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1、主 要 内 容病原学病原生活史综合防控技术诊断技术形态学概论2一、棘球属绦虫分类学二、病原生活史与形态学概况 1 生活史 2 成虫形态 3 幼虫(蚴、棘球蚴)形态三、诊断技术 1 中间宿主-棘球蚴感染的诊断 2 终末宿主-棘球绦虫感染的诊断3四、流行病学调查方法 1 在现场开展动物棘球蚴病流行病学调查工作的方法 2 在现场开展犬细粒棘球绦虫病流行病学调查工作的方法 3 在实验室开展棘球蚴病(棘球绦虫病)流行病学调查的方法五、流行现状六、综合防控技术棘球蚴病(棘球蚴病(echinococcosis)的定义)的定义定 义棘球蚴病(俗称包虫病,hydatid disease,hydatidiosis
2、)是一类由棘球属绦虫(Echinococcus)的幼虫 (中绦期、续绦期)棘球蚴( 包囊、包虫 )所引起的人兽共患寄生虫病。45 一、棘球属绦虫分类学 目前,公认的棘球属(Echinococcus, Rudolphi,1801)绦虫有5个种,即细粒棘球绦虫(E.granulosus Batsch,1786)、多房棘球绦虫(E. multilocularis Leuckart,1863)、石渠棘球绦虫(E. shiquicus )、少节棘球绦虫(E. Orligarthrus Diesing,1863)和福氏棘球绦虫(E. vogeli Rausch et Bernstein,1972)。动物界
3、动物界Animal Kingdom 扁形动物门扁形动物门 Platyhelminthes 绦虫纲绦虫纲 Cestoidea 多节绦虫亚纲多节绦虫亚纲Cestoda(真绦虫亚纲(真绦虫亚纲Eucestoda) 圆叶目圆叶目 Cyclophyllidea 带科带科 Taeniidae 棘球属棘球属 Echinococcus 细粒棘球绦虫细粒棘球绦虫 E. granulosus 多房棘球绦虫多房棘球绦虫 E. multilocularis 伏氏棘球绦虫伏氏棘球绦虫 E. vogeli 少节棘球绦虫少节棘球绦虫 E. oligathrus 石渠棘球绦虫石渠棘球绦虫 E. shiquicus系统分类地位
4、细粒棘球绦虫成虫:细粒棘球绦虫(E. granulosus Batsch, 1786)又称包生绦虫,单房棘球绦虫 E. unilocularis Rudolphi,1801。 幼虫:棘球蚴(hydatid)又称细粒棘球蚴(E. granulosus larva)、单房性棘球蚴(unilocular hydatid,Echinococcus unilocularis)或包虫(hydatid cyst)、囊状棘球蚴(E. cysticus Huber, 1891)等。所致疾病:棘球蚴病(echinococcosis)又称包虫病(hydatid disease,hydatidosis)、细粒棘球蚴病
5、、单房性棘球蚴病(unilocular echinococcosis)、囊性棘球蚴病(cystic echinococcosis,CE)等。多房棘球绦虫成虫:多房棘球绦虫E. multilocularis (Leuckart,1863) Vogel,1955,泡状棘球绦虫(Alveococcus multilocularis Klemm,1883), 多房棘球带绦虫(Taenia echinococcus multilocularis Leuckart,1863),西伯利亚棘球绦虫(E. sibiricensis Rausch and Schiller,1954),多房带绦虫(Taenia m
6、ultilocularis)。 幼虫:多房棘球蚴(alveolar hydatid)又称泡(状)球蚴(Alveococcus)。所致疾病:泡球蚴病(alveococcosis),亦称泡型包囊病(alveolar hydatid disease)或泡型包虫病(alveolar echinococcosis,简称AE),或多房性包虫病(multilocular hydatid disease)、多房性棘球蚴病(multilocular echinococcosis)。石渠棘球绦虫成虫:目前只在藏狐( Tibetan fox,Vulpes ferrilata )中发现。共3 个节片,比多房棘球绦虫的
7、成虫还要小一些。幼虫:仅在高原鼠兔(pike, Ochotona curzoniae )中发现。单房性包囊。所致疾病:目前尚未发现牛、羊及人体病例。带属Taenia 泡状带绦虫 T. hydatigena (蚴:细颈囊尾蚴 Cysticercus tanuicollis; 所致疾病:水铃铛)多头属Multiceps(Taenia) 多头多头绦虫 T. multiceps (蚴:脑多头蚴Conurus cerebralis/ Cysticercus cerebralis; 所致疾病:脑包虫)附:寄生于犬的带科绦虫 二、病原生活史与形态学概况1、生活史 其发育过程包括2个阶段:成虫和幼虫。 成虫寄
8、生于终末宿主肉食类。 幼虫(蚴)寄生于中间宿主人、反刍类、啮齿类等,所致疾病称为棘球蚴病(包虫病)。细粒棘球绦虫生活史细粒棘球绦虫生活史 中间宿主吞食成虫或虫卵,六钩蚴则在肠内孵出,钻入肠壁,经血管进入血循环到达各器官,主要是肝脏和肺脏,经35个月,发育成为直径13cm的棘球蚴,以后每年增长15 cm。细粒棘球绦虫生活史成虫脱落的孕节或虫卵随终末宿主(传染源)粪便排出,污染周围环境,主要是水源和草地等。 在一个直径为10 cm的棘球蚴内原头蚴数可达10万个左右。 棘球蚴被犬、狼等终宿主吞食后,其所含的每个原头蚴都可发育为一条成虫(含200 800个虫卵)。 从原头蚴发育至成虫约经8周,成虫寿命
9、约56个月,在人体内棘球蚴可存活40年或更久。细粒棘球绦虫生活史 成虫(Eg)形态 是带科绦虫中最细小的一种之一,长27mm。头节呈梨形,有顶突和4个吸盘,顶突伸缩力很强,其上有大小两圈呈放射状排列整齐的小钩。除头节、颈部外,链体由幼节、成节和孕节各一节组成,偶或多一节。成虫(Eg)形态 成节内含雌雄生殖器官各一套,生殖孔位于节片一侧的中部偏后,睾丸4565个,分布于生殖孔的前后方。孕节最长,其生殖孔开口于节片一侧中部,子宫具不规则的囊状侧突,内含200800个虫卵。 棘球绦虫虫卵 虫 卵 棘球绦虫与其他带绦虫的卵在显微镜下难以区别 棘球绦虫虫体不同发育时期棘球绦虫虫体(Eg)形态变化幼虫(蚴
10、)-棘球蚴形态 圆形或近似圆形,或不规则形状的囊状体,大小可因寄生时间、寄生部位和宿主的不同而异,从直径不足1cm到数10cm,由囊壁和囊内含物组成。 幼虫(蚴)-棘球蚴形态肝脏棘球蚴幼虫(蚴)-棘球蚴形态绵羊肝脏、肺脏棘球蚴包囊幼虫(蚴)-棘球蚴形态绵羊肺脏棘球蚴包囊棘球蚴包囊结构 囊壁分两层,外层为角皮层或称角质层,乳白色半透明,似粉皮状,厚约14 mm,较脆弱,易破裂,无细胞结构。内层为生发层或称胚层,厚约20m,紧贴在角皮层内,基质内有细胞结构,可见许多细胞核。 棘球蚴包囊结构 内含物 棘球蚴的生发层向囊内生长出许多生发囊、子囊及原头蚴。囊内充满无色透明的棘球蚴液(hydatid fl
11、uid)。 生发囊 亦称育囊,由生发层直接发育而来,为仅有一生发层的小囊,直径约1cm,借助小蒂与生发层相连,内含数十个原头蚴。破裂后的生发囊,其生发层收缩,原头蚴翻出。 棘球蚴包囊结构 子囊(daughter cyst) 可由棘球蚴囊(母囊)的生发层直接长出,也可由原头蚴、生发囊进一步发育形成。子囊壁的结构与母囊的壁相似,由生发层和角皮层组成。囊内也可生长出原头蚴、生发囊,或与子囊结构相似的更小的囊,称为孙囊(grand daughter cyst)。 有的棘球蚴囊内无原头蚴、生发囊等,则称为不育囊(infertile cyst)或无头囊。 棘球蚴包囊结构 囊液 无色透明或略带淡黄色,比重1
12、.011.02, pH6.77.8,内含蛋白、肌醇、卵磷酯、尿素及少量糖、无机盐和酶。囊液中的蛋白质具有抗原性。 棘球蚴砂(hydatid sand)或称囊砂,是从囊壁脱落并悬浮于囊液中的原头蚴、生发囊及小的子囊。 棘球蚴包囊结构 原头蚴 椭圆形或圆形,大小约为170122m,多数原头蚴的四个吸盘和顶突内陷,具数十个小钩及石灰小体或钙颗粒。原头蚴原头蚴电镜照片电镜照片 多房棘球绦虫生活史 石渠棘球绦虫各发育阶段的形态学特征 三、诊断 四、流行病学调查方法四、流行病学调查方法1 在现场开展动物棘球蚴病流行病学调查工作的方法 可参照棘球蚴病防治技术DB63/T4572004 青海地方标准进行。 本
13、标准规定了对棘球蚴病和细粒棘球绦虫病的调查、防治、监测、控制及建档。 本标准适用于牛、羊、猪棘球蚴病的防治。 调查方法调查方法3)检囊 首先肉眼逐区观察脏器表面,对于表层明显可见的包囊先切开,看其结构。然后,用手逐区触摸脏器,发现脏器实质内囊状物时,切开深层囊,观其结构。 幼年羊包囊处于发育初期,其形态和大小不同于成年羊包囊,呈小白点状,囊径小于0.5cm,不易观察,生长在脏器表面和内部。检查办法应先肉眼仔细逐区观察脏器表面,将表面所有可疑小白点囊状物“#”字型切下,放入平皿。然后,将被检脏器按顺序切成25mm的薄片,逐片用手触摸,肉眼检查,发现囊状物,用“#”字型切下,放入平皿。调查方法4)
14、判定结果4.1)包囊判定 4.1.1)包囊位于脏器的实质内,周围由宿主结缔组织包围,呈灰白色,有半透明感。 4.1.2)囊壁粉皮样白色,切开囊壁,可见囊腔,囊液透明无色。含囊砂(原头蚴)和子囊或无。 4.1.3)幼龄羊大多形成0.5cm以下小白点状的包囊,具以下特征:调查方法小囊外观呈珠状,表面光泽,位于脏器包膜之下,有很强的触感,质地坚韧有弹性。将囊沿中轴切开,具明显囊腔,其内含少量透明囊液,壁白色。 4.2)包囊计数 根据上述特征结构,按不同脏器进行包囊计数,测囊径范围,登记 在临床上与细颈囊尾蚴和脑多头蚴的鉴别 细颈囊尾蚴脑多头蚴脑多头蚴脑多头蚴 现场开展犬棘球绦虫病流行病学调查工作方法
15、目前对中间宿主患棘球蚴病的生前诊断尚无行之有效的方法。现普遍采用国际公认的剖检法,对家畜屠宰后,进行棘球蚴病感染调查。该法取得的调查结果为人们所普遍接受。犬棘球绦虫病流行病学调查工作方法犬棘球绦虫病流行病学调查工作方法2)检查人员分工 多人(最少4人)。1号组员负责对犬一般情况进行调查与登记编号,并对安全防护进行监督;2号组员实施灌药;3号组负责保定;4号组员对所有犬排泄物进行检查。 3)检查用品 A 药品配制1.5g氢溴酸槟榔碱粉末、100mL水混匀,配成1.5溶液,装入清 犬棘球绦虫病流行病学调查工作方法 洁注射液瓶内备用。B 防护用品口罩、帽子、连体工作服、胶靴、乳胶手套、线手套、喷灯、
16、汽油、酒精、大塑料袋若干个、铁铣、石灰。C 固定犬用品钢筋制铁钎、拴犬铁链、铁制犬保定钳。D 投药及检虫用品登记表、铁制连续注射器、30cm20cm黑底搪瓷盘、1L搪瓷杯、水壶、自制木片、挑虫针、平皿、放大镜、硫酸阿托品注射液。 犬棘球绦虫病流行病学调查工作方法2)检查人员分工 多人(最少4人)。1号组员负责对犬一般情况进行调查与登记编号,并对安全防护进行监督;2号组员实施灌药;3号组负责保定;4号组员对所有犬排泄物进行检查。 3)检查用品 药品配制犬棘球绦虫病流行病学调查工作方法犬棘球绦虫病流行病学调查工作方法犬棘球绦虫病流行病学调查工作方法5)结果判定A 虫体检查 用4%10%的福尔马林溶
17、液清洗搪瓷盘中标准粪样,沉淀片刻,弃上清,晃动盘,肉眼判定有无虫体,发现虫体吸入平皿,逐条计数、登记(附:家牧犬细粒棘球绦虫感染调查统计表)。检完后,认真清洗粪检盘,避免重检。B 感染强度 分三级。I轻度10条以下,中度10100条,强度100条以上。 犬棘球绦虫病流行病学调查工作方法6)消毒及无害化处理A 粪便收集完后,将犬继续固定12小时,排出的粪便深埋。所有地面上粪便清除干净,扔入废坑,撒入石灰,并用土埋实,以免小孩或犬将坑内废弃物弄出造成污染。B 凡被犬粪接触的地面、铁锹、铁钎、铁链等一律用喷灯焚烧。C 所有参与工作的人员用肥皂和清水反复洗手。犬棘球绦虫病流行病学调查工作方法D 防护服
18、、胶靴、手套、帽子、口罩等检查用品用后按无污染解脱法,分别装入结实塑料袋中(每袋体积不能大于高压锅所能容纳的体积),严格高压消毒处理。注意事项:此项工作危险性很大,为了自己和当地居民、家畜安全自开始至结束,要严密注视每一个环节,发现问题及时处理;严禁外人进入场地,消毒必须彻底。犬棘球绦虫病流行病学调查工作方法本方法的缺点 有相当数量的犬只对氢溴酸槟榔碱不敏感,并不出现排便反应。因此,特异性高,但检出率低。 氢溴酸槟榔碱目前市售的产品仅有粉剂,使用不便;出售产品的公司(或药厂)很少,购买不便。 实验室开展棘球蚴病(棘球绦虫病)流行病学调查的方法(1)中间宿主疑似棘球蚴包囊诊断 显微镜下,病原体组
19、织学检查;虫体抗原检查(免疫学方法);DNA检查(PCR方法)(2)中间宿主生前血清学诊断 抗体检测可参照NYT 1466-2007 动物棘球蚴病诊断技术进行;循环抗原检测(3)中间宿主小动物(羊)X线、B超影像学检查实验室开展棘球蚴病(棘球绦虫病)流行病学调查的方法实验室开展棘球蚴病(棘球绦虫病)流行病学调查的方法(4)终末宿主棘球绦虫检查粪抗原检测(粪抗原-ELISA、夹心法ELISA ):德国Echinococcus-ELISA (Genzyme Virotech GmbH, Rsselsheim, Germany) ;瑞典CHEKIT Echinotest(Bommeli Diagno
20、stics, Liebefeld-Bern, Switzerland)粪虫体DNA检测: rDNA(18S rRNA基因,ITS1,ITS2);mtDNA(CO1、ND1)方法:PCR、RFLP-PCR、RAPD-PCR、SSCP、sequencing 上述方法不仅特异性高,而且敏感性高。实验室开展棘球蚴病(棘球绦虫病)流行病学调查的方法实验室开展棘球蚴病(棘球绦虫病)流行病学调查的方法(5)终末宿主血清学检查 血清抗体检测:用细粒棘球蚴原头节抗原包被ELISA反应板,可检测到人工感染后2-3周犬的血清中特异性抗体(IgG、IgA和IgE)。此方法虽然特异性高(70%95%),但对自然感染细粒棘球绦虫犬的检出率低,仅为35%73% 。本方法主要用于群体动物流行病学基线调查。 五、流行现状 E. granulosus in the world 流行现状 E. granulosus in China 流行现状 Distribution of E. multilocularis 流行现状 E. multilocularis in China 流行现状 E. shiquicus in China 六、综合防控技术THANKS!演讲完毕,谢谢观看!