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1、与生活的联系：与生活的联系：烧伤病人的治疗通烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来请同学们想一想如何来治疗该病人？治疗该病人？2.2 2.2 动物细胞工程动物细胞工程动物细胞培养动物细胞培养动物细胞融合动物细胞融合单克隆抗体单克隆抗体动物细胞核移植动物细胞核移植动物动物细胞细胞工程工程常用常用技术技术最基础的是最基础的是 动物细胞培养技术动物细胞培养技术（一）学习目标：（一）学习目标：（一）学习目标：（一）学习目标：（二）学习重点（二）学
2、习重点（二）学习重点（二）学习重点：（三）学习（三）学习（三）学习（三）学习难点难点难点难点：2.2 2.2 2.2 2.2 动物细胞工程动物细胞工程动物细胞工程动物细胞工程1 1 1 1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用。、简述动物细胞培养的过程、条件及应用。、简述动物细胞培养的过程、条件及应用。、简述动物细胞培养的过程、条件及应用。2 2 2 2、简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应、简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应、简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应、简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应 用前景。用前景。用前景。用前景。3 3 3 3、举例
3、说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。、举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。、举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。、举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。1 1 1 1、动物细胞培养的过程及条件。、动物细胞培养的过程及条件。、动物细胞培养的过程及条件。、动物细胞培养的过程及条件。2 2 2 2、用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。、用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。、用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。、用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。3 3 3 3、单克隆抗体的制备和应用。、单克隆抗体的制备和应用。、单克隆抗体的制备和应用。、单克隆抗体的制备和应
4、用。1 1 1 1、用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。、用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。、用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。、用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。2 2 2 2、单克隆抗体的制备过程。、单克隆抗体的制备过程。、单克隆抗体的制备过程。、单克隆抗体的制备过程。2.2.1 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术学习目标一：动物细胞培养学习目标一：动物细胞培养 就是从动物机体中取出相关的组织，就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。养基中，让这些细胞生
5、长和增殖。2 2、原理：、原理：1 1、概念：、概念：动物细胞培养的原理：动物细胞培养的原理：植物组织培养植物组织培养的原理的原理：细胞增殖细胞增殖细胞的全能性细胞的全能性如何进行动物细胞培养呢如何进行动物细胞培养呢?阅读阅读阅读阅读P44P44P44P44最后一段最后一段最后一段最后一段P46P46P46P46第一段相关内容第一段相关内容第一段相关内容第一段相关内容注意关键词注意关键词注意关键词注意关键词:细胞贴壁、接触抑制、原代培养、传代培养细胞贴壁、接触抑制、原代培养、传代培养细胞贴壁、接触抑制、原代培养、传代培养细胞贴壁、接触抑制、原代培养、传代培养合作探究合作探究1 11 1 1 1
6、、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？2 2 2 2、如何将动物组织分散成单个的细胞？、如何将动物组织分散成单个的细胞？、如何将动物组织分散成单个的细胞？、如何将动物组织分散成单个的细胞？3 3 3 3、胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明细胞间的物质、胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明细胞间的物质、胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明细胞间的物质、胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明细胞间的物质 主要是什么成分？主要是什么成分？主要是什么成分？主要是什么成分？4
7、 4 4 4、培养瓶或培养皿的内表面为何要光滑、无毒？、培养瓶或培养皿的内表面为何要光滑、无毒？、培养瓶或培养皿的内表面为何要光滑、无毒？、培养瓶或培养皿的内表面为何要光滑、无毒？5 5 5 5、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增 殖？殖？殖？殖？取幼龄动物的器官或组织取幼龄动物的器官或组织取幼龄动物的器官或组织取幼龄动物的器官或组织剪碎组织剪碎组织剪碎组织剪碎组织胰蛋白酶处理胰蛋白酶处理胰蛋白酶处理胰蛋白酶处理细胞培细胞培细胞培细胞培养养养养单个细胞单个
8、细胞单个细胞单个细胞(一一)动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程:1 1 1 1、选材：、选材：、选材：、选材：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，这些细胞动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，这些细胞动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，这些细胞动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，这些细胞增殖增殖增殖增殖 能力强，有丝分裂旺盛，分化程度低，容易培养能力强，有丝分裂旺盛，分化程度低，容易培养能力强，有丝分裂旺盛，分化程度低，容易培养能力强，有丝分裂旺盛，分化程度低，容易培养。2 2 2 2、分散成单个细胞、分散成单个细胞、分散成单个细胞、分散成单个细胞在进行动物细胞培养时，用在进行动物细胞培养时，用在进行动物细胞
9、培养时，用在进行动物细胞培养时，用 分散细胞，分散细胞，分散细胞，分散细胞，说明细胞间的物质主要是说明细胞间的物质主要是说明细胞间的物质主要是说明细胞间的物质主要是 。(一一)动物细胞培养的过程：动物细胞培养的过程：（P50 P50 P50 P50 思考与探究思考与探究思考与探究思考与探究1 1 1 1）蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶 分散成单个细胞便于从培养液中获得营养，排出代分散成单个细胞便于从培养液中获得营养，排出代分散成单个细胞便于从培养液中获得营养，排出代分散成单个细胞便于从培养液中获得营养，排出代谢废物，利于继续培养。谢废物，利于继续培养。谢废物，利于继续
10、培养。谢废物，利于继续培养。思考：思考：思考：思考：1 1 1 1、为什么要将组织块分散成单个细胞培养？、为什么要将组织块分散成单个细胞培养？、为什么要将组织块分散成单个细胞培养？、为什么要将组织块分散成单个细胞培养？2 2 2 2、胰蛋白酶处理组织时要注意什么问题？、胰蛋白酶处理组织时要注意什么问题？、胰蛋白酶处理组织时要注意什么问题？、胰蛋白酶处理组织时要注意什么问题？能够用胃蛋白酶代替吗？能够用胃蛋白酶代替吗？能够用胃蛋白酶代替吗？能够用胃蛋白酶代替吗？控制好消化时间，太长会消化细胞膜上的蛋白质；控制好消化时间，太长会消化细胞膜上的蛋白质；控制好消化时间，太长会消化细胞膜上的蛋白质；控制
11、好消化时间，太长会消化细胞膜上的蛋白质；不能，因为两者的最适不能，因为两者的最适不能，因为两者的最适不能，因为两者的最适PHPHPHPH不同，而正常组织细胞的不同，而正常组织细胞的不同，而正常组织细胞的不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适生存环境与胰蛋白酶的最适生存环境与胰蛋白酶的最适生存环境与胰蛋白酶的最适PHPHPHPH较接近。较接近。较接近。较接近。3 3 3 3、动物细胞培养能否最终培养成新个体？、动物细胞培养能否最终培养成新个体？、动物细胞培养能否最终培养成新个体？、动物细胞培养能否最终培养成新个体？不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能不能，动物细胞培养只能使细胞数目
12、增多，不能不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体。发育成新的动物个体。发育成新的动物个体。发育成新的动物个体。P443 3、动物细胞生长特性：、动物细胞生长特性：要求：要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。易于贴附。（1 1）细胞贴壁：）细胞贴壁：将细胞悬液置于适宜环境中培将细胞悬液置于适宜环境中培养，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁养，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。上，称为细胞贴壁。（2 2）细胞的接触抑制）细胞的接触抑制当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细当贴
13、壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。接触抑制。（1 1）原代培养）原代培养通常将动物组织消化后的通常将动物组织消化后的初次培养初次培养称为原代培养。称为原代培养。（2 2）传代培养）传代培养 将贴满瓶壁的细胞重新用将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶胰蛋白酶处理，处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程称为传代培养。培养过程称为传代培养。相关概念：相关概念：4 4、动物细胞培养过程：、动物细胞培养过程：动物胚胎或幼龄动动物胚胎或幼龄动动物胚胎或幼龄动动物胚胎或幼龄
14、动物的组织、器官物的组织、器官物的组织、器官物的组织、器官10101010代细胞代细胞代细胞代细胞 原代培养原代培养原代培养原代培养50505050代细胞代细胞代细胞代细胞传代培养传代培养传代培养传代培养无限传代无限传代无限传代无限传代胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶单个细胞单个细胞单个细胞单个细胞细胞悬浮液细胞悬浮液细胞悬浮液细胞悬浮液加加加加培养液培养液培养液培养液细胞株细胞株细胞株细胞株遗传物质遗传物质遗传物质遗传物质未改变未改变未改变未改变细胞系细胞系细胞系细胞系遗传物质遗传物质遗传物质遗传物质已改变已改变已改变已改变，具有癌细胞的特具有癌细胞的特具有癌细胞的特具有癌细胞的特点，失去接
15、触抑点，失去接触抑点，失去接触抑点，失去接触抑制。制。制。制。P49P49讨论讨论2 2：用于核移植的供体细胞一般都选用用于核移植的供体细胞一般都选用传传1010代以内的细胞，想一想，这是为什么？代以内的细胞，想一想，这是为什么？提示：提示：培养的动物细胞一般当传代至培养的动物细胞一般当传代至10105050代代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，其细左右时，部分细胞核型可能会发生变化，其细胞核遗传物质可能会发生突变。而胞核遗传物质可能会发生突变。而1010代以内的代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。细胞一般能保持正常的二倍体核型。思考：体外培养的动物细胞需要什么条件？思考：体外培养的动物
16、细胞需要什么条件？（二）动物细胞培养条件：（二）动物细胞培养条件：无菌、无毒无菌、无毒 的环境的环境 温度和温度和pH 36.50.5；7.2-7.4 气体环境：气体环境：主要有主要有主要有主要有O O2 2和和和和COCO2 2（95%95%空气空气 +5%CO+5%CO2 2 ）保证细胞保证细胞保证细胞保证细胞的正常生的正常生的正常生的正常生长增殖长增殖长增殖长增殖营养营养（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无 机盐、微量元素、动物血清等。）机盐、微量元素、动物血清等。）机盐、微量元素、动物血清等。）
17、机盐、微量元素、动物血清等。）无菌处理无菌处理无菌处理无菌处理添加一定量的抗生素添加一定量的抗生素添加一定量的抗生素添加一定量的抗生素定期更换培养液定期更换培养液定期更换培养液定期更换培养液P46P46旁栏思考题旁栏思考题 ：为什么对动物细胞进行为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？培养时通常要添加血清？血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等多种营养，还含有其他活性糖、激素等多种营养，还含有其他活性物质，可以补充合成培养基中缺乏的物物质，可以补充合成培养基中缺乏的物质，质，保证细胞的正常生长增殖。保证细胞的正常生长增殖。植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组
18、织培养和动物细胞培养的比较比较项目比较项目比较项目比较项目植物组织培养植物组织培养植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养动物细胞培养动物细胞培养原理原理原理原理培养基性质培养基性质培养基性质培养基性质培养基特有成分培养基特有成分培养基特有成分培养基特有成分培养结果培养结果培养结果培养结果培养目的培养目的培养目的培养目的相同点相同点相同点相同点细胞的全能性细胞的全能性细胞的全能性细胞的全能性细胞增殖细胞增殖细胞增殖细胞增殖固体培养基固体培养基固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基液体培养基液体培养基蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素葡萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖,动物
19、血清动物血清动物血清动物血清快速繁殖、快速繁殖、快速繁殖、快速繁殖、培育无病毒植株培育无病毒植株培育无病毒植株培育无病毒植株获得细胞或细获得细胞或细获得细胞或细获得细胞或细胞的产物胞的产物胞的产物胞的产物都有糖、氨基酸、促生长因子、都有糖、氨基酸、促生长因子、都有糖、氨基酸、促生长因子、都有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等无机盐、微量元素等无机盐、微量元素等无机盐、微量元素等植物体植物体植物体植物体细胞群体细胞群体细胞群体细胞群体(三三)动物细胞培养技术的应用动物细胞培养技术的应用、生产生物制品、生产生物制品如：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。如：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。、与
20、基因工程相结合、与基因工程相结合、用于有毒物质的检测、用于有毒物质的检测、用于生理、病理、药理等方面的研究。、用于生理、病理、药理等方面的研究。利用动物细胞核移植技术利用动物细胞核移植技术思考：根据动物细胞核仍具有全能性的特点，思考：根据动物细胞核仍具有全能性的特点，怎样让动物细胞的全能性表达？怎样让动物细胞的全能性表达？理论基础：理论基础：动物的细胞核具有全能性动物的细胞核具有全能性学习目标二：动物体细胞核移植技术和克隆动物学习目标二：动物体细胞核移植技术和克隆动物学习目标二：动物体细胞核移植技术和克隆动物学习目标二：动物体细胞核移植技术和克隆动物2 2 2 2、核移植、核移植、核移植、核移
21、植 种类种类种类种类胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植（易）（易）（易）（易）体细胞核移植体细胞核移植体细胞核移植体细胞核移植（难）（难）（难）（难）1 1、概念：、概念：P47P47因为卵母细胞体积大，易操作，细胞质中含有因为卵母细胞体积大，易操作，细胞质中含有促使细胞核表达全能性的物质和营养。促使细胞核表达全能性的物质和营养。为什么要选择为什么要选择MM期的卵母细胞做受体细胞？期的卵母细胞做受体细胞？受体细胞受体细胞受体细胞受体细胞（MMMM中中中中期的卵母细胞）期的卵母细胞）期的卵母细胞）期的卵母细胞）多多利利与与“母母亲亲”3 3、体细胞核移植的过程、体细胞核移植
22、的过程克克隆隆羊羊多多利利培培育育过过程程细胞核移植细胞核移植细胞核移植细胞核移植重组细胞重组细胞重组细胞重组细胞电脉冲刺激电脉冲刺激电脉冲刺激电脉冲刺激早期胚胎早期胚胎早期胚胎早期胚胎胚胎移植胚胎移植胚胎移植胚胎移植另另另另一只绵羊的子宫一只绵羊的子宫一只绵羊的子宫一只绵羊的子宫妊娠、出生妊娠、出生妊娠、出生妊娠、出生克隆羊多利克隆羊多利克隆羊多利克隆羊多利黑面绵羊去黑面绵羊去黑面绵羊去黑面绵羊去核卵母细胞核卵母细胞核卵母细胞核卵母细胞白面绵羊乳白面绵羊乳白面绵羊乳白面绵羊乳腺细胞核腺细胞核腺细胞核腺细胞核通过显微操通过显微操通过显微操通过显微操作技术取出作技术取出作技术取出作技术取出细胞核
23、细胞核细胞核细胞核阅阅阅阅读读读读课课课课本本本本P48P48P48P48内内内内容容容容（MMMM卵母细胞）卵母细胞）卵母细胞）卵母细胞）减数第二次分裂中期减数第二次分裂中期减数第二次分裂中期减数第二次分裂中期去核的卵母细胞去核的卵母细胞去核的卵母细胞去核的卵母细胞供体细胞注入供体细胞注入供体细胞注入供体细胞注入去核卵母细胞去核卵母细胞去核卵母细胞去核卵母细胞激活受体细胞，激活受体细胞，激活受体细胞，激活受体细胞，完成分裂、发完成分裂、发完成分裂、发完成分裂、发育育育育胚胎移植胚胎移植胚胎移植胚胎移植代孕牛子宫代孕牛子宫代孕牛子宫代孕牛子宫克隆牛克隆牛克隆牛克隆牛3 3 3 3、核移植过程：
24、、核移植过程：、核移植过程：、核移植过程：3 3、严格来说新个体含有卵母细胞的细胞质，所、严格来说新个体含有卵母细胞的细胞质，所 以具有以具有两个亲本的性状，但主要性状与供核两个亲本的性状，但主要性状与供核 个体相似。个体相似。归归 纳纳:1 1、共分成两大阶段：、共分成两大阶段：核移植和胚胎移植核移植和胚胎移植2 2、取卵母细胞作受体细胞的、取卵母细胞作受体细胞的原因原因是是:因为卵母细胞体积大，易操作，细胞质中含有因为卵母细胞体积大，易操作，细胞质中含有促使细胞核表达全能性的物质和营养。促使细胞核表达全能性的物质和营养。P49P49【讨论讨论】1 1、为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来
25、为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞。自有重要利用价值的动物提供的体细胞。P49P49【讨论讨论】3 3、不是，克隆动物绝大部分不是，克隆动物绝大部分DNADNA来自供体细胞核，来自供体细胞核，但核外还有少部分但核外还有少部分DNADNA（如线粒体（如线粒体DNADNA）来自）来自受体卵母细胞。此外，还会受到不同环境的受体卵母细胞。此外，还会受到不同环境的影响。影响。练习：下列有关克隆的叙述，不正确的是练习：下列有关克隆的叙述，不正确的是A A、生物体通过体细胞进行的无性繁殖、生物体通过体细胞进行的无性繁殖 B B、将某种瘤细胞体外培养繁殖成大量细胞、将某种
26、瘤细胞体外培养繁殖成大量细胞C C、扦插和嫁接实质上也是克隆、扦插和嫁接实质上也是克隆 D D、将鸡的某个、将鸡的某个DNADNA片段整合到小鼠的片段整合到小鼠的DNADNA中中D克隆：克隆：是通过无性繁殖的方法产生出来的一群是通过无性繁殖的方法产生出来的一群 遗传特性相同的遗传特性相同的DNADNA分子、细胞或个体。分子、细胞或个体。4 4、体细胞核移植技术应用前景、体细胞核移植技术应用前景5 5、体细胞核移植技术存在的问题：、体细胞核移植技术存在的问题：成功率低成功率低 克隆动物存在健康问题克隆动物存在健康问题 克隆动物食品的安全性问题存有争议克隆动物食品的安全性问题存有争议 加速家畜遗传
27、改良进程，促进优良畜群繁育；加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育；保护濒危物种，增加存活数量；保护濒危物种，增加存活数量；克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白；克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白；可以作为异种移植的供体；可以作为异种移植的供体；可以用于组织器官的移植可以用于组织器官的移植动物细胞培养一般动物细胞培养一般不需不需经过脱分化过程。经过脱分化过程。因因高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的能力。发育成完整个体的能力。所以，动物细胞没所以，动物细胞没有脱分化过程。要想使培养的动物细胞定向有脱分化过程。要想使培养的动物细胞定向分化
28、，通常采用分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使其定向诱导动物干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。分化成所需要的组织或器官。P50P50思考与探究思考与探究22、(1)(1)(1)(1)利用卢辛达的体细胞克隆的奶牛其遗传物质基本上利用卢辛达的体细胞克隆的奶牛其遗传物质基本上利用卢辛达的体细胞克隆的奶牛其遗传物质基本上利用卢辛达的体细胞克隆的奶牛其遗传物质基本上 全部来自该奶牛，克隆牛具有高产的遗传基础。全部来自该奶牛，克隆牛具有高产的遗传基础。全部来自该奶牛，克隆牛具有高产的遗传基础。全部来自该奶牛，克隆牛具有高产的遗传基础。P50P50思考与探究思考与探究33、(2)(2)(2)(2)首先从
29、卢辛达耳朵上剪取一小块组织，在体外培首先从卢辛达耳朵上剪取一小块组织，在体外培首先从卢辛达耳朵上剪取一小块组织，在体外培首先从卢辛达耳朵上剪取一小块组织，在体外培养获得该组织的细胞。从屠宰场取废弃的牛卵巢，抽养获得该组织的细胞。从屠宰场取废弃的牛卵巢，抽养获得该组织的细胞。从屠宰场取废弃的牛卵巢，抽养获得该组织的细胞。从屠宰场取废弃的牛卵巢，抽取卵母细胞体外培养成熟。用显微针去除卵母细胞的取卵母细胞体外培养成熟。用显微针去除卵母细胞的取卵母细胞体外培养成熟。用显微针去除卵母细胞的取卵母细胞体外培养成熟。用显微针去除卵母细胞的核，再将耳细胞注入卵母细胞，用电刺激方法使卵母核，再将耳细胞注入卵母细
30、胞，用电刺激方法使卵母核，再将耳细胞注入卵母细胞，用电刺激方法使卵母核，再将耳细胞注入卵母细胞，用电刺激方法使卵母细胞与体细胞融合，这时供体核就进入了受体卵母细细胞与体细胞融合，这时供体核就进入了受体卵母细细胞与体细胞融合，这时供体核就进入了受体卵母细细胞与体细胞融合，这时供体核就进入了受体卵母细胞，再用电刺激或化学物质激活卵母细胞，使其完成胞，再用电刺激或化学物质激活卵母细胞，使其完成胞，再用电刺激或化学物质激活卵母细胞，使其完成胞，再用电刺激或化学物质激活卵母细胞，使其完成减数分裂和发育过程。核移植胚胎在减数分裂和发育过程。核移植胚胎在减数分裂和发育过程。核移植胚胎在减数分裂和发育过程。核移植胚胎在体外体外体外体外短时间培养短时间培养短时间培养短时间培养后，挑选正常卵裂的胚胎植入经同期发情处理的受体后，挑选正常卵裂的胚胎植入经同期发情处理的受体后，挑选正常卵裂的胚胎植入经同期发情处理的受体后，挑选正常卵裂的胚胎植入经同期发情处理的受体母牛体内。母牛体内。母牛体内。母牛体内。