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1、小鼠B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M(B 2-GP1lgA/G/M)elisa 试剂盒 使用说明书 Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置 标准品稀释液：1.5ml X 1瓶 酶标试剂：3 ml X 1 瓶(48)/6 ml X 1 瓶(96)【小鼠B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M(B 2-GP1 IgA/G/M)elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用 计算：以标准物的浓度为横坐标，0D值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 0D值 由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD值计算出标准曲线 的直线回归方程式，将样品的 OD值代入方程式，计算出样品浓度，再
2、乘以稀释倍数，即为 样品的实际浓度。试剂盒组成：封板膜:2片(48)/2片(96)说明书:1份 密封袋:1个 标准品：2700ng/L 0.5ml X 1 瓶 0.5ml X 1 瓶 2-8C保存 酶标包被板：1X 48 1X 96 2-8 C保存 样品稀释液：3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶 2-8 C保存 显色剂A液:3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶 2-8 C保存 显色剂B液:3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶 2-8 C保存 终止液：3ml X 1 瓶 6ml X 1 瓶 2-8 C保存 浓缩洗涤液：(20ml X 20倍)X 1瓶(20ml X 30倍)X 1瓶
3、 2-8C保存 实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠 B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M(B 2-GP1 IgA/G/M)水平。用纯化的小鼠B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M(B 2-GP1 IgA/G/M)抗体包被微孔 板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 B 2糖蛋白1抗体IgA/G/M(B 2-GP1 IgA/G/M)，再与HRP标记的B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M(B 2-GP1 IgA/G/M)抗体结合，形 成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在HRP酶的催化 下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 B
4、2糖蛋白1抗 体lgA/G/M(B 2-GP1 IgA/G/M)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中小鼠 B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M(B 2-GP1 IgA/G/M)浓度。目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M(B 2-GP1 IgA/G/M)的含量。服务承诺：供货期：款到发货。工作时间内免费的技术咨询和指导。请来电咨询 为客户提供来样检测服务，最大限度实验结果的有效性(免费代测)。保存条件及有效期：试剂盒保存：2-8 C|有效期：6个月【小鼠B 2糖蛋白1抗体IgA/G/M(B 2-GP1 Ig
5、A/G/M)elisa试剂盒】样本处理及要求：1血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右(2000-3000转份)。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次 离心。3.尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右
6、（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞 浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20分 钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备 用。标本融化后仍然保持 2-8C的温度。加入一定量的 PBS（PH7.4）,用手工或匀浆器 将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待 检测，其余冷冻备用。6.标本
7、采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验，可将标本放于-20 C保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤 1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔 10孔，在第一、第二孔中分别加标 准品100 M，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液 50 d，混匀；然后从第一孔、第二 孔中各取100 d分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50 d,混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取 50dl 弃掉，再各取 50dl 分别加到第五、第六孔 中，再在第五、第六孔中分别加标准
8、品稀释液 50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各 取50 d分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50 d，混 匀后从第七、第八孔中分别取 50dl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准 品稀释液50 d，混匀后从第九第十孔中各取 50 d弃掉。（稀释后各孔加样量都为 50 d,浓度分别为 1800ng/L，1200ng/L，600ng/L，300ng/L，1 50ng/L）。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样 品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40 d,然后再加待测样品10 d（样 品最终稀释度为
9、5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混 匀。3.温育：用封板膜封板后置 37 C温育30分钟。4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30（48T的20倍）倍稀释后备用。5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂 50 dl，空白孔除外。7.温育：操作同 3。8.洗涤：操作同 5。9.显色：每孔先加入显色剂 A50 d，再加入显色剂 B50 d，轻轻震荡混匀，37 C避光显色 15分钟.10.终止：每孔加终止液 50 d,l终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：
10、以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。【小鼠B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M（3 2-GP1 IgA/G/M）elisa试剂盒】注意事项：1 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未 用完，板条应装入密封袋中保存。2 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好 控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值 大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计 算时请最后乘以总稀释倍数（X nX 5）O 5 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.&所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。试剂盒性能：1样品线性回归与预期浓度相关系数 R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于 9%和 11%检测范围：0.2IU/L-6IU/L