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1、DNADNA指纹的制作过程指纹的制作过程高二（高二（12）班）班 刘欣祥刘欣祥DNA指纹技术的操作流程（书本指纹技术的操作流程（书本P58页）页）应用应用DNA指纹技术，首先需要合适的酶将指纹技术，首先需要合适的酶将待检测的样品待检测的样品DNA切成片段，然后用电泳的方法将切成片段，然后用电泳的方法将这些片段按大小分开，再经过一系列的步骤，最后这些片段按大小分开，再经过一系列的步骤，最后形成如下图所示的形成如下图所示的DNA指纹图。指纹图。DNA指纹技术的操作方法生物样品中提取DNA 将送检的各将送检的各种生物学检样如毛发、种生物学检样如毛发、血痕、精血痕、精 斑、人体斑、人体组织或白骨等，把
2、其组织或白骨等，把其中所含的中所含的DNA提取出提取出来。来。DNA指纹技术的操作方法生物样品中提取DNADNA扩增 如果提如果提取的取的DNA 量很量很少，可以将少，可以将DNA样品进行样品进行PCR扩扩增，得到大量增，得到大量的所需的所需DNA。DNA指纹技术的操作方法生物样品中提取DNADNADNA片段扩增酶切 选用合适的限选用合适的限制酶，在长链制酶，在长链DNA位置上位置上加以切割，将分子量很大加以切割，将分子量很大的的DNA长链切成许多长度长链切成许多长度不同的小片段不同的小片段 。DNA指纹技术的操作方法生物样品中提取DNADNADNA片段扩增酶切按大小分开电泳 在电泳仪中，对在
3、电泳仪中，对酶切后的酶切后的DNA片段进行电泳，片段进行电泳，各酶切片段就会按其长度大各酶切片段就会按其长度大小在电场中进行分离小在电场中进行分离。DNA指纹技术的操作方法生物样品中提取DNADNADNA片段扩增酶切按大小分开电泳尼龙滤膜上转移 将分开的双链将分开的双链DNA片段解旋为单链片段，片段解旋为单链片段，然后永久性地固定在尼龙然后永久性地固定在尼龙膜上。膜上。DNA指纹技术的操作方法生物样品中提取DNADNADNA片段扩增酶切按大小分开电泳尼龙滤膜上转移标记的DNA探针和膜上单链DNA片段杂交DNA指纹技术的操作方法生物样品中提取DNADNADNA片段扩增酶切按大小分开电泳尼龙滤膜上
4、转移标记的DNA探针和膜上DNA片段杂交放射自显影技术 用放射性胶片与尼龙用放射性胶片与尼龙薄膜叠放，尼龙膜上的放薄膜叠放，尼龙膜上的放射性探针便会发出射性探针便会发出X射线使射线使胶片曝光，从而使杂交探胶片曝光，从而使杂交探针的长度不同的针的长度不同的DNA片段片段位置显影在胶片上。这样位置显影在胶片上。这样的特征的特征DNA片段条状图谱，片段条状图谱，便是所谓的便是所谓的DNA指纹。指纹。DNA指纹技术的操作方法生物样品中提取DNADNADNA片段扩增酶切按大小分开电泳尼龙滤膜上转移标记的DNA探针和膜上DNA片段杂交放射自显影技术DNA指纹图谱 1、酶切 2、电泳 3、转膜 4、杂交 5、显影尼龙膜上的尼龙膜上的DNA条带条带