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1、关于高中生物第三章第一节菊花的组织培养3新人教版选修1第一页，讲稿共三十五页哦第二页，讲稿共三十五页哦第三页，讲稿共三十五页哦 菊花是菊科菊属的多年生宿根草本植物菊花是菊科菊属的多年生宿根草本植物,是我国的传统名花和世界是我国的传统名花和世界四大切花之一四大切花之一 长期以来菊花采用长期以来菊花采用分株、扦插等无性繁殖分株、扦插等无性繁殖方法进行繁殖方法进行繁殖 但是传统的繁殖方法易受环境影响但是传统的繁殖方法易受环境影响,繁殖周期长繁殖周期长,随着市场需随着市场需 求的急剧增加求的急剧增加,已经不能满足市场日益发展的需要。已经不能满足市场日益发展的需要。植物组织培养具有增殖效率高、繁殖速度快
2、的特点植物组织培养具有增殖效率高、繁殖速度快的特点,可以用较短的可以用较短的时间和较少的空间生产出大量的试管苗时间和较少的空间生产出大量的试管苗第四页，讲稿共三十五页哦扦插扦插嫁接嫁接压条压条 第五页，讲稿共三十五页哦n植物组织培养的基本过程植物组织培养的基本过程n影响植物组织培养的因素影响植物组织培养的因素n菊花的组织培养菊花的组织培养第六页，讲稿共三十五页哦植物组织培养关键词：关键词：外植体、脱分化、再分化、愈伤组织外植体、脱分化、再分化、愈伤组织 在在无菌无菌和和人工控制人工控制条件下，将离体条件下，将离体的植物的植物器官、组织、细胞器官、组织、细胞，培养在人工，培养在人工配置的培养基上
3、，给予适宜的培养条配置的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成终形成完整的植株完整的植株。第七页，讲稿共三十五页哦切取切取形成层形成层无菌接无菌接种种诱导愈伤组织诱导愈伤组织的形成的形成试管苗的形成试管苗的形成培养室培养室移栽移栽脱分化脱分化再分化再分化举例举例第八页，讲稿共三十五页哦1 1、培育无病毒植株、培育无病毒植株2 2、大规模培养愈伤组织（提取紫草素，治疗烫伤和大规模培养愈伤组织（提取紫草素，治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）割伤的药物以及染料和化妆品的原料）4 4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法、基因工程中亦
4、需用到植物组织培养的方法（受体细胞为植物细胞）（受体细胞为植物细胞）植物组织培养的应用：植物组织培养的应用：3 3、人工种子（解决有些作物品种繁殖能力差，结、人工种子（解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题）子困难或发芽率低等问题）第九页，讲稿共三十五页哦植物组织培养过程植物组织培养过程:离离离离体体体体组组组组织织织织或或或或细细细细胞胞胞胞植植植植物物物物体体体体脱分化脱分化细胞分裂细胞分裂细胞分裂细胞分裂素素素素生长生长生长生长素素素素愈愈愈愈伤伤伤伤组组组组织织织织芽芽芽芽根根根根细胞分裂素细胞分裂素细胞分裂素细胞分裂素 生长素生长素生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素细胞分
5、裂素细胞分裂素 生长素生长素生长素生长素细细细细胞胞胞胞分分分分裂裂裂裂素素素素 生长素生长素生长素生长素细细细细胞胞胞胞分分分分裂裂裂裂素素素素有利于根的分化有利于根的分化有利于根的分化有利于根的分化有利于芽的分化，抑制根的分化有利于芽的分化，抑制根的分化有利于芽的分化，抑制根的分化有利于芽的分化，抑制根的分化促进愈伤组织生长促进愈伤组织生长促进愈伤组织生长促进愈伤组织生长第十九页，讲稿共三十五页哦（4）pH、温度、光照、温度、光照pH控制在控制在5.8左右左右温度控制在温度控制在1822每日用日光灯照射每日用日光灯照射12h第二十页，讲稿共三十五页哦菊花的组织培养菊花的组织培养（一）制备一
6、）制备MSMS固体培养基固体培养基（二）外植体消毒（二）外植体消毒（三）接种（三）接种（四）培养（四）培养（五）移栽（五）移栽（六）栽培（六）栽培第二十一页，讲稿共三十五页哦（一）制备（一）制备MSMS固体培养基固体培养基MSMSMSMS培养基包括培养基包括培养基包括培养基包括20202020多种营养成分，实验室一般使用多种营养成分，实验室一般使用多种营养成分，实验室一般使用多种营养成分，实验室一般使用4 4 4 4保保保保存配制好的培养基存配制好的培养基存配制好的培养基存配制好的培养基母液母液母液母液来制备来制备来制备来制备1 1、配制各种母液、配制各种母液无机物中大量元素浓缩无机物中大量元
7、素浓缩无机物中大量元素浓缩无机物中大量元素浓缩10101010倍，微量元素浓缩倍，微量元素浓缩倍，微量元素浓缩倍，微量元素浓缩100100100100倍，常倍，常倍，常倍，常温保存温保存温保存温保存激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml1mg/ml1mg/ml1mg/ml的质量浓度单独配制成母液的质量浓度单独配制成母液的质量浓度单独配制成母液的质量浓度单独配制成母液用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，用母液配制培养基时，需要根据各种母
8、液的浓缩倍数，用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量计算用量计算用量计算用量第二十二页，讲稿共三十五页哦2 2、配制培养基、配制培养基分装到锥形瓶中，每瓶分装分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml50ml或或100ml100ml 配制培养液配制培养液 调调PHPH培养基的分装培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素不必添加植物激素3 3、灭菌、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌蒸汽灭菌第二十三页，讲稿共三十五页哦1
9、1 1 1、选材：、选材：、选材：、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝（二）外植体消毒（二）外植体消毒2 2 2 2、消毒、消毒、消毒、消毒流水冲洗流水冲洗流水冲洗流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗洗，刷洗后在流水下冲洗洗，刷洗后在流水下冲洗洗，刷洗后在流水下冲洗20min20min20min20min左右左右左右左右 酒精处理酒精处理酒精处
10、理酒精处理用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70707070的酒精中摇动的酒精中摇动的酒精中摇动的酒精中摇动2 2 2 23 3 3 3次，持续次，持续次，持续次，持续6 6 6 67s7s7s7s，立即将外植体取，立即将外植体取，立即将外植体取，立即将外植体取出，在无菌水中清洗出，在无菌水中清洗出，在无菌水中清洗出，在无菌水中清洗 消毒液处理消毒液处理消毒液处理消毒液处理取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质取出后用无菌吸水纸吸
11、干外植体表面的水分，放入质取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为量分数为量分数为量分数为0.10.10.10.1的氯化汞溶液中的氯化汞溶液中的氯化汞溶液中的氯化汞溶液中1 1 1 12min2min2min2min，取出后在，取出后在，取出后在，取出后在无菌水中至少清洗无菌水中至少清洗无菌水中至少清洗无菌水中至少清洗3 3 3 3次，漂净次，漂净次，漂净次，漂净消毒液消毒液消毒液消毒液第二十四页，讲稿共三十五页哦（三）接种（三）接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是污染的
12、主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用至关重要的。用至关重要的。用至关重要的。用70707070的酒精喷雾使空气消毒，的酒精喷雾使空气消毒，的酒精喷雾使空气消毒，的酒精喷雾使空气消毒，酒精或新洁酒精或新洁酒精或新洁酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射尔灭搽洗工作台并用紫外线照射尔灭搽洗工作台并用紫外线照射尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20202020分钟分钟分钟分钟1 1、接种室消毒、接种室消毒2 2、无菌操作要求、无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用操
13、作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。3 3、材料的切取和接种、材料的切取和接种第二十五页，讲稿共三十五页哦4 4、接种注意事项、接种注意事项每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为75757575的的的的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯
14、火焰上烧一遍，酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种冷却后再接种冷却后再接种冷却后再接种外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜瓶的大小确定，一般胡萝卜瓶的大小确定，一般胡萝卜瓶的大小确定，一般胡萝卜3 3 3 34 4 4 4块，菊的茎或叶块，菊的茎或叶块，菊的茎或叶块，菊的茎或叶6 6 6 68 8 8 8块，块，块，块，也不要太少，以充分利用
15、培养基中的营养成分和光照也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件条件条件条件插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分培养基利于吸收水分和养分培养基利于吸收水分和养分培养基利于吸收水分和养分第二十七页，讲稿共三十五页哦正常苗正常苗污染苗污染苗第二十八页，讲稿共三十五页哦1、外植体带菌、外植体带菌2、培养基及接种器、培养基及接种器具
16、灭菌不彻底具灭菌不彻底3、接种操作时带入、接种操作时带入4、环境不清洁、环境不清洁污染途径污染途径第二十九页，讲稿共三十五页哦思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？验吗？答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。第三十页，讲稿共三十五页哦（四）培养（四）培养n n
17、接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒期间应定期消毒n n培养温度控制在培养温度控制在18-22n n每日用日光灯光照每日用日光灯光照12h第三十一页，讲稿共三十五页哦（五）移栽（五）移栽 移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日的封口膜，让试管苗在培养间生长几日1 1、打开封口膜、打开封口膜2 2、清洗转移、清洗转移 用流水清洗根部的培养基，用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间生活一段
18、时间3 3、移栽、移栽幼苗长壮后，移栽到土壤中幼苗长壮后，移栽到土壤中第三十二页，讲稿共三十五页哦固体基质型，含水量高、固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培蓄水性强、透性好，适合栽培珍珠岩珍珠岩,珍珠岩是一种火山喷发的酸性熔岩，经急剧冷珍珠岩是一种火山喷发的酸性熔岩，经急剧冷却而成的玻璃质岩石，有弧形或圆形裂隙，如珍珠的结却而成的玻璃质岩石，有弧形或圆形裂隙，如珍珠的结构，所以被命名为珍珠岩构，所以被命名为珍珠岩。蛭石蛭石是一种天然、无毒的矿物质，在高温作用下会膨胀是一种天然、无毒的矿物质，在高温作用下会膨胀的矿物。它是一种比较少见的矿物，属于硅酸盐。的矿物。它是一种比较少见的矿物，属于硅酸盐。第三十三页，讲稿共三十五页哦（六）栽培（六）栽培 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，况，适时浇水、施肥，直至开花适时浇水、施肥，直至开花第三十四页，讲稿共三十五页哦感谢大家观看第三十五页，讲稿共三十五页哦