细胞比较多的部位。3实验步骤：实验步骤：取材取材解离解离漂洗漂洗染色染色制片制片观察观察4观察结果：观察结果：先用低倍镜：找分生
21、区细胞，特点：细胞先用低倍镜：找分生区细胞，特点：细胞正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂状正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂状态。态。高倍镜观察：各时期细胞内染色体的情况高倍镜观察：各时期细胞内染色体的情况*解离解离：试剂：试剂：15%的盐酸和的盐酸和95%的酒精。的酒精。作用：固定、杀死了细胞，使细胞分裂停留在当时作用：固定、杀死了细胞，使细胞分裂停留在当时的状态，因而可以看到不同分裂时期的细胞内染色的状态，因而可以看到不同分裂时期的细胞内染色体的状态。体的状态。漂洗漂洗：试剂清水。目的：洗去解离液，防止解离过：试剂清水。目的：洗去解离液，防止解离过度，影响染色。度，影响染色。1、说出实验过
22、程中解离和漂洗的所用说出实验过程中解离和漂洗的所用的试剂及其作用？的试剂及其作用？2、染色用什么的试剂？、染色用什么的试剂？0.01g/ml龙胆紫溶液或醋酸洋红龙胆紫溶液或醋酸洋红1 1（0909江江苏苏）有）有1 1位同学做根尖有位同学做根尖有丝丝分裂分裂实验实验，在，在显显微微镜镜中中观观察到的察到的图图像如像如图图所示。造成所示。造成这这种情况的种情况的原因可能是原因可能是 取材位置不合适取材位置不合适 取材取材时间时间不合适不合适制片时压片力量不合适制片时压片力量不合适解离时间不合适解离时间不合适视野选择不合适视野选择不合适ABCDC一般上午一般上午10时时下午下午2时左右根尖小有丝分
23、裂旺盛。时左右根尖小有丝分裂旺盛。2.2.制成生长健壮的小麦根尖临时装片，欲观察制成生长健壮的小麦根尖临时装片，欲观察到细胞有丝分裂的前、中、后、末几个时期，到细胞有丝分裂的前、中、后、末几个时期，下列说法正确的是：下列说法正确的是：A.A.应该选一个处于间期的细胞，持续观察它从应该选一个处于间期的细胞，持续观察它从间期到末期的全过程间期到末期的全过程 B B如果在低倍镜下看不到细胞，可改用高倍如果在低倍镜下看不到细胞，可改用高倍物镜继续观察物镜继续观察 C.C.如果在一个视野中不能看全各个时期，可移如果在一个视野中不能看全各个时期，可移动装片从周围细胞中寻找动装片从周围细胞中寻找 D.D.如
24、果视野过暗，可以转动细准焦螺旋增加视如果视野过暗，可以转动细准焦螺旋增加视野的亮度野的亮度5.5.取生长健壮的小麦根尖，经过解离、漂洗、染色、取生长健壮的小麦根尖，经过解离、漂洗、染色、制片过程，制成临时装片，放在显微镜下观察。欲观制片过程，制成临时装片，放在显微镜下观察。欲观察到细胞有丝分裂的前、中、后、末几个时期察到细胞有丝分裂的前、中、后、末几个时期 A.A.应该选一个处于间期的细胞，持续观察它从间期应该选一个处于间期的细胞，持续观察它从间期到末期的全过程到末期的全过程 B B如果在低倍镜下看不到细胞，可改用高倍物镜继如果在低倍镜下看不到细胞，可改用高倍物镜继续观察续观察 C.C.如果在
25、一个视野中不能看全各个时期，可移动装如果在一个视野中不能看全各个时期，可移动装片从周围细胞中寻找片从周围细胞中寻找 D.D.如果视野过暗，可以转动细准焦螺旋增加视野的如果视野过暗，可以转动细准焦螺旋增加视野的亮度亮度c6.6.右图为蝗虫精母细胞减数分裂某一时期的显微照右图为蝗虫精母细胞减数分裂某一时期的显微照片，该时期片，该时期A.A.是减数分裂第一次分裂的前期是减数分裂第一次分裂的前期B.B.是减数分裂第一次分裂的中期是减数分裂第一次分裂的中期C.C.非姐妹染色单体发生了互换非姐妹染色单体发生了互换D.D.结束后，同源染色体发生联会结束后，同源染色体发生联会AC7有关有关“低温诱导大蒜根尖细
26、胞染色体加倍低温诱导大蒜根尖细胞染色体加倍”的实的实验，正确的叙述是验，正确的叙述是A可能出现三倍体细胞可能出现三倍体细胞B多倍体细胞形成的比例常达多倍体细胞形成的比例常达100%C多倍体细胞形成过程无完整的细胞周期多倍体细胞形成过程无完整的细胞周期D多倍体形成过程增加了非同源染色体重组的机会多倍体形成过程增加了非同源染色体重组的机会C8.人类遗传病发病率逐年增高，相关遗传学研究备受关人类遗传病发病率逐年增高，相关遗传学研究备受关注。根据以下信息回答问题：注。根据以下信息回答问题：（3）小鼠常被用作研究人类遗传病的模式动物。请填）小鼠常被用作研究人类遗传病的模式动物。请填充观察小鼠细胞减少分裂
27、的实验步骤：充观察小鼠细胞减少分裂的实验步骤：供选材料及试剂：小鼠的肾脏、睾丸、肝脏，苏丹供选材料及试剂：小鼠的肾脏、睾丸、肝脏，苏丹染染液、醋酸洋红染液、詹纳斯绿液、醋酸洋红染液、詹纳斯绿B（健那绿）染液，解离（健那绿）染液，解离固定液。固定液。取材：用取材：用_作实验材料作实验材料制片：制片：取少量组织低渗处理后，放在取少量组织低渗处理后，放在_溶溶液中，一定时间后轻轻漂洗。液中，一定时间后轻轻漂洗。将漂洗后的组织放在载玻片上，滴加适量将漂洗后的组织放在载玻片上，滴加适量 _。一定时间后加盖玻片，一定时间后加盖玻片，_。（小鼠）睾丸（小鼠）睾丸解离固定液解离固定液醋酸洋红染液醋酸洋红染液压片压片观察：观察：用显微镜观察时，发现几种不同特征的分用显微镜观察时，发现几种不同特征的分裂中期细胞。若它们正常分裂，产生的子细胞是裂中期细胞。若它们正常分裂，产生的子细胞是_。右图是观察到的同源染色体进入（右图是观察到的同源染色体进入（A1 和和A2）的）的配对情况若配对情况若A1正常，正常，A2发生的改变可能是发生的改变可能是_。次级精母细胞，精细胞，精原细胞次级精母细胞，精细胞，精原细胞缺失缺失