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1、Department of Microbiology,Guangzhou Medical CollegeDepartment of Microbiology,Harbin Medical UniversityMedical Microbiology医 学 微 生 物 学Department of Microbiology,GMCDepartment of Microbiology,GMC第9章 呼吸道传播的病原微生物Department of Microbiology,Guangzhou Medical College案例9-1n刘某，男，30岁。u主诉：低热伴咳嗽一个多月。u查体：T 38，
2、P86次/分，R20次/分，BP120/80mmHg。一般状况良好，右上肺叩诊稍浊，语颤稍增强，可闻及支气管肺泡呼吸音和少量湿啰音，心腹检查未见异常。u实验室检查：血Rt：Hb 130g/L，WBC12109/L，N68%，L32%，PLT138109/L；尿Rt(-)；大便Rt(-)；ESR35mm/h。n问题：u你作为主诊医生，该患者确诊还需要做哪些检查？u患者最有可能感染哪种病原体？u一旦确诊，应遵循的治疗原则是什么？Department of Microbiology,Guangzhou Medical College分析n作为主诊医生，该患者确诊还需要做哪些检查？uX-ray 胸片（
3、正、侧）u痰液查致病菌+药敏un患者最有可能感染哪种病原体？u结核？肺炎？支气管炎？n一旦确诊，应遵循的治疗原则是什么？uDepartment of Microbiology,Guangzhou Medical College第9章 呼吸道传播的病原微生物第1节结核分枝杆菌Mycobacterium TuberculosisTubercle bacilliDepartment of Microbiology,Guangzhou Medical College流行病学n n结核病的病原菌uu18861886年德国细菌学家年德国细菌学家 Koch Koch 证明证明n n全球性卫生问题uu是艾滋病
4、高发区人群的首要死因是艾滋病高发区人群的首要死因n n世界防治结核病日uu3 3月月2424日日Department of Microbiology,Guangzhou Medical College分枝杆菌属（Mycobacterium）n n细长略带弯曲的杆菌n抗酸杆菌（acid-fast bacillus）n种类Department of Microbiology,Guangzhou Medical College分枝杆菌属细菌种类分枝杆菌属细菌种类结核分枝杆菌复合群结核分枝杆菌复合群结核分枝杆菌结核分枝杆菌牛分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌非洲分枝杆菌田鼠分枝杆菌田鼠分枝杆菌非典型分
5、枝杆菌非典型分枝杆菌麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌光产色分枝杆菌光产色分枝杆菌暗产色分枝杆菌暗产色分枝杆菌不产色分枝杆菌不产色分枝杆菌迅速生长分枝杆菌迅速生长分枝杆菌分分枝枝杆杆菌菌属属Department of Microbiology,Guangzhou Medical College一、生物学性状一、生物学性状1）、形态上：）、形态上：菌体细长稍菌体细长稍弯曲。弯曲。呈分枝状生长趋势，呈分枝状生长趋势，经齐尼经齐尼(Ziehl-Neelsen)抗抗酸染色法染色后，菌体呈红酸染色法染色后，菌体呈红色（色（抗酸染色阳性抗酸染色阳性），其他），其他非抗酸菌及细胞杂质等均被非抗酸菌及细胞杂质等均被染成
6、蓝色。染成蓝色。无芽胞、鞭毛和荚膜1、形态与染色Department of Microbiology,Guangzhou Medical College2、培养特性、培养特性n n2 2）、培养上：营养要求特殊）、培养上：营养要求特殊）、培养上：营养要求特殊）、培养上：营养要求特殊（常用罗氏培养基，常用罗氏培养基，常用罗氏培养基，常用罗氏培养基，L-JL-J）；pH6.5-6.8pH6.5-6.8；T T：3737；气体：；气体：；气体：；气体：专性需氧，专性需氧，专性需氧，专性需氧，8-12%CO8-12%CO2 2可刺激其可刺激其可刺激其可刺激其生长。生长。生长。生长。生长缓慢生长缓慢生长
7、缓慢生长缓慢，18h/18h/代。代。代。代。n n培养表现培养表现培养表现培养表现在在在在罗氏培养基罗氏培养基罗氏培养基罗氏培养基上上上上经经经经2 24 4周培养后形成周培养后形成周培养后形成周培养后形成粗糙粗糙粗糙粗糙、干干干干燥燥燥燥、不透明的乳白色或米黄色不透明的乳白色或米黄色不透明的乳白色或米黄色不透明的乳白色或米黄色，呈呈呈呈颗粒状颗粒状颗粒状颗粒状、结节状或菜花样菌结节状或菜花样菌结节状或菜花样菌结节状或菜花样菌落落落落。液体培养基中呈索状生长。液体培养基中呈索状生长。液体培养基中呈索状生长。液体培养基中呈索状生长（加吐温（加吐温（加吐温（加吐温8080后可呈均匀生长）。后可呈
8、均匀生长）。后可呈均匀生长）。后可呈均匀生长）。培养基含鸡蛋、马铃薯粉、甘油、孔雀绿等培养基含鸡蛋、马铃薯粉、甘油、孔雀绿等Department of Microbiology,Guangzhou Medical College结核分枝杆菌菌落结核分枝杆菌菌落Department of Microbiology,Guangzhou Medical College结核分枝杆菌索状生长结核分枝杆菌索状生长Department of Microbiology,Guangzhou Medical College抗酸染色法抗酸染色法n n原理：结核杆菌具有要枝菌酸。原理：结核杆菌具有要枝菌酸。原理：结核
9、杆菌具有要枝菌酸。原理：结核杆菌具有要枝菌酸。n n方法：方法：方法：方法：制片：涂片制片：涂片制片：涂片制片：涂片干燥干燥干燥干燥固定（同革兰氏染色法）固定（同革兰氏染色法）固定（同革兰氏染色法）固定（同革兰氏染色法）n n 染色：加石炭酸复红覆盖标本片染色：加石炭酸复红覆盖标本片染色：加石炭酸复红覆盖标本片染色：加石炭酸复红覆盖标本片n n 加热至冒蒸气为止加热至冒蒸气为止加热至冒蒸气为止加热至冒蒸气为止n n 维持分钟，水洗维持分钟，水洗维持分钟，水洗维持分钟，水洗n n n n 盐酸酒精脱色至无红色液体流出为止盐酸酒精脱色至无红色液体流出为止盐酸酒精脱色至无红色液体流出为止盐酸酒精脱色
10、至无红色液体流出为止n n 水洗水洗水洗水洗n n 加吕氏美蓝染秒至分钟加吕氏美蓝染秒至分钟加吕氏美蓝染秒至分钟加吕氏美蓝染秒至分钟n n 水洗水洗水洗水洗n n 待干，镜检待干，镜检待干，镜检待干，镜检n n结果：抗酸菌红色（结核杆菌）结果：抗酸菌红色（结核杆菌）结果：抗酸菌红色（结核杆菌）结果：抗酸菌红色（结核杆菌）n n 非抗酸菌蓝色（其他细菌或细胞等）非抗酸菌蓝色（其他细菌或细胞等）非抗酸菌蓝色（其他细菌或细胞等）非抗酸菌蓝色（其他细菌或细胞等）n n注意事项：加热时不能把石炭复红加沸煮干注意事项：加热时不能把石炭复红加沸煮干注意事项：加热时不能把石炭复红加沸煮干注意事项：加热时不能把
11、石炭复红加沸煮干 Department of Microbiology,Guangzhou Medical CollegeDepartment of Microbiology,Guangzhou Medical College结核分枝杆菌结核分枝杆菌抵抗力与变异性抵抗力与变异性n n3、抵抗力、抵抗力特点：特点：“三耐四敏三耐四敏”耐干燥、耐酸碱、耐孔雀绿耐干燥、耐酸碱、耐孔雀绿（1 1：1300013000）对湿热、对湿热、对湿热、对湿热、7070乙醇、紫外线、常用抗结核药物乙醇、紫外线、常用抗结核药物乙醇、紫外线、常用抗结核药物乙醇、紫外线、常用抗结核药物（但长期使用易产生耐药性）（但长期
12、使用易产生耐药性）（但长期使用易产生耐药性）（但长期使用易产生耐药性）n n4 4、变异性、变异性、变异性、变异性 典型形态典型形态典型形态典型形态多形性多形性多形性多形性 R R型菌落型菌落型菌落型菌落S S型菌落型菌落型菌落型菌落 有毒有毒有毒有毒无毒（用于制备疫苗无毒（用于制备疫苗无毒（用于制备疫苗无毒（用于制备疫苗-卡介苗卡介苗卡介苗卡介苗-Bacilli Bacilli Calmette-GurinCalmette-Gurin ，BCGBCG）抗结核药敏感抗结核药敏感抗结核药敏感抗结核药敏感耐药耐药耐药耐药Department of Microbiology,Guangzhou Me
13、dical College二、致病性和免疫性 n n类脂（lipid）uu分枝菌酸（分枝菌酸（mycolicmycolic acid acid）-抗酸性抗酸性uu索状因子（索状因子（cord factorcord factor）-慢性肉芽肿慢性肉芽肿慢性肉芽肿慢性肉芽肿uu磷脂（磷脂（phosphatidephosphatide）-结核结节和干酪坏死结核结节和干酪坏死uu蜡质蜡质D D（wax-Dwax-D）-具佐剂作用，引起迟发型具佐剂作用，引起迟发型具佐剂作用，引起迟发型具佐剂作用，引起迟发型超敏反应超敏反应超敏反应超敏反应uu硫酸脑苷酯（硫酸脑苷酯（sulfatidesulfatide）
14、-抗吞噬抗吞噬 n n蛋白质：引起迟发型超敏反应和产生抗体引起迟发型超敏反应和产生抗体n n多糖（polysaccharide）：诱发速发型超敏诱发速发型超敏反应反应1、致病物质Department of Microbiology,Guangzhou Medical College2、所致疾病 n n结核病uu经呼吸道、消化道、经呼吸道、消化道、破损皮肤黏膜等进入破损皮肤黏膜等进入机体机体uu侵犯侵犯多种组织器官多种组织器官Department of Microbiology,Guangzhou Medical College肺部感染原发感染n n多发生于儿童n n原发综合征n n形成结核结节
15、n n转归Department of Microbiology,Guangzhou Medical College吞噬细胞内繁殖吞噬细胞内繁殖（渗出性炎症）（渗出性炎症）原发性感染原发性感染结核分枝杆菌结核分枝杆菌 肺泡肺泡吞噬细胞吞噬细胞全身性粟粒性结核全身性粟粒性结核结核结节结核结节 淋巴结病淋巴结病灶逐渐纤维化和钙化灶逐渐纤维化和钙化原发感染Department of Microbiology,Guangzhou Medical College肺部感染继发感染n n多由原发病灶潜伏的结核菌引起n n多发于成年人n n病灶多局限n n易发生干酪样坏死和形成空洞n n为开放性肺结核Depar
16、tment of Microbiology,Guangzhou Medical College肺外感染 n n免疫力低下患者n n常见于脑、肾、骨、关节、生殖系统n n少数形成全身粟粒性结核或播散性结核Department of Microbiology,Guangzhou Medical College免疫机制n n感染免疫、有菌免疫（infection immunityinfection immunity）n n结核菌免疫依赖细胞免疫n n可产生抗体，但其保护作用不明确Department of Microbiology,Guangzhou Medical College免疫与超敏反应 n
17、 n细胞免疫为主,迟发型超敏反应同时存在n n郭霍现象n n免疫和超敏反应的物质基础uu结核分枝杆菌结核分枝杆菌核糖核酸（核糖核酸（rRNArRNA）uu结核菌素蛋白、蜡质结核菌素蛋白、蜡质D DDepartment of Microbiology,Guangzhou Medical CollegeDepartment of Microbiology,Guangzhou Medical College结核菌素试验n n结核菌素试剂uu旧结核菌素旧结核菌素（old tuberculinold tuberculin，OTOT)uu纯蛋白衍化物纯蛋白衍化物(purified(purified pro
18、tein derivativeprotein derivative，PPDPPD)Department of Microbiology,Guangzhou Medical Collegen n方法方法uu取两种取两种PPD 5PPD 5单位单位注入两前臂注入两前臂皮内皮内uu48487272小时后观察红肿直径小时后观察红肿直径n n结果结果uu阴性：阴性：5mm5mmuu阳性：阳性：5mm5mmuu强阳性：强阳性：15mm15mm结核菌素试验Department of Microbiology,Guangzhou Medical College结核菌素试验结果分析阳性阳性阳性阳性强阳性强阳性强
19、阳性强阳性 阴性阴性阴性阴性硬结、红肿直径0.5-1.5cm之间出现超敏反应不表示正患结核病硬结直径超过1.5cm以上表明可能有活动性结核，应进一步检查注射部位有针眼大的红点或稍有红肿，硬结直径小于0.5cm无结核感染，但应考虑：无结核感染，但应考虑：原发感染的早期原发感染的早期正患严重结核病正患严重结核病正患其他传染病（麻疹）正患其他传染病（麻疹）Department of Microbiology,Guangzhou Medical Collegen n选择卡介苗接种对象、测定卡介苗接种后的免疫效果n n了解人群自然感染率n n作为婴幼儿结核病的辅助诊断n n测定肿瘤患者的细胞免疫功能结核
20、菌素试验应用Department of Microbiology,Guangzhou Medical College三、微生物学检查n n标本取材n n涂片染色镜检：抗酸染色n n培养法：罗氏固体培养基n n动物试验n n细菌学基因诊断：PCRDepartment of Microbiology,Guangzhou Medical College特异性防治n n卡介苗预防uu接种对象：新生儿和结核菌素试验阴性的儿童接种对象：新生儿和结核菌素试验阴性的儿童uu免疫时间：免疫时间：3 35 5年年n n药物治疗uu联合应用联合应用uu长期用药长期用药Department of Microbiolo
21、gy,Guangzhou Medical College麻风分枝杆菌Mycobacterium lepraeDepartment of Microbiology,Guangzhou Medical College麻风分枝杆菌（M.leprae）n n麻风病的病原菌uu慢性传染病慢性传染病n n世界各地均有报道uu主要分布在亚、非和拉丁美洲主要分布在亚、非和拉丁美洲Department of Microbiology,Guangzhou Medical College形态与染色n n细长略弯曲n n无芽胞，无荚膜，无鞭毛n n抗酸染色阳性n n典型的胞内寄生菌Department of Micr
22、obiology,Guangzhou Medical College培养特性n n不能在人工培养基中生长n n抗酸特性n n动物模型：犰狳Department of Microbiology,Guangzhou Medical College致病性n易感人群 人n传播途径 直接接触或由飞沫传播n潜伏期 一般是6个月至5年n发病慢、病程长n麻风分为3种类型u瘤型麻风u结核样型u界线类u未定类Department of Microbiology,Guangzhou Medical College麻风两型两类相互间的关系图麻风两型两类相互间的关系图Department of Microbiology
23、,Guangzhou Medical College微生物学诊断n n显微镜检查n nPCRDepartment of Microbiology,Guangzhou Medical College防治原则n n特异的预防uu尚无有效的菌苗尚无有效的菌苗n n早期发现、早治疗n n目前多采用二三种药联合治疗uu氨苯砜氨苯砜（dapsonedapsone，DDSDDS）Department of Microbiology,Guangzhou Medical College非结核分枝杆菌Nontuberculosis mycobacteriaDepartment of Microbiology,Gu
24、angzhou Medical College非结核分枝杆菌n n除人型结核分枝杆菌、牛型结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌菌群n n多存在于自然界，是条件致病菌Department of Microbiology,Guangzhou Medical College分类 根据菌落色素和生长速度分为4组：n n第第组：光产色菌组：光产色菌n n第第组：暗产色菌组：暗产色菌n n第第组：不产色菌组：不产色菌n n第第组：迅速生长菌组：迅速生长菌Department of Microbiology,Guangzhou Medical College偶发分枝杆菌光产色菌Department of Microbiology,Guangzhou Medical College问题n n简述结核分枝杆菌的主要简述结核分枝杆菌的主要生物学特性生物学特性n n简述简述结核分枝杆菌结核分枝杆菌类脂类脂成分成分在致病中的作用在致病中的作用n n简述简述结核菌素试验结核菌素试验原理、结果判断及意义原理、结果判断及意义n n简述结核病的简述结核病的预防预防及抗结核药物的及抗结核药物的治疗原则治疗原则n n何为何为卡介苗卡介苗？简述卡介苗在实际工作中的应用及？简述卡介苗在实际工作中的应用及对其对其效果的评价效果的评价n n简述麻风分枝杆菌的简述麻风分枝杆菌的生物学特性生物学特性及及致病特点致病特点