灭菌与灭菌技术精选PPT.ppt

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1、关于灭菌与灭菌技术第1页，讲稿共93张，创作于星期二第一节第一节 概述概述 n需要灭菌的制剂：直接注入机体或与粘膜、创面接需要灭菌的制剂：直接注入机体或与粘膜、创面接触的药剂触的药剂 n无菌（无菌（Sterility）：是指物体或任一给定的介质中，没）：是指物体或任一给定的介质中，没有任何活的微生物存在或无论用任何方法都鉴定不出活有任何活的微生物存在或无论用任何方法都鉴定不出活的微生物来的微生物来n灭菌（灭菌（Sterilization）：应用物理或化学等方法把物）：应用物理或化学等方法把物体上或介质中所有的微生物及其芽胞全部杀死，即获体上或介质中所有的微生物及其芽胞全部杀死，即获得无菌状态的

2、总过程得无菌状态的总过程n消毒（消毒（Disinfection）：用物理或化学等方法杀灭物体）：用物理或化学等方法杀灭物体上或介质中的病原微生物（除了芽胞）上或介质中的病原微生物（除了芽胞）第2页，讲稿共93张，创作于星期二l防腐（防腐（Antisepsis）：用物理或化学等方法抑制微生）：用物理或化学等方法抑制微生物生长的作用，称为防腐或抑菌物生长的作用，称为防腐或抑菌 l热原（热原（Pyrogens）：热原是微生物的一种内毒素，存）：热原是微生物的一种内毒素，存在于细菌的细胞膜与固体膜之间，能够引起人或动物在于细菌的细胞膜与固体膜之间，能够引起人或动物体温的异常升高。致热能力最强的是革兰氏

3、阴性杆菌体温的异常升高。致热能力最强的是革兰氏阴性杆菌所产生的热原所产生的热原 l无菌操作法（无菌操作法（Aseptic technique）：是指在整个操作过）：是指在整个操作过程中利用和控制一定条件，尽量使产品避免微生物污染程中利用和控制一定条件，尽量使产品避免微生物污染的一种操作方法的一种操作方法 第3页，讲稿共93张，创作于星期二细菌的耐受性细菌的耐受性 致死温度：是指在一定的时间内，杀死致死温度：是指在一定的时间内，杀死某种细菌所需要的最低温度某种细菌所需要的最低温度致死时间：是指在某一温度下，杀死某致死时间：是指在某一温度下，杀死某种细菌所需要的最短时间，又称热死时种细菌所需要的最

4、短时间，又称热死时间间 第4页，讲稿共93张，创作于星期二灭菌和除菌对制剂的影响灭菌和除菌对制剂的影响 l灭菌后的制剂中含有细菌的尸体，尸体过多会因菌体内灭菌后的制剂中含有细菌的尸体，尸体过多会因菌体内毒素（热原）而引起副作用毒素（热原）而引起副作用 l除菌是指用特殊的滤材把微生物（死菌、活菌）除菌是指用特殊的滤材把微生物（死菌、活菌）全部阻留而滤除，除了原已染有的微量可溶性代全部阻留而滤除，除了原已染有的微量可溶性代谢产物，由于没有菌体的存在，故没有更多的热谢产物，由于没有菌体的存在，故没有更多的热原产生原产生 第5页，讲稿共93张，创作于星期二不同菌种的耐热性不同菌种的耐热性第6页，讲稿共

5、93张，创作于星期二芽胞抗高温的原因芽胞抗高温的原因芽胞壁厚而致密，热力不易透入芽胞内芽胞壁厚而致密，热力不易透入芽胞内 芽胞内水分含量少，加热时蛋白质不易凝芽胞内水分含量少，加热时蛋白质不易凝固，酶不易失去活性固，酶不易失去活性 芽胞内含有吡啶芽胞内含有吡啶2，6-二羧酸钙，它与蛋白二羧酸钙，它与蛋白质结合成耐热的复合体质结合成耐热的复合体 第7页，讲稿共93张，创作于星期二第二节第二节 微生物死亡动力学的研究微生物死亡动力学的研究 实质实质是寻找对灭菌效果可靠的验证参数是寻找对灭菌效果可靠的验证参数原因原因灭菌温度多是测量灭菌器内的温度而不是灭菌温度多是测量灭菌器内的温度而不是灭菌物体内的

6、温度灭菌物体内的温度 现行方法不易检出残存的微生物现行方法不易检出残存的微生物第8页，讲稿共93张，创作于星期二一、一、D值值 D值是指降低微生物数至原来的值是指降低微生物数至原来的10或降低一个对数或降低一个对数单位所需的时间或剂量，也就是杀灭单位所需的时间或剂量，也就是杀灭90微生物所微生物所需的时间或剂量需的时间或剂量 D=U/（lgN0-lgNu）U为在一定灭菌条件下灭菌经历的时间或接受的剂量；为在一定灭菌条件下灭菌经历的时间或接受的剂量；N0为微生物的初始数量；为微生物的初始数量；Nu为接受了为接受了U单位时间或剂单位时间或剂量的灭菌后微生物的数量；量的灭菌后微生物的数量；Nt为为t

7、时间微生物的残留时间微生物的残留数量数量 热力灭菌或直接用钴-60辐射灭菌 第9页，讲稿共93张，创作于星期二二、二、Z值值 l不同温度下对特定的微生物在特定介质或环境中求得不同温度下对特定的微生物在特定介质或环境中求得D值后，就可用值后，就可用lgD对温度作图对温度作图 Z=（T2-T1）/（lgD1-lgD2）l表示降低一个表示降低一个lgD值所需升高的温度，及灭菌时间减少到值所需升高的温度，及灭菌时间减少到原来的原来的10所需升高的温度所需升高的温度 第10页，讲稿共93张，创作于星期二三、三、F值与值与F0值值 F=t10 T-T0/Z nt是测量被灭菌物温度的时间间隔，一般为是测量被

8、灭菌物温度的时间间隔，一般为0.51.0分钟或更小；分钟或更小；T是每个时间间隔是每个时间间隔t所测得的被灭所测得的被灭菌物料的温度，菌物料的温度，T0是参比温度是参比温度 nF值是指在一定温度值是指在一定温度T下给定下给定Z值所产生的灭菌效力值所产生的灭菌效力与在参比温度与在参比温度T0下给定下给定Z值所产生的灭菌效力相值所产生的灭菌效力相同时，同时，T0温度下所相当的灭菌时间温度下所相当的灭菌时间 nF值适用于干热灭菌值适用于干热灭菌 第11页，讲稿共93张，创作于星期二F0值值-物理物理F0值值 在湿热灭菌条件下测定的，且以嗜热脂肪芽胞杆菌作在湿热灭菌条件下测定的，且以嗜热脂肪芽胞杆菌作

9、为微生物指示菌，该菌在为微生物指示菌，该菌在121下，下，Z值为值为10 F0=t10 T-121/10 F0为一定灭菌温度为一定灭菌温度T，Z值为值为10时所产生的灭菌效时所产生的灭菌效力与力与121，Z值为值为10所产生的灭菌效力相同时所所产生的灭菌效力相同时所相当的时间相当的时间 F0值将各种灭菌温度使微生物的致死力转换为灭值将各种灭菌温度使微生物的致死力转换为灭菌物品完全暴露于菌物品完全暴露于121对微生物的致死效力，对微生物的致死效力，所以所以F0值又称为标准灭菌时间，适用于热压灭菌法值又称为标准灭菌时间，适用于热压灭菌法 第12页，讲稿共93张，创作于星期二F0值值-生物生物F0值

10、值 将将F0值看作是值看作是D121值与微生物数量对数降低值的乘值与微生物数量对数降低值的乘积积 F0=D121（lgN0-lgNt）其中其中Nt为灭菌后预期达到的微生物残存数，又叫为灭菌后预期达到的微生物残存数，又叫染菌度概率染菌度概率，一般取，一般取Nt为为10-6 生物生物F0值可认为是以相当于值可认为是以相当于121热压灭菌时杀死热压灭菌时杀死容器中全部微生物所需要的时间容器中全部微生物所需要的时间例如，将含有例如，将含有200个嗜热脂肪芽胞杆菌的个嗜热脂肪芽胞杆菌的5葡萄糖水葡萄糖水溶液以溶液以121热压灭菌时，其热压灭菌时，其D值为值为2.4分，则分，则F0=2.4（lg200-l

11、g10-6）=19.92min 第13页，讲稿共93张，创作于星期二由于由于F0是将不同灭菌温度折算到相当于是将不同灭菌温度折算到相当于121湿热灭湿热灭菌时的效力，故菌时的效力，故F0值可作为灭菌过程的比较参数值可作为灭菌过程的比较参数 为了使为了使F0测定准确，先应选择灵敏度高，重现性好，精测定准确，先应选择灵敏度高，重现性好，精密度为密度为0.1的热电偶，并对热电偶进行校验的热电偶，并对热电偶进行校验 灭菌时应将热电偶的探针置于被测物的内部，经灭菌灭菌时应将热电偶的探针置于被测物的内部，经灭菌器通向柜外的湿度记录仪，有些灭菌记录仪附有器通向柜外的湿度记录仪，有些灭菌记录仪附有F0显显示器

12、，在灭菌过程中和灭菌后，自动显示示器，在灭菌过程中和灭菌后，自动显示F0值值 第14页，讲稿共93张，创作于星期二影响影响F0值的因素值的因素 容器的形状、大小、热穿透系数容器的形状、大小、热穿透系数 灭菌产品溶液粘度、容器充填量灭菌产品溶液粘度、容器充填量 容器在灭菌器内的数量与排布容器在灭菌器内的数量与排布注意灭菌器内各层、四角、中间位置热分布注意灭菌器内各层、四角、中间位置热分布是否均匀，以便合理排布是否均匀，以便合理排布 第15页，讲稿共93张，创作于星期二为了确保灭菌效果，还应注意两个问题：为了确保灭菌效果，还应注意两个问题：n根据生物根据生物F0值的计算公式，若值的计算公式，若N0

13、越大，即被灭菌物中微越大，即被灭菌物中微生物越多，则灭菌时间越长，故生产过程中应尽量减少微生物越多，则灭菌时间越长，故生产过程中应尽量减少微生物的污染，应采取各种措施使每个容器的含菌数控制在生物的污染，应采取各种措施使每个容器的含菌数控制在10以下以下 n计算计算F0时，应适当考虑增加安全因素，一般增加时，应适当考虑增加安全因素，一般增加50，如规定如规定F0为为8分，则实际操作应控制分，则实际操作应控制F0为为12分分 第16页，讲稿共93张，创作于星期二药剂学中灭菌法可分为三大类：即物理灭菌、化学灭菌、药剂学中灭菌法可分为三大类：即物理灭菌、化学灭菌、无菌操作法。无菌操作法。第17页，讲稿

14、共93张，创作于星期二第三节第三节 物理灭菌法物理灭菌法 一、热力灭菌法（一、热力灭菌法（Thermal sterilization）n加热可破坏蛋白质和核酸中的氢键，故导致核酸破坏，加热可破坏蛋白质和核酸中的氢键，故导致核酸破坏，蛋白质变形或凝固，酶失去活性，微生物因而死亡蛋白质变形或凝固，酶失去活性，微生物因而死亡 n热力灭菌法分为干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一热力灭菌法分为干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一温度下，湿热灭菌的效力比干热灭菌大温度下，湿热灭菌的效力比干热灭菌大第18页，讲稿共93张，创作于星期二细菌在湿热下，菌体吸收水分，蛋白质较细菌在湿热下，菌体吸收水分，蛋白质较易凝固。这点

15、可以从鸡蛋白含水量与凝固易凝固。这点可以从鸡蛋白含水量与凝固温度之间的关系看出来，凝固蛋白质所需温度之间的关系看出来，凝固蛋白质所需要的温度与蛋白质的含水量有关要的温度与蛋白质的含水量有关 湿热的穿透力比干热大湿热的穿透力比干热大 湿热灭菌时，水蒸气与物品接触而凝结成湿热灭菌时，水蒸气与物品接触而凝结成水，因而发出潜热（汽化热），加速细菌水，因而发出潜热（汽化热），加速细菌的死亡的死亡 第19页，讲稿共93张，创作于星期二鸡蛋白含水量与凝固温度关系表鸡蛋白含水量与凝固温度关系表第20页，讲稿共93张，创作于星期二(一一)干热灭菌法干热灭菌法 火焰灭菌法火焰灭菌法 n灼烧是最迅速、可靠、简便、紧

16、急的灭菌方法灼烧是最迅速、可靠、简便、紧急的灭菌方法n金属品如铂丝、铁或镍制。不锈钢制的刮刀、镊子等，金属品如铂丝、铁或镍制。不锈钢制的刮刀、镊子等，瓷制品如研钵等，玻璃制器皿如玻棒、载玻片、试管瓷制品如研钵等，玻璃制器皿如玻棒、载玻片、试管等的灭菌都可用此等的灭菌都可用此 n采用该法灭菌时，最少须在火焰中加热采用该法灭菌时，最少须在火焰中加热20秒，通常是秒，通常是要将灭菌的物品迅速通过火焰要将灭菌的物品迅速通过火焰34次。对研钵的简便次。对研钵的简便灭菌方法是在其中加入少量乙醇点火燃烧；对于玻璃、灭菌方法是在其中加入少量乙醇点火燃烧；对于玻璃、瓷制品，操作前应充分干燥，以免烧灼时炸裂损坏瓷

17、制品，操作前应充分干燥，以免烧灼时炸裂损坏 第21页，讲稿共93张，创作于星期二干热空气灭菌法干热空气灭菌法 本法系指物品于干热灭菌柜、隧道灭菌器等设备中、本法系指物品于干热灭菌柜、隧道灭菌器等设备中、利用干热空气达到杀灭微生物或消除热原物质的方法利用干热空气达到杀灭微生物或消除热原物质的方法 本法并不是一种优良理想的灭菌方法，其原因是干本法并不是一种优良理想的灭菌方法，其原因是干热空气的穿透力很弱而不均匀；另外，空气的比热热空气的穿透力很弱而不均匀；另外，空气的比热低，是一种不良的传热介质。因此须长时间受高热低，是一种不良的传热介质。因此须长时间受高热的作用才能达到灭菌的目的的作用才能达到灭

18、菌的目的 加热温度及时间根据灭菌器和灭菌物性质的不同而加热温度及时间根据灭菌器和灭菌物性质的不同而异，目的是达到微生物残留量在异，目的是达到微生物残留量在10-6以内。根据中国以内。根据中国药典规定，干热灭菌条件一般为：药典规定，干热灭菌条件一般为：160170120min、17018060min上或上或25045min 第22页，讲稿共93张，创作于星期二对于磺胺等遇高热熔化或容易分解的药物或对热敏感的材对于磺胺等遇高热熔化或容易分解的药物或对热敏感的材料，应采用较低温度与较长时间灭菌料，应采用较低温度与较长时间灭菌 对耐热物品可采用较高的温度和相应较短的时间对耐热物品可采用较高的温度和相应

19、较短的时间 凡应用湿热方法灭菌无效的非水性物质，或极粘稠凡应用湿热方法灭菌无效的非水性物质，或极粘稠的液体如甘油、液体石蜡、油类等药物也可以采用的液体如甘油、液体石蜡、油类等药物也可以采用此法此法 药物的干热空气灭菌药物的干热空气灭菌第23页，讲稿共93张，创作于星期二对玻璃容器或瓷制与金属制的容器灭菌时，必须先对玻璃容器或瓷制与金属制的容器灭菌时，必须先洗净，不使其沾染有油脂或其他有机物质，然后用洗净，不使其沾染有油脂或其他有机物质，然后用适当的包装材料包裹适当的包装材料包裹 烧瓶或其他容器口上用棉花塞密，外面再覆以纱布或烧瓶或其他容器口上用棉花塞密，外面再覆以纱布或一层坚韧的纸，置干热空气

20、灭菌器中，一层坚韧的纸，置干热空气灭菌器中，160灭菌灭菌2小小时以上时以上 空安瓿的灭菌，可置于密盖的金属盒中，用空安瓿的灭菌，可置于密盖的金属盒中，用200或或200以上的高温保持至少以上的高温保持至少45min以上，当温度达到以上，当温度达到250时，灭菌时，灭菌45min后，热原也可以被破坏后，热原也可以被破坏 器皿的干热空气灭菌器皿的干热空气灭菌第24页，讲稿共93张，创作于星期二(二二)湿热灭菌法湿热灭菌法 本法系指将物品置于灭菌柜内利用高压饱和蒸汽、过本法系指将物品置于灭菌柜内利用高压饱和蒸汽、过热水喷淋等手段使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生热水喷淋等手段使微生物菌体中的蛋白质、

21、核酸发生变性而杀灭微生物的方法变性而杀灭微生物的方法 本法是制剂生产中应用最广泛的一种灭菌法本法是制剂生产中应用最广泛的一种灭菌法 具有可靠、操作简便，易于控制和经济等优点。缺点是具有可靠、操作简便，易于控制和经济等优点。缺点是不适用于对湿热敏感的药物不适用于对湿热敏感的药物 第25页，讲稿共93张，创作于星期二影响湿热灭菌的因素影响湿热灭菌的因素 微生物的种类和数量微生物的种类和数量 n各种细菌对热的抵抗力相差很大，处于不同发育阶段，各种细菌对热的抵抗力相差很大，处于不同发育阶段，所需灭菌的温度与时间也不相同所需灭菌的温度与时间也不相同 n繁殖期间的微生物对高温比衰老时期的抵抗力小得繁殖期间

22、的微生物对高温比衰老时期的抵抗力小得多多 n最初菌数越少，越能短时间内达到灭菌，同时，如果最初菌数越少，越能短时间内达到灭菌，同时，如果最初菌数多，即使细菌全部杀灭，而药液中细菌尸体、最初菌数多，即使细菌全部杀灭，而药液中细菌尸体、热原过多，亦会引起不良反应热原过多，亦会引起不良反应 第26页，讲稿共93张，创作于星期二介质的性质介质的性质 n溶液中若有营养性物质如糖类、氨基酸等，对微生溶液中若有营养性物质如糖类、氨基酸等，对微生物有营养保护的作用，能增强其抗热性物有营养保护的作用，能增强其抗热性 n细菌的生活能力也因介质的酸碱度而不同，一般微生细菌的生活能力也因介质的酸碱度而不同，一般微生物

23、在中性溶液中耐热性最大，在碱性溶液中次之，酸物在中性溶液中耐热性最大，在碱性溶液中次之，酸性则不利于微生物的发育性则不利于微生物的发育 第27页，讲稿共93张，创作于星期二药物的性质药物的性质 一般说，灭菌所需时间与温度成反比。但是药液温度一般说，灭菌所需时间与温度成反比。但是药液温度增高，药物分解的反应速度也增加。所以在杀灭细菌增高，药物分解的反应速度也增加。所以在杀灭细菌的前提下，可适当降低灭菌温度或时间的前提下，可适当降低灭菌温度或时间 比如，维生素比如，维生素C注射液用流通蒸汽注射液用流通蒸汽15min即可达到灭菌，即可达到灭菌，氯化钠输液用氯化钠输液用115，30min进行灭菌进行灭

24、菌 第28页，讲稿共93张，创作于星期二蒸汽的性质蒸汽的性质 湿饱和蒸汽：即饱和水蒸汽中带有水分，常由于蒸汽输湿饱和蒸汽：即饱和水蒸汽中带有水分，常由于蒸汽输送管路中热量损失所形成的，因此在蒸汽中混悬着无数送管路中热量损失所形成的，因此在蒸汽中混悬着无数微细水滴，此种蒸汽的热含量较低，穿透力较差，故灭微细水滴，此种蒸汽的热含量较低，穿透力较差，故灭菌效力较低菌效力较低 饱和蒸汽：即蒸汽的温度与水的沸点相当，当蒸汽的饱和蒸汽：即蒸汽的温度与水的沸点相当，当蒸汽的压力达到平衡时，蒸汽中不含有微细的水滴。饱和蒸压力达到平衡时，蒸汽中不含有微细的水滴。饱和蒸汽热含量较高，潜热大，穿透力较大，因此灭菌效

25、力汽热含量较高，潜热大，穿透力较大，因此灭菌效力也较大也较大 第29页，讲稿共93张，创作于星期二过热蒸汽：如在热压灭菌器中的水不足，液体状态的过热蒸汽：如在热压灭菌器中的水不足，液体状态的水完全蒸发后，再继续加热即生成过热蒸汽，这种蒸水完全蒸发后，再继续加热即生成过热蒸汽，这种蒸汽与干热状态相似。在压力不变、温度继续上升的情汽与干热状态相似。在压力不变、温度继续上升的情况下此温度虽比饱和温度高，但穿透力很差，因此灭况下此温度虽比饱和温度高，但穿透力很差，因此灭菌效力不如饱和蒸汽菌效力不如饱和蒸汽 不饱和蒸汽：若灭菌器内空气未排尽，则蒸汽为不不饱和蒸汽：若灭菌器内空气未排尽，则蒸汽为不饱和蒸汽

26、，内含不同比例的空气，由于空气是热的饱和蒸汽，内含不同比例的空气，由于空气是热的不良导体，空气与被灭菌的物体接触后又无潜热放不良导体，空气与被灭菌的物体接触后又无潜热放出，故灭菌效力降低出，故灭菌效力降低 第30页，讲稿共93张，创作于星期二1、热压灭菌法、热压灭菌法 本法系在热压灭菌器内进行的用高压饱和蒸汽加热杀灭本法系在热压灭菌器内进行的用高压饱和蒸汽加热杀灭微生物的方法。是常用的湿热灭菌法微生物的方法。是常用的湿热灭菌法热压灭菌器有密盖，可以使饱和蒸汽不逸出，由于蒸汽热压灭菌器有密盖，可以使饱和蒸汽不逸出，由于蒸汽量不断增加而使器内压力增大，此法有很强的灭菌作用量不断增加而使器内压力增大

27、，此法有很强的灭菌作用 如在表压如在表压1.05kg/cm2的饱和蒸汽（达的饱和蒸汽（达121.3）经过）经过20min，能杀灭所有细菌繁殖体和芽胞能杀灭所有细菌繁殖体和芽胞 第31页，讲稿共93张，创作于星期二热压灭菌所需的温度及与温度相当的压力及时间如下：热压灭菌所需的温度及与温度相当的压力及时间如下：115，1.7atm（67kPa，7.1kg/cm2），），30min 121，2.0atm（97kPa，11kg/cm2），），20min 126，2.4atm（139kPa，14.1kg/cm2），），15min 湿热灭菌一般要求湿热灭菌一般要求F0=112分分 第32页，讲稿共93张，

28、创作于星期二卧式热压灭菌柜卧式热压灭菌柜 必须使用饱和蒸汽必须使用饱和蒸汽 必须排尽灭菌柜内空气必须排尽灭菌柜内空气 灭菌结束后，应待压力降灭菌结束后，应待压力降至零后，缓慢打开柜门后至零后，缓慢打开柜门后取出样品取出样品 灭菌时间必须由全部药液灭菌时间必须由全部药液达到灭菌温度时算起达到灭菌温度时算起 第33页，讲稿共93张，创作于星期二热压灭菌器内灭菌温度检查法热压灭菌器内灭菌温度检查法 碘淀粉温度指示纸碘淀粉温度指示纸 n取碘和碘化钾各取碘和碘化钾各0.5g，淀粉淀粉25g，加水至加水至300ml使成糊使成糊状，然后将滤纸条浸入，取出干燥，装入安瓿内熔封，状，然后将滤纸条浸入，取出干燥，

29、装入安瓿内熔封，检查时与产品一起灭菌，经灭菌后，观察纸条，如果温检查时与产品一起灭菌，经灭菌后，观察纸条，如果温度超过度超过114115则纸条的蓝色褪为白色，说明灭菌则纸条的蓝色褪为白色，说明灭菌器内温度已到器内温度已到115 第34页，讲稿共93张，创作于星期二 熔融温度指示剂熔融温度指示剂 利用某些化学药品，其熔点正好是灭菌所需温度，可利用某些化学药品，其熔点正好是灭菌所需温度，可以作为温度指示剂以作为温度指示剂 取这样的药品结晶少量密封于安瓿中，与待灭菌制取这样的药品结晶少量密封于安瓿中，与待灭菌制剂同置于灭菌器中，观察指示剂是否熔化来判断灭剂同置于灭菌器中，观察指示剂是否熔化来判断灭菌

30、温度菌温度 常用的温度指示剂有焦性儿茶酚（常用的温度指示剂有焦性儿茶酚（140）、氨基比）、氨基比林（林（107109）、安替比林（）、安替比林（110112）、乙酰）、乙酰苯胺（苯胺（113114）、升华硫（）、升华硫（117）、苯甲酸）、苯甲酸（121）、）、-萘酚（萘酚（121）等）等 在指示剂中加入少许亚甲蓝或苏丹红可以方便观察其熔变在指示剂中加入少许亚甲蓝或苏丹红可以方便观察其熔变情况情况 第35页，讲稿共93张，创作于星期二 留点温度计留点温度计 其结构原理与体温表类似，温度指示最高为其结构原理与体温表类似，温度指示最高为140 与一般体温计不同的是当灭菌器内温度达到最高并降低与一

31、般体温计不同的是当灭菌器内温度达到最高并降低以后，水银面不会随着温度下降而是留在最高点指示灭以后，水银面不会随着温度下降而是留在最高点指示灭菌温度达到的最高点菌温度达到的最高点 自动记录热电偶自动记录热电偶 自动记录灭菌器内温度的变化和时间。分布于灭菌器自动记录灭菌器内温度的变化和时间。分布于灭菌器不同的水平面和垂直面，探测热量的分布不同的水平面和垂直面，探测热量的分布 第36页，讲稿共93张，创作于星期二脉动真空蒸汽灭菌柜脉动真空蒸汽灭菌柜 适合对药棉、纱布、手术无适合对药棉、纱布、手术无菌衣、医疗器械等灭菌。能菌衣、医疗器械等灭菌。能自动抽真空，可有效地从多自动抽真空，可有效地从多孔性物质

32、中驱除空气，并在孔性物质中驱除空气，并在真空条件下通入水蒸汽，利真空条件下通入水蒸汽，利用饱和蒸汽进行灭菌。灭菌用饱和蒸汽进行灭菌。灭菌结束后，内层再一次抽真空，结束后，内层再一次抽真空，把蒸汽从灭菌物品中抽出，把蒸汽从灭菌物品中抽出，而夹层中仍然通有蒸汽，便而夹层中仍然通有蒸汽，便于物品的干燥于物品的干燥 第37页，讲稿共93张，创作于星期二快速冷却灭菌器快速冷却灭菌器 适合对玻璃瓶装液体（注适合对玻璃瓶装液体（注射剂、大输液）进行自动射剂、大输液）进行自动真空饱和蒸汽灭菌，并附真空饱和蒸汽灭菌，并附有喷淋冷水装置，在灭菌有喷淋冷水装置，在灭菌时间达到后，可喷淋冷却，时间达到后，可喷淋冷却，

33、使被灭菌物迅速冷却，利使被灭菌物迅速冷却，利于药品的稳定于药品的稳定 第38页，讲稿共93张，创作于星期二软包装灭菌器软包装灭菌器 适合对软包装液体适合对软包装液体（软塑料装大输液、（软塑料装大输液、袋装食品）进行蒸汽袋装食品）进行蒸汽灭菌。自动抽真空，灭菌。自动抽真空，饱和蒸汽灭菌后，附饱和蒸汽灭菌后，附有喷淋冷水装置，灭有喷淋冷水装置，灭菌结束后迅速冷却，菌结束后迅速冷却，利于药品食品的稳定利于药品食品的稳定 第39页，讲稿共93张，创作于星期二2、流通蒸汽灭菌法、流通蒸汽灭菌法 流通蒸汽灭菌是在不密闭的容器内，用蒸汽灭菌，压力流通蒸汽灭菌是在不密闭的容器内，用蒸汽灭菌，压力与大气压相等，

34、即与大气压相等，即100的蒸汽灭菌的蒸汽灭菌目前我国某些药厂生产注射剂，特别是目前我国某些药厂生产注射剂，特别是12ml的注射的注射剂及不耐高热的品种，基本上都是采用这种灭菌法剂及不耐高热的品种，基本上都是采用这种灭菌法第40页，讲稿共93张，创作于星期二3、煮沸灭菌法、煮沸灭菌法 煮沸灭菌法就是把安瓿或其他物品放入水中煮沸灭菌，一煮沸灭菌法就是把安瓿或其他物品放入水中煮沸灭菌，一般是般是10030min或或60min。此法不能保证杀灭所有的芽此法不能保证杀灭所有的芽胞，例如破伤风菌等厌氧菌的芽胞胞，例如破伤风菌等厌氧菌的芽胞加有适当抑菌剂时，药液经加有适当抑菌剂时，药液经10030min煮沸

35、，可杀死煮沸，可杀死抵抗力强的芽胞。适合煮沸灭菌法使用的抑菌剂主要抵抗力强的芽胞。适合煮沸灭菌法使用的抑菌剂主要有：甲酚（有：甲酚（0.1%0.3%）、氯甲酚（）、氯甲酚（0.05%0.1%）等等 第41页，讲稿共93张，创作于星期二4、低温间歇灭菌法、低温间歇灭菌法 此法系将待灭菌物于此法系将待灭菌物于80加热加热1h后，在后，在2025保保持持24h，连续操作三次以上的灭菌方法（以连续操作三次以上的灭菌方法（以80灭菌灭菌结束）结束）此法在较高温下可以杀死细菌繁殖体但不能杀死芽胞，此法在较高温下可以杀死细菌繁殖体但不能杀死芽胞，所以在较低温度下杀死细菌繁殖体的同时让芽胞发育变所以在较低温度

36、下杀死细菌繁殖体的同时让芽胞发育变为繁殖体，这样下一次加热时可以将其杀死，反复操作为繁殖体，这样下一次加热时可以将其杀死，反复操作至芽胞全部灭绝至芽胞全部灭绝由于此法效果比较差，所以常常加入抑菌剂增强灭菌由于此法效果比较差，所以常常加入抑菌剂增强灭菌效力效力 第42页，讲稿共93张，创作于星期二5、油浴和盐水浴灭菌法、油浴和盐水浴灭菌法 在制备小量注射剂时，药房中如果没有热压灭菌器，在制备小量注射剂时，药房中如果没有热压灭菌器，或因为量小而使用不经济时，可用盐水浴代替，能或因为量小而使用不经济时，可用盐水浴代替，能同样达到灭菌的目的同样达到灭菌的目的 可用饱和氯化铵溶液（沸点可用饱和氯化铵溶液

37、（沸点114）在加热锅中同安瓿）在加热锅中同安瓿一起煮沸一起煮沸30min，溶液中可放红色染料少许，用于判断溶液中可放红色染料少许，用于判断安瓿是否破裂安瓿是否破裂 油浴灭菌法即用不发挥性的脂肪油或轻质矿物油置油浴油浴灭菌法即用不发挥性的脂肪油或轻质矿物油置油浴中，将待灭菌的物品浸入，在中，将待灭菌的物品浸入，在115加热灭菌。此法适用加热灭菌。此法适用于外科器械与其他锋利的器具于外科器械与其他锋利的器具 第43页，讲稿共93张，创作于星期二二、过滤灭菌法二、过滤灭菌法 过滤灭菌法是使药液通过无菌的滤器除去活的或死的过滤灭菌法是使药液通过无菌的滤器除去活的或死的微生物而得到不含微生物的滤液微生

38、物而得到不含微生物的滤液 供灭菌用滤器和过滤介质（滤材）的理想条件：有供灭菌用滤器和过滤介质（滤材）的理想条件：有效地从溶液中除净微生物，溶液可以顺畅地从滤器效地从溶液中除净微生物，溶液可以顺畅地从滤器和滤材中通过。滤器和滤材无吸附性，也无落屑进和滤材中通过。滤器和滤材无吸附性，也无落屑进入滤液中，容易清洗、更换入滤液中，容易清洗、更换 第44页，讲稿共93张，创作于星期二(一一)过滤灭菌法的特点过滤灭菌法的特点 适于不耐热药物的溶液，如生物碱、激素、生化制剂适于不耐热药物的溶液，如生物碱、激素、生化制剂等，可以减少药液中的热原但不能破坏热原等，可以减少药液中的热原但不能破坏热原 加压、减压过

39、滤均可，但加压过滤用的较多，因过滤加压、减压过滤均可，但加压过滤用的较多，因过滤设备如有漏隙则往外泄漏，而不会污染药液设备如有漏隙则往外泄漏，而不会污染药液室温下易挥发、易氧化的药物宜用加压过滤法室温下易挥发、易氧化的药物宜用加压过滤法 过滤灭菌法应配合无菌操作技术进行过滤灭菌法应配合无菌操作技术进行 在过滤灭菌前，药液应进行预过滤，尽量除去颗粒杂在过滤灭菌前，药液应进行预过滤，尽量除去颗粒杂质，以便提高除菌过滤的速度质，以便提高除菌过滤的速度 用过滤法灭菌的成品必须进行无菌检查，合格后方能使用过滤法灭菌的成品必须进行无菌检查，合格后方能使用用 第45页，讲稿共93张，创作于星期二(二二)过滤

40、灭菌常用的滤器与滤材过滤灭菌常用的滤器与滤材 硅藻土滤柱硅藻土滤柱由由硅硅藻藻土土及及有有机机粘粘合合剂剂等等物物混混合合，在在1200高高温温下下烧烧制制而而成成。滤滤孔孔为为34m的的细细号号滤滤柱柱可可滤滤除除溶溶液液中中的的颗颗粒杂质和一部分细菌粒杂质和一部分细菌 白陶土滤器白陶土滤器 由由白白陶陶土土及及细细砂砂混混合合，经经高高温温烧烧结结而而成成，为为瓷瓷制制品品，孔径孔径1.3m以下的可滤除细菌以下的可滤除细菌 第46页，讲稿共93张，创作于星期二 垂熔玻璃滤器垂熔玻璃滤器硬硬质质中中性性玻玻璃璃粉粉加加高高温温至至接接近近其其熔熔点点熔熔合合而而成成均均匀匀孔孔径径的的滤滤板

41、板，然然后后再再把把滤滤板板粘粘连连于于不不同同的的玻玻璃璃器器内内制制成成。孔孔径径为为1.52m的的6号号滤滤器器可可以以滤滤除除细细菌菌但但不不能能滤滤除除芽胞芽胞 多孔聚乙烯多孔聚乙烯 简称多孔简称多孔PE，是将聚乙烯高分子粉末烧结以后形成的具有是将聚乙烯高分子粉末烧结以后形成的具有一定孔径的滤膜。多孔一定孔径的滤膜。多孔PE可以滤除杂质和一部分细菌，可以滤除杂质和一部分细菌，但不能完全除菌，常用于过滤灭菌前的预过滤，用但不能完全除菌，常用于过滤灭菌前的预过滤，用于滤除药液中的活性炭最方便于滤除药液中的活性炭最方便 第47页，讲稿共93张，创作于星期二三、紫外线灭菌法三、紫外线灭菌法

42、紫外线由汞蒸汽灯产生，波长为紫外线由汞蒸汽灯产生，波长为200300nm，其中其中波长在波长在253.7nm的紫外线杀菌作用最强，是近紫外线的紫外线杀菌作用最强，是近紫外线（300400nm）的数千倍至数万倍的数千倍至数万倍 紫外线杀灭细菌的机制是，经紫外线照射后，细菌细紫外线杀灭细菌的机制是，经紫外线照射后，细菌细胞内脱氧核糖核酸的胸腺嘧啶成为二聚体而失去活性胞内脱氧核糖核酸的胸腺嘧啶成为二聚体而失去活性 根据紫外线的特性，目前紫外线杀菌应用于：空气灭根据紫外线的特性，目前紫外线杀菌应用于：空气灭菌、水中灭菌及固体表面直接照射灭菌菌、水中灭菌及固体表面直接照射灭菌 第48页，讲稿共93张，创

43、作于星期二第49页，讲稿共93张，创作于星期二1、紫外线空气灭菌、紫外线空气灭菌 紫外线空气灭菌效果与环境温度有关。室温紫外线空气灭菌效果与环境温度有关。室温20时，时，辐射的辐射的253.7nm紫外线最强；室温在紫外线最强；室温在10或或40时，时，所辐射的紫外线降低所辐射的紫外线降低1015，而，而0时降低时降低50室内空气湿度与灰尘影响紫外线在空气中的穿透率，室内空气湿度与灰尘影响紫外线在空气中的穿透率，故也影响紫外线的灭菌效果。比如，空气相对湿度故也影响紫外线的灭菌效果。比如，空气相对湿度75时，其杀菌率比时，其杀菌率比RH25时降低时降低18.7；空气中含；空气中含尘量尘量8.510

44、5粒粒/升时，杀菌率比无尘时降低升时，杀菌率比无尘时降低2030 第50页，讲稿共93张，创作于星期二2、紫外线水中灭菌、紫外线水中灭菌 紫外线对一些液体的透过率很低，使透到液体内部的紫外线对一些液体的透过率很低，使透到液体内部的紫外线量减少，故液体中杀菌所需紫外线剂量比空气紫外线量减少，故液体中杀菌所需紫外线剂量比空气中要大的多中要大的多紫外线透过率与溶液中的溶质浓度有关，溶质浓度紫外线透过率与溶液中的溶质浓度有关，溶质浓度增加，透过率减少，溶液灭菌时，照射剂量应相应增加，透过率减少，溶液灭菌时，照射剂量应相应增加增加 一般来说，紫外线在水中的透过率最高，故紫外灭菌一般来说，紫外线在水中的透

45、过率最高，故紫外灭菌可应用于饮用水、无盐水、纯净水、蒸馏水及注射用可应用于饮用水、无盐水、纯净水、蒸馏水及注射用水的生产水的生产第51页，讲稿共93张，创作于星期二3、固体表面灭菌、固体表面灭菌 制药生产中，物料、机械、容器等表面所附着的细制药生产中，物料、机械、容器等表面所附着的细菌，采用紫外线灭菌比较有效。可以放置于灭菌柜菌，采用紫外线灭菌比较有效。可以放置于灭菌柜中，柜的内壁应采用反射率较高的铝板，柜的隔板中，柜的内壁应采用反射率较高的铝板，柜的隔板需用网状需用网状 紫外线灭菌的注意事项：紫外线灭菌的注意事项：紫外线能促使易氧化的药紫外线能促使易氧化的药物或油脂等氧化变质，故生产此类药物

46、制剂时不能使物或油脂等氧化变质，故生产此类药物制剂时不能使用紫外线灭菌；用紫外线灭菌；普通玻璃可吸收紫外线，因此安瓿普通玻璃可吸收紫外线，因此安瓿中的药物不能用此法灭菌；中的药物不能用此法灭菌；紫外线对人体如果照射紫外线对人体如果照射过久，会产生眼结膜炎或皮肤灼烧等现象；过久，会产生眼结膜炎或皮肤灼烧等现象；各种紫各种紫外灯都有一定的有效时间，一般为外灯都有一定的有效时间，一般为3000h 第52页，讲稿共93张，创作于星期二四、微波灭菌法四、微波灭菌法 微波通常是指频率大于微波通常是指频率大于300兆赫，波长短于兆赫，波长短于1m的高频的高频率振荡电磁波率振荡电磁波 微波灭菌法是利用高频电场

47、使物质内部分子极化迅速微波灭菌法是利用高频电场使物质内部分子极化迅速升温的灭菌方法。微波穿透物质使之吸收微波能量，升温的灭菌方法。微波穿透物质使之吸收微波能量，并转化为热能呈现灭菌作用并转化为热能呈现灭菌作用微波灭菌常用于口服液的灭菌微波灭菌常用于口服液的灭菌 普通微波炉中可以发射出频率为普通微波炉中可以发射出频率为2450兆赫的微波，产兆赫的微波，产生高温，也可以杀灭细菌。广东格兰仕集团进行了以生高温，也可以杀灭细菌。广东格兰仕集团进行了以下测定：用下测定：用WP700格兰仕微波炉对每克含有格兰仕微波炉对每克含有200万个细万个细菌的熏肉进行灭菌，发现菌的熏肉进行灭菌，发现30秒后仅存活每克

48、秒后仅存活每克18个，个，60秒秒后全部杀死后全部杀死 第53页，讲稿共93张，创作于星期二五、辐射灭菌法五、辐射灭菌法 辐射灭菌是应用射线灭菌的方法，目前应用的有穿透力辐射灭菌是应用射线灭菌的方法，目前应用的有穿透力较强的较强的射线和穿透力较弱的射线和穿透力较弱的射线射线 其优点在于：其优点在于：价格便宜，节约能源；价格便宜，节约能源；可在常温下进可在常温下进行，不破坏被辐射的挥发性成分，适合热敏材料的消毒、行，不破坏被辐射的挥发性成分，适合热敏材料的消毒、灭菌，这也是辐射灭菌的最大特点；灭菌，这也是辐射灭菌的最大特点；穿透力强，在包穿透力强，在包装条件下也可以灭菌；装条件下也可以灭菌；速度

49、快，操作简便，便于连续速度快，操作简便，便于连续作业作业 第54页，讲稿共93张，创作于星期二(一一)射线种类射线种类 射线是由钴射线是由钴-60或铯或铯-137发出的电磁波，不带电荷即发出的电磁波，不带电荷即穿透力很强的光子，适用于较厚样品的灭菌，可用于穿透力很强的光子，适用于较厚样品的灭菌，可用于密封安瓿和和整瓶药物的灭菌，还可以穿透包装进行密封安瓿和和整瓶药物的灭菌，还可以穿透包装进行灭菌灭菌 射线是由电子加速器产生的高速电子流，带负电荷，射线是由电子加速器产生的高速电子流，带负电荷，穿透力较弱，通常仅用于非常薄和密度低的物质的灭穿透力较弱，通常仅用于非常薄和密度低的物质的灭菌，在物质的

50、比重为菌，在物质的比重为1，不计容器壁的比重和厚度时，不计容器壁的比重和厚度时，它平均只能穿透层后约它平均只能穿透层后约2cm的物质，比的物质，比射线的灭菌效射线的灭菌效果差果差 第55页，讲稿共93张，创作于星期二(二二)辐射灭菌的机制辐射灭菌的机制 直接电离作用直接电离作用n射线可使微生物体内蛋白质、核酸等有机大分子化射线可使微生物体内蛋白质、核酸等有机大分子化合物的分子直接发生电离，产生破坏正常代谢的自合物的分子直接发生电离，产生破坏正常代谢的自由基。这种自由基可以和水中的氢氧自由基或氢自由基。这种自由基可以和水中的氢氧自由基或氢自由基继续起反应，形成不稳定的有机过氧化物，导由基继续起反