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1、关于实验四灭活疫苗的制备及其应用第1页，讲稿共16张，创作于星期日2什么是疫苗？什么是疫苗？疫苗是将病原微生物（如细菌、立克次氏体、病毒等）疫苗是将病原微生物（如细菌、立克次氏体、病毒等）及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用转基因等方法及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用转基因等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。疫苗保留了病原菌刺激动物体免疫系统的特性。当动物疫苗保留了病原菌刺激动物体免疫系统的特性。当动物体接触到这种不具伤害力的病原菌后，免疫系统便会产生体接触到这种不具伤害力的病原菌后，免疫系统便会产生一定的保护物质，如免疫激素、活性生理物质、特
2、殊抗体一定的保护物质，如免疫激素、活性生理物质、特殊抗体等；当动物再次接触到这种病原菌时，动物体的免疫系统等；当动物再次接触到这种病原菌时，动物体的免疫系统便会依循其原有的记忆，制造更多的保护物质来阻止病原便会依循其原有的记忆，制造更多的保护物质来阻止病原菌的伤害。菌的伤害。第2页，讲稿共16张，创作于星期日3疫苗的种类有哪些？疫苗的种类有哪些？一、人工主动免疫一、人工主动免疫1.灭活疫苗灭活疫苗病原细菌、病毒、立克次体等，经人工培养，再用物理病原细菌、病毒、立克次体等，经人工培养，再用物理或化学方法将其杀灭制成疫苗疫苗。此种疫苗失去繁殖或化学方法将其杀灭制成疫苗疫苗。此种疫苗失去繁殖能力，但
3、保留免疫原性。能力，但保留免疫原性。2.减毒活疫苗减毒活疫苗用人工定向变异方法或从自然界筛选出毒力减弱或基本用人工定向变异方法或从自然界筛选出毒力减弱或基本无毒的活微生物制成减毒活疫苗。接种后在体内有生长无毒的活微生物制成减毒活疫苗。接种后在体内有生长繁殖能力，可激发机体对病原的持久免疫力。繁殖能力，可激发机体对病原的持久免疫力。3.类毒素类毒素细胞外毒素经甲醛处理后失去毒性，仍保留免疫原性，为细胞外毒素经甲醛处理后失去毒性，仍保留免疫原性，为类毒素。类毒素。第3页，讲稿共16张，创作于星期日4第4页，讲稿共16张，创作于星期日5二、人工被动免疫二、人工被动免疫1.抗毒素抗毒素2.人免疫球蛋白
4、制剂人免疫球蛋白制剂3.细胞因子制剂细胞因子制剂4.单克隆抗体制剂单克隆抗体制剂人工主动免疫和人工被动免疫均能使机体增加抗病能力，但后者人工主动免疫和人工被动免疫均能使机体增加抗病能力，但后者的持续时间短，主要用治疗和紧急预防。的持续时间短，主要用治疗和紧急预防。第5页，讲稿共16张，创作于星期日6三、新型疫苗三、新型疫苗1.亚单位疫苗亚单位疫苗通过蛋白质水解方法，提取细菌、病毒的特殊蛋白质结构，筛选出的具有免疫活性通过蛋白质水解方法，提取细菌、病毒的特殊蛋白质结构，筛选出的具有免疫活性的片段制成的疫苗，称为亚单位疫苗。的片段制成的疫苗，称为亚单位疫苗。2.结合疫苗结合疫苗指采用化学方法将多糖
5、共价结合在蛋白载体上所制备成的多糖指采用化学方法将多糖共价结合在蛋白载体上所制备成的多糖-蛋白结合疫苗，用于提蛋白结合疫苗，用于提高细菌疫苗多糖抗原的免疫原性，如高细菌疫苗多糖抗原的免疫原性，如b型流感嗜血杆菌结合疫苗。型流感嗜血杆菌结合疫苗。3.合成肽疫苗合成肽疫苗合成肽疫苗是一种仅含免疫决定簇组分的小肽合成肽疫苗是一种仅含免疫决定簇组分的小肽,即用人工方法按天然蛋白质的氨基酸即用人工方法按天然蛋白质的氨基酸顺序合成保护性短肽顺序合成保护性短肽,与载体连接后加佐剂所制成的疫苗与载体连接后加佐剂所制成的疫苗,是最为理想的安全新型疫苗。是最为理想的安全新型疫苗。4.基因工程疫苗基因工程疫苗使用使
6、用DNA重组生物技术，把天然的或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或重组生物技术，把天然的或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中，使之充分表达，经纯化后而制得的疫苗。哺乳动物细胞中，使之充分表达，经纯化后而制得的疫苗。第6页，讲稿共16张，创作于星期日7第7页，讲稿共16张，创作于星期日8疫苗有哪些接种方式？疫苗有哪些接种方式？注射、口服、浸泡、喷雾注射、口服、浸泡、喷雾第8页，讲稿共16张，创作于星期日草鱼注射疫苗现场草鱼注射疫苗现场 123第9页，讲稿共16张，创作于星期日10实验四实验四 灭活疫苗的制备及其应用灭活疫苗的制备及其应用一、实验目的一、实验目的1 1了解
7、疫苗的种类和免疫途径；了解疫苗的种类和免疫途径；2 2掌握组织浆疫苗的制备方法。掌握组织浆疫苗的制备方法。第10页，讲稿共16张，创作于星期日11二、实验内容二、实验内容1 1鱼病检测（为后续实验做准备）鱼病检测（为后续实验做准备）2 2组织浆疫苗的制备组织浆疫苗的制备3 3灭活疫苗的安全性评价（灭活疫苗的安全性评价（了解了解）第11页，讲稿共16张，创作于星期日12三、主要仪器及试材三、主要仪器及试材解剖用具，包括解剖盘、解剖刀、解剖针、大小手术解剖用具，包括解剖盘、解剖刀、解剖针、大小手术剪、大小镊子，培养皿，载玻片，盖玻片、纱布等。剪、大小镊子，培养皿，载玻片，盖玻片、纱布等。离心机、注
8、射器等。离心机、注射器等。实验鱼。实验鱼。第12页，讲稿共16张，创作于星期日13四、实验方法与步骤四、实验方法与步骤（一）组织浆疫苗的制备（一）组织浆疫苗的制备1 1活苗的制备：取有典型症状的鱼，先用酒精或碘制剂消毒鱼体活苗的制备：取有典型症状的鱼，先用酒精或碘制剂消毒鱼体表，解剖后取肝、脾、肾组织，并称重。然后让在研钵中磨成糊状，表，解剖后取肝、脾、肾组织，并称重。然后让在研钵中磨成糊状，加入加入5 5倍生理盐水，用双层纱布过滤，去除沉淀，即成原毒组织浆倍生理盐水，用双层纱布过滤，去除沉淀，即成原毒组织浆（活苗）。（活苗）。2 2灭活：取上述活苗，于灭活：取上述活苗，于60-6560-65
9、水浴锅中孵育水浴锅中孵育2h2h。3 3防腐保存：对已灭活的疫苗加入防腐保存：对已灭活的疫苗加入福尔马林福尔马林，使成，使成1%1%的浓度，的浓度，44保存。保存。第13页，讲稿共16张，创作于星期日14四、实验方法与步骤四、实验方法与步骤（二）安全性实验（二）安全性实验1 1灭活效果的评价灭活效果的评价（1 1）细菌性灭活疫苗：涂布于琼脂平板上，放入）细菌性灭活疫苗：涂布于琼脂平板上，放入2828温箱温箱24 h24 h，生长缓慢的细菌培养，生长缓慢的细菌培养48h48h。（2 2）病毒性灭活疫苗：接种至合适细胞系，观察细胞病变。）病毒性灭活疫苗：接种至合适细胞系，观察细胞病变。2 2鱼体安
10、全性实验鱼体安全性实验取灭活的疫苗，加入同体积的生理盐水，注射取灭活的疫苗，加入同体积的生理盐水，注射10cm10cm规格的鲫规格的鲫3030尾，每尾尾，每尾0.2ml0.2ml，正常饲养，正常饲养，5d5d内内无死亡，可用于后续的免疫保护评价。无死亡，可用于后续的免疫保护评价。第14页，讲稿共16张，创作于星期日15五、实验注意事项五、实验注意事项 操作用的全部工具消毒后方可使用。操作用的全部工具消毒后方可使用。制备组织浆疫苗，与所取病鱼材料直接有关，因此必制备组织浆疫苗，与所取病鱼材料直接有关，因此必须选择典型的传染性病鱼。须选择典型的传染性病鱼。第15页，讲稿共16张，创作于星期日感谢大家观看第16页，讲稿共16张，创作于星期日