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1、实验实验10染色体带型分析染色体带型分析对植物有丝分裂中期染色体进行酶解,酸、碱、对植物有丝分裂中期染色体进行酶解,酸、碱、盐等处理,并用特定的染料染色后盐等处理,并用特定的染料染色后,使染色体使染色体在其长轴上显示出一个个深浅、宽窄不同的横在其长轴上显示出一个个深浅、宽窄不同的横纹纹,这样的横纹就叫做染色体的带这样的横纹就叫做染色体的带各染色体上染色带的数目、部位、宽窄、深浅各染色体上染色带的数目、部位、宽窄、深浅及排列顺序相对稳定,为鉴别染色体的形态提及排列顺序相对稳定,为鉴别染色体的形态提供依据,也为细胞遗传学和染色体工程提供新供依据,也为细胞遗传学和染色体工程提供新的研究手段。的研究手
2、段。显示染色体带的过程称为染色体显带显示染色体带的过程称为染色体显带.染色体的显带技术整条染色体的显带技术:如Q带和G带染色体局部的显带技术J带和C带.Q带缺点:荧光持续存在的时间很短缺点:荧光持续存在的时间很短,必须有荧,必须有荧光显微镜才能进行观察光显微镜才能进行观察 荧光染料氮芥喹叶荧光染料氮芥喹叶 优点:受制片过程和热处理的影响较小优点:受制片过程和热处理的影响较小,制片效果较好制片效果较好,带型鲜明带型鲜明G带先经盐先经盐,碱碱,热热,胰酶或蛋白酶胰酶或蛋白酶,尿素及去垢剂尿素及去垢剂等处理后等处理后,再用再用Giemsa染液染色染液染色 优点:优点:G带在各条染色体上显出的带型和带
3、在各条染色体上显出的带型和Q带型带型基本相同基本相同,普通显微镜下可以观察,普通显微镜下可以观察中期染色体的形态、带型(中期染色体的形态、带型(G显带)显带)一一个个男男性性G显显带带人类人类G显带染色体模式图显带染色体模式图 C带将中期染色体先经盐酸,后经碱(如将中期染色体先经盐酸,后经碱(如氢氧化钡)处理,再用吉姆萨染色氢氧化钡)处理,再用吉姆萨染色显示的是紧邻着丝粒的异染色质区显示的是紧邻着丝粒的异染色质区又称着丝粒异染色质带又称着丝粒异染色质带C带的形成是高度重复序列的带的形成是高度重复序列的DNA(异染色质)(异染色质)经酸碱变性和复性处理后,易于复性,而低重经酸碱变性和复性处理后,
4、易于复性,而低重复序列和单一序列复序列和单一序列DNA(常染色质)不复性,(常染色质)不复性,经经Giemsa染色后呈现深浅不同的染色反应。染色后呈现深浅不同的染色反应。这种差异反映染色体结构的差异这种差异反映染色体结构的差异 C显带核型图显带核型图 R带中期染色体不经盐酸水解或不经胰酶处理的中期染色体不经盐酸水解或不经胰酶处理的情况下,经吉姆萨染色后所呈现的区带情况下,经吉姆萨染色后所呈现的区带所呈现的是所呈现的是G带染色后的带间不着色区,故又带染色后的带间不着色区,故又称反带称反带 部分染色体的部分染色体的R显带显带T带又称端粒带,是染色体的端粒部位经吉姆萨又称端粒带,是染色体的端粒部位经
5、吉姆萨和吖啶橙染色后所呈现的区带,典型的和吖啶橙染色后所呈现的区带,典型的T带带呈绿色。呈绿色。高分辨染色体70年代后期,由于细胞同步化方法的应用年代后期,由于细胞同步化方法的应用和显带技术的改进,因而可获得更长而带纹和显带技术的改进,因而可获得更长而带纹更为丰富的染色体,这种染色体即称为高分更为丰富的染色体,这种染色体即称为高分辨染色体。辨染色体。本实验是一个带有障碍性的实验,种子本实验是一个带有障碍性的实验,种子萌发时的水分、温度控制不好,预处理萌发时的水分、温度控制不好,预处理不充分,解离时没有严格按要求做,压不充分,解离时没有严格按要求做,压片技术不过关等等,都会直接或间接地片技术不过关等等,都会直接或间接地导致实验失败。导致实验失败。注意事项完成一种植物根尖制片和保存细胞图象完成一种植物根尖制片和保存细胞图象 对染色体图片进行核型分析:列出测量结果、对染色体图片进行核型分析:列出测量结果、排列好核型图、绘模式图排列好核型图、绘模式图作业