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1、会计学1溶血溶血(rn xu)对生化检验结果的影响对生化检验结果的影响第一页，共30页。溶血(rn xu)的定义溶血对生化检验结果(ji gu)的影响溶血(rn xu)标本的处理标本溶血的原因如何避免溶血第1页/共30页第二页，共30页。一、溶血一、溶血(rn xu)(rn xu)的定义的定义溶溶血血是是红红细细胞胞破破坏坏,红红细细胞胞的的一一些些组组分分释释放放进进入入(jnr)(jnr)血血清清或或血血浆浆，导导致致实实验验样样品品出出现现特特有有的的红红色色增增加加。很很多多因因素素都都可可以以使使红红细细胞胞破破坏坏，发发生生溶溶血血，从从而而干干扰扰监监测测，使使检检验验结结果果失
2、去真实性和准确性，影响疾病的诊断和治疗。失去真实性和准确性，影响疾病的诊断和治疗。第2页/共30页第三页，共30页。溶溶血血(rn(rn xu)xu)是是临临床床生生化化检检验验中中最最常常见见的的一种干扰和影响因素。一种干扰和影响因素。溶溶血血(rn(rn xu)xu)后后显显著著增增高高的的有有ASTAST、ALTALT、LDHLDH、K+K+、TBILTBIL、TPTP、ALBALB等；等；溶溶血血(rn(rn xu)xu)后后显显著著降降低低的的项项目目有有GLUGLU、CRCR等。等。第3页/共30页第四页，共30页。（一）溶血（一）溶血（一）溶血（一）溶血(rn xu)(rn xu
3、)(rn xu)(rn xu)对肝功能测定的影响对肝功能测定的影响对肝功能测定的影响对肝功能测定的影响1.天门冬氨酸氨基转移酶（AST）溶血造成AST升高可能是由以下两个方面的原因(yunyn)引起(1)人类红细胞中AST活性约为血清中的40倍，当标本溶血时红细胞破裂后释放AST，势必引起血清AST活性的升高从而使溶血标本的结果明显高于未溶血标本。(2)溶血后血清颜色加深，致使测得的吸光度值增高。第4页/共30页第五页，共30页。2 2、谷氨酸、谷氨酸-丙酮酸转氨酶（丙酮酸转氨酶（ALTALT）红细胞中红细胞中ALTALT活性约是血清活性约是血清(xuqng)(xuqng)中中7 71515倍
4、。严重溶血（倍。严重溶血（HbHb约约6.5g/L6.5g/L）时，可）时，可使血清使血清(xuqng)ALT(xuqng)ALT由由20U/L20U/L增高到增高到26.5U/L26.5U/L（增加约（增加约27%27%）。因此溶血后）。因此溶血后ALTALT含含量测定的增高主要来源于细胞内量测定的增高主要来源于细胞内ALTALT的大量的大量释放。释放。可见与可见与ASTAST相比，相比，ALTALT受溶血影响轻些。受溶血影响轻些。第5页/共30页第六页，共30页。3 3、乳酸脱氢酶（、乳酸脱氢酶（LDHLDH）红红细细胞胞和和血血小小板板中中含含有有丰丰富富的的LDHLDH，红红细细胞胞中
5、中LDHLDH的的含含量量是是血血清清的的160160200200倍倍，故故受受溶溶血血影影响响最最大大。在在测测定定环环节节(hunji)(hunji)上上都都有有可可能能发发生生不不同同程程度度的的血血小小板板破破坏坏，而而影影响响LDHLDH测测定定，使使其其测定结果偏高。测定结果偏高。第6页/共30页第七页，共30页。4 4、谷氨酰转肽酶（、谷氨酰转肽酶（GGTGGT）由由于于红红细细胞胞内内GGTGGT含含量量(hnling)(hnling)很很低低，轻轻微微溶溶血血对对其其测测定定结结果果影影响响不不大大，但但重度溶血则有影响重度溶血则有影响第7页/共30页第八页，共30页。5 5
6、、总蛋白（、总蛋白（TPTP）总蛋白的测定通常选用双缩脲法，主总蛋白的测定通常选用双缩脲法，主波长波长540nm,540nm,而血红蛋白在而血红蛋白在555nm555nm有吸收有吸收(xshu)(xshu)峰，试验表明如果溶血标本中峰，试验表明如果溶血标本中HbHb 0.5g 0.5gL L时无干扰；而高时无干扰；而高HbHb，会使结果偏高，可以做样品空白来消除影会使结果偏高，可以做样品空白来消除影响。响。第8页/共30页第九页，共30页。6 6、总胆红素（、总胆红素（TBILTBIL）重氮法测定重氮法测定TBILTBIL，最后生成，最后生成(shn(shn chn)chn)红紫色的偶氮胆红素
7、，主要在波红紫色的偶氮胆红素，主要在波长为长为540nm540nm560nm560nm处有光吸收。而处有光吸收。而HbHb在在波长波长540nm540nm550nm550nm处有光吸收，恰与偶处有光吸收，恰与偶氮胆红素的比色波长相近。因此溶血后氮胆红素的比色波长相近。因此溶血后细胞破裂时大量细胞破裂时大量HbHb进入血清进入血清,势必造成势必造成TBILTBIL测定值的升高测定值的升高,是是TBILTBIL测定的正向干测定的正向干扰因素。扰因素。第9页/共30页第十页，共30页。此外，由于此外，由于HbHb重氮试剂反应形成的产重氮试剂反应形成的产物可破坏偶氮胆红素，溶血对重氮法测定物可破坏偶氮
8、胆红素，溶血对重氮法测定胆红素同时胆红素同时(tngsh)(tngsh)存在负向干扰，使存在负向干扰，使测定结果偏低，但该作用较轻微，因此溶测定结果偏低，但该作用较轻微，因此溶血后由于血后由于HbHb对测定结果的干扰，对测定结果的干扰，TBILTBIL的测的测定结果往往偏高。定结果往往偏高。第10页/共30页第十一页，共30页。（二）溶血（二）溶血（二）溶血（二）溶血(rn xu)(rn xu)(rn xu)(rn xu)对血脂测定的影响对血脂测定的影响对血脂测定的影响对血脂测定的影响1 1、总胆固醇（、总胆固醇（TCTC）试试 验验 表表 明明 如如 果果 溶溶 血血 标标 本本 中中HbH
9、b1.5g1.5gL L无无干干扰扰(gnro)(gnro)；而而高高浓浓度度时时因因HbHb的的固固有有颜颜色色干干扰扰(gnro)(gnro)，会会使结果偏高。使结果偏高。第11页/共30页第十二页，共30页。2 2、甘油三酯（、甘油三酯（TGTG）除去上述除去上述(shngsh)(shngsh)如总胆固醇影如总胆固醇影响因素外，目前所用甘油磷酸氧化酶响因素外，目前所用甘油磷酸氧化酶过氧化物酶法和乙酰丙醇显色法都以测过氧化物酶法和乙酰丙醇显色法都以测量甘油为基础，而红细胞膜磷脂可被磷量甘油为基础，而红细胞膜磷脂可被磷脂酶作用，产生游离甘油，所以溶血后脂酶作用，产生游离甘油，所以溶血后测定结
10、果偏高。测定结果偏高。第12页/共30页第十三页，共30页。3 3、载脂蛋白、载脂蛋白A(APOA)A(APOA)及载脂蛋及载脂蛋(APOB)(APOB)免疫透射比浊法使用最广泛，以免疫透射比浊法使用最广泛，以抗原抗体为基础，血红蛋白可使测定抗原抗体为基础，血红蛋白可使测定结果升高，故标本结果升高，故标本(biobn)(biobn)溶血后溶血后测定结果偏高。测定结果偏高。第13页/共30页第十四页，共30页。（三）溶血对肾功能测定（三）溶血对肾功能测定（三）溶血对肾功能测定（三）溶血对肾功能测定(cdng)(cdng)(cdng)(cdng)的影响的影响的影响的影响1 1、尿素（、尿素（URE
11、A)UREA)无无论论是是二二乙乙酰酰肟肟法法还还是是脲脲酶酶法法，溶溶血血均均可可导导致致光光谱谱蓝蓝色色部部分分吸吸光光度度(gungd)(gungd)值值升升高高对对结结果果都都有有干扰，导致结果偏高。干扰，导致结果偏高。第14页/共30页第十五页，共30页。2 2、尿酸、尿酸(UA)(UA)试试 验验 表表 明明 如如 果果(rgu)(rgu)溶溶 血血 标标 本本 中中HbHb1g1gL L会会干干扰扰；是是因因为为测测定定波波长长546mm546mm时时因因HbHb固固有有颜颜色色潜潜在在影影响响使使测测定定结结果果偏高偏高(比色法比色法)。第15页/共30页第十六页，共30页。3
12、 3、肌酐（、肌酐（CreCre）苦味酸法测定苦味酸法测定CreCre的特异性较差，易受的特异性较差，易受其它还原性物质影响，主要其它还原性物质影响，主要(zhyo)(zhyo)是维是维生素生素C C、酮体、丙酮酸等假肌酐干扰。假肌、酮体、丙酮酸等假肌酐干扰。假肌酐物质亦可与苦味酸形成颜色反应，导致酐物质亦可与苦味酸形成颜色反应，导致测定值发生偏差。这种假肌酐物质红细胞测定值发生偏差。这种假肌酐物质红细胞中最多，血清中较少，故溶血后红细胞中中最多，血清中较少，故溶血后红细胞中假肌酐物质的释放是造成测定值发生偏差假肌酐物质的释放是造成测定值发生偏差的主要的主要(zhyo)(zhyo)原因。原因。
13、第16页/共30页第十七页，共30页。溶血溶血(rn xu)(rn xu)释放出的物质导致释放出的物质导致JaffeJaffe反应反应 而致测定结果的升高。而致测定结果的升高。JaffeJaffe反反应指血浆中的肌酐与碱性苦味酸盐反应，应指血浆中的肌酐与碱性苦味酸盐反应，生成黄红色的苦味酸肌酐复合物的反应。生成黄红色的苦味酸肌酐复合物的反应。第17页/共30页第十八页，共30页。（四）溶血（四）溶血（四）溶血（四）溶血(rn xu)(rn xu)(rn xu)(rn xu)对电解质测定的影响对电解质测定的影响对电解质测定的影响对电解质测定的影响1 1、钾（、钾（K+K+）细细胞胞内内液液的的主
14、主要要阳阳离离子子，约约9898的的钾钾存存于于细细胞胞内内，红红细细胞胞内内钾钾浓浓度度约约为为105mmol/L105mmol/L，而而血血清清中中仅仅有有3.5mmol/L3.5mmol/L5.4mmol/L5.4mmol/L，红红细细胞胞中中钾钾的的含含量量比比血血清清中中高高2323倍倍。因因此此(ync)(ync)溶溶血血造造成成血血清清钾钾明明显显升升高高，增增高高主主要要来来源源于于红红细细胞胞内内钾钾的的大量释放。大量释放。第18页/共30页第十九页，共30页。有有报报道道表表明明血血清清游游离离血血红红蛋蛋白白在在2.52.52.8g/L2.8g/L时时血血清清钾钾增增高高
15、14%14%16%16%，血血清清游游离离血血红红蛋蛋白白达达6.6g/L6.6g/L时时血血清清钾钾增增高高可可达达41%41%，所所以以应应在在样样品品采采集集后后1h1h内内应应将将红红细细胞胞与与血血清清分分离离。并并且且(bngqi)(bngqi)在在分分析析血血清清钾的结果时应引起高度注意。钾的结果时应引起高度注意。第19页/共30页第二十页，共30页。2 2、氯（、氯（CL-CL-）血浆中氯约为血浆中氯约为103mmol/L103mmol/L，红细，红细胞中氯约为胞中氯约为4954mmol/L4954mmol/L。溶血会导。溶血会导致致(dozh)(dozh)细胞内的氯离子转移到
16、血细胞内的氯离子转移到血清中，从而引起了血清氯离子测定值清中，从而引起了血清氯离子测定值的升高的升高第20页/共30页第二十一页，共30页。3 3、磷（、磷（P P）实验表明如果溶血标本中实验表明如果溶血标本中HbHb1g/L1g/L影响很小，而在影响很小，而在HbHb等于等于(dngy)2.8g(dngy)2.8gL L时影响较大，时影响较大，所以应在采血后所以应在采血后30min30min内分离血细胞，内分离血细胞，否则会因磷酸酯从否则会因磷酸酯从RBCRBC中释放而会使中释放而会使结果偏高。结果偏高。第21页/共30页第二十二页，共30页。（五）溶血（五）溶血（五）溶血（五）溶血(rn
17、xu)(rn xu)(rn xu)(rn xu)对葡萄糖测定的影响对葡萄糖测定的影响对葡萄糖测定的影响对葡萄糖测定的影响葡萄糖葡萄糖(GLU)(GLU)葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖氧化酶法测定GLUGLU的特异性较的特异性较强，干扰物较少，但过氧化氢酶易受到其强，干扰物较少，但过氧化氢酶易受到其它物质的影响，如维生素它物质的影响，如维生素C C、谷胱苷肽均、谷胱苷肽均因能竞争因能竞争H2O2H2O2而导致负偏差，样品中某些而导致负偏差，样品中某些强的酶会促使强的酶会促使GLUGLU降解而导致测定值明显降解而导致测定值明显下降的。如果在血清或血浆加入下降的。如果在血清或血浆加入(jir)NaF(ji
18、r)NaF、KFKF作为酵解抑制剂样品收集作为酵解抑制剂样品收集后立即去蛋白时，溶血样品也可以用。后立即去蛋白时，溶血样品也可以用。第22页/共30页第二十三页，共30页。（六）溶血对心肌（六）溶血对心肌（六）溶血对心肌（六）溶血对心肌(xnj)(xnj)(xnj)(xnj)酶谱测定的影响酶谱测定的影响酶谱测定的影响酶谱测定的影响 由于由于LDH LDH、HBDHHBDH在红细胞内的含量皆在红细胞内的含量皆明显高于胞外，故溶血后结果都升高，虽明显高于胞外，故溶血后结果都升高，虽然红细胞中不含然红细胞中不含CK CK，但含有，但含有(hn yu)(hn yu)大大量的腺苷酸激酶量的腺苷酸激酶(A
19、K)(AK)，可干扰测定，可干扰测定CK CK 的的偶联法的反应体系，人为地引起偶联法的反应体系，人为地引起CKCK结果的结果的升高。升高。第23页/共30页第二十四页，共30页。三、标本三、标本三、标本三、标本(biobn)(biobn)(biobn)(biobn)溶血的原因溶血的原因溶血的原因溶血的原因1 1、环环境境温温度度变变化化(binhu)(binhu)，气气温温较较低低时时血血清清不不易易分分离离，标标本本需需经经多多次次离离心，离心后容易出现溶血现象。心，离心后容易出现溶血现象。2 2、标标本本运运送送过过程程中中导导致致碰碰撞撞，从从而而使离心后也会出现溶血现象。使离心后也会
20、出现溶血现象。3 3、采采血血量量不不足足，相相对对低低渗渗抗抗凝凝导导致致溶血。溶血。第24页/共30页第二十五页，共30页。4 4、特特殊殊人人群群如如肥肥胖胖者者、小小孩孩等等血血管管不不易易找找到到或或太太细细导导致致抽抽血血时时多多次次操操作作或或压压迫迫时间过长也会引起溶血现象。时间过长也会引起溶血现象。5 5、针针头头过过细细或或抽抽血血速速度度过过快快，负负压压太太大大，红红细细胞胞通通过过针针尖尖(zhn(zhn jin)jin)时时破破坏坏而而溶溶血。血。第25页/共30页第二十六页，共30页。四、溶血标本四、溶血标本四、溶血标本四、溶血标本(biobn)(biobn)(b
21、iobn)(biobn)的处理的处理的处理的处理1 1、主主动动与与临临床床联联系系，结结合合临临床床首首先先排排除除体体内内溶溶血血的的可可能能，若若不不是是(b(b shi)shi)体体内内溶溶血血，建建议议重重新新采采取取标标本本，否否则则应应在在检检验验报报告告单单上上注注明明“标标本本溶溶血血”，以提醒临床医生注意，以提醒临床医生注意.2 2、利利用用溶溶血血指指数数变变化化值值，根根据据各各项项目目的的回回归归方方程程，对对易易受受溶溶血血影影响响的的ASTAST、CKCK、CK-MBCK-MB、LDH,LDH,K+K+的的测测定定结结果果进进行行部部分分纠纠正正，尤尤其其对对轻轻
22、中中度度溶溶血血效效果果较较好好，但但对对重重度度溶溶血血标标本本则则应应重重新新复复查。查。第26页/共30页第二十七页，共30页。3 3、从从方方法法学学上上克克服服或或减减少少溶溶血血的的干干扰扰(gnro)(gnro)，如如通通过过设设置置样样品品空空白白或或改改用用双双波波长长比比色色、导导数数分分光光光光度度法法和和动动力力学学方方法法，对对参参与与分分析析法法化化学学反反应应的的溶溶血血干干扰扰(gnro)(gnro)，改改进进试剂组配试剂组配第27页/共30页第二十八页，共30页。五、如何避免五、如何避免(bmin)(bmin)溶血溶血1 1、掌握采集血液标本的正确方法、掌握采集血液标本的正确方法2 2、颠颠倒倒混混匀匀采采血血管管时时动动作作应应轻轻柔柔，不要过分振荡。不要过分振荡。3 3、妥妥善善保保存存标标本本，血血液液标标本本不不可可存存放放于于冰冰箱箱(bngxing)(bngxing)冷冷冻冻室室，避免融化后引起溶血。避免融化后引起溶血。第28页/共30页第二十九页，共30页。第29页/共30页第三十页，共30页。