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1、关于动物细胞工程(3)第1页，讲稿共54张，创作于星期日1 1、植物细胞工程常用的技术手段是什么？、植物细胞工程常用的技术手段是什么？技术手段技术手段植物组织培养植物组织培养植物体细胞杂交植物体细胞杂交2 2、动物细胞工程常用的技术手段是什么？、动物细胞工程常用的技术手段是什么？技术技术手段手段动物细胞培养动物细胞培养动物细胞融合动物细胞融合生产单克隆抗体生产单克隆抗体动物核移植动物核移植基础基础第2页，讲稿共54张，创作于星期日自学指导自学指导1 1 请大家用请大家用4 4分钟时间阅读课本第分钟时间阅读课本第44-4744-47页第页第一段的内容，思考并在课本上找到以下问一段的内容，思考并在
2、课本上找到以下问题的答案：题的答案：1 1、动物细胞培养动物细胞培养的概念的概念2 2、动物细胞培养的过程及特点、动物细胞培养的过程及特点P44-45P44-45及图及图2-2-1616，原代培养原代培养和和传代培养传代培养的区别的区别3 3、动物细胞培养的条件：、动物细胞培养的条件：（1 1）合成培养基中）合成培养基中添加血清添加血清的原因的原因（2 2）O O2 2和和COCO2 2的作用的作用第4页，讲稿共54张，创作于星期日一、动物细胞培养一、动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物有机体动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的中取出相关的 ，将它分散，将它分散成成 ，然后，放在适宜，然后
3、，放在适宜的的 中，让这些细胞中，让这些细胞 。组织组织单个细胞单个细胞生长和增殖生长和增殖培养基培养基1.概念：概念：2.原理：原理：细胞增殖细胞增殖3.过程：过程：第5页，讲稿共54张，创作于星期日3、动物细胞培养过程：、动物细胞培养过程：原代培养原代培养传代培养传代培养第6页，讲稿共54张，创作于星期日动物胚胎或幼龄动物的组织动物胚胎或幼龄动物的组织胰蛋白酶或胶原蛋白酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶（分解细胞间蛋白质）（分解细胞间蛋白质）（分裂能力强，分化程度低，容易培（分裂能力强，分化程度低，容易培养）养）分散成单个细胞分散成单个细胞加培养液加培养液（使细胞与培养液充分接触）（使细胞与培养液充分
4、接触）细胞悬液细胞悬液原代培养原代培养细胞贴壁、接触抑制细胞贴壁、接触抑制传代培养传代培养1010代细胞代细胞5050代细胞代细胞无限传代无限传代细胞株细胞株细胞系细胞系遗传物质遗传物质未未改变改变遗传物质遗传物质已已改变改变胰蛋白酶胰蛋白酶第7页，讲稿共54张，创作于星期日P44思考、讨论思考、讨论进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什
5、么？动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？蛋白质。胃蛋白酶的适宜蛋白质。胃蛋白酶的适宜pHpH约是约是2 2，而细胞培养，而细胞培养的适宜的适宜pHpH是是7.27.27.47.4。会消化。长时间作用会消化细胞膜蛋白，损伤细胞会消化。长时间作用会消化细胞膜蛋白，损伤细胞不要。因高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去不要。因高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去发育成完整个体的能力。发育成完整个体的能力。细胞株和细胞系的区别细胞株和细胞系的区别细胞株遗传物质未改变；细胞系遗传物质改变，无细胞株遗传物质未改变；细胞系遗传物质改变，无限增殖限增殖第9页，讲稿共54张，创作于星期日（1 1）无菌、无毒
6、的环境）无菌、无毒的环境a.培养液及用具无菌处理培养液及用具无菌处理b.添加一定量的抗生素添加一定量的抗生素c.定期更换培养液定期更换培养液4 4、动物细胞培养的条件：、动物细胞培养的条件：（2 2）全部的营养物质）全部的营养物质葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、动物血清动物血清、血浆、血浆合成培养基（液体培养基）合成培养基（液体培养基）（3 3）适宜的温度和）适宜的温度和pHpH值值温度：温度：36.536.50.50.5,pH7.2-7.4,pH7.2-7.4 （4 4）必要的气体条件）必要的气体条件O O2 2和和COCO2 2（95%95%空气和空
7、气和5%5%COCO2 2 ）维持培养液的维持培养液的pH第10页，讲稿共54张，创作于星期日5、动物细胞培养技术的应用、动物细胞培养技术的应用（1 1）蛋白质生物制品的生产）蛋白质生物制品的生产 如病毒疫苗、干扰素、如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体单克隆抗体（2 2）基因工程技术中常用的）基因工程技术中常用的受体细胞受体细胞（3 3）用于检测有毒物质）用于检测有毒物质（4 4）细胞的生理、药理、病理研究）细胞的生理、药理、病理研究 （5 5）健康细胞培养）健康细胞培养 培养健康细胞用于烧伤病人培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植皮肤移植第12页，讲稿共54张，创作于星期日获得细胞获得细胞细胞的全能
8、性细胞的全能性细胞株、细胞系细胞株、细胞系植物体植物体培养结果培养结果或细胞分泌蛋白或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株等无病毒植株等培养目的培养目的葡萄糖、动物血清葡萄糖、动物血清促生长因子促生长因子蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较植物细胞和动物细胞培养的比较第13页，讲稿共54张，创作于星期日例例1.（2013全国卷大纲版）全国卷大纲版）2.关于动物细胞培养和植关于动物细胞培养
9、和植物组织培养的叙述，错误的是物组织培养的叙述，错误的是 A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶蛋白酶 C.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖胞可离体培养增殖 D.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒于植物脱除病毒 B用含有一定浓度有毒物质的细胞培养液和正常细胞培养液用含有一定浓度有毒物质的细胞培养液和正常细胞培养液同时培养
10、正常细胞，通过对照观察变异细胞的百分数来确同时培养正常细胞，通过对照观察变异细胞的百分数来确定其毒性强弱。定其毒性强弱。第14页，讲稿共54张，创作于星期日自学指导自学指导2 2 请大家用请大家用5 5分钟时间阅读课本第分钟时间阅读课本第47-5047-50页的内容，页的内容，思考并在课本上找到以下问题的答案：思考并在课本上找到以下问题的答案：1 1、动物核移植的概念及分类、动物核移植的概念及分类2 2、动物体细胞核移植的过程、动物体细胞核移植的过程P48P48图图2-212-213 3、供体、受体细胞的选择及原因？、供体、受体细胞的选择及原因？4 4、克隆动物的性状与供体动物完全相同吗、克隆
11、动物的性状与供体动物完全相同吗？原因？原因？5 5、体细胞核移植技术的应用及存在的问题。、体细胞核移植技术的应用及存在的问题。第15页，讲稿共54张，创作于星期日例例2 2：在适当培养条件下离体的植物组织或细胞发：在适当培养条件下离体的植物组织或细胞发育成了完整的植株，而离体的动物体细胞却没有育成了完整的植株，而离体的动物体细胞却没有发育成动物的成熟个体，其原因是（发育成动物的成熟个体，其原因是（）A A 动物细胞内没有成套的遗传物质动物细胞内没有成套的遗传物质 B B 动物细胞的全能性随分化程度提高而受到限制，动物细胞的全能性随分化程度提高而受到限制，分化潜能变弱分化潜能变弱 C C 动物细
12、胞的细胞核太小动物细胞的细胞核太小 D D 任何动物细胞的全能性都低于植物细胞任何动物细胞的全能性都低于植物细胞动物体细胞不能发育为完整个动物体细胞不能发育为完整个体的原因体的原因第16页，讲稿共54张，创作于星期日卵细胞卵细胞母绵羊母绵羊母绵羊母绵羊乳腺细胞乳腺细胞细胞质细胞质细胞核细胞核细胞核移植细胞核移植早期胚胎早期胚胎卵裂卵裂C母绵羊子宫母绵羊子宫胚胎移植胚胎移植多莉羊多莉羊分娩分娩妊娠妊娠多多莉莉羊羊的的培培育育过过程程融合后的卵细胞融合后的卵细胞动物细胞培养动物细胞培养生殖方式：生殖方式：孟德尔遗传定律：孟德尔遗传定律：无性繁殖无性繁殖不遵循不遵循第17页，讲稿共54张，创作于星期
13、日二、动物体细胞二、动物体细胞核移植技术核移植技术和和克隆动物克隆动物:3、方式、方式胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植体细胞核移植（体细胞核移植（难度高难度高）将动物的一个细胞的细胞核，移入一将动物的一个细胞的细胞核，移入一个个 中，使其重组并发育成一个新的胚中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为用核移植的方法得到的动物称为 动物细胞核的全能性动物细胞核的全能性去核的卵母细胞去核的卵母细胞1 1、概念：、概念：2、原理：、原理：克隆动物克隆动物第18页，讲稿共54张，创作于星期日1、植物细胞工程的实际应用有
14、哪些？、植物细胞工程的实际应用有哪些？2、微型繁殖优点？、微型繁殖优点？3、作物脱毒选材、为什么？、作物脱毒选材、为什么？4、细胞产物的工厂化生产通常将培养到、细胞产物的工厂化生产通常将培养到什么阶段？什么阶段？5、单倍体育种的优点、基因工程育种的、单倍体育种的优点、基因工程育种的优点？优点？4、进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分、进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？用胃蛋白酶行吗？课前提问课前提问：第19页，讲稿共54张，创作于星期日1 1、原代培养和传代培养的区别、原代培养和传代培养的区别2 2、什
15、么是细胞贴壁？什么是细胞的接触抑、什么是细胞贴壁？什么是细胞的接触抑制？制？3 3、细胞株和细胞系的区别？、细胞株和细胞系的区别？4 4、植物组织培养与动物细胞培养的培养基、植物组织培养与动物细胞培养的培养基在成分上各有什么特有成分？在成分上各有什么特有成分？5 5、动物细胞培养需要什么气体环境？各起、动物细胞培养需要什么气体环境？各起什么作用？什么作用？6 6、动物体细胞核移植用到哪些技术手段？、动物体细胞核移植用到哪些技术手段？第20页，讲稿共54张，创作于星期日动物体细胞核移植技术和克隆动物动物体细胞核移植技术和克隆动物第21页，讲稿共54张，创作于星期日4 4、动物体细胞核移植技术流程
16、图、动物体细胞核移植技术流程图取供体细胞培养取供体细胞培养采集卵母细胞采集卵母细胞（1010代以内）代以内）供体细胞供体细胞去核卵母细胞去核卵母细胞培养到培养到M M中期中期注入注入细胞融合细胞融合重组细胞重组细胞（供体核进入受体卵母细胞）（供体核进入受体卵母细胞）重组胚胎重组胚胎代孕动物的代孕动物的子宫子宫胚胎移植胚胎移植生出生出与供体遗传物质基本相同与供体遗传物质基本相同的个体的个体第22页，讲稿共54张，创作于星期日思考讨论（二）思考讨论（二）P49补充：核移植时受体细胞为什么选用去核的卵母细胞？补充：核移植时受体细胞为什么选用去核的卵母细胞？（1 1）卵母细胞的细胞质可使体细胞核全能性
17、得以表达）卵母细胞的细胞质可使体细胞核全能性得以表达（2 2）卵母细胞体积大，容易操作）卵母细胞体积大，容易操作（3 3）卵母细胞细胞质多，营养丰富）卵母细胞细胞质多，营养丰富1.1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？必须先去掉受体卵母细胞的核？使重组胚胎的核中遗传物质全部来自于供体细胞使重组胚胎的核中遗传物质全部来自于供体细胞第23页，讲稿共54张，创作于星期日思考讨论（二）思考讨论（二）P492.2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代用于核移植的供体细胞一般都选用传代1010代以内的细代以内的细胞，为什么
18、？胞，为什么？3.3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物是对体细胞供体动物100100的复制吗？为什么？的复制吗？为什么？1010代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，遗遗传物质不发生突变传物质不发生突变 不是。不是。（1 1）重组胚胎的线粒体）重组胚胎的线粒体DNADNA来自受体卵母细胞来自受体卵母细胞（2 2）生物的性状会受环境影响而发生改变）生物的性状会受环境影响而发生改变（3 3）有可能发生基因突变等）有可能发生基因突变等第24页，讲稿共54张，创作于星期日5.总结体细胞核
19、移植技术的应用前景总结体细胞核移植技术的应用前景(1)(1)促进优良畜群繁育促进优良畜群繁育(2)(2)保护濒危动物保护濒危动物(3)(3)生物反应器生物反应器(4)(4)异种移植异种移植(5)(5)了解胚胎发育和衰老了解胚胎发育和衰老第25页，讲稿共54张，创作于星期日6.体细胞核移植技术存在的问题体细胞核移植技术存在的问题(1)成功率低成功率低(2)克隆动物的克隆动物的健康问题健康问题(3)克隆动物食品的安全性克隆动物食品的安全性第26页，讲稿共54张，创作于星期日第28页，讲稿共54张，创作于星期日自学指导自学指导3 3 请大家用请大家用4 4分钟时间阅读课本第分钟时间阅读课本第44-4
20、744-47页第一段的页第一段的内容，思考并在课本上找到以下问题的答案：内容，思考并在课本上找到以下问题的答案：1 1、动物细胞融合的概念、动物细胞融合的概念2 2、比较动物细胞融合与植物体细胞杂交、比较动物细胞融合与植物体细胞杂交3 3、单克隆抗体的优点、单克隆抗体的优点4 4、单克隆抗体的制备过程图解。想一想，整、单克隆抗体的制备过程图解。想一想，整个过程有几次筛选？目的？杂交瘤细胞的特个过程有几次筛选？目的？杂交瘤细胞的特点？点？5 5、单克隆抗体的应用、单克隆抗体的应用第30页，讲稿共54张，创作于星期日一、动物细胞融合一、动物细胞融合 也称也称细胞杂交细胞杂交，是指两个或多个动物是指
21、两个或多个动物细胞结合形成一个细细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形胞的过程，融合后形成的成的具有原来两个或具有原来两个或多个细胞遗传信息多个细胞遗传信息的的单核细胞单核细胞，称为，称为杂交杂交细胞细胞。第31页，讲稿共54张，创作于星期日动物细胞融合动物细胞融合1.概念概念2.结果：形成杂交细胞结果：形成杂交细胞3.细胞融合的原理：细胞融合的原理：4.诱导方法：诱导方法：（1）物理法：离心、振动、电激）物理法：离心、振动、电激（2）化学法：聚乙二醇（）化学法：聚乙二醇（PEG）（3）生物法：）生物法：灭活的病毒灭活的病毒5.意义：意义：思考讨论：为什么细胞融合过程中使用思考讨论：为什么细胞融
22、合过程中使用的病毒需要灭活？的病毒需要灭活？仙台仙台病毒病毒紫外线紫外线丧失感染性丧失感染性（不感染细胞）（不感染细胞）保留融合活性保留融合活性（抗原性）（抗原性）细胞膜的流动性细胞膜的流动性使远缘杂交成为可能使远缘杂交成为可能第32页，讲稿共54张，创作于星期日灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞膜连接细胞融合，形成杂种细胞细胞融合，形成杂种细胞第34页，讲稿共54张，创作于星期日主要用于制备主要用于制备单克隆抗体单克隆抗体获得杂种植株获得杂种植株用途用途物理、化学方法物理、化学方法（同左）（同左）灭活的病毒灭活的病毒
23、物理（离心、振荡、物理（离心、振荡、电刺激）电刺激）化学（聚乙二醇）化学（聚乙二醇）诱导方法诱导方法使细胞分散后诱使细胞分散后诱导细胞融合导细胞融合去除细胞壁后诱去除细胞壁后诱导原生质体融合导原生质体融合细胞融合的方法细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、植物细胞全能性植物细胞全能性原理原理动物细胞融合动物细胞融合植物体细胞杂交植物体细胞杂交比较项目比较项目植物、动物细胞融合的比较植物、动物细胞融合的比较第35页，讲稿共54张，创作于星期日1.动物细胞培养的温度和动物细胞培养的温度和PH值要求分别是？培养箱值要求分别是？培养箱的气体环境要求？为什么要加入的气
24、体环境要求？为什么要加入5%的的CO2？2.动物细胞核移植的类型？受体细胞？为什么？动物细胞核移植的类型？受体细胞？为什么？3.核移植的类型中哪种更容易，为什么？核移植的类型中哪种更容易，为什么？4.用于核移植的供体细胞一般都选用传代用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内代以内的细胞，为什么？的细胞，为什么？5.克隆牛和转基因牛所用的技术手段有哪些？克隆牛和转基因牛所用的技术手段有哪些？6.你认为体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体你认为体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了细胞供体动物进行了100的复制吗？为什么？的复制吗？为什么？7.动物细胞融合的原理和方法有哪些
25、？动物细胞融合的原理和方法有哪些？课前提问课前提问：第36页，讲稿共54张，创作于星期日第37页，讲稿共54张，创作于星期日 抗体抗体1 1。抗原抗原 动物体内动物体内刺激刺激效应效应B 抗原抗原 动物体内动物体内刺激刺激效应效应B 抗体抗体抗原不纯抗原不纯抗体不纯抗体不纯筛选单一效应筛选单一效应B细胞细胞不能增值，产生大量抗体不能增值，产生大量抗体2 2。特异性差、纯度低；。特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏产量低、反应不够灵敏第38页，讲稿共54张，创作于星期日设计方案：设计方案：一个一个B B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体淋巴细胞只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖小鼠骨髓瘤细
26、胞能无限增殖-化学性质单一、特异性强的抗体。化学性质单一、特异性强的抗体。杂种细胞杂种细胞（杂交瘤细胞）（杂交瘤细胞）单克隆抗体单克隆抗体 培养培养 第39页，讲稿共54张，创作于星期日思考：思考：1、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？细胞融合？融合的杂交瘤细胞，融合的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质继承了双亲细胞的遗传物质，不仅，不仅具具有有B B细胞分泌抗体的能力细胞分泌抗体的能力，而且无限增殖，而且无限增殖，可以获得大量可以获得大量单克隆抗体单克隆抗体2 2、制备过程中为何须经两次筛选？、制备过程中为何须经两次筛选？第一次：筛选出杂交瘤细胞。第一次：筛
27、选出杂交瘤细胞。第二次：筛选出产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞。第二次：筛选出产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞。3 3、本过程利用了哪些原理？运用了哪些技术手段、本过程利用了哪些原理？运用了哪些技术手段?原理：原理：技术手段：技术手段：免疫学，动物细胞融合和动物细胞培养免疫学，动物细胞融合和动物细胞培养细胞增殖和细胞膜的流动性细胞增殖和细胞膜的流动性第40页，讲稿共54张，创作于星期日小鼠小鼠骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞注射抗原注射抗原B B淋巴细胞淋巴细胞选择培养基筛选选择培养基筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞克隆化培养，筛选克隆化培养，筛选能产生所需抗体的能产生所需抗体的细胞群细胞群体内培养体内培养从小鼠腹水
28、提取从小鼠腹水提取体外培养体外培养从细胞培养液提取从细胞培养液提取单克隆抗体单克隆抗体培养骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞多种杂交细胞多种杂交细胞细胞融合细胞融合4.4.单克单克隆抗体隆抗体的制备的制备 第41页，讲稿共54张，创作于星期日3.单克隆抗体的概念单克隆抗体的概念 由由单个单个B淋巴细胞淋巴细胞经过无性繁殖（克经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的胞群所产生的化学性质单一、特异性强化学性质单一、特异性强的抗的抗体称为单克隆抗体。体称为单克隆抗体。第42页，讲稿共54张，创作于星期日1、动物融合的概念、方法及意义、动物融合的概念、
29、方法及意义2、单克隆抗体制备的过程是怎样的？、单克隆抗体制备的过程是怎样的？3、选用小鼠骨髓瘤细胞与、选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合的原细胞融合的原因？因？4、单克隆抗体制备的过程利用了哪些原理、单克隆抗体制备的过程利用了哪些原理？运用了哪些技术手段？运用了哪些技术手段?5、植物、动物细胞融合有哪些异同？、植物、动物细胞融合有哪些异同？课前提问：课前提问：第43页，讲稿共54张，创作于星期日 单克隆抗单克隆抗体制备过体制备过程程单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞，是一种缺陷型细胞，在在选择培养基选择培养基（HATHAT培培养基养基，HAT
30、HAT培养基中有培养基中有三种关键成分：次黄嘌三种关键成分：次黄嘌呤（呤（hypoxanthinehypoxanthine，H H）、氨甲蝶呤）、氨甲蝶呤（aminopterinaminopterin，A A）和）和胸腺嘧啶核苷胸腺嘧啶核苷（thymidinethymidine，T T），所），所以取三者的字头称为以取三者的字头称为HATHAT培养基。中无法生培养基。中无法生长，而小鼠长，而小鼠B B淋巴细胞淋巴细胞是正常细胞，在是正常细胞，在HATHAT培培养基上可正常存活。养基上可正常存活。杂杂交瘤细胞在交瘤细胞在HATHAT选择培选择培养液可以生长繁殖。养液可以生长繁殖。第44页，讲稿共
31、54张，创作于星期日单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用与常规抗体相比，单克隆抗体的优点在于它与常规抗体相比，单克隆抗体的优点在于它特异特异性强、灵敏度高，并可能大量制备性强、灵敏度高，并可能大量制备。应用主要有：应用主要有：1、临床诊断、临床诊断2、作为载体，运载抗癌药物，形成、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹生物导弹”治疗肿瘤治疗肿瘤单克隆抗体单克隆抗体+放射性同位素放射性同位素/化学药物化学药物/细胞毒素细胞毒素生物导弹生物导弹第45页，讲稿共54张，创作于星期日1.动物细胞工程技术的基础是：（）动物细胞工程技术的基础是：（）A动物细胞融合动物细胞融合B胚胎移植胚胎移植C动物细胞培养动
32、物细胞培养D核移植核移植.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）淋巴细胞淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞A B C D CD2.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是A、诱导融合的方法完全相同、诱导融合的方法完
33、全相同 B、所用的技木术手段完全相同、所用的技木术手段完全相同C、所采用的原理完全相同、所采用的原理完全相同 D、都能形成杂种细胞、都能形成杂种细胞第46页，讲稿共54张，创作于星期日1 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓髓瘤瘤细胞融合的是（细胞融合的是（）A.A.经过免疫的经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞 B.B.没经过免疫的没经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞C.C.经过免疫的经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 D.D.没经过免疫的淋巴细胞没经过免疫
34、的淋巴细胞A第47页，讲稿共54张，创作于星期日3 3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞织，其主要原因是这样的组织细胞 （）A.A.容易产生各种变异容易产生各种变异 B B具有更强的全能性具有更强的全能性 C.C.取材十分方便取材十分方便 D D分裂增殖的能力强分裂增殖的能力强D第48页，讲稿共54张，创作于星期日1.（2013重庆卷）重庆卷）2题题2图是单克隆抗体制备流程图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是的简明示意图。下列有关叙述
35、，正确的是A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞淋巴细胞B中使用胰蛋中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成白酶有利于杂交瘤细胞的形成C同时具有脾脏细胞同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性和鼠骨髓瘤细胞的特性D是经筛选培养获得是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细的能分泌特异性抗体的细胞群胞群D第49页，讲稿共54张，创作于星期日 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案杆菌的实验方案2、该方案能达到预期效果吗？为什么？、该方案能达到预期效果吗？为什么？4、图中、图中B为为_过程，常用过
36、程，常用_作为诱导剂，该细胞继作为诱导剂，该细胞继承承_的遗传特性，既能的遗传特性，既能_,又能又能_。1、该实验方案的目的是、该实验方案的目的是_3、A是从小鼠的脾脏中取得是从小鼠的脾脏中取得_,该细胞能够产生该细胞能够产生_5、C过程指细胞培养，该过程包括过程指细胞培养，该过程包括_培养和培养和_培养两个阶段，其培养两个阶段，其中中_代以内的的细胞属于细胞株。代以内的的细胞属于细胞株。制备单克隆抗体制备单克隆抗体B淋巴细胞淋巴细胞特异性抗特异性抗体体细胞融合细胞融合灭活病毒灭活病毒双亲细胞双亲细胞分泌抗体分泌抗体无限增殖无限增殖原代原代传代传代50B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交
37、瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群足够数量的细胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔AC2 2、没有将抗原注射到小鼠体内，、没有将抗原注射到小鼠体内，无法获得产生单一抗体的效应无法获得产生单一抗体的效应B B细胞。细胞。第50页，讲稿共54张，创作于星期日35.（06江苏）下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。江苏）下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。（1）技术是单克隆抗体技术的基础。技术是单克隆抗体技术的基础。（2）根据培养基的用途分类，图中）根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于培养基属于 培养基。培养基。（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大
38、的优越性是 。（4）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用的诱导剂外，还可以采用 。动物细胞培养动物细胞培养选择选择特异性强，灵敏度高特异性强，灵敏度高灭活的病毒灭活的病毒第51页，讲稿共54张，创作于星期日（5）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的 特点，又特点，又具备淋巴细胞的具备淋巴细胞的 特点。特点。（6）淋巴细胞是由动物体）淋巴细胞是由动物体 中的中的 细胞分化、发育细胞分化、发育而来。而来。（7）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、
39、氨基酸的主要方式是式是 。在体外无限增殖在体外无限增殖分泌特异性抗体分泌特异性抗体骨髓骨髓造血干造血干主动运输主动运输第52页，讲稿共54张，创作于星期日4（2009中山一模）中山一模）科学家对鼠源杂交瘤抗体进行改造，生产出效果更好的科学家对鼠源杂交瘤抗体进行改造，生产出效果更好的鼠鼠人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠人嵌合抗体的过程。请据人嵌合抗体的过程。请据图回答：图回答：可变区可变区恒定区恒定区人抗体人抗体鼠抗体鼠抗体嵌合抗体嵌合抗体可变区可变区恒定区恒定区（1）鼠源杂交瘤抗体就是从免疫的小鼠脾脏细胞中获取）鼠源杂交瘤抗体就是从免疫的小鼠脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导淋巴细胞，在诱导剂的作用下与剂的作用下与_融合，形成融合，形成_细胞，并通过体内培养细胞，并通过体内培养或体外培养生产的单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的或体外培养生产的单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点在于它的优点在于它的_，并可大量制备。，并可大量制备。骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤杂交瘤特异强和灵敏度高特异强和灵敏度高第53页，讲稿共54张，创作于星期日感谢大家观看01.04.2023第54页，讲稿共54张，创作于星期日