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1、关于血液及其成分的保存运输和领发现在学习的是第1页，共98页全血在保存时会发生什么样的变化？全血在保存时会发生什么样的变化？全血保存主要需要解决哪些问题？全血保存主要需要解决哪些问题？现在学习的是第2页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 血液在贮存中的变化血液在贮存中的变化(一一)血浆的变化血浆的变化项目项目保存液保存液保存天数保存天数0 07 7141421213535血浆血浆pHpHACDACD7.00 7.00 6.79 6.79 6.73 6.73 6.71 6.71 CPDCPD7.20 7.20 7.00 7.00 6.89 6.89 6.84 6.84 现在学习的是第3
2、页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 三、血液在贮存中的变化三、血液在贮存中的变化(一一)全血的变化全血的变化项目项目保存液保存液保存天数保存天数0 07 7141421213535血浆钠离子血浆钠离子(mmol)(mmol)ACDACD172172158158150150146146CPDCPD175175163163155155152152血浆钾离子血浆钾离子(mmol)(mmol)ACDACD1010202029293535CPDCPD3.93.911.911.917.217.22121CPDA-1CPDA-127.327.3血浆血浆Hb(mg/L)Hb(mg/L)ACDACD
3、100100220220350350530530CPDCPD17177878125125191191CPDA-1CPDA-18282461461现在学习的是第4页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 血液在贮存中的变化血液在贮存中的变化血小板血小板白细胞白细胞5 5天之后逐渐死亡天之后逐渐死亡24h24h之后功能逐渐丧失之后功能逐渐丧失现在学习的是第5页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 血液在贮存中的变化血液在贮存中的变化不稳定的凝血因子不稳定的凝血因子活性逐渐下降活性逐渐下降现在学习的是第6页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 血液在贮存中的变化血液在贮存中的变
4、化红细胞红细胞膜蛋白、脂质发生变化，钾离子降低，钠、钙膜蛋白、脂质发生变化，钾离子降低，钠、钙离子升高。离子升高。双凹形变成球形或桑椹形，脆性增加，易发性溶双凹形变成球形或桑椹形，脆性增加，易发性溶血。血。现在学习的是第7页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 三、血液在贮存中的变化三、血液在贮存中的变化红细胞红细胞的变化的变化项目项目保存液保存液保存天数保存天数0 07 7141421213535ATP(%)ATP(%)CPDCPD10010096968383CPDA-1CPDA-110010096968383707057572,3-DPG2,3-DPGACDACD100100606
5、023231010CPDCPD100100999980804444CPDA-1CPDA-11001009999808044445 5红细胞存活率红细胞存活率(%)(%)ACDACD100100989885857070CPDCPD100100989885858080CPDA-1CPDA-11001009898909085857979现在学习的是第8页，共98页成熟红细胞不仅无细胞核，而且也无线粒体、成熟红细胞不仅无细胞核，而且也无线粒体、核蛋白体等细胞器，不能进行核酸和蛋白质核蛋白体等细胞器，不能进行核酸和蛋白质的生物合成，也不能进行有氧氧化，不能利的生物合成，也不能进行有氧氧化，不能利用脂肪酸
6、。血糖是其唯一的能源。用脂肪酸。血糖是其唯一的能源。红细胞携带红细胞携带O O2 2,自身不消耗自身不消耗O O2 2,其内电解质以其内电解质以钾最多、钠含量较少钾最多、钠含量较少,与血浆的钾钠含量相与血浆的钾钠含量相反。红细胞内反。红细胞内CaCa离子浓度低于血浆。离子浓度低于血浆。红细胞的特点红细胞的特点现在学习的是第9页，共98页主要途径主要途径磷酸戊糖旁路磷酸戊糖旁路葡萄糖酵解葡萄糖酵解合成合成ATP：合成合成2,3-DPG（2,3-二磷酸甘油酸二磷酸甘油酸）控制静脉侧氧气的释放和维持控制静脉侧氧气的释放和维持Hb二二价铁，进行氧气的传递价铁，进行氧气的传递通过磷酸戊糖通路代谢，为红细
7、胞提供另一种还原力，在红细胞氧化还原系统中发挥重要作用，具有通过磷酸戊糖通路代谢，为红细胞提供另一种还原力，在红细胞氧化还原系统中发挥重要作用，具有保护膜蛋白、血红蛋白及酶蛋白的琉基不被氧化，还原高铁血红蛋白等多种功能。保护膜蛋白、血红蛋白及酶蛋白的琉基不被氧化，还原高铁血红蛋白等多种功能。葡萄糖葡萄糖磷酸化、变构、裂解磷酸化、变构、裂解2分子乳酸分子乳酸 2ATP红细胞能量代谢红细胞能量代谢现在学习的是第10页，共98页现在学习的是第11页，共98页成熟红细胞的糖酵解特点：成熟红细胞的糖酵解特点：红细胞糖酵解的特点是在酵解过程中有相当数量的红细胞糖酵解的特点是在酵解过程中有相当数量的1.3-
8、DPG1.3-DPG转变转变成成2.3-DPG2.3-DPG，后者再脱磷酸变成，后者再脱磷酸变成3-PG3-PG，并进一步酵解产生乳酸。，并进一步酵解产生乳酸。此此2.3-DPG2.3-DPG侧支循环称侧支循环称2.3-DPG2.3-DPG支路，产生支路的原因是红细胞支路，产生支路的原因是红细胞中存在中存在DPGDPG变位酶和变位酶和2.3-DPG2.3-DPG磷酸酶，前者活性大于后者，故磷酸酶，前者活性大于后者，故可使可使2.3-DPG2.3-DPG堆积起来。堆积起来。2.3-DPG2.3-DPG生成的主要生理意义在于降低生成的主要生理意义在于降低HbHb对氧的亲和力，在组对氧的亲和力，在组
9、织氧分压较低的情况下，织氧分压较低的情况下，HbO2HbO2放出氧适应组织需要放出氧适应组织需要。现在学习的是第12页，共98页血红蛋白与氧亲和性增加血红蛋白与氧亲和性增加2,3-DPG2,3-DPG含量减少含量减少氧解离曲线向左移氧解离曲线向左移组织氧供给不足组织氧供给不足P50是指血红蛋白氧饱和度为是指血红蛋白氧饱和度为50%时的血氧分压，可以反映时的血氧分压，可以反映Hb与与O2的亲和力。的亲和力。P50增大，氧离曲线右移，表示增大，氧离曲线右移，表示Hb与与O2的亲和力小，的亲和力小，P50减小，氧离曲线左移，说明亲和力大。减小，氧离曲线左移，说明亲和力大。2,3-DPG的生理意义的生
10、理意义现在学习的是第13页，共98页1.1.维持维持NaNa+-K-K-ATP ATP酶酶(钠泵钠泵)功能。通过功能。通过ATP ATP 提供能量提供能量,维持维持K+K+的浓度在红细胞内比血浆高的浓度在红细胞内比血浆高5 5倍。所以倍。所以,红红细胞产生的细胞产生的ATPATP主要用于维持红细胞膜主要用于维持红细胞膜NaNa+-K-K-ATP ATP酶酶酶酶的正常功能的正常功能,以保证红细胞的离子平衡。以保证红细胞的离子平衡。在保存过程中在保存过程中,红细胞膜和膜蛋白的损伤以及葡萄糖红细胞膜和膜蛋白的损伤以及葡萄糖的持续消耗引起的的持续消耗引起的ATPATP供能减少都会影响供能减少都会影响N
11、aNa+-K-K-ATP ATP酶酶功能的正常发挥功能的正常发挥,导致细胞内导致细胞内K+K+的逸出的逸出,从而使血从而使血浆浆K+K+浓度不断升高浓度不断升高。红细胞红细胞ATPATP的功能的功能（红细胞内糖代谢的意义）（红细胞内糖代谢的意义）现在学习的是第14页，共98页2 2、维持红细胞膜上钙泵一的正常运转，将红细胞内、维持红细胞膜上钙泵一的正常运转，将红细胞内的的CaCa2+2+泵入血浆以维持红细胞内的低钙状态。正常情泵入血浆以维持红细胞内的低钙状态。正常情况下，红细胞内的况下，红细胞内的CaCa2+2+浓度很低（浓度很低（20umol/L)20umol/L)。，而。，而血浆血浆CaC
12、a2+2+的浓度为的浓度为2-3mmol/L2-3mmol/L。血浆内钙离子会被动扩散。血浆内钙离子会被动扩散进入红细胞。缺乏进入红细胞。缺乏ATPATP时，钙泵不能正常运行，钙将时，钙泵不能正常运行，钙将聚集并沉积于红细胞膜上，使膜失去柔韧性而趋于聚集并沉积于红细胞膜上，使膜失去柔韧性而趋于僵硬，使红细胞易被破坏僵硬，使红细胞易被破坏红细胞红细胞ATPATP的功能（红细胞内糖代谢的意义）的功能（红细胞内糖代谢的意义）现在学习的是第15页，共98页3.3.维持红细胞膜上脂质与血浆脂蛋白中的脂质进行交维持红细胞膜上脂质与血浆脂蛋白中的脂质进行交换。红细胞膜的脂质处于不断更新中，此过程需消换。红细
13、胞膜的脂质处于不断更新中，此过程需消耗耗ATPATP。缺乏。缺乏ATPATP时，脂质更新受阻，红细胞可塑时，脂质更新受阻，红细胞可塑性降低，易于破坏性降低，易于破坏4.4.少量用于谷胱甘肽的生物合成。少量用于谷胱甘肽的生物合成。5.5.用于葡萄糖的活化，启动糖酵解过程用于葡萄糖的活化，启动糖酵解过程。红细胞红细胞ATPATP的功能（红细胞内糖代谢的意义）的功能（红细胞内糖代谢的意义）现在学习的是第16页，共98页红细胞内的谷胱甘肽代谢红细胞内的谷胱甘肽代谢红细胞内谷胱甘肽含量很高(2mmol/L)，而且几乎全是还原型的，主要生理功能是对抗氧化剂对巯基的氧化。现在学习的是第17页，共98页第一节
14、第一节 全血的保存全血的保存 现在学习的是第18页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 对于需要短时间内纠正载氧能力的患者和特别经受不住组对于需要短时间内纠正载氧能力的患者和特别经受不住组织缺氧的患者输入织缺氧的患者输入2,3-DPG2,3-DPG水平低的血是无益的，应该给水平低的血是无益的，应该给这些患者输注保存期不超过这些患者输注保存期不超过710710天的血液。天的血液。现在学习的是第19页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 二、血液保存需要解决的问题二、血液保存需要解决的问题需解决的问题需解决的问题 血液凝固血液凝固 红细胞溶血红细胞溶血放氧能力下降放氧能力下降 抗凝
15、剂抗凝剂红细胞营养代谢红细胞营养代谢抗溶血剂抗溶血剂改善放氧改善放氧保存容器保存容器现在学习的是第20页，共98页红细胞保存液考虑的几个方面红细胞保存液考虑的几个方面1.保护细胞的能量产生机构，使其维持保护细胞的能量产生机构，使其维持正常结构和功能正常结构和功能2.尽量减慢细胞代谢速度，减少能量消尽量减慢细胞代谢速度，减少能量消耗并供应能量物质。耗并供应能量物质。3.其他：抗氧化剂的作用？改善保存容其他：抗氧化剂的作用？改善保存容器？器？现在学习的是第21页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 常用血液保存液的成分：常用血液保存液的成分：1、抗凝剂、抗凝剂血液抗凝剂是防止血液凝固和红细
16、胞被破坏的化学物质血液抗凝剂是防止血液凝固和红细胞被破坏的化学物质 常用的抗凝剂有哪些？常用的抗凝剂有哪些？现在学习的是第22页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 血液保存液的成分血液保存液的成分(一一)血液抗凝剂血液抗凝剂 枸橼酸钠枸橼酸钠 肝素肝素 EDTA2Na EDTA2Na 原理原理CaThrombinCa应用应用实验室检测血液标本的抗凝及外实验室检测血液标本的抗凝及外科体外循环手术的抗凝科体外循环手术的抗凝实验室检测血液标本的抗凝实验室检测血液标本的抗凝全血及血液成分保存的抗凝剂全血及血液成分保存的抗凝剂现在学习的是第23页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 葡
17、萄糖的在血液中浓度应为葡萄糖的在血液中浓度应为0.5%l%，以，以0.5%为宜为宜 枸橼酸钠枸橼酸钠+葡萄糖葡萄糖 葡萄糖用于维持红细胞代谢，延长红葡萄糖用于维持红细胞代谢，延长红细胞的保存时间细胞的保存时间血液保存液的成分：血液保存液的成分：2、提供红细胞的能量代谢、提供红细胞的能量代谢葡萄糖葡萄糖现在学习的是第24页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 腺嘌呤腺嘌呤提高提高ATPATP水平和活性的另一办法就是在保存液中加入少量水平和活性的另一办法就是在保存液中加入少量腺嘌呤腺嘌呤腺嘌呤腺嘌呤磷酸腺苷（磷酸腺苷（AMPAMP）磷酸化磷酸化ATPATP血液保存液的成分：血液保存液的成分
18、：2、提供红细胞的能量代谢、提供红细胞的能量代谢现在学习的是第25页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 血液保存液的成分：血液保存液的成分：3、抗溶血剂抗溶血剂目前国际上使用较多的是甘露醇，它的用量很小，一般在目前国际上使用较多的是甘露醇，它的用量很小，一般在1 1以以下。下。蔗糖蔗糖 山梨醇山梨醇甘露醇甘露醇具有缓解红细胞溶血的功能和具有缓解红细胞溶血的功能和加固细胞膜的作用，而不影响加固细胞膜的作用，而不影响红细胞代谢红细胞代谢现在学习的是第26页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 血液保存液的成分：血液保存液的成分：4、改善红细胞的放氧能力改善红细胞的放氧能力ACDA
19、CD或或CPDCPD血液保存到血液保存到l l周和周和2 2周后，其红细胞放氧能力均降到周后，其红细胞放氧能力均降到50%50%，对于即刻需要纠正缺氧的患者，输注保存时间长的，对于即刻需要纠正缺氧的患者，输注保存时间长的血液是不适宜的。血液是不适宜的。现在学习的是第27页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 血液保存液的成分：血液保存液的成分：4、改善红细胞的放氧能力改善红细胞的放氧能力血红蛋白的解离度血红蛋白的解离度 红细胞的放氧能力红细胞的放氧能力 影响因素：影响因素：COCO2 2分压、分压、O O2 2分压、分压、pHpH和和2,3-2,3-DPGDPG含量及其生成有关酶系有关
20、含量及其生成有关酶系有关现在学习的是第28页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 一、全血在一、全血在(42)(42)时的保存时的保存 4、改善红细胞的放氧能力改善红细胞的放氧能力解决的方法：解决的方法：1 1、保存液中加、保存液中加NaHCONaHCO3 3，所产生的所产生的C0C02 2，可由内在的，可由内在的Ca(OH)Ca(OH)2 2来消除，避免来消除，避免pHpH降低，有利于降低，有利于2,3-DPG2,3-DPG的合成的合成2 2、加磷酸二羟丙酮，可以增加、加磷酸二羟丙酮，可以增加2,3-DPG2,3-DPG含量。含量。3 3、加丙酮酸盐、通过辅酶、加丙酮酸盐、通过辅酶系
21、统增加系统增加1,3-1,3-二磷酸甘油酸（二磷酸甘油酸（1,3-1,3-DPGDPG），然后变成），然后变成2,3-DPG2,3-DPG。4 4、加维生素、加维生素C C，增加还原力，进而维持有关酶的活性。，增加还原力，进而维持有关酶的活性。现在学习的是第29页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 全血在全血在(42)(42)时的保存时的保存 保存温度保存温度低温保存低温保存排放整齐排放整齐红细胞代谢缓慢，乳酸生成速度下降，红细胞代谢缓慢，乳酸生成速度下降，pHpH下降速度也变缓慢。下降速度也变缓慢。维持红细胞正常代谢，血袋要排放整齐，避免重维持红细胞正常代谢，血袋要排放整齐，避免重
22、叠堆积。叠堆积。现在学习的是第30页，共98页温度对红细胞保存的影响温度对红细胞保存的影响6 6 以上时以上时,无法保证血液成分的活性和有效性。高于无法保证血液成分的活性和有效性。高于10 10 红细胞破坏增加红细胞破坏增加,10,10 以上超过以上超过30 min30 min游离血红蛋白游离血红蛋白的含量逐渐增加的含量逐渐增加,pH,pH下降下降,血钾浓度也逐渐上升。血钾浓度也逐渐上升。保存温度低于下限保存温度低于下限22时时,红细胞可能溶解破裂红细胞可能溶解破裂,输给患者可输给患者可能造成输血不良反应。能造成输血不良反应。储存温度储存温度6 6 可最大限度地抑制血液中的细菌生长。可最大限度
23、地抑制血液中的细菌生长。在不正确的条件下储存在不正确的条件下储存30 min 30 min 以上的血液有发生细菌污染和以上的血液有发生细菌污染和(或或)细胞功能丧失的可能细胞功能丧失的可能现在学习的是第31页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 一、全血在一、全血在(42)(42)时的保存时的保存 保存容器保存容器聚乙烯烃袋聚乙烯烃袋聚氯乙烯（聚氯乙烯（PVC)PVC)袋袋全血、红细胞等的保存全血、红细胞等的保存血小板的保存血小板的保存现在学习的是第32页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 血液保存液血液保存液 ACDACD保养液保养液（枸櫞酸盐（枸櫞酸盐-葡萄糖葡萄糖-枸橼
24、酸）枸橼酸）pH5.03pH5.03 21 21天天 CPDCPD保养液保养液（枸櫞酸盐（枸櫞酸盐-葡萄糖葡萄糖-枸橼酸枸橼酸-磷酸盐）磷酸盐）pH5.63pH5.63 21 21天天CPDACPDA保养液保养液(枸櫞酸盐枸櫞酸盐-葡萄糖葡萄糖-枸橼酸枸橼酸-磷酸盐磷酸盐-腺嘌呤腺嘌呤)pH5.63 35pH5.63 35天天加入磷酸盐加入磷酸盐加入腺嘌呤加入腺嘌呤现在学习的是第33页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 二、血液保存液二、血液保存液 现在学习的是第34页，共98页第一节第一节 全血的保存全血的保存 三、血液在贮存中的变化三、血液在贮存中的变化(二二)贮存期（贮存期（s
25、helf life）全血，聚氯乙烯塑料袋，全血，聚氯乙烯塑料袋，44条件下贮存：条件下贮存：ACDACD或或CPDCPD保存液：贮存期为保存液：贮存期为2121天天CPDA-1CPDA-1保存液：贮存期为保存液：贮存期为3535天天现在学习的是第35页，共98页 第二节第二节 红细胞的保存红细胞的保存 一、浓缩红细胞保存一、浓缩红细胞保存44保存保存保存液是全血保存液保存液是全血保存液从采血日起，与相应的保存液的储存期一致从采血日起，与相应的保存液的储存期一致现在学习的是第36页，共98页 第二节第二节 红细胞的保存红细胞的保存 二、添加剂红细胞保存二、添加剂红细胞保存浓缩红细胞浓缩红细胞剩余
26、营养物质少剩余营养物质少黏稠黏稠贮存中易发生溶血贮存中易发生溶血现在学习的是第37页，共98页 第二节第二节 红细胞的保存红细胞的保存 二、添加剂红细胞保存二、添加剂红细胞保存1 1、浓缩红细胞加羟乙基淀粉（分子量、浓缩红细胞加羟乙基淀粉（分子量3 3万）溶液在万）溶液在(42)(42)贮存贮存可保存可保存1414天。天。2 2、浓缩红细胞加磷酸腺嘌呤及庆大霉素的新维代浆血，在、浓缩红细胞加磷酸腺嘌呤及庆大霉素的新维代浆血，在(42)(42)可保存可保存3535天。天。(一一)含胶体的红细胞悬液（胶体代浆血）含胶体的红细胞悬液（胶体代浆血）现在学习的是第38页，共98页 第二节第二节 红细胞的
27、保存红细胞的保存 二、添加剂红细胞保存二、添加剂红细胞保存(二二)晶体盐红细胞悬液（晶体盐代浆血）晶体盐红细胞悬液（晶体盐代浆血）添加剂添加剂成分成分保存期保存期备注备注生理盐水生理盐水24d24dSAGSAGNaClNaCl、腺嘌呤、葡萄糖、腺嘌呤、葡萄糖35d35dSAGMSAGMNaClNaCl、腺嘌呤、葡萄糖、甘露醇、腺嘌呤、葡萄糖、甘露醇35d35d甘露醇抗溶血剂甘露醇抗溶血剂SAGSSAGSNaClNaCl、腺嘌呤、葡萄糖、蔗糖、腺嘌呤、葡萄糖、蔗糖35d35d更低溶血率更低溶血率MAPMAPNaClNaCl、腺嘌呤、葡萄糖、甘露醇、磷酸盐、腺嘌呤、葡萄糖、甘露醇、磷酸盐35d35
28、d补充抗凝补充抗凝低渗低渗NH4ClNH4ClNH4ClNH4Cl、腺嘌呤、葡萄糖、甘露醇、枸橼酸盐、腺嘌呤、葡萄糖、甘露醇、枸橼酸盐120d120d输注前需洗涤，临输注前需洗涤，临床未使用床未使用SAGMSAGM麦芽糖麦芽糖NaClNaCl、腺嘌呤、葡萄糖、甘露醇、麦芽糖、腺嘌呤、葡萄糖、甘露醇、麦芽糖12w12w五联袋，每五联袋，每4 4周更周更换保存液换保存液现在学习的是第39页，共98页目前还不能断定高水平的目前还不能断定高水平的ATPATP是否为氯化是否为氯化氨的作用氨的作用,有关理论也有待于进一步研有关理论也有待于进一步研究。但作者深信新溶液的保存作用究。但作者深信新溶液的保存作用
29、,且且有可能是氨的存在是基于这种溶液的非有可能是氨的存在是基于这种溶液的非渗透性低渗的原因并得以维持渗透性低渗的原因并得以维持ATPATP 的的含量和延长红细胞的贮存期含量和延长红细胞的贮存期。现在学习的是第40页，共98页 第二节第二节 红细胞的保存红细胞的保存 二、添加剂红细胞保存二、添加剂红细胞保存(三三)红细胞复苏液红细胞复苏液复苏液（丙酮酸盐、肌苷、葡萄糖、磷酸盐、腺嘌呤及复苏液（丙酮酸盐、肌苷、葡萄糖、磷酸盐、腺嘌呤及NaCl NaCl）加入浓缩红细胞加入浓缩红细胞3737保温保温1 1小时小时红细胞复苏：红细胞复苏：ATPATP和和2,3-DPG2,3-DPG恢复到正常水平恢复到
30、正常水平输注前要去除复苏液输注前要去除复苏液现在学习的是第41页，共98页第三节第三节 保存血的肉眼观察和临床应用保存血的肉眼观察和临床应用鉴定血液应在充分的自然光线或日光灯下进行（必要时可用放鉴定血液应在充分的自然光线或日光灯下进行（必要时可用放大镜检查）大镜检查）现在学习的是第42页，共98页第三节第三节 保存血的肉眼观察和临床应用保存血的肉眼观察和临床应用一、正常血的肉眼观察一、正常血的肉眼观察血液流入袋内多呈暗红色，有时呈鲜红色血液流入袋内多呈暗红色，有时呈鲜红色血浆呈草黄色或淡黄色者为多见血浆呈草黄色或淡黄色者为多见分层分层红细胞层呈暗红色红细胞层呈暗红色白膜层白膜层分层界面清晰分层
31、界面清晰现在学习的是第43页，共98页第三节第三节 保存血的肉眼观察和临床应用保存血的肉眼观察和临床应用一、正常血的肉眼观察一、正常血的肉眼观察血浆层内不应有肉眼可见的血块、絮状物或漂浮物。血浆层内不应有肉眼可见的血块、絮状物或漂浮物。有时出现不同程度的均匀乳黄色或乳白色脂肪颗粒样漂浮物，有时出现不同程度的均匀乳黄色或乳白色脂肪颗粒样漂浮物，在在3737加温时易溶解呈透明状加温时易溶解呈透明状若细菌污染则加热后不透明。若细菌污染则加热后不透明。现在学习的是第44页，共98页第三节第三节 保存血的肉眼观察和临床应用保存血的肉眼观察和临床应用一、正常血的肉眼观察一、正常血的肉眼观察白膜层白膜层(b
32、uffy coat)(buffy coat)，荷叶状、放射波浪状、雪花状、龟裂状等荷叶状、放射波浪状、雪花状、龟裂状等现在学习的是第45页，共98页第三节第三节 保存血的肉眼观察和临床应用保存血的肉眼观察和临床应用一、正常血的肉眼观察一、正常血的肉眼观察红细胞层暗红色不含肉眼可见的血凝块或其他异常物质。红细胞层暗红色不含肉眼可见的血凝块或其他异常物质。如果有气泡：如果有气泡：1 1周后逐渐消失周后逐渐消失 正常正常在保存中如气泡日渐增多，则有污染产气杆菌的可能。在保存中如气泡日渐增多，则有污染产气杆菌的可能。现在学习的是第46页，共98页第三节第三节 保存血的肉眼观察和临床应用保存血的肉眼观察
33、和临床应用一、正常血的肉眼观察一、正常血的肉眼观察血液发出前，要仔细检查，观察是否有红细胞微小凝块，即冷凝集血液发出前，要仔细检查，观察是否有红细胞微小凝块，即冷凝集现象。现象。冷凝集的血输用前加温，一般冷凝集的血输用前加温，一般37 51037 510分钟分钟经保温的血液若有溶血发生则应放弃。经保温的血液若有溶血发生则应放弃。现在学习的是第47页，共98页第三节第三节 保存血的肉眼观察和临床应用保存血的肉眼观察和临床应用二、异常血的肉眼观察二、异常血的肉眼观察一般库存血红细胞为暗红色，如果颜色变成暗紫色（高锰一般库存血红细胞为暗红色，如果颜色变成暗紫色（高锰酸钾溶液颜色），则常常是细菌污染造
34、成红细胞溶血的结酸钾溶液颜色），则常常是细菌污染造成红细胞溶血的结果。果。这种血不能输用，必须进行细菌培养。这种血不能输用，必须进行细菌培养。(一一)血液颜色变化血液颜色变化现在学习的是第48页，共98页第三节第三节 保存血的肉眼观察和临床应用保存血的肉眼观察和临床应用二、异常血的肉眼观察二、异常血的肉眼观察溶血：溶血：发生溶血的初期，血浆层底部首先变为红色或白细胞层出现玫瑰色发生溶血的初期，血浆层底部首先变为红色或白细胞层出现玫瑰色的小环，这些现象是溶血初期的特征。的小环，这些现象是溶血初期的特征。溶血加重后，红色血浆部分则越来越多，并向上部扩展，最溶血加重后，红色血浆部分则越来越多，并向上
35、部扩展，最后全部血浆变为红色。后全部血浆变为红色。(二二)血浆层与红细胞层分界不清血浆层与红细胞层分界不清现在学习的是第49页，共98页第三节第三节 保存血的肉眼观察和临床应用保存血的肉眼观察和临床应用二、异常血的肉眼观察二、异常血的肉眼观察抗凝不佳：抗凝不佳：形成肉眼见到的小凝块，严重时可形成整个大块形成肉眼见到的小凝块，严重时可形成整个大块血凝块往往沉降在血细胞层内，可使整齐的表面变成凹凸不平。血凝块往往沉降在血细胞层内，可使整齐的表面变成凹凸不平。(三三)大量血块存在大量血块存在现在学习的是第50页，共98页第三节第三节 保存血的肉眼观察和临床应用保存血的肉眼观察和临床应用二、异常血的肉
36、眼观察二、异常血的肉眼观察库存血亦可能发生大小不等的纤维蛋白絮状凝块，漂浮于血库存血亦可能发生大小不等的纤维蛋白絮状凝块，漂浮于血浆层表面或悬浮在血浆层中。浆层表面或悬浮在血浆层中。多量、大块的血凝块或纤维蛋白块的存在，均表明血液质多量、大块的血凝块或纤维蛋白块的存在，均表明血液质量不佳，不仅输血困难，也可能发生输血反应。量不佳，不仅输血困难，也可能发生输血反应。原来血液没有凝块，保存后产生了血凝块，则应怀疑可能原来血液没有凝块，保存后产生了血凝块，则应怀疑可能是细菌污染所致。是细菌污染所致。(三三)大量血块存在大量血块存在现在学习的是第51页，共98页现在学习的是第52页，共98页第三节第三
37、节 保存血的肉眼观察和临床应用保存血的肉眼观察和临床应用二、异常血的肉眼观察二、异常血的肉眼观察乳糜：血浆内含过多脂肪。乳糜：血浆内含过多脂肪。库存血如发生血浆明胶化现象，可能细菌污染，不能发出库存血如发生血浆明胶化现象，可能细菌污染，不能发出使用。使用。(四四)血浆层呈乳糜或明胶化血浆层呈乳糜或明胶化现在学习的是第53页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 血液的冷冻保存研究开始于血液的冷冻保存研究开始于2020世纪世纪4040年代年代19491949年年PolgePolge和和SmithSmith等人发现甘油对牛精子的冷冻保存有保护等人发现甘油对牛精子的冷冻保存有保护作用，
38、从中得到启示作用，从中得到启示第二年，第二年，SmithSmith应用甘油作保护剂冷冻红细胞获得成功应用甘油作保护剂冷冻红细胞获得成功其后，血液冷冻保存的研究迅速发展，但是由于没能解决其后，血液冷冻保存的研究迅速发展，但是由于没能解决去除防冻保护剂的问题，临床尚未能得到广泛应用。去除防冻保护剂的问题，临床尚未能得到广泛应用。现在学习的是第54页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 19561956年，年，TullisTullis应用应用CohnCohn分离器将防冻剂甘油去除，从而使冷分离器将防冻剂甘油去除，从而使冷冻红细胞成功地应用于临床。冻红细胞成功地应用于临床。196319
39、63年，年，HugginsHuggins发现红细胞在糖溶液中有可逆性的聚集反应，发现红细胞在糖溶液中有可逆性的聚集反应，利用此反应原理，可用糖液洗涤法去除防冻保护剂利用此反应原理，可用糖液洗涤法去除防冻保护剂甘油。甘油。MerymanMeryman等人利用不同浓度梯度的氯化钠洗涤红细胞去等人利用不同浓度梯度的氯化钠洗涤红细胞去除防冻剂除防冻剂现在学习的是第55页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 一、血细胞的低温损伤机制一、血细胞的低温损伤机制低温损伤机制低温损伤机制现在学习的是第56页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 一、血细胞的低温损伤机制一、血细胞的
40、低温损伤机制相变温度区间：相变温度区间：细胞在冷冻或复溶过程中，发生液相和固相转变的温度区间细胞在冷冻或复溶过程中，发生液相和固相转变的温度区间在相变过程中，通常伴随吸热或者放热反应，以及体在相变过程中，通常伴随吸热或者放热反应，以及体积的改变积的改变现在学习的是第57页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 一、血细胞的低温损伤机制一、血细胞的低温损伤机制降温过程的低温损伤：降温过程的低温损伤：来自于降温、复温过程中必须经过的一个温度区间，即来自于降温、复温过程中必须经过的一个温度区间，即15 15 至至60 60 之间。之间。该温度区间对细胞具有杀伤性。该温度区间对细胞具有杀
41、伤性。现在学习的是第58页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 一、血细胞的低温损伤机制一、血细胞的低温损伤机制(一一)盐变性学说盐变性学说 慢速冷冻细胞损伤的主要原因：慢速冷冻细胞损伤的主要原因：LovelockLovelock等人提出，细胞外水结冰时，细胞收缩、脱水等人提出，细胞外水结冰时，细胞收缩、脱水使细胞内外产生的高浓度电解质，作用于细胞膜，引起脂蛋白使细胞内外产生的高浓度电解质，作用于细胞膜，引起脂蛋白复合物的变性和部分类脂质的丢失，增加了细胞对阳离子的通复合物的变性和部分类脂质的丢失，增加了细胞对阳离子的通透性，并使细胞膜上形成一些小孔，冰融化时水进入细胞内引透性
42、，并使细胞膜上形成一些小孔，冰融化时水进入细胞内引起渗透休克起渗透休克现在学习的是第59页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 一、血细胞的低温损伤机制一、血细胞的低温损伤机制(二二)冰晶的机械作用冰晶的机械作用快速冷冻时细胞损伤的主要原因：快速冷冻时细胞损伤的主要原因：在快速冷冻时，细胞内形成许多冰晶，在快速冷冻时，细胞内形成许多冰晶，冰晶作用于细胞膜，并使细胞膜上产生小孔，使得细胞膜不冰晶作用于细胞膜，并使细胞膜上产生小孔，使得细胞膜不可逆地丧失其半透性可逆地丧失其半透性现在学习的是第60页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 一、血细胞的低温损伤机制一、血
43、细胞的低温损伤机制(二二)冰晶的机械作用冰晶的机械作用降温过快或过慢，都会杀死细胞降温过快或过慢，都会杀死细胞在慢的降温速率下，细胞的低温损伤源于在慢的降温速率下，细胞的低温损伤源于“盐变性盐变性”在高降温速率下，细胞的低温损伤源于在高降温速率下，细胞的低温损伤源于“胞内冰胞内冰”细胞冰冻保存的最佳降温速率，应该是慢到足以防止细胞冰冻保存的最佳降温速率，应该是慢到足以防止“胞胞内冰内冰”，同时又快到使，同时又快到使“盐变性盐变性”最小最小不同的细胞，由于细胞膜的生物特性不同，对最佳降温速率的要求不同的细胞，由于细胞膜的生物特性不同，对最佳降温速率的要求也不同。也不同。现在学习的是第61页，共9
44、8页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 一、血细胞的低温损伤机制一、血细胞的低温损伤机制(三三)化学损伤化学损伤LevittLevitt提出：冷冻时，在细胞脱水和溶质浓缩过程中，蛋提出：冷冻时，在细胞脱水和溶质浓缩过程中，蛋白质组分异常靠近，最终使蛋白质分子中巯基白质组分异常靠近，最终使蛋白质分子中巯基(SH)(SH)和二硫和二硫键键(SS)(SS)发生相互不可逆的反应，形成新的化学键，导致蛋白质发生相互不可逆的反应，形成新的化学键，导致蛋白质变性而引起细胞死亡。变性而引起细胞死亡。现在学习的是第62页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 一、血细胞的低温损伤机制一、血
45、细胞的低温损伤机制(四四)细胞的融化反应细胞的融化反应细胞复融过程中的损伤：融化反应细胞复融过程中的损伤：融化反应尚不明确尚不明确现在学习的是第63页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 一、血细胞的低温损伤机制一、血细胞的低温损伤机制(四四)细胞的融化反应细胞的融化反应经验总结：经验总结：慢速冷冻的标本应慢速融化慢速冷冻的标本应慢速融化快速冷冻的标本则应采用快速融化的方法快速冷冻的标本则应采用快速融化的方法现在学习的是第64页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 二、冷冻保护剂二、冷冻保护剂冷冻保护剂可根据它们能否穿透细胞膜分为两种冷冻保护剂可根据它们能否穿透
46、细胞膜分为两种 细胞内保护剂细胞内保护剂细胞外保护剂细胞外保护剂加入保护剂后，可降低加入保护剂后，可降低溶液的冰点，并增加未溶液的冰点，并增加未冻水量冻水量小分子小分子大分子大分子能自由地通过细胞膜能自由地通过细胞膜不能穿透细胞不能穿透细胞现在学习的是第65页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 二、冷冻保护剂二、冷冻保护剂胞内外盐数量一定胞内外盐数量一定未冻水量增加未冻水量增加盐的浓度降低盐的浓度降低使细胞处于盐浓度较低的环境中使细胞处于盐浓度较低的环境中现在学习的是第66页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 二、冷冻保护剂二、冷冻保护剂(二二)冷冻保护剂的
47、种类冷冻保护剂的种类细胞内保护剂：甘油、细胞内保护剂：甘油、DMSODMSO、葡萄糖、乙二醇、丙三醇、葡萄糖、乙二醇、丙三醇、甲醇、乙醇、乙酸胺、甲酞胺等。甲醇、乙醇、乙酸胺、甲酞胺等。细胞外保护剂：乳糖、麦芽糖、木糖、聚乙烯吡咯烷酮细胞外保护剂：乳糖、麦芽糖、木糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)(PVP)、右旋糖酐、白蛋白、羟乙基淀粉（右旋糖酐、白蛋白、羟乙基淀粉（HESHES）、聚乙二醇）、聚乙二醇（PEGPEG）、甘露醇等。）、甘露醇等。现在学习的是第67页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 三、低温血液保存与玻璃化三、低温血液保存与玻璃化玻璃化就是生物材料在由液态向固态转化
48、过程中没有相变热产生，玻璃化就是生物材料在由液态向固态转化过程中没有相变热产生，也就是没有晶体生成。也就是没有晶体生成。有人认为冷却速率达到有人认为冷却速率达到10/10/秒，颗粒小于秒，颗粒小于5l0nm5l0nm就不会使生就不会使生物材料受到冷冻损伤，这就叫玻璃化。物材料受到冷冻损伤，这就叫玻璃化。现在学习的是第68页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 三、低温血液保存与玻璃化三、低温血液保存与玻璃化添加冷冻保护剂或快速冷冻生物材料的目的就是使生物材料添加冷冻保护剂或快速冷冻生物材料的目的就是使生物材料中的水处于容易达到玻璃化的状态。中的水处于容易达到玻璃化的状态。现在学
49、习的是第69页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 四、红细胞甘油化、冷冻、融化和去甘油的方法四、红细胞甘油化、冷冻、融化和去甘油的方法高浓度甘油慢速冷冻高浓度甘油慢速冷冻低浓度甘油快速冷冻低浓度甘油快速冷冻解冻：慢速融化解冻：慢速融化去除甘油试剂可用糖液聚集法或去除甘油试剂可用糖液聚集法或不同浓度梯度氯化钠洗涤法不同浓度梯度氯化钠洗涤法解冻：快速融化解冻：快速融化去除甘油试剂可用不同浓度梯度氯化去除甘油试剂可用不同浓度梯度氯化钠溶液，由高渗逐渐过渡到等渗分次钠溶液，由高渗逐渐过渡到等渗分次洗涤洗涤现在学习的是第70页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 五、冷
50、冻红细胞的制备方法五、冷冻红细胞的制备方法在我国普遍使用在我国普遍使用高浓度甘油慢速冷冻高浓度甘油慢速冷冻 现在学习的是第71页，共98页第四节第四节 血液的冷冻保存血液的冷冻保存 五、冷冻红细胞的制备方法五、冷冻红细胞的制备方法高浓度甘油慢速冷冻高浓度甘油慢速冷冻 盐液离心洗涤法盐液离心洗涤法 糖液聚集洗涤法糖液聚集洗涤法 按解冻后洗脱甘油的方法：按解冻后洗脱甘油的方法：方法：先采用高张溶液使融化的高渗红细胞渗透压达方法：先采用高张溶液使融化的高渗红细胞渗透压达到平衡，接着用逐渐减低的高张溶液进行分次洗涤，到平衡，接着用逐渐减低的高张溶液进行分次洗涤，最后用含有葡萄糖的等渗最后用含有葡萄糖的