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1、在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确第五章 发酵过程控制在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确10016时间典型的典型的细细菌生菌生长长曲曲线线abcda适应期（迟滞期）适应期（迟滞期）b对数生长期期对数生长期期c稳定期稳定期(平稳期）平稳期）d死亡期（衰老期）死亡期（衰老期）ab菌体生长阶段菌体生长阶段c产物合成阶段产物合成阶段d菌体自溶阶段菌体自溶阶段在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题
2、也很明确第一节、发酵过程的主要控制参数第一节、发酵过程的主要控制参数（一）物理参数（一）物理参数1温度（温度（）发酵整个过程或不同阶段中所维持的温度。发酵整个过程或不同阶段中所维持的温度。影响酶反应速率、氧在培养液中的溶解度与传递影响酶反应速率、氧在培养液中的溶解度与传递速率、菌体生长速率和产物合成速率速率、菌体生长速率和产物合成速率2压力（压力（Pa）发酵过程中发酵罐维持的压力发酵过程中发酵罐维持的压力,罐内维持正压可罐内维持正压可以防止外界空气中的杂菌侵入，以防止外界空气中的杂菌侵入，保证纯种的培养保证纯种的培养,间接影响菌体代谢。一般维持在间接影响菌体代谢。一般维持在0.21050.51
3、05Pa。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确3搅拌转速（搅拌转速（rmin）搅拌转速是指搅拌器在发酵过程中的转动速度，搅拌转速是指搅拌器在发酵过程中的转动速度，通常以每通常以每1min的转数来表示。的转数来表示。它的大小与氧在发酵液中的传递速率与发酵液的它的大小与氧在发酵液中的传递速率与发酵液的均匀性有关。均匀性有关。4搅拌功率（搅拌功率（kw）指搅拌器搅拌时所消耗的功率，常指每指搅拌器搅拌时所消耗的功率，常指每1m3发酵发酵液所消耗的功率（液所消耗的功率（kwm3）。）。它的大小与氧容量传递系数有关。它的大小与氧容量传
4、递系数有关。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确5空气流量空气流量V（Vmin），简称），简称VVM每每1min内每单性体积发酵液通入空气的体积，内每单性体积发酵液通入空气的体积，也是需氧发酵的控制参数。也是需氧发酵的控制参数。与氧的传递和其他控制参数有关。一般控制在与氧的传递和其他控制参数有关。一般控制在0.51.0V（Vmin）范围内。）范围内。6粘度（粘度（Pas）粘度大小可以作为细胞生长或细胞形态的一项粘度大小可以作为细胞生长或细胞形态的一项标志，也能反映发酵罐中菌丝分裂过程的情况。标志，也能反映发酵罐中菌丝分裂过
5、程的情况。通常用表观粘度表示之：它的大小可改变氧传递通常用表观粘度表示之：它的大小可改变氧传递的阻力。的阻力。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确7浊度（）浊度（）浊度是能及时反映单细胞生长状况的参数，浊度是能及时反映单细胞生长状况的参数，对某些产品的生产是极其重要的参数。一般采对某些产品的生产是极其重要的参数。一般采用分光光度计的波长用分光光度计的波长420660 nm测量。浊度测量。浊度对氨基酸、核苷酸等产品的生产是极其重要的。对氨基酸、核苷酸等产品的生产是极其重要的。8.料液流量（料液流量（Lmin）这是控制流体进料
6、的参数。这是控制流体进料的参数。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（二）化学参数（二）化学参数1 pH（酸碱度）（酸碱度）发酵液的发酵液的pH是发酵过程中各种产酸和产碱的是发酵过程中各种产酸和产碱的生化反应的综合结果。生化反应的综合结果。它是发酵工艺控制的重要参数之一。它的高它是发酵工艺控制的重要参数之一。它的高低与菌体生长和产物合成有着重要的关系。低与菌体生长和产物合成有着重要的关系。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确2基质浓度（基质浓度（g或或
7、mg）是指发酵液中糖、氮、磷等重要营养物质的是指发酵液中糖、氮、磷等重要营养物质的浓度。浓度。它们的变化对产生菌的生长和产物的合成有它们的变化对产生菌的生长和产物的合成有着重要的影响，也是提高代谢产物产量的重着重要的影响，也是提高代谢产物产量的重要控制手段。要控制手段。在发酵过程中，必须定时测定糖（还原糖和在发酵过程中，必须定时测定糖（还原糖和总糖）、氮（氨基氮或氨氮）等基质的浓度。总糖）、氮（氨基氮或氨氮）等基质的浓度。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确3溶解氧浓度溶解氧浓度10-6（ppm）或饱和度（）或饱和度（）溶
8、解氧是需氧菌发酵的必备条件。溶解氧是需氧菌发酵的必备条件。利用溶氧浓度的变化，可了解产生菌对氧利用的利用溶氧浓度的变化，可了解产生菌对氧利用的规律，反映发酵的异常情况，也可作为发醉中间规律，反映发酵的异常情况，也可作为发醉中间控制的参数及设备供氧能力的指标。控制的参数及设备供氧能力的指标。溶氧浓度一般用绝对含量（溶氧浓度一般用绝对含量（10-6）来表示、有时）来表示、有时也用在相同条件下，氧在培养液中饱和浓度表示。也用在相同条件下，氧在培养液中饱和浓度表示。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确4产物的浓度产物的浓度g（u）
9、ml 这是发酵产物产量高低或合成代谢正常与否的重这是发酵产物产量高低或合成代谢正常与否的重要参数，也是决定发酵周期长短的根据。要参数，也是决定发酵周期长短的根据。5废气中的氧含量（）废气中的氧含量（）废气中的氧含量与产生菌的摄氧率和供氧系数废气中的氧含量与产生菌的摄氧率和供氧系数有关。有关。从废气中的从废气中的O2的含量可以算出产生菌的摄氧率的含量可以算出产生菌的摄氧率和发酵罐的供氧能力。和发酵罐的供氧能力。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确6废气中的废气中的CO2浓度（）浓度（）废气中的废气中的CO2就是产生菌呼吸放出
10、的就是产生菌呼吸放出的CO2。测定。测定它可以算出产生菌的呼吸熵，从而了解产生菌的它可以算出产生菌的呼吸熵，从而了解产生菌的呼吸代谢规律。呼吸代谢规律。.氧化还原电位（氧化还原电位（mV)也是影响微生物生长及其生化活性的因素之一。也是影响微生物生长及其生化活性的因素之一。对微生物，培养基最适宜和所允许的最大电位值，对微生物，培养基最适宜和所允许的最大电位值，应与微生物本身的种类和生理状态有关。应与微生物本身的种类和生理状态有关。其他化学参数：其他化学参数：DNA、RNA、生物合成的酶等。、生物合成的酶等。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所
11、提出的问题也很明确（三）生物参数（三）生物参数1菌丝形态菌丝形态 丝状菌发酵过程中菌丝形态的改变是生化代谢丝状菌发酵过程中菌丝形态的改变是生化代谢变化的反映。变化的反映。一般都以菌丝形态作为衡量种子质量、区分发一般都以菌丝形态作为衡量种子质量、区分发酵阶段、控制发酵过程的代谢变化和决定发酵周酵阶段、控制发酵过程的代谢变化和决定发酵周期的依据之一。期的依据之一。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确2菌体浓度菌体浓度 菌体浓度简称菌浓，是控制微生物发酵的重要参菌体浓度简称菌浓，是控制微生物发酵的重要参数之一。数之一。大小和变化
12、速度对菌体的生化反应都有影响大小和变化速度对菌体的生化反应都有影响在生产上，常常根据菌体浓度来决定适合的补料在生产上，常常根据菌体浓度来决定适合的补料量和供氧量，以保证生产达到顶期的水平。量和供氧量，以保证生产达到顶期的水平。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（发酵液的菌体量和单位时间的菌浓、溶氧浓度、（发酵液的菌体量和单位时间的菌浓、溶氧浓度、糖浓度、氮浓度和产物浓度等的变化值）糖浓度、氮浓度和产物浓度等的变化值）计算计算 （菌体的比生长速率、氧比消耗速率、糖比消耗速（菌体的比生长速率、氧比消耗速率、糖比消耗速率、氮比
13、消耗速率和产物比生产速率）率、氮比消耗速率和产物比生产速率）（控制产生菌的代谢、决定补料和供氧工艺条件）（控制产生菌的代谢、决定补料和供氧工艺条件）研究研究 发酵动力学发酵动力学（三）发酵参数在发酵过程控制中的作用（三）发酵参数在发酵过程控制中的作用在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确u由此可见，取得发酵过程中正确可靠的各种数由此可见，取得发酵过程中正确可靠的各种数据是研究动力学的前提。遗憾的是现有的能直接据是研究动力学的前提。遗憾的是现有的能直接从发酵罐中测量的参数不多，还难于做到把许多从发酵罐中测量的参数不多，还难于做
14、到把许多有用的参数就地通过传感方式变成各种输出信号。有用的参数就地通过传感方式变成各种输出信号。u目前较常测定的参数有温度、罐压、空气流量、目前较常测定的参数有温度、罐压、空气流量、搅拌转速、搅拌转速、pH、溶氧、效价、糖含量、前体、溶氧、效价、糖含量、前体(如如苯乙酸苯乙酸)浓度、菌体浓度浓度、菌体浓度(干重、离心压缩细胞体干重、离心压缩细胞体积积%)等。不常测定的参数有氧化还原电位、粘度、等。不常测定的参数有氧化还原电位、粘度、排气中的排气中的O2和和CO2含量等。含量等。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确 发酵过程
15、各参数概况发酵过程各参数概况参数名称参数名称测试方法测试方法意义、主要作用意义、主要作用温度温度传感器传感器维持生长、合成维持生长、合成罐压罐压压力表压力表维持正压、增加维持正压、增加DO空气流量空气流量传感器传感器供氧排泄废气提高供氧排泄废气提高KL搅拌转速搅拌转速传感器传感器物料混合、提高物料混合、提高KLpH酸度计酸度计反映反映pH、KL在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确第二节、发酵过程控制第二节、发酵过程控制 一、温度变化及控制一、温度变化及控制1.温度对发酵的影响温度对发酵的影响（1）影响各种酶反应的速率和蛋白
16、质的性质。）影响各种酶反应的速率和蛋白质的性质。在一定范围内，随着温度的升高，酶反应速率也在一定范围内，随着温度的升高，酶反应速率也增加，但有一个最适温度，超过这个温度，酶的催化增加，但有一个最适温度，超过这个温度，酶的催化活力就下降。温度对菌体生长的酶反应和代谢产物合活力就下降。温度对菌体生长的酶反应和代谢产物合成的酶反应的影响不同。成的酶反应的影响不同。如产黄青霉菌体的最适生长温度为如产黄青霉菌体的最适生长温度为30，黑曲酶的黑曲酶的最适生长温度为最适生长温度为37度度在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（2）温度还能
17、改变菌种代谢产物的合成方）温度还能改变菌种代谢产物的合成方向，向，细胞生长和代谢产物积累的最适温度也细胞生长和代谢产物积累的最适温度也往往是不同的。往往是不同的。例如，青霉素产生菌的生长最适温度为例如，青霉素产生菌的生长最适温度为30度，而产生青霉素的最适温度为度，而产生青霉素的最适温度为25度；度；（3）影响发酵液的物理性质。）影响发酵液的物理性质。发酵液的粘度、基质和氧在发酵液中的溶发酵液的粘度、基质和氧在发酵液中的溶解度和传递速率、某些基质的分解和吸收速解度和传递速率、某些基质的分解和吸收速率等。率等。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深
18、，所提出的问题也很明确2.最适温度的选择最适温度的选择（1）根据菌种及生长阶段选择）根据菌种及生长阶段选择前期菌量少，取稍高的温度，使菌生长迅速；前期菌量少，取稍高的温度，使菌生长迅速；中期菌量已达到合成产物的最适量，发酵需要延长中期菌量已达到合成产物的最适量，发酵需要延长中期，从而提高产量，因此温度要稍低一些，可以中期，从而提高产量，因此温度要稍低一些，可以推迟衰老。因为在稍低温度下氨基酸合成蛋白质和推迟衰老。因为在稍低温度下氨基酸合成蛋白质和核酸的正常途径关闭得比较严密有利于产物合成。核酸的正常途径关闭得比较严密有利于产物合成。后期产物合成能力降低，延长发酵周期没有必要，后期产物合成能力降
19、低，延长发酵周期没有必要，就又提高温度，刺激产物合成到放罐。就又提高温度，刺激产物合成到放罐。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确如：如：四环素生长阶段四环素生长阶段280C，合成期，合成期260C后期再升温；后期再升温；黑曲霉生长黑曲霉生长370C，产糖化酶，产糖化酶32340C。最适温度选择要根据菌种与发酵阶段做试验。最适温度选择要根据菌种与发酵阶段做试验。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（2 2）根据培养条件选择）根据培养条件选择温度选择还要
20、根据培养条件综合考虑，灵活选择。温度选择还要根据培养条件综合考虑，灵活选择。通气条件差时可适当降低温度，使菌呼吸速率降低通气条件差时可适当降低温度，使菌呼吸速率降低些，溶氧浓度也可髙些。些，溶氧浓度也可髙些。培养基稀薄时，温度也该低些。因为温度高营养利培养基稀薄时，温度也该低些。因为温度高营养利用快，会使菌过早自溶。用快，会使菌过早自溶。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（3 3）根据菌生长情况）根据菌生长情况生长快的菌种，维持在较高温度时间要短些；生生长快的菌种，维持在较高温度时间要短些；生长慢的菌种，维持较高温度时间
21、可长些。培养条件长慢的菌种，维持较高温度时间可长些。培养条件适宜，如营养丰富，通气能满足，那么前期温度可适宜，如营养丰富，通气能满足，那么前期温度可髙些，以利于菌的生长。髙些，以利于菌的生长。总的来说，温度的选择根据菌种生长阶段及培养总的来说，温度的选择根据菌种生长阶段及培养条件综合考虑。要通过反复实践来定出最适温度。条件综合考虑。要通过反复实践来定出最适温度。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确 3.发酵热的产生和控制发酵热的产生和控制 （1）生物热（）生物热（Q生物生物）：）：产生菌在生长繁殖产生菌在生长繁殖过程中产生
22、的热能。过程中产生的热能。生物热与发酵类型有关生物热与发酵类型有关微生物进行有氧呼吸产生的热比厌氧发酵产生的热多微生物进行有氧呼吸产生的热比厌氧发酵产生的热多一摩尔葡萄糖彻底氧化成一摩尔葡萄糖彻底氧化成CO2和水和水好氧：产生好氧：产生287.2千焦耳热量，千焦耳热量，183千焦耳转变为高能化合物千焦耳转变为高能化合物 104.2千焦以热的形式释放千焦以热的形式释放厌氧：产生厌氧：产生22.6千焦耳热量，千焦耳热量，9.6千焦耳转变为高能化合物千焦耳转变为高能化合物 13千焦以热的形式释放千焦以热的形式释放l生物热的大小，还与菌种和培养基成分等不同而变化。生物热的大小，还与菌种和培养基成分等不
23、同而变化。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（2）搅拌热（）搅拌热（Q搅拌搅拌）：搅拌器转动引起的液体）：搅拌器转动引起的液体之间和液体与设备之间的摩擦所产生的热量。之间和液体与设备之间的摩擦所产生的热量。搅拌热与搅拌轴功率有关，可用下式计算：搅拌热与搅拌轴功率有关，可用下式计算：Q搅拌搅拌P8604186.8（焦耳（焦耳/小时）小时）（3）蒸发热（）蒸发热（Q蒸发蒸发）：空气进入发酵罐与发酵）：空气进入发酵罐与发酵液广泛接触后，引起水分蒸发所需的热能。液广泛接触后，引起水分蒸发所需的热能。（4）辐射热（）辐射热（Q辐射
24、辐射）：由于罐外壁和大气间的）：由于罐外壁和大气间的温度差异而使发酵液中的部分热能通过罐体向温度差异而使发酵液中的部分热能通过罐体向大气辐射的热量。大气辐射的热量。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确Q发酵发酵=Q生物生物+Q搅拌搅拌Q蒸发蒸发Q辐射辐射发酵过程中，发酵液温度变化取发酵过程中，发酵液温度变化取决于上面几个因素决于上面几个因素：总的来说抗生素发酵是一个放热过程。总的来说抗生素发酵是一个放热过程。对温度通过冷却进行控制。对温度通过冷却进行控制。l夹套夹套l冷却蛇管冷却蛇管在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问
25、题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确二、二、pH的影响与控制的影响与控制 1.pH对发酵的影响对发酵的影响 (1)(1)发酵过程中微生物的正常生长需要有一定的发酵过程中微生物的正常生长需要有一定的pH值，不同的微生物对值，不同的微生物对PH值的要求也是不同值的要求也是不同的。的。酵酵 母：母：pH 3.8pH 3.86.06.0细细 菌：菌：pH 6.5pH 6.57.57.5霉霉 菌：菌：pH 4.0pH 4.05.85.8放线菌：放线菌：pH 6.5pH 6.58.08.0在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深
26、，所提出的问题也很明确(2)影响酶的活性，当影响酶的活性，当pH值抑制菌体中某些酶值抑制菌体中某些酶的活性时，会阻碍菌体的新陈代谢；的活性时，会阻碍菌体的新陈代谢；(3)影响微生物细胞膜所带电荷的状态，改变细影响微生物细胞膜所带电荷的状态，改变细胞膜的通透性，影响微生物对营养物质的吸收胞膜的通透性，影响微生物对营养物质的吸收和代谢产物的排泄；和代谢产物的排泄；(4)pH值不同，往往引起菌体代谢过程的不同，值不同，往往引起菌体代谢过程的不同，使代谢产物的质量和比例发生改变。使代谢产物的质量和比例发生改变。酿酒酵母酿酒酵母pHpH：4.5-5.04.5-5.03 3，乙醇，乙醇 发酵发酵pHpH：
27、8.08.0，甘油发酵，甘油发酵在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确 2.2.影响影响pHpH值变化的因素值变化的因素菌体本身具有一定的调整周围环境菌体本身具有一定的调整周围环境pHpH值，构建最值，构建最适适pHpH值的能力。值的能力。（1 1）基质代谢）基质代谢 糖代谢：糖代谢：C源过多，糖分解成小分子酸、醇，使源过多，糖分解成小分子酸、醇，使pH下降。糖缺乏，下降。糖缺乏，pH上升，是补料的标志之一上升，是补料的标志之一氮代谢：当氨基酸中的氮代谢：当氨基酸中的-NH2被利用后被利用后pH会下降；会下降；尿素被分解成尿
28、素被分解成NH3，pH上升，上升，NH3利用后利用后pH下降，下降，当碳源不足时氮源当碳源利用当碳源不足时氮源当碳源利用pH上升。上升。生理酸碱性物质利用后生理酸碱性物质利用后pH会上升或下降会上升或下降在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（2 2）产物形成）产物形成 某些产物本身呈酸性或碱性，使发酵液某些产物本身呈酸性或碱性，使发酵液pH变化。变化。如有机酸类产生使如有机酸类产生使pH下降，红霉素、洁霉素、下降，红霉素、洁霉素、螺旋霉素等抗生素呈碱性，使螺旋霉素等抗生素呈碱性，使pH上升。上升。（3 3）菌体自溶）菌体自
29、溶，pH上升，发酵后期，上升，发酵后期，pH上升。上升。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确 3.3.发酵过程中发酵过程中pHpH值的调节及控制值的调节及控制（1）发酵发酵pH值的确定值的确定一般是在一般是在58之间，上限之间，上限8.5，下限，下限2.5随菌种和产品不同而不同。同一菌种，生长最适随菌种和产品不同而不同。同一菌种，生长最适pH值可能与产物合成的最适值可能与产物合成的最适pH值是不一样的。值是不一样的。按发酵过程的不同阶段分别控制不同的按发酵过程的不同阶段分别控制不同的pH，使产，使产量最大。量最大。在整堂课
30、的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确例例 pH对林可霉素发酵的影响对林可霉素发酵的影响 林林可可霉霉素素发发酵酵开开始始，葡葡萄萄糖糖转转化化为为有有机机酸酸类类中中间间产产物物，发发酵酵液液pHpH下下降降，待待有有机机酸酸被被生生产产菌菌利利用用，pHpH上上升升。若若不不及及时时补补糖糖、酸酸，发发酵酵液液pHpH可可迅迅速速升升到到8.08.0以以上上，阻阻碍碍或或抑抑制制某某些些酶酶系系，使林可霉素增长缓慢，甚至停止。使林可霉素增长缓慢，甚至停止。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯
31、度，由浅入深，所提出的问题也很明确 （2 2）发酵）发酵pHpH的控制：的控制：调整基础培养基：适当调整调整基础培养基：适当调整C/NC/N比，或加入产酸比，或加入产酸或产碱物料或产碱物料作用有限作用有限 补料控制：可直接补加酸、碱性物质补料控制：可直接补加酸、碱性物质 一般加生理性酸碱一般加生理性酸碱 pH低：补尿素、氨水低：补尿素、氨水 pH高：硫酸氨高：硫酸氨 加生理性酸碱，即可调节加生理性酸碱，即可调节pH,同时补充营养。同时补充营养。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确三、溶氧的影响和控制三、溶氧的影响和控制1.
32、定义：定义：溶氧（溶氧（DO）指溶解在发酵液中的氧。单位指溶解在发酵液中的氧。单位ppmppm(毫克毫克分子分子/升）升）2.DO对发酵的影响对发酵的影响 DO不足不足：微生物代谢异常，产量下降，菌体过：微生物代谢异常，产量下降，菌体过早衰老死亡；早衰老死亡；DO太多太多：发酵液泡沫过多，抑制产物生产，同：发酵液泡沫过多，抑制产物生产，同时空气消耗增加。时空气消耗增加。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确3.溶氧（溶氧（DO）的判断的判断 一般发酵液的一般发酵液的DO范围在范围在20-25ppm,在菌体在菌体生长阶段及产物
33、合成阶段氧的需求最大，生长阶段及产物合成阶段氧的需求最大，DO表表现最低。而菌体进入衰老自溶阶段后，现最低。而菌体进入衰老自溶阶段后，DO的浓的浓度会逐步升高。度会逐步升高。4.DO的测定：的测定：溶氧电极传感器（氧化还原反应）溶氧电极传感器（氧化还原反应）5.DO的控制：搅拌转速的控制：搅拌转速-搅拌器搅拌器 通气速率通气速率 在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确四、四、泡沫的影响与控制泡沫的影响与控制一、泡沫的性质及对发酵的影响一、泡沫的性质及对发酵的影响1.产生原因：产生原因：2.泡沫的性质：泡沫的性质：发酵液液面上
34、的泡沫，气相所占的比例特别大，与发酵液液面上的泡沫，气相所占的比例特别大，与液体有较明显的界限，如发酵前期的泡沫；液体有较明显的界限，如发酵前期的泡沫；发酵液中的泡沫，又称流态泡沫，分散在发酵液中，发酵液中的泡沫，又称流态泡沫，分散在发酵液中，比较稳定，与液体之间无明显的界限。比较稳定，与液体之间无明显的界限。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确l使发酵罐的装填系数减少；使发酵罐的装填系数减少；l造成大量逃液，导致产
35、物的损失，增加了染菌的造成大量逃液，导致产物的损失，增加了染菌的机会；机会；l氧传递减弱；氧传递减弱；l使微生物菌体提早自溶，降低发酵物产量。使微生物菌体提早自溶，降低发酵物产量。3.对发酵的影响：对发酵的影响：在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确4.4.泡沫的控制泡沫的控制泡沫的控制，可以采用三种途径：泡沫的控制，可以采用三种途径：（1 1）调整培养基中的成分调整培养基中的成分(如少加或缓加易起如少加或缓加易起泡的原材料泡的原材料)或改变某些物理化学参数或改变某些物理化学参数(如如pHpH值、温度、通气和搅拌值、温度、通
36、气和搅拌)或者改变发酵工艺或者改变发酵工艺(如采用分次投料如采用分次投料)来控制，以减少泡沫形成来控制，以减少泡沫形成的机会。但这些方法的效果有一定的限度。的机会。但这些方法的效果有一定的限度。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（2）机械消沫机械消沫靠机械引起的强烈振动或压力的变化促使气泡破裂。靠机械引起的强烈振动或压力的变化促使气泡破裂。罐内消沫法：在搅拌轴上方装消沫桨，通过消沫罐内消沫法：在搅拌轴上方装消沫桨，通过消沫 桨转动打碎泡沫。桨转动打碎泡沫。罐外消沫法：将泡沫引出罐外，通过喷嘴的加速罐外消沫法：将泡沫引出罐
37、外，通过喷嘴的加速 作用或利用离心力来消除泡沫。作用或利用离心力来消除泡沫。优点：不需加入外界物料，可节省原料，减少污染优点：不需加入外界物料，可节省原料，减少污染 杂菌的机会。杂菌的机会。缺点：消沫效果不理想，仅可作为辅助的消沫方缺点：消沫效果不理想，仅可作为辅助的消沫方 法。法。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（3）消沫剂消沫（化学消沫）消沫剂消沫（化学消沫）-最常用，有效最常用，有效u化学消泡剂的要求（或化
38、学消泡剂的特点）化学消泡剂的要求（或化学消泡剂的特点）化学消泡剂必须是表面活性剂，具有较低的表面张化学消泡剂必须是表面活性剂，具有较低的表面张力，消泡作用迅速有效；力，消泡作用迅速有效；具有一定的亲水性，以使消泡剂对气具有一定的亲水性，以使消泡剂对气液界面的分液界面的分散系数足够大，从而迅速发挥消泡活性；散系数足够大，从而迅速发挥消泡活性；在水中的溶解度必须较大，以保持持久的消泡或抑在水中的溶解度必须较大，以保持持久的消泡或抑泡性能；泡性能；对人、畜及微生物细胞无毒性；对人、畜及微生物细胞无毒性；应不影响氧在培养液的溶解和传递；应不影响氧在培养液的溶解和传递；必须来源方便、广泛，价格便宜。必须
39、来源方便、广泛，价格便宜。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确常用的消沫剂主要有常用的消沫剂主要有天然油脂类，高碳醇、脂肪天然油脂类，高碳醇、脂肪酸和酯类，聚醚类，硅酮酸和酯类，聚醚类，硅酮类类4大类。大类。（1）天然油脂类：玉米油、米糠油、豆油、松）天然油脂类：玉米油、米糠油、豆油、松子油、菜子油、鱼油、猪油等。子油、菜子油、鱼油、猪油等。优点：来源比较丰富，价格比较低廉，在发酵中优点：来源比较丰富，价格比较低廉，在发酵中不仅用于消沫，还可以作为供产生菌利用的碳源不仅用于消沫，还可以作为供产生菌利用的碳源和中间控制的手段
40、。和中间控制的手段。缺点：分子中无亲水基，在发泡介质中难铺展，缺点：分子中无亲水基，在发泡介质中难铺展，消泡活性差。并且油的成本和折粮单耗都比较高消泡活性差。并且油的成本和折粮单耗都比较高且用量大，已逐渐被合成消沫剂取代。且用量大，已逐渐被合成消沫剂取代。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（2）高碳醇和酯类：十八醇、聚乙二醇、）高碳醇和酯类：十八醇、聚乙二醇、苯乙酸酯类（苯乙酸乙酯、苯乙酸丁酯、苯乙酸酯类（苯乙酸乙酯、苯乙酸丁酯、苯乙酸月桂醇酯）、苯乙醇、苯乙醇油苯乙酸月桂醇酯）、苯乙醇、苯乙醇油酸酯等。酸酯等。多适用于
41、丝状真菌发酵。多适用于丝状真菌发酵。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（3）聚醚类。）聚醚类。聚氧丙烯甘油：亲水性差，在发沫介质中溶解度小。聚氧丙烯甘油：亲水性差，在发沫介质中溶解度小。抑泡性能优于消泡性能。适用于稀薄发酵液。抑泡性能优于消泡性能。适用于稀薄发酵液。聚氧乙烯氧丙烯甘油：亲水性好，在发沫介质中易聚氧乙烯氧丙烯甘油：亲水性好，在发沫介质中易铺展，消沫能力强。相应的溶解度大，消沫活性持铺展，消沫能力强。相应的溶解度大，消沫活性持续时间短。适用于粘稠发酵液的消沫。续时间短。适用于粘稠发酵液的消沫。聚醚类优点：聚醚
42、类优点：性能稳定、使用简便、易控制、用量性能稳定、使用简便、易控制、用量少、成本低。少、成本低。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（4）硅酮类：聚二甲基硅氧烷及其衍生物。）硅酮类：聚二甲基硅氧烷及其衍生物。适用于微碱性细菌发酵。适用于微碱性细菌发酵。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确消沫剂消沫优缺点：消沫剂消沫优缺点：优点：效果好，较机械消沫作用迅速，尤其是优点：效果好，较机械消沫作用迅速，尤其是化学合成消沫剂用量少。化学合成消沫剂用量少。缺点：消
43、沫剂使用不当时对菌的生长代谢有干缺点：消沫剂使用不当时对菌的生长代谢有干扰；发酵过程中经常添加消沫剂增加原材料单扰；发酵过程中经常添加消沫剂增加原材料单耗；设备不严密时增加染菌机会；残留的消沫耗；设备不严密时增加染菌机会；残留的消沫剂可能造成提炼上的麻烦。剂可能造成提炼上的麻烦。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确五、五、罐压的影响与控制罐压的影响与控制1、罐压的影响和作用、罐压的影响和作用 罐压影响二氧化碳和氧气的溶解度；罐压影响二氧化碳和氧气的溶解度；影响微生物的生长；影响微生物的生长；防止发酵污染。防止发酵污染。2、
44、罐压的控制、罐压的控制 控制罐压方法一般为调节空气进口阀门或排气控制罐压方法一般为调节空气进口阀门或排气出口阀门的开启度，改变进入或排出气体的流量、出口阀门的开启度，改变进入或排出气体的流量、维持工艺所需的压力。维持工艺所需的压力。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确六、基质及菌体浓度的影响及其控制六、基质及菌体浓度的影响及其控制（一）（一）碳源浓度（碳源浓度（糖含量糖含量）变化及其控制）变化及其控制 1.培养基中的碳源培养基中的碳源快速利用碳源（如葡萄糖）快速利用碳源（如葡萄糖）能较迅速地参与代谢，合成菌体和产生能量，并
45、能较迅速地参与代谢，合成菌体和产生能量，并产生分解产物（如丙酮酸等）产生分解产物（如丙酮酸等）,有利于菌体生长。有利于菌体生长。慢速利用碳源慢速利用碳源为菌体缓慢利用，有利于延长代谢产物的合成，为菌体缓慢利用，有利于延长代谢产物的合成，特别有利于延长抗生索的分泌期。特别有利于延长抗生索的分泌期。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确For 青霉素：青霉素：现象：在迅速利用的葡萄糖培养基中，菌体生长良现象：在迅速利用的葡萄糖培养基中，菌体生长良好，但青霉素合成量很少；相反，在缓慢利用的乳好，但青霉素合成量很少；相反，在缓慢利用
46、的乳糖培养基中，青霉素的产量明显增加。但发酵周期糖培养基中，青霉素的产量明显增加。但发酵周期很长。很长。工业中常以较低的浓度和慢速利用碳源一起组工业中常以较低的浓度和慢速利用碳源一起组成基础培养基中的混合碳源，供菌体生长用。成基础培养基中的混合碳源，供菌体生长用。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确2.糖含量的测定糖含量的测定 总糖（单总糖（单.双双.多糖）：取样多糖）：取样水解（酸）水解（酸）测测定定 还原糖：直接测定还原糖：直接测定3.糖的调控：定期测定糖含量，特别还原糖含量。糖的调控：定期测定糖含量，特别还原糖含量。
47、目的：可间接反映菌丝生长反之及产物合成等情目的：可间接反映菌丝生长反之及产物合成等情况。做为补糖的依据。况。做为补糖的依据。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（二）氨基氮（氮源）的调控（二）氨基氮（氮源）的调控1.培养基中氮源的种类培养基中氮源的种类迅速利用的氮源：迅速利用的氮源：氨基氨基(或铵或铵)态氮的氨基酸态氮的氨基酸(或硫或硫酸铵等酸铵等)和玉米浆等；容易被菌体所利用，促进菌体生和玉米浆等；容易被菌体所利用，促进菌体生长，但对某些代谢产物的合成，特别是某些抗生素的长，但对某些代谢产物的合成，特别是某些抗生素的合成
48、产生调节作用，影响产量。合成产生调节作用，影响产量。缓慢利用的氮源：缓慢利用的氮源：黄豆饼粉、花生饼粉、棉子饼粉黄豆饼粉、花生饼粉、棉子饼粉等蛋白质。延长次级代谢产物的生产期、提高产物的等蛋白质。延长次级代谢产物的生产期、提高产物的产量。一次投入全量容易促进菌体生长和养分过早耗产量。一次投入全量容易促进菌体生长和养分过早耗尽，以致菌体早衰自溶，缩短产物的生产期。尽，以致菌体早衰自溶，缩短产物的生产期。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确3.测氮目的：测氮目的：氮源的含量及消耗可直接反映菌丝体的生氮源的含量及消耗可直接反映菌
49、丝体的生长状况。长状况。4.氮的测定：氮的测定：取样取样加热或加碱加热或加碱除氨气除氨气测氮测氮2.生产上采用的方法：生产上采用的方法：设计发酵培养基：选用含有快速利用和设计发酵培养基：选用含有快速利用和慢速利用的混合氮源。慢速利用的混合氮源。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（三）菌丝浓度及浊度（三）菌丝浓度及浊度1.菌丝浓度定义：即单位体积培养液中菌丝菌丝浓度定义：即单位体积培养液中菌丝体的数量。体的数量。2.菌丝浓度变化的意义菌丝浓度变化的意义发酵前期：从孢子到菌丝浓度最大发酵前期：从孢子到菌丝浓度最大菌丝浓度菌丝
50、浓度。发酵中期：稳定期，菌丝浓度变化不大发酵中期：稳定期，菌丝浓度变化不大发酵后期：菌体衰老死亡发酵后期：菌体衰老死亡菌丝浓度菌丝浓度意义：通过菌丝浓度的变化可以判断和了解意义：通过菌丝浓度的变化可以判断和了解发酵周期发酵周期在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确3.菌丝浓度测定：菌丝浓度测定：湿重法：发酵液湿重法：发酵液过滤过滤 吸水吸水称重称重干重法：发酵液干重法：发酵液过滤过滤 吸水吸水干燥恒重干燥恒重体积法：发酵液体积法：发酵液离心离心 体积百分数（常用方法）体积百分数（常用方法）浊度法：与浓度成正比，测定浊度法：与