化学发光免疫分析技术 (2)讲稿.ppt

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1、关于化学发光免疫分析技术(2)第一页,讲稿共八十二页哦一、一、化学发光免疫技术的概念化学发光免疫技术的概念二、二、化学发光免疫分析基本原理化学发光免疫分析基本原理三、化学发光免疫分析的类型三、化学发光免疫分析的类型四、临床应用四、临床应用五、发展与展望五、发展与展望第二页,讲稿共八十二页哦一、化学发光免疫技术的概念 化学发光免疫技术化学发光免疫技术:化学发光分析是根据化学反应产生的辐射光的强度来确定化学发光分析是根据化学反应产生的辐射光的强度来确定物质含量的分析方法。化学发光免疫分析是将化学发光系统与免疫反应相结合,物质含量的分析方法。化学发光免疫分析是将化学发光系统与免疫反应相结合,用化学发

2、光相关的物质标记抗体或抗原,与待测的抗原或抗体反应后,经过分离用化学发光相关的物质标记抗体或抗原,与待测的抗原或抗体反应后,经过分离游离态的化学发光标记物,加入化学发光系统的其它相关物产生化学发光,进行游离态的化学发光标记物,加入化学发光系统的其它相关物产生化学发光,进行抗原或抗体的定量或定性检测。抗原或抗体的定量或定性检测。第三页,讲稿共八十二页哦化学发光免疫分析化学发光免疫分析(ChemiluminescenceImmunoassay,CLIA)是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无污染、仪器简单经济等优点。它是放

3、射性免疫分析与普通酶免疫分析的取代者,是免疫分析重要的发展方向。CLIA发展迅猛,已占各种免疫分析的首位,是目前放射免疫分析和酶联免疫分析最佳的取代者。第四页,讲稿共八十二页哦是目前世界公认先进的标记免疫测定技术,化学发光免疫分析技术具有高度的准确性和特异性,成为检验方法中最为重要的技术之一。化学发光免疫分析技术作为疾病诊断的主要手段已被广泛用于机体免疫功能、传染性疾病、内分泌功能、肿瘤标志物、性激素、甲状腺功能等方面的体外诊断实验中。第五页,讲稿共八十二页哦化学发光免疫分析的优势灵敏度高灵敏度高灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性,其灵敏度可达10-22mol/L(RIA为10-12mol

4、/L)。化学发光免疫分析能够检出放射免疫分析和酶联免疫分析等方法无法检出的物质,对疾病的早期诊断具有十分重要的意义。发光强度在46个量级之间与测定物质浓度间呈线性关系。这与显色的酶免疫分析吸光度(OD值)为2.0的范围相比,优势明显。虽然RIA也有较宽的线性动力学范围,但放射性限制了其应用。第六页,讲稿共八十二页哦宽的线性动力学范围宽的线性动力学范围光信号持续时间长光信号持续时间长辉光型的CLIA产生的光信号持续时间可达数小时甚至一天。简化了实验操作及测量。绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂(或复合试剂)的一步模式第七页,讲稿共八十二页哦分析方法简便快速分析方法简便快速结果稳定、误差小结果稳

5、定、误差小样品系直接自己发光,不需要任何光源照射,免除了各种可能因素(光源稳定性、光散射、光波选择器等)给分析带来的影响,使分析结果灵敏稳定可靠。安全性好及使用期长安全性好及使用期长免除了使用放射性物质。到目前为止,还未发现其危害性;试剂稳定,保存期可达一年。第八页,讲稿共八十二页哦二、化学发光免疫分析基本原理化学发光免疫分析包含两个部分,即免疫反应系统和化学发光分析系统。免疫反应系统是将标记物质标记在抗原或抗体上,经过特异性免疫反应后,形成抗原2抗体复合物。然后进行对标记物进行检测,来测定待检物。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激

6、发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子,利用发光信号测量仪器光量子产率。第九页,讲稿共八十二页哦化学发光免疫分析仪是通过检测患者血清内待测物质从而对人体进行免疫分析的医学检验仪器。将定量的患者血清和辣根过氧化物(HRP)加入到固相包被有抗体的白色不透明微孔板中,血清中的待测分子与辣根过氧化物酶的结合物和固相载体上的抗体特异性结合。分离洗涤未反应的游离成分。然后,加入鲁米诺Luminol发光底液,利用化学反应释放的自由能激发中间体,从基态回到激发态,能量以光子的形式释放。此时,将微孔板置入分析仪内,通过仪器内部的三维传动系统,依次由光子计数器读出各孔的光子数。样品中的待测分子浓度根据标准品建

7、立的数学模型进行定量分析。最后,打印数据报告,以辅助临床诊断。第十页,讲稿共八十二页哦三、化学发光免疫分析的类型化学发光免疫分析法根据其标记物的不同可分为三大类,即化直接化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析法。第十一页,讲稿共八十二页哦 用吖啶酯直接标记抗体用吖啶酯直接标记抗体(抗原抗原),与待测标本中相应,与待测标本中相应的抗原的抗原(抗体抗体)发生免疫反应后,形成固相包被抗体发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测待测抗原抗原-吖啶酯标记抗体复合物,这时只需加入氧化剂吖啶酯标记抗体复合物,这时只需加入氧化剂(H H2 2O O2 2)和)和NaOHNaOH使成碱性环境,吖

8、啶酯在不需要催化剂使成碱性环境,吖啶酯在不需要催化剂的情况下分解、发光的情况下分解、发光 。由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生的光子由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生的光子能,这部分光的积分与待测抗原的量成正比,可从标准曲线上计能,这部分光的积分与待测抗原的量成正比,可从标准曲线上计算出待测抗原的含量。算出待测抗原的含量。3.1 3.1 直接化学发光免疫分析直接化学发光免疫分析第十二页,讲稿共八十二页哦发光发光Y Y Y YY Y Y YY Y Y Y磁微粒磁微粒被测抗原被测抗原+抗体抗体+带吖啶酯带吖啶酯标记物抗标记物抗体体Y Y Y YY Y Y YY Y Y YY

9、 Y Y YY Y Y YY Y Y YY Y Y YY Y Y YY Y Y YY Y Y YY Y Y Y冲洗后冲洗后-夹心法夹心法(1 1)加入加入H H2 2O O2 2(pH10)直接化学发光的机理直接化学发光的机理第十三页,讲稿共八十二页哦磁磁微粒微粒模式图模式图Y YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY Y Y YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY Y特点特点抗原和抗体结抗原和抗体结合与未合与未结合部分结合部分的的易易分离分离磁微粒磁微粒技术技术第十四页,讲稿共

10、八十二页哦 化学发光酶免疫分析化学发光酶免疫分析(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA)是用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶)是用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶或碱性磷酸酶(ALP)(ALP)来标记抗原或抗体,在与待测标本中相应的抗来标记抗原或抗体,在与待测标本中相应的抗原原(抗体抗体)发生免疫反应后,形成固相包被抗体发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原待测抗原-酶标记抗体复酶标记抗体复合物,经洗涤后,加入底物合物,经洗涤后,加入底物(发光剂发光剂),酶催化和分解底物发光,由光,酶催化和分解底

11、物发光,由光量子阅读系统接收,光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大,量子阅读系统接收,光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大,再把它们传送至计算机数据处理系统,计算出测定物的浓度。再把它们传送至计算机数据处理系统,计算出测定物的浓度。3.23.2、化学发光酶免疫分析、化学发光酶免疫分析第十五页,讲稿共八十二页哦该分析系统采用辣根过氧化物酶(该分析系统采用辣根过氧化物酶(HRP)标记)标记抗体抗体(或抗原或抗原),在与反应体系中的待测标本和固,在与反应体系中的待测标本和固相载体发生免疫反应后,形成固相包被抗体相载体发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测待测抗原抗原-酶(酶(HRP)标记抗体

12、复合物,这时加入鲁米)标记抗体复合物,这时加入鲁米诺发光剂、诺发光剂、H2O2和化学发光增强剂使产生化学和化学发光增强剂使产生化学发光。发光。辣根过氧化物酶标记的化学发光免疫分析辣根过氧化物酶标记的化学发光免疫分析第十六页,讲稿共八十二页哦辣根过氧化物酶标记化学发光免疫分析示意图辣根过氧化物酶标记化学发光免疫分析示意图 第十七页,讲稿共八十二页哦该分析系统以碱性磷酸酶该分析系统以碱性磷酸酶 标记抗体标记抗体(或抗原或抗原),在,在与反应体系中的待测标本和固相载体发生免疫与反应体系中的待测标本和固相载体发生免疫反应后,形成固相包被抗体反应后,形成固相包被抗体-待测抗原待测抗原-酶标记酶标记抗体复

13、合物,这时加入抗体复合物,这时加入AMPPD发光剂,碱性磷酸发光剂,碱性磷酸酶使酶使AMPPD脱去磷酸根基团而发光。脱去磷酸根基团而发光。碱性磷酸酶标记的化学发光免疫分析碱性磷酸酶标记的化学发光免疫分析第十八页,讲稿共八十二页哦碱性磷酸酶标记化学发光免疫分析示意图碱性磷酸酶标记化学发光免疫分析示意图 第十九页,讲稿共八十二页哦分析步骤分配样品分配样品,磁颗粒磁颗粒和试剂和试剂孵育孵育使反应物使反应物结合结合在磁场中在磁场中清洗去除清洗去除未结合物质未结合物质加入加入底物底物产生产生信号信号孵育孵育,促使信号促使信号的产生的产生信号信号检测检测第二十页,讲稿共八十二页哦电化学发光免疫分析电化学发

14、光免疫分析(electrochemiluminescence immunoassay,ECLIA)是以电化学发光剂三联吡啶钌标记是以电化学发光剂三联吡啶钌标记 抗体抗体(抗原抗原),以三丙胺,以三丙胺(TPA)(TPA)为电子供体,为电子供体,在电场中因电子转移而发生特异性化学发光在电场中因电子转移而发生特异性化学发光 反应,它包括电化学和化学发光两个过程。反应,它包括电化学和化学发光两个过程。3.3 3.3 电化学发光免疫分析电化学发光免疫分析第二十一页,讲稿共八十二页哦在电化学发光免疫分析系统中,磁性微粒为固相载体包被抗体在电化学发光免疫分析系统中,磁性微粒为固相载体包被抗体(抗原抗原),

15、用,用三联吡啶钌标记抗体三联吡啶钌标记抗体(抗原抗原),在反应体系内待测标本与相应的抗原,在反应体系内待测标本与相应的抗原 (抗体抗体)发生免疫反应后,形成磁性微粒包被抗体发生免疫反应后,形成磁性微粒包被抗体-待测抗原待测抗原-三联吡啶钌三联吡啶钌标记抗体复合物,这时将上述复合物吸入流动室,同时引人标记抗体复合物,这时将上述复合物吸入流动室,同时引人TPATPA缓冲缓冲液。当磁性微粒流经电极表面时,被安装在电极下面的电磁铁吸引住,液。当磁性微粒流经电极表面时,被安装在电极下面的电磁铁吸引住,而未结合的标记抗体和标本被缓冲液冲走。与此同时电极加压,启动电而未结合的标记抗体和标本被缓冲液冲走。与此

16、同时电极加压,启动电化学发光反应,使三联吡啶钌和化学发光反应,使三联吡啶钌和TPATPA在电极表面进行电子转移,产生电在电极表面进行电子转移,产生电化学发光,光的强度与待测抗原的浓度成正比。化学发光,光的强度与待测抗原的浓度成正比。第二十二页,讲稿共八十二页哦电化学发光免疫分析示意图电化学发光免疫分析示意图第二十三页,讲稿共八十二页哦电化学发光免疫测定示意图电化学发光免疫测定示意图第二十四页,讲稿共八十二页哦标记磁颗粒在电场中发光工作示意图标记磁颗粒在电场中发光工作示意图第二十五页,讲稿共八十二页哦 目前我院最新引进的迈瑞CL-2000i 全自动化学发光免疫分析系统主要以化学发化学发光酶免疫分

17、析光酶免疫分析为主。拥有国内完全自主知识产权,它的酶促化学发光是目前免疫诊断中最灵敏的化学发光体系之一,其核心性能达到了国际同类产品先进水平。第二十六页,讲稿共八十二页哦该机采用高灵敏全球主流化学发光技术的CL-2000i 分析系统,拥有业内领先的高效处理能力,可实现240T/H检测;智能优化的测试流程,专利逻辑设计,提升测试通量,瀑布式真空气吸清洗技术降样本携带干扰至最低,涵盖甲状腺功能、激素、肿瘤标志物、传染病等50多个检测项目。目前我科开展肿瘤标志物,甲状腺功能检测,生殖内分泌激素检查肿瘤标志物,甲状腺功能检测,生殖内分泌激素检查项目,后续依临床需要酌情开展新的项目,更好的服务临床,服务

18、患者第二十七页,讲稿共八十二页哦四、临床应用四、临床应用1.1.甲状腺激素甲状腺激素 2.2.生殖激素生殖激素3.3.肾上腺肾上腺/垂体激素垂体激素 4.4.贫血因子贫血因子5.5.肿瘤标记物肿瘤标记物 6.6.感染性疾病感染性疾病7.7.糖尿病糖尿病 8.8.心血管系统心血管系统9.9.病毒标记物病毒标记物 10.10.骨代谢骨代谢11.11.过敏性疾病过敏性疾病 12.12.治疗药物监测治疗药物监测 第二十八页,讲稿共八十二页哦甲状腺功能检测项目及临床意义甲功五项是T3、T4、FT3、FT4和TSH的总称,它与甲状腺功能有密切关系,是诊断甲亢、甲减的重要依据。检测甲状腺激素在甲亢和甲减病人

19、的诊断中已得到广泛应用,并成为判断疗效、监测复发的重要手段第二十九页,讲稿共八十二页哦甲状腺素(T4)甲状腺素(T4)是由甲状腺合成、分泌的激素,在调节机体代谢中起着重要作用,被分泌到血液循环中的T4能对垂体的促甲状腺激素(TSH)的调节起反应;下丘脑、甲状腺、垂体所组成负反馈机制对T4的分泌起着调节作用。在血循环中,T4约60%与甲状腺结合球蛋白(thyroxine-bindingglobulin,TBG)结合,30%与甲状腺激素转运蛋白(Transthyretin,TBPA)结合,其余约10%与白蛋白结合,仅0.03%-0.04%为游离状态游离的T4有活性,而结合的T4无活性,主要起备用作

20、用。第三十页,讲稿共八十二页哦参考范围:5.014.5ug/dl(CENTAUR)临床意义:T4升高:见于甲状腺功能亢进的病人,但轻型甲亢、早期甲亢、亚临床甲亢的变化未如T3明显;凡引起TBG升高的因素均可使T4升高,如妊娠、应用雌激素、葡萄胎、淋巴瘤、血卟啉病等;药物如胺碘酮、含碘造影剂、受体阻断剂、奋乃近、海洛因等T4降低:见于甲状腺功能减退的病人,轻型甲减、亚临床甲减的变化较T3明显;缺碘性甲状腺肿可见T4降低或在正常低限,而T3正常;肾病综合征、肝功能衰竭、遗传性TBG缺陷症、肢端肥大症、重症全身性疾病状态等;以及应用糖皮质激素、雄激素、生长激素、苯妥英钠等药物第三十一页,讲稿共八十二

21、页哦血清中的三碘甲状腺原氨酸(T3)血清中的三碘甲状腺原氨酸(T3),仅20%由甲状腺直接分泌而来,80%以上在外周组织通过T4脱碘而来。血液循环中的T3能对垂体的促甲状腺激素(TSH)的调节起反应,下丘脑、垂体、甲状腺所组成负反馈机制对T3的分泌起着调节作用。在血循环中,约99.5%的T3与TBG结合,但T3与TBG的亲和力明显低于T4;T3不与TBPA结合未结合的T3有活性;而结合的T3无活性,主要起备用作用。第三十二页,讲稿共八十二页哦参考范围:0.581.62ug/dL临床意义:T3升高:见于甲状腺功能亢进的病人,轻型甲亢、早期甲亢、亚临床甲亢的变化较T4明显,适合轻型甲亢、早期甲亢和

22、亚临床甲亢以及甲亢治疗后复发的诊断;T3型甲亢仅有T3和FT3升高;与T4一样,T3亦受TBG变化影响,但受影响程度不及T4。T3降低:仅于较重甲状腺功能减退的病人,T3和T4均下降,轻型甲减T3不一定下降;重症全身性疾病状态或慢性病变可导致T3下降,多见于慢性肾功能不全、慢性心功能不全、糖尿病、心梗等疾病的患者。第三十三页,讲稿共八十二页哦游离甲状腺素(游离甲状腺素(FT4)游离三碘甲状腺原氨酸()游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)FT3和FT4分别为T3和T4在血清中未与蛋白结合的部分,其不受血清中TBG的影响,直接反映甲状腺功能的状态,其敏感性和特异性均高于T3和T4参考范围:FT3:2.3

23、4.0pg/mLFT4:0.61.2ng/dL第三十四页,讲稿共八十二页哦临床意义:血清FT3和FT4升高:甲亢;低T3综合征,由于5脱碘酶受抑制,T4外周脱碘作用障碍使FT4升高;甲状腺素不敏感综合征,FT3和FT4升高,而无甲亢表现;某些药物,胺碘酮、肝素等可使FT4升高;FT3适合于甲亢和左旋甲状腺素治疗中药物是否过量的判断。血清FT3和FT4降低:甲减病人两者皆下降,但轻型甲减、甲减初期多以FT4下降为主;低T3综合征仅有FT3下降;某些药物,如苯妥英钠、多巴胺、糖皮质激素也可使FT3和FT4降低。第三十五页,讲稿共八十二页哦T3、T4均升高:均升高:高TBG血症、甲亢、甲状腺激素不敏

24、感综合征。T4升高,升高,T3正常或下降:正常或下降:家族性白蛋白异常性高T4血症;胰高血糖素瘤;药物普萘洛尔、胺碘酮、胆囊造影剂;全身性疾病、精神性疾病;苯丙胺成瘾;T4型甲亢、甲亢伴T4转换T3障碍。T4正常,正常,T3升高:升高:T3型甲亢;甲减用T3或者其他甲状腺激素制剂替代治疗后T4正常,正常,T3下降:下降:患有全身性疾病时;5单脱碘酶活性下降;血皮质醇升高的各种情况;营养不良综合征。T4下降、下降、T3升高:升高:医源性甲亢;甲状腺功能正常病人服用甲状腺激素制剂。T4下降,下降,T3正常:正常:轻至中度甲减;碘缺乏;苯妥英钠、卡马西平。T3和和T4均下降:均下降:中至重度甲减;重

25、症全身性疾病;低TBG血症;大剂量使用水杨酸制剂第三十六页,讲稿共八十二页哦促甲状腺激素(促甲状腺激素(TSH)促甲状腺激素是由、两亚单位非共价结合而成的糖蛋白,亚单位与LH、FSH的亚单位相似;而亚单位与上述垂体糖蛋白的相应部分完全不同,有自已独特的生化及免疫特性;TSH主要由垂体合成,主要针对FT3、FT4的负反馈起反应;下丘脑三肽、促甲状腺激素释放激素(TRH)都可直接刺激TSH的产生。TSH主要通过与甲状腺细胞膜受体作用发挥以下三种功能,一是促进甲状腺细胞产生与肥大;二是促进碘代谢;三是促进甲状腺合成T3、T4。参考范围:0.5-7.30mIU/ml(CENTAUR)第三十七页,讲稿共

26、八十二页哦促甲状腺激素(TSH)TSH降低正常升高FT3、FT4FT3、FT4降低正常升高升高正常或降低甲亢甲状腺自主调节功能继发性甲减垂体性甲亢原发性甲减甲状腺功能正常不排除继发性甲减第三十八页,讲稿共八十二页哦肿瘤标志物(tumor markertumor marker,TMTM)肿瘤标志物(tumor marker,TM)是指在肿瘤的发生和增殖过程中,由肿瘤细胞本身所产生的或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的,反映肿瘤存在和生长的一类物质,包括蛋白质、激素、酶(同工酶)、多胺等。可在肿瘤患者血液或体液中检测到肿瘤标志物。第三十九页,讲稿共八十二页哦肿瘤标志物临床应用正常人群中的筛查 有症状

27、者的辅助诊断 癌症的临床阶段的分期 疾病进程的预后指标 评估治疗方案 判断癌症是否复发 治疗应答的监测血清肿瘤标志物的检测是肿瘤诊断的常用方法之一,对于恶性肿瘤的诊断、疗效的观察、病情进展的判断和复发的监测等皆有一定的临床应用价值,并具有简便无创、测定结果定量客观、可重复测定以便动态监测、费用相对低廉等优点。第四十页,讲稿共八十二页哦甲胎蛋白(AFP)(AFP)参考值:7.0ng/ml500g/LAFP500g/L持续持续1 1个月或个月或AFP200g/LAFP200g/L持续持续2 2好个月,应高度怀疑肝癌,同时应有医学影像学好的证据参与诊断好个月,应高度怀疑肝癌,同时应有医学影像学好的证

28、据参与诊断低浓度(低浓度(5050200g/L200g/L)持续时间超过)持续时间超过2 2个月的好患者,应视为肝癌的高危人群个月的好患者,应视为肝癌的高危人群当谷丙转氨酶(当谷丙转氨酶(ALTALT)正常,用)正常,用AFPAFP来诊断肝癌,可取性可达来诊断肝癌,可取性可达100100。若若AFPAFP及胆红素同时明显升高,病人存活期很短及胆红素同时明显升高,病人存活期很短通常由非原发性肝癌引起的通常由非原发性肝癌引起的AFPAFP升高,一般都不会高于升高,一般都不会高于400g/L400g/L第四十一页,讲稿共八十二页哦3.63.65.25.2的胆管上皮癌、的胆管上皮癌、8484以上的肝母

29、细胞癌和以上的肝母细胞癌和7070左右的生殖性畸胎瘤及较少比例的左右的生殖性畸胎瘤及较少比例的胰腺癌、肺癌、肾癌和白血病患者也可出现胰腺癌、肺癌、肾癌和白血病患者也可出现AFPAFP低浓度的异常升高。低浓度的异常升高。良性病变中的良性病变中的AFPAFP升高,升高一般是散在的和暂时的。肝炎病人,升高,升高一般是散在的和暂时的。肝炎病人,1010升高,水平升高,水平50g/L50g/L;肝硬化病人,肝硬化病人,3030升高,水平升高,水平500g/L500g/L;第四十二页,讲稿共八十二页哦癌胚抗原(CEACEA)参考值:4.5ng/ml4.5ng/ml是一种可溶性糖蛋白,胚胎期主要存在于胎儿的

30、胃肠管、胰腺和肝脏。胃肠道恶性肿是一种可溶性糖蛋白,胚胎期主要存在于胎儿的胃肠管、胰腺和肝脏。胃肠道恶性肿瘤时可见血清瘤时可见血清CEACEA升高,在乳腺癌、肺癌及其他恶性肿瘤中也可出现表达,并分泌于体液中。升高,在乳腺癌、肺癌及其他恶性肿瘤中也可出现表达,并分泌于体液中。CEACEA在中晚期肿瘤中的阳性率在中晚期肿瘤中的阳性率 胰腺癌胰腺癌 88889191 肺癌肺癌 7676 结肠癌结肠癌 7373 乳腺癌和卵巢癌乳腺癌和卵巢癌 7373 膀胱癌、宫颈癌和子宫内膜癌中也有升高膀胱癌、宫颈癌和子宫内膜癌中也有升高 第四十三页,讲稿共八十二页哦铁蛋白(SFSF)男:27-375ug/l :27

31、-375ug/l 女:12-135ug/l:12-135ug/l铁蛋白升高可见于下列肿瘤:急性白血病、何杰金氏病、肺癌、结肠癌、肝癌和前列铁蛋白升高可见于下列肿瘤:急性白血病、何杰金氏病、肺癌、结肠癌、肝癌和前列腺癌。检测铁蛋白对肝脏转移性肿瘤有诊断价值,腺癌。检测铁蛋白对肝脏转移性肿瘤有诊断价值,76%76%的肝转移病人铁蛋白含量高于的肝转移病人铁蛋白含量高于400g/L400g/L,当肝癌时,当肝癌时,AFPAFP测定值较低的情况下,可用铁蛋白测定值补充,以测定值较低的情况下,可用铁蛋白测定值补充,以提高诊断率。在色素沉着、炎症、肝炎时铁蛋白也会升高。升高的原因可能提高诊断率。在色素沉着、

32、炎症、肝炎时铁蛋白也会升高。升高的原因可能是由于细胞坏死,红细胞生成被阻断或肿瘤组织中合成增多。是由于细胞坏死,红细胞生成被阻断或肿瘤组织中合成增多。第四十四页,讲稿共八十二页哦乳腺癌相关抗原(CA15-3CA15-3)参考值:15U/ml15U/mlCA15-3CA15-3是乳腺癌的最重要的特异性标志物。是乳腺癌的最重要的特异性标志物。30%-50%30%-50%的乳腺癌患者的的乳腺癌患者的CA15-3CA15-3明显明显升高。升高。CA15-3CA15-3动态测定有助于动态测定有助于IIII期和期和IIIIII期乳腺癌病人治疗后复发的早期发现;当期乳腺癌病人治疗后复发的早期发现;当CA15

33、-CA15-3 3大于大于100U/ml100U/ml时,可认为有转移性病变。时,可认为有转移性病变。肺癌、胃肠癌、卵巢癌及宫颈癌患者的血清肺癌、胃肠癌、卵巢癌及宫颈癌患者的血清CA15-3CA15-3也可升高,应予以鉴别,也可升高,应予以鉴别,特别要排除部分妊娠引起的含量升高。特别要排除部分妊娠引起的含量升高。第四十五页,讲稿共八十二页哦卵巢癌相关抗原(CA125CA125):参考值:35U/ml35U/mlCA12535U/ml的病人中有的病人中有95%95%在第二次手术时仍有肿瘤存在在第二次手术时仍有肿瘤存在早期复发的监测早期复发的监测:75%:75%的患者在肿瘤复发前一年左右时间的患者

34、在肿瘤复发前一年左右时间CA125CA125的水平就已升高的水平就已升高CA125CA125在子宫内膜异位症、在子宫内膜异位症、1%1%的健康妇女、的健康妇女、3%3%的患良性卵巢疾病妇女及其他非肿瘤患者的患良性卵巢疾病妇女及其他非肿瘤患者也可见到升高。也可见到升高。第四十六页,讲稿共八十二页哦胰腺胃肠癌相关抗原(CA19-9CA19-9)参考值:30U/ml30U/mlCA19-9CA19-9是胰腺癌,胃癌,结、直肠癌、胆囊癌的相关标志物,是对胰腺癌是胰腺癌,胃癌,结、直肠癌、胆囊癌的相关标志物,是对胰腺癌敏感性最高的标志物。敏感性最高的标志物。胰腺癌患者胰腺癌患者85%-95%85%-95

35、%为阳性。当为阳性。当CA19-9CA19-9小于小于1000U/ml1000U/ml时,有一定的手术意义,时,有一定的手术意义,肿瘤切除后肿瘤切除后CA19-9CA19-9浓度会下降,如再上升,则可表示复发。对胰腺癌转移浓度会下降,如再上升,则可表示复发。对胰腺癌转移的诊断也有较高的阳性率,当血清的诊断也有较高的阳性率,当血清CA19-9CA19-9水平高于水平高于10000U10000Umlml时,几乎均存时,几乎均存在外周转移。在外周转移。胃癌、结直肠癌、胆囊癌、胆管癌、肝癌的阳性率也会很高。胃癌、结直肠癌、胆囊癌、胆管癌、肝癌的阳性率也会很高。胃肠道和肝的多种良性和炎症病变,如胰腺炎、

36、轻微的胆汁郁积和黄疸,胃肠道和肝的多种良性和炎症病变,如胰腺炎、轻微的胆汁郁积和黄疸,CA19-9CA19-9浓度也可增高,但往往呈浓度也可增高,但往往呈“一过性一过性”,而且其浓度多低于,而且其浓度多低于120U/ml120U/ml。第四十七页,讲稿共八十二页哦总前列腺特异性抗原(TPSATPSA)参考值:4.0ng/ml4.0ng/mlPSAPSA是前列腺癌的特异性标志物,也是目前公认的唯一具有器官特异性肿瘤标志是前列腺癌的特异性标志物,也是目前公认的唯一具有器官特异性肿瘤标志物。血清物。血清TPSATPSA升高一般提示前列腺存在病变(前列腺炎、良性增生或癌症)。血升高一般提示前列腺存在病

37、变(前列腺炎、良性增生或癌症)。血清清PSAPSA是检测和早期发现前列腺癌最重要的指标之一,血清是检测和早期发现前列腺癌最重要的指标之一,血清TPSATPSA定量的阳性临界值定量的阳性临界值为大于为大于10g/L10g/L,前列腺癌的诊断特异性达,前列腺癌的诊断特异性达9090-97-97。TPSATPSA也可用于高危人群也可用于高危人群前列腺癌的筛选与早期诊断,是第一个由美国癌症协会推荐用于筛查前列腺癌的筛选与早期诊断,是第一个由美国癌症协会推荐用于筛查5050岁以上男性前列腺癌的肿瘤标志物。岁以上男性前列腺癌的肿瘤标志物。TPSATPSA测定还可用于监测前列腺癌患者或接受激素治疗患者的病情

38、及疗效,测定还可用于监测前列腺癌患者或接受激素治疗患者的病情及疗效,90%90%前列前列腺癌术后患者的血清腺癌术后患者的血清TPSATPSA值可降至不能检出的痕量水平,若术后血清值可降至不能检出的痕量水平,若术后血清TPSATPSA值升高,提示有残存肿瘤。放疗后疗效显著者,值升高,提示有残存肿瘤。放疗后疗效显著者,5050以上患者在以上患者在2 2个月内血清个月内血清TPSATPSA降降至正常。至正常。第四十八页,讲稿共八十二页哦游离前列腺特异性抗原(FPSAFPSA)参考值:1ng/ml:1ng/ml单项的血清总单项的血清总PSAPSA(TPSATPSA)测定不能明确鉴别前列腺癌和良性的前列

39、腺增生,)测定不能明确鉴别前列腺癌和良性的前列腺增生,主要是因为在浓度主要是因为在浓度2 2 20ng/ml20ng/ml范围内,二组病人有交叉。而范围内,二组病人有交叉。而FPSA/TPSAFPSA/TPSA不受此因不受此因素及年龄的影响,通过素及年龄的影响,通过FPSA/TPSAFPSA/TPSA比值达到鉴别前列腺癌或良性的前列腺增生的目的。比值达到鉴别前列腺癌或良性的前列腺增生的目的。前列腺癌患者的前列腺癌患者的FPSA/TPSAFPSA/TPSA比值明显偏低,良性的前列腺增生患者的比值明显偏低,良性的前列腺增生患者的FPSA/TPSAFPSA/TPSA比值显著增高。比值显著增高。FPS

40、A/TPSAFPSA/TPSA界限指定为界限指定为0.150.15,低于该值高度怀疑前列腺癌,低于该值高度怀疑前列腺癌,其诊断敏感性为其诊断敏感性为90.9%90.9%,特异性为,特异性为87.5%87.5%,准确性为,准确性为88.6%88.6%,明显优于,明显优于TPSATPSA单独单独测定。测定。FPSAFPSA检测主要适用于未经治疗、检测主要适用于未经治疗、TPSATPSA值为值为2 2 20ng/ml20ng/ml病人,当病人,当TPSATPSA值低于值低于2ng/ml2ng/ml或高于或高于20ng/ml20ng/ml时,时,FPSA/TPSAFPSA/TPSA比值并不能用于鉴别前

41、列腺癌和良性的前列腺增生。比值并不能用于鉴别前列腺癌和良性的前列腺增生。第四十九页,讲稿共八十二页哦一种肿瘤可分泌多种肿瘤标志物,而不同的肿瘤或同种肿瘤的一种肿瘤可分泌多种肿瘤标志物,而不同的肿瘤或同种肿瘤的不同组织类型可有相同的肿瘤标志物,而且在不同的肿瘤患者不同组织类型可有相同的肿瘤标志物,而且在不同的肿瘤患者体内,肿瘤标志物的质和量变化也较大。因此,单独检测一种体内,肿瘤标志物的质和量变化也较大。因此,单独检测一种肿瘤标志物,可能会因为测定方法的灵敏度不够而出现假阴性,肿瘤标志物,可能会因为测定方法的灵敏度不够而出现假阴性,联合检测多种肿瘤标志物有利于提高检出的阳性率。为此,选联合检测多

42、种肿瘤标志物有利于提高检出的阳性率。为此,选择一些特异性较高,可以互补的肿瘤标志物联合测定,对提高择一些特异性较高,可以互补的肿瘤标志物联合测定,对提高肿瘤的检出率是有价值的。肿瘤的检出率是有价值的。第五十页,讲稿共八十二页哦肿瘤标志物的相关肿瘤肿瘤标志物主诊所预示的肿瘤CEA广谱结肠直肠癌,乳腺癌AFP肝脏睾丸癌,肝细胞癌CA125卵巢卵巢癌,胰腺癌,肺癌,乳腺癌CA19-9消化道胰腺癌,胆管癌,胃癌,肠癌CA72-4胃胃癌,卵巢癌CA15-3乳腺乳腺癌CA50广谱胰腺癌,肝癌,卵巢癌,肠癌,胃癌,肺癌PSA前列腺前列腺癌HCG子宫胚胎细胞癌,滋养层肿瘤NSE肺小细胞肺癌,神经内分泌系统肿瘤

43、SCC鳞癌鳞状细胞癌(肺、食道、上鄂、宫颈、皮肤)CYFRA 21-1肺非小细胞肺癌第五十一页,讲稿共八十二页哦肿瘤标志物的联合应用肿瘤类型 肿瘤标志物(按检测的顺序排)肝AFPCEA结、直肠、胆道CEACA199CA50胰CEACA199CA242CA50胃CEACA724CA199食道CEA SCC肺NSECYFRA 21-1 CEA+CA50CA199/SCC乳腺CA153 CEA CA125卵巢 CA125-HCG AFPCEA CA724宫颈CEA CA724子宫CEA SCCSF-HCG肾CEA-MG前列腺FPSA/TPSAPAP甲状腺CEA CA199 TBG T3,T4,FT3

44、,FT4,TSH鼻咽CEA SCC EBV第五十二页,讲稿共八十二页哦性激素检测系列v下丘脑水平:促性腺激素释放激素(GnRH)v脑垂体水平:促卵泡激素(FSH),促黄体生成素(LH),垂体催乳素(PRL)v性腺水平(睾丸,卵巢分泌):睾酮(T),雌二醇(E2),雌三醇(E3),孕酮(P)(胎盘分泌):胎盘催乳素(HPL),人绒毛膜性腺激素(HCG)v其它:性激素结合球蛋白(SHBG),硫酸去氢表酮(DHEA-SO4),妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)第五十三页,讲稿共八十二页哦卵巢、子宫内膜与激素水平 第五十四页,讲稿共八十二页哦雌二醇E2参考值;男性为2584pg/ml。女性卵泡期为25

45、138pg/ml;黄体期为31317pg/ml;排卵期为100440pg/ml;绝经期为2584pg/ml。1.判断闭经原因(1)激素水平符合正常的周期变化,表明卵泡发育正常,应考虑为子宫性闭经;(2)雌激素水平偏低,闭经原因可能因原发或继发性卵巢功能低下或受药物影响而抑制卵巢功能,也可见于下丘脑-垂体功能失调、高催乳激素血症等。2.诊断无排卵:雌激素无周期性变化,常见于无排卵性功能失调性子宫出血、多囊卵巢综合征、某些绝经后子宫出血。3.监测卵泡发育:应用药物诱导排卵时,测定血中E2作为监测卵泡发育、成熟的指标之一,用以指导HCG用药及确定取卵时间。4.女性性早熟:临床多以8岁以前出现第二性征

46、发育诊断性早熟,血E2水平升高为诊断性早熟的激素指标之一。第五十五页,讲稿共八十二页哦雌三醇E3未孕妇女:(0.310.17)ng/ml。在妊娠妇女则随妊娠周龄而升高:21周,(0.2-5.8)ng/ml;35周,(4.9-15.7)ng/ml;41-42周,(8.2-24.2)ng/ml。男性:(0.240.17)ng/ml。(1)糖尿病妊娠患者监测E3有助于了解胎盘功能和胎儿发育情况。凡胎儿发育正常者妊娠中期E3浓度逐渐缓慢上升,41-42周达到高峰。一般认为足月妊娠时血清E3应大于31nmol/L,6.9nmol/L、13.9nmol/L者示胎儿危急。24h尿10mg,亦提示胎儿胎盘功能

47、低下。(2)妊娠高血压综合征在无胎儿窘迫的情况下,早期由于子宫-胎盘血流增加,E3可保持正常。中、重度妊高症由于肾素-血管紧张素-醛固酮系统活性增强,致胎盘缺血,血清E3可明显下降。(3)多胎妊娠、超重胎儿血清E3多升高。过期妊娠、胎儿宫内生长迟缓、胎儿肾上腺发育不全、死胎等血清E3下降。第五十六页,讲稿共八十二页哦孕激素PROG男:成人0.7-2.1ng/ml女:卵泡期0.21.6ng/ml排卵期0.32.1ng/ml排卵后1.822.5ng/ml1.监测排卵血孕酮水平在黄体期范围内提示有排卵。若孕酮水平符合有排卵,而无其它原因的不孕患者,需配合B型超声检查观察卵泡发育及排卵过程,以除外黄素

48、化未破裂卵泡综合征。原发性或继发性闭经、无排卵性月经或无排卵性功能失调性子宫出血、多囊卵巢综合征、口服避孕药或长期使用GnRH激动剂,均可使孕酮水平下降。2.了解黄体功能黄体期血孕酮水平低于生理值,提示黄体功能不足;月经来潮45日血孕酮仍高于生理水平,提示黄体萎缩不全。3.观察胎盘功能妊娠期胎盘功能减退时,血孕酮水平下降。异位妊娠时,孕酮水平较低如孕酮水平25ng/ml,基本可除外异位妊娠。单次血清孕酮水平低于黄体期孕酮正常范围,提示为死胎。先兆流产时,孕酮值若有下降趋势,有可能流产。4.孕酮替代疗法的监测孕早期切除黄体侧卵巢后,应用孕酮替代疗法时应监测血清孕酮水平。第五十七页,讲稿共八十二页

49、哦雄激素TESTO成人:男2.279.76ng/ml女0.11.23ng/ml睾酮增高:特发性男性性早熟,家族性男性性早熟,肾上腺皮质增生,肾上腺皮质肿瘤(腺癌显著增高,腺瘤亦常增高),睾丸肿瘤,睾丸女性化,多囊卵巢综合征,卵巢雄性化肿瘤,松果体瘤,特发性多毛症,甲减,雄激素,HCG和雌激素治疗中等。降低:21三体综合征,尿毒症,肌强直营养不良征,肝功能不全,陷睾症,原发性或继发性性腺功能减退症(Klinefelter综合征,Kallman综合征等),雄激素治疗停药后等。睾酮降低:男性睾丸发育不全、类无睾综合征、下丘脑或垂体性性腺功能减低。此外,也见于甲状腺功能亢进、肝硬化、肾衰竭、严重创伤以

50、及久病体弱患者。第五十八页,讲稿共八十二页哦垂体催乳激素PRL参考范围;男性:3.0-16.5ng/ml女性:3.8-30.7ng/ml非妊娠期女性:3.224.9ng/ml1.闭经、不孕及月经失调者,无论有无泌乳,均应测PRL,以除外高催乳激素血症。2.垂体肿瘤患者伴PRL异常增高时,应考虑有垂体催乳激素瘤。3.PRL水平升高还见于性早熟、原发性甲状腺功能低下、卵巢早衰、黄体功能欠佳、长期哺乳、神经精神刺激、药物作用(如氯丙嗪、避孕药、大量雌激素、利血平等)因素等;PRL水平降低多见于垂体功能减退、单纯性催乳激素分泌缺乏症等。第五十九页,讲稿共八十二页哦垂体促性腺激素(LH和FSH)参考范围

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