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1、生物选修生物选修 3 3 知识点知识点专题专题 1 1 基因工程基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过_ ,赋予生物以_,创造出_。基因工程 是在 _上进行设计和施工的,又叫做_。(一)基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”_ (1)来源:主要是从_中分离纯化出来的。 (2)功能:能够识别双链 DNA 分子的某种_ _ _的核苷酸序列, 并且使每一条链中 _ _ _部位的两个核苷酸之间的 _断开,因此具有_ 性。 (3)结果:经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式: _ _ _和 _ _ _2.“分子缝合针”_ (1)两种 DNA 连接酶( 和
2、)的比较 : 相同点:都缝合_ _键。 区别:EcoliDNA 连接酶来源于_ _,只能将双链 DNA 片段互 补的_ 之间的磷酸二酯键连接起来;而 T4DNA 连接酶能缝 合_ ,但连接平末端的之间的效率较_ _ 。 (2)与 DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将_ _加到已有的核 苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA 连接酶是连接_ _ 的末端,形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”_ _ (1)载体具备的条件:_。 _。 _。 (2)最常用的载体是_ _,它是一种裸露的、结构简单的、独立于 ,并具有_ 能力的_ _DNA 分子。 (3)其它载体:_ _(二)基因工程的基本操作程序
3、 第一步:_ _ _ 1.目的基因是指: 。 2.原核基因采取 获得,真核基因是_ _。人工合成 目的基因的常用方法有_ _ _和_ _。 3.PCR 技术扩增目的基因 (1)原理:_ _(2)过程:第一步:加热至 9095使_ _;第二步:冷 却到 5560,_ _;第三步:加热至 7075,热稳 定 酶从 起始互补链的合成。 第二步:_ _ 1.目的:使目的基因在受体细胞中_ _ _,并且可以 ,使目的基因能够 。 2.组成:_ _ _ _ _ (1)启动子:是一段有特殊结构的 ,位于基因的_ _, 是_ _ _酶识别和结合的部位,能驱动基因 , 最终获得所需的 。 (2)终止子:也是一段
4、有特殊结构的 ,位于基因的 。 (3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中 ,从而 将 筛选出来。常用的标记基因是_ _。 第三步:_ 1.转化的概念:是 进入 内,并且在受体细胞内 _ _和_ _的过程。 2.常用的转化方法: 将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是 _ _,其次还 有_ _和 _ _等 。 将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是 。此方法 的受体细胞多是 _ _。 将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是 、 、 ,最常用的原核细胞是 _,其转化方法是 先用 _ _ _处理细胞,使其成为 _ ,再将 _ _ 溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感
5、受态细胞吸收 DNA 分 子,完成转化过程。 3.重组细胞导入受体细胞后,筛选 含含 的依据是 。 第四步:_ _ 1.首先要检测 上是否插入了 ,方法是采用_ _ _ 2.其次还要检测 _,方法是采用 作探针与 杂交杂交。 3.最后检测 ,方法是从转基因生物中提取 ,用相应 的 _ _进行_。 4.有时还需进行 水平的鉴定。如 。(四)蛋白质工程的概念 蛋白质工程是指以 的结构规律及其生物功能的关系的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通 过_ _,对现有蛋白质进行 ,或制造一种 _,以满足人类的生产和生活的需求。(基因工程在原则上只能生产基因工程在原则上只能生产 的蛋白质的蛋白质)A 为_
6、 B 为 。 专题专题 2 2 细胞工程细胞工程 (一)植物细胞工程 1.理论基础(原理):_ 全能性表达的难易程度受精卵生殖细胞胚胎干细胞干细胞体细胞 1 4 2 5 3 排序排序_ _ _ 植物细胞植物细胞_动物细胞动物细胞(大于或小于) 2.植物组织培养技术 ( ) ( ) (1)过程:离体离体的植物器官、组织或细胞 ( ( ) ) 试管苗 植物体 (2)用途:微型繁殖、微型繁殖、_、_、_、细胞产物的工、细胞产物的工 厂化生产厂化生产。 (3)地位:是培育转基因植物转基因植物、_ _培育植物新品种的最后一道 工序。 3.3.植物体细胞杂交技术植物体细胞杂交技术 (1)过程:(2)诱导融
7、合的方法:物理法包括 等。 化学法一般是用_ _作为 诱导剂。 (3)意义:_ _ _ _ (二)动物细胞工程1. 动物细胞培养 (1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的 ,将它分散成_ _ _,然后放在适宜的_中,让这些细胞 。(2)动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织动物胚胎或幼龄动物的器官或组织 )剪碎用_ _处理分散成_制成_ _转入培养瓶中进行_培养贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋 白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_培养。 (3)细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就 ,称 为_。细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面_ _时,细胞就会 ,
8、这种现象称为_ 。 (4)动物细胞培养需要满足以下条件 的环境的环境:培养液应进行_处理。通常还要在培养液中添加一 定 量的_,以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液,防止 _。 营养营养:合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。 通常需加入_ _等天然成分。 温度温度:适宜温度:哺乳动物多是 36.536.50.50.5 ;pH:7.27.27.47.4 。 气体环境气体环境:95% 5% 。O2是_ _所必 需的,CO2的主要作用是_ (5)动物细胞培养技术的应用:制备病毒疫苗、制备病毒疫苗、_、检测有毒物质、检测有毒物质、 培养医学研究的各种细胞。培养医学研究的
9、各种细胞。 2.动物体细胞核移植技术和克隆动物 (1)哺乳动物核移植可以分为_核移植(比较容易)和_核 移植(比较难)。 (2)选用去核卵卵( (母母) )细胞细胞的原因:卵(母)细胞_;卵(母) 细胞 。 (3)体细胞核移植的大致过程是:为_为_。 b (4)体细胞核移植技术的应用: 加速家畜加速家畜 改良进程,促进良畜群繁育;改良进程,促进良畜群繁育; 保护保护 物种,物种, 增大存活数量;增大存活数量;生产珍贵的生产珍贵的 ; 作为作为 的供的供 体;体; 用于用于 的移植等的移植等。 (5)体细胞核移植技术存在的问题:克隆动物存在着 问题、表现 缺陷等。 3.动物细胞融合 (1)动物细
10、胞融合也称_,是指两个或多个动物细胞结合形成一个 细胞的过程。融合后形成的具有原来 细胞遗传信息的单核 细胞,称为_ (2)动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的 方法与植物原生质体融合的方法类似,常用的诱导因素有_、 、 等。 (3)动物细胞融合的意义:克服了_,成为研究 、 、肿瘤和生物生物新品种培育、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。 (4)动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较: 比项目细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用法 植物体 细胞杂 交细胞膜的流动 性去除细胞壁后 诱导原生质体 融合离心、电刺 激、振动, 聚乙二醇等 试剂诱导克服了远缘杂 交的不亲和性,
11、获得杂种植株动物细 胞融合细胞膜的流动 性使细胞分散后 诱导细胞融合植物细胞杂 交,灭活的 病毒诱导制备单克隆抗 体的技术之一4.单克隆抗体 (1)抗体:一个 B 淋巴细胞只分泌一_ _。从血清中分离出 的抗体 、 、 。 (2)单克隆抗体的制备过程: (3)杂交瘤细胞的特点:既能_ _,又能产生_ _ 。 (4)单克隆抗体的优点:_ _。 (5)单克隆抗体的作用: 作为诊断试剂作为诊断试剂 :准确识别各种 物质的细微差异,并跟 发生特异性结合,具有 、 、 、 的优点。 用于治疗疾病和运载药物用于治疗疾病和运载药物 :主要用于治疗 ,可制成 “ ”,也有少量用于治疗其它疾病。 专题专题 3
12、3 胚胎工程胚胎工程 (一)动物胚胎发育的基本过程(一)动物胚胎发育的基本过程 1、胚胎工程是指对动物_所进行的多种显微操作和处理 技术,如_、_、_ _、_等技术。 经过处理后获得的 ,还需移植到_生产后代,以满足人 类的各种需求。 2、动物胚胎发育的基本过程 (1)受精场所是母体的_。 (2)卵裂期:特点:细胞有丝有丝分裂,细胞数量不断增加,但胚胎的总体体积_ _。 (3)桑椹胚:特点:胚胎细胞数目达到 32 个左右时,胚胎形成致密的细胞团 ,形似桑椹。是_(全能或者已分化)细胞(全能或者已分化)细胞。(4)囊 胚:特点:细胞开始出现_(该时期细胞的_)。聚 集在胚胎一端个体较大的细胞称为
13、_,将来发 育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为_。 (5)原肠胚:特点:有了_ _ _(几层)胚层(几层)胚层的分化,具有 腔 和 腔。(二)胚胎干细胞 1、哺乳动物的胚胎干细胞简称 ES 或 EK 细胞,来源于_ 中分离出来。 2、具有胚胎细胞的特性,在形态上表现为_小,_大,_ _明显;在功能上,具有发育的发育的 ,可分化为成年动物体可分化为成年动物体 内任何一种组织细胞内任何一种组织细胞。另外,在体外培养的条件下,可以 而不 发生 ,可进行 保存,也可进行 。 3、胚胎干细胞的主要用途是: 可用于研究哺乳动物 ; 是在体外条件下研究 的理想材料,在培养液中加入 , 如牛黄酸等化学物质时,
14、就可以诱导 ES 细胞向不同类型的组织细胞分化,这 为揭示 的机理提供了有效的手段; 可以用于治疗人类的某些人类的某些 ,如帕金森综合症、少年糖尿病等; 利用可以被诱导分化形成新的新的 的特性,移植 ES 细胞可使坏死或退坏死或退 化化的部位得以修复并恢复正常功能; 随着组织工程技术的发展,通过 ES 细胞 ,定向培育 出_ _,用于_ _ _ _,解决供体器官不足和器官移 植后_ _的问题。 (三)胚胎工程的应用 1.体外受精和胚胎的早期培养 (1)卵母细胞的采集和培养: 主要方法:用_处理,使其排出更多的卵子,然后,从_ 中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。第二种方法:从刚屠宰母畜的屠
15、宰母畜的 中采集卵母细胞;第三种方法是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从 _中吸取卵母细胞。采集的卵母细胞,都要在体外经 后, 才能与 受精。 (2) 精子的采集和获能:在体外受精前,要对精子进行_处理。 (3) 受精:获能的精子和培养成熟的卵细胞在 _溶液或专专用用的的 溶液中完成受精过程。 (4)胚胎的早期培养:精子与卵子在体外受精后,应将受精卵移入 中继续培养,以检查_ _和和_。培养液 成分较复杂,除一些无机盐和有机盐外,还需添加 、 、 、 等营养成分, 以及_等物质。当胚胎发育到适宜的阶段时,可 将其取出向_ 。不同动物胚胎移植的时 间不同。(牛、羊一般要培育到_ _ _或或_ _
16、_ 阶段才能进行移植,小鼠、家兔等实验动物可在 的的阶段阶段移植,人的体外受精胚胎可在 阶段移 植。) 2.胚胎移植 (1)胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及其它方式得到的 胚胎,移植到_其它雌性动物的体内,使之继续发育为 新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“_“_ ”,接受胚胎的个体称 为“_”“_”。(供体为优良优良品种,作为受体的雌性动物应为常见或存量大常见或存量大的 品种。) 地位:如转基因、核移植,或体外受精转基因、核移植,或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎 ,都必须经过_才能获得后代,是胚胎工程的最后一道胚胎工程的最后一道“工序工序 ”。 (2) 胚胎
17、移植的意义:大大缩短了_,充分发挥雌性优雌性优 良个体的良个体的 能力能力。 (3) 生理学基础:动物发情排卵后,同种动物的供、受体生殖器官的_ _。这就为供体的胚胎移入受体提供了_ 。 早期胚胎在一定时间内处于_状态。这就为胚胎的收集提供了可能胚胎的收集提供了可能 。受体对移入子宫的外来胚胎_(发生或者不发生)(发生或者不发生) 反应反应 。这为胚胎在胚胎在 的存活提供了可能的存活提供了可能。 供体胚胎可与受体子宫建立正常的_联系,但供体胚胎的 在孕育过程中不受影响。 (4) 基本程序主要包括:对供、受体的选择和处理对供、受体的选择和处理 。选择_优秀的 供体,有健康的体质和正常繁殖能力健康
18、的体质和正常繁殖能力 的受体,供体和受体是_ _ _(相同或者不同)(相同或者不同)物种。并用激素进行_ _,用_ _ _ _对供体母牛做_ _ _处理。 配种或人工授精配种或人工授精 。 对胚胎的收集、检查、培养或保存对胚胎的收集、检查、培养或保存 。配种或输精后第 7 天,用特 制的 装置,把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来(也叫冲卵)。对胚胎 进行质量质量检查,此时的胚胎应发育到_ _或或_ _ _ 阶段。直接向受体移植或放入196196的的 中保存。 对 进行移植。 移植后的检查。对受体母牛进行_ _ _的检查。 3.胚胎分割 (1)概念:是指采用机械方法将 _ _切割 2 等份、4 等份等,经 移植获得 的技术。 (2)意义:来自同一胚胎的后代具有_ _(相同或者不同)(相同或者不同)的遗传 物质,属于_ _ _(有性还是无性)(有性还是无性)繁殖。 (3)材料:发育良好,形态正常的 。(桑椹胚至囊胚的发育过 程中,细胞开始分化,但其 仍很高仍很高,也可用于胚胎分割。) (4)操作过程:对囊胚阶段的胚胎分割时,要将_分割,否则 会影响分割后胚胎的分割后胚胎的_ _和和_ _。