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1、精品题库试题 生物 1.(2022 江苏，23，3 分)下列关于基因工程技术的叙述,错误的是()A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别 6 个核苷酸序列 B.PCR 反应中温度的周期性转变是为了 DNA 聚合酶催化不同的反应 C.载体质粒通常接受抗生素合成基因作为筛选标记基因 D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达 1.ABC 1.限制酶的识别序列多为 6 个核苷酸,也有少数限制酶的识别序列由 4、5 或 8 个核苷酸组成,A 错误;PCR 反应中,起初的 9095 高温是使目的基因解旋,后冷却至 50 左右是使引物结合到互补 DNA 链上,最终再加热至72 左右是
2、让 DNA 聚合酶催化 DNA 的子链延长,B 错误;载体质粒上的四环素抗性基因、青霉素抗性基因等抗生素抗性基因常作为标记基因,C 错误;目的基因即使成功地插入到受体细胞染色体上,假如不是在启动子和终止子之间,也不能正常表达,D 正确。2.(2022 重庆，4，6 分)题 4 图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,正确的是()题 4 图 A.的构建需要限制性核酸内切酶和 DNA 聚合酶参与 B.侵染植物细胞后,重组 Ti 质粒整合到的染色体上 C.的染色体上若含抗虫基因,则就表现出抗虫性状 D.只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异 2.D 2.的构建需要限制性核酸内切酶和
3、DNA连接酶参与,A错误;侵染植物细胞后,通过农杆菌的转化作用,使目的基因进入植物细胞并整合到的染色体上,B 错误;的染色体上含有目的基因(抗虫基因)但不肯定表达,C 错误;基因工程依据的原理是基因重组,基因重组属于可遗传变异,D 正确。3.(2022 重庆，2，6 分)生物技术平安性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述,错误的是()A.应严格选择转基因植物的目的基因,避开产生对人类有害的物质 B.当今社会的普遍观点是禁止克隆人的试验,但不反对治疗性克隆 C.反对设计试管婴儿的缘由之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿 D.生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力 3.D 3.在
4、获得转基因植物时,要严格选择目的基因,避开产生对人类有害的毒性蛋白或过敏蛋白等物质,A 正确;当今社会的普遍观点是禁止有关人类的生殖性克隆,但不反对治疗性克隆,B 正确;反对设计试管婴儿的缘由之一是有人将此技术用于设计婴儿性别,C 正确;生物武器包括致病菌、病毒、生化毒剂及经过基因重组的致病菌等,干扰素不属于生物武器,D 错误。4.(2022 四川，3，6 分)将牛催乳素基因用32P 标记后导入小鼠乳腺细胞,选取仅有一条染色体上整合有单个目的基因的某个细胞进行体外培育。下列叙述错误的是()A.小鼠乳腺细胞中的核酸含有 5 种碱基和 8 种核苷酸 B.该基因转录时,遗传信息通过模板链传递给 mR
5、NA C.连续分裂 n 次后,子细胞中32P 标记的细胞占 1/2n+1 D.该基因翻译时所需 tRNA 与氨基酸种类数不肯定相等 4.C 4.小鼠乳腺细胞中的核酸有 DNA 和 RNA 两种,共包含 5 种碱基和 8 种核苷酸,A 正确;遗传信息可通过转录过程传递给mRNA,B正确;亲代细胞仅一条染色体上的一个目的基因进行了标记,所以连续分裂n次可得到2n个子细胞,其中含有32P 标记的细胞有 2 个,占 1/2n-1,C 错误;由于密码子的简并性,一种氨基酸可能由多种 tRNA 转运,所以翻译过程中 tRNA 与氨基酸的种类数不肯定相等,D 正确。5.(2022 广东，25，6 分)利用基
6、因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图 14 所示,下列叙述正确的是()图 14 A.过程需使用逆转录酶 B.过程需使用解旋酶和 PCR 猎取目的基因 C.过程使用的感受态细胞可用 NaCl 溶液制备 D.过程可利用 DNA 分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞 5.AD 5.由 mRNA 形成 cDNA 需要逆转录酶,A 正确;过程需要使用限制酶和 PCR 技术获得并扩增目的基因,B 错误;过程使用的感受态细胞可用 CaCl2溶液制备,C 错误;工程菌是指用基因工程方法,使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系,所以过程可利用 DNA 分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞,D 正确
7、。6.(2022 天津，4，6 分)为达到相应目的,必需通过分子检测的是()A.携带链霉素抗性基因受体菌的筛选 B.产生抗人白细胞介素-8 抗体的杂交瘤细胞的筛选 C.转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定 D.21 三体综合征的诊断 6.B 6.依据受体菌是否对链霉素产生抗性进行携带链霉素抗性基因受体菌的筛选,不需要分子检测,A 错误;用特定选择培育基筛选出的杂交瘤细胞,还需要进行克隆化培育和抗体检测,才能获得足够多的能分泌抗人白细胞介素-8 抗体的杂交瘤细胞,B 正确;转基因抗虫棉是否具有抗虫特性,需要做抗虫的接种试验,C 错误;21 三体综合征可通过用显微镜直接观看体细胞中的 21 号染色体数目
8、的方法进行检测,D 错误。7.（江西红色六校 2022 级高三其次次联考）（15 分）【生物现代生物科技专题】(第 4 小题 1 分，其他每空 2 分，共 15 分)依据所同学物学学问回答：假如要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌 Ti 质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过 DNA 重组将目的基因插入植物细胞的 上。目前临床上使用的红细胞生成素(一种糖蛋白，用于治疗肾衰性贫血)主要来自基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)。检测 rhEPO 的体外活性需用抗 rhEPO 的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的 细胞，可由 rhEPO 免疫过的小鼠
9、细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。在“试管牛”的培育过程中，接受激素处理可使良种母牛一次排出多枚卵母细胞，最常用的激素是 。从良种公牛采集的精子需 后才能进行受精作用。在胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎。生态系统内即使某个物种由于某种缘由而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置，从而避开系统结构或功能失衡。这体现了生态工程的什么原理 (1 分)A.协调与平衡原理 B.物种多样性原理 C.物质循环再生原理 D.整体性原理 7.（第 4 小题 1 分，其他每空 2 分，共 15 分）(1)TDNA 染色体 DNA(2)杂交瘤 B 淋巴(3)促性腺激素 获能 胚胎分割(4)B(1 分)7.（1
10、）运用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞，需要用 Ti 质粒构建表达载体，将目的基因插入农杆菌Ti 质粒的 T-DNA，用含有构建好的表达载体的农杆菌感染植物细胞，最终使目的基因插入植物细胞的染色体DNA 上。（2）单克隆抗体是通过动物细胞工程的细胞融合技术，筛选培育产生的杂交瘤细胞分泌的，该细胞的杂交瘤细胞由 rhEPO 免疫过的小鼠淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。（3）使母牛超数排卵常用促性腺激素；从良种公牛采集的精子须获能后才能进行受精作用，即仿照阴道环境中的物质，使精子获得与卵细胞结合的力量；欲获得较多的胚胎。可通过胚胎分割技术，将早期胚胎分割成合适的份数。生态系统内即使某个物种由于
11、某种缘由而死亡，也会很快有其它物种占据它原来的生态位置，从而避开系统结构或功能失衡，这体现了生态工程的物种多样性原理，由于生态系统的稳定性取决于自我调整力量，自我调整力量的大小又于物种丰富度成正相关。8.（南通 2022 届高三第一次调研）英国科学家利用基因工程技术培育动身绿光的斑马鱼。下列有关转基因斑马鱼培育过程的说 法错误的是（）A.可以用两种限制酶同时处理目的基因、运载体 B.目的基因导人受体细胞时可运用显微注射技术 C.基因工程成功的标志是斑马鱼能发出绿色荧光 D.转基因斑马鱼培育需要运用胚胎移植等技术 8.D 8.用两种限制酶同时处理目的基因、运载体，可以同时产生两个不同的黏性末端，
12、从而避开了目的基因、运载体的自身连接；将目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射技术；基因工程成功的标志是目的基因成功表达蛋白质，即斑马鱼能发出绿色荧光；鱼类属于水生动物，不需要胚胎移植。9.（广东省汕头市 2022 届高三 3 月高考模拟理科综合试题）玉米的 PEPC 酶固定 CO2的力量较水稻的强 60倍。我国科学家正致力于将玉米的 PEPC 基因导入水稻中，以提高水稻产量。下列各项对此争辩的分析中正确的是 （）A.核心步骤是构建玉米 PEPC 基因表达载体 B.通常接受显微注射法将 PEPC 基因导入水稻细胞 C.在受体细胞中检测到 PEPC 酶则意味着此项争辩取得成功 D.利用细胞培育
13、技术将转基因水稻细胞培育成植株 9.A 9.将玉米的 PEPC 基因导入水稻中，应用基因工程技术，其核心步骤是构建玉米 PEPC 基因表达载体；将重组质粒导入植物细胞中常用农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；在水稻的叶肉细胞中检测到 PEPC 酶则意味着此项争辩取得成功，或者说水稻固定二氧化碳的力量提高了，意味着此项争辩取得成功；利用植物组织培育技术将转基因水稻细胞培育成植株。10.（安徽江南十校 2022 届高三联考）某致病基因 b 与其正常基因 B 中的某一特定序列，经限制酶 A 切割后产生的片段如图 1(bp 表示碱基对)，据此可进行基因诊断；图 2 为某家庭有关该病的遗传系谱图。下列
14、分析不正确的是 A图 2 中1 的基因型为 bb，其致病基因来自双亲 B图 2 中 I2 基因诊断会消灭 142bp、99bp,43bp 三个片段 C图 1 中限制酶 A 的作用结果能体现酶的专一性特点 D对家庭成员进行基因诊断还可用 DNA 分子杂交技术 10.A 10.据图分析，该病可能为常染色体隐性遗传病，-1 的基因型为 bb，推断双亲为 Bb；也可能为伴 X 性遗传病，-1 的基因型为 X-1 的基因型为 XbY，则其致病基因来自母亲 XBXb；-2 的基因型可能为 Bb，B 基因被限制酶 A 切割消灭 99bp，43bp 两个片段，b 基因被限制酶 A 切割消灭 142bp 片段；
15、限制酶 A 能识别 B 基因的特定脱氧核苷酸系列进行切割，不能识别 b 基因进行切割，体现限制酶的专一性；可以用 b 基因作为基因探针，与 DNA 样品进行杂交，过程是否消灭杂交带推断是否患有患病基因。11.（北京西城区 2022 届高三上学期期末）下列有关基因工程的叙述正确的是 （）A用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的 DNA 片段可获相同黏性末端 B以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同 C检测到受体细胞中含有目的基因就标志着基因工程育种已经成功 D质粒上的抗生素抗性基因有利于质粒与外源基因连接 11.A 11.一种限制酶能识别特定的核苷酸序列，并在特定切
16、点切割 DNA 分子，故要获得相同黏性末端，用同种限制酶切割载体与含目的基因的 DNA 片段即可；以蛋白质的氨基酸序列为依据推想其 mRNA，再依据推想的mRNA 碱基序列推想的目的基因，由于密码子的简并性和缺少基因内含子等，所以与原基因不同；受体细胞中含有目的基因就标志着目的基因成功导入，基因工程育种是否成功还要看目的基因在受体细胞内是否稳定维持和表达；质粒上的抗生素基因是作为标记基因利于筛选含有目的基因的细胞。12.（北京海淀区 2022 届高三上学期期末）下列现代生物科技所依据的原理不正确的是 （）A.植物组织培育技术细胞全能性 B.基因工程技术基因重组 C.植物体细胞杂交技术细胞核移植
17、 D.生态工程物质循环再生 12.C 12.通常我们所说的广义的组织培育，是指通过无菌操作分别植物体的一部分，接种到培育基上，在人工把握的条件进行培育，使其生成完整的植株，原理是细胞全能性；基因工程又称基因拼接技术和 DNA 重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种 DNA 分子，然后导入活细胞，以转变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品；植物体细胞杂交，又称原生质体融合是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培育，使其再生杂种植株的技术，利用的是细胞膜的流淌性；生态工程
18、是指应用生态系统中物质循环原理，结合系统工程的最优化方法设计的分层多级利用物质的生成工艺系统，其目的是将生物群落内不同物质共生、物质与能量多级利用、环境自净和物质循环再生等原理与系统工程的优化方法相结合，达到资源多层次和循环利用的目的。13.(2022 福建，33，10 分)Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES 细胞)对 Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图:(1)步骤中,在核移植前应去除卵母细胞的_。(2)步骤中,重组胚胎培育到_ 期时,可从其内细胞团分别出 ES 细胞。(3)步骤中,需要构建含有 Rag2基因的表达载体。可以依据 Rag2基因
19、的_设计引物,利用 PCR 技术扩增 Rag2基因片段。用 Hind和 Pst限制酶分别在片段两侧进行酶切获得 Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有_酶的酶切位点。(4)为检测 Rag2基因的表达状况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的_,用抗 Rag2蛋白的抗体进行杂交试验。13.(10 分)(1)细胞核(2)囊胚(3)核苷酸序列 Hind和 Pst(4)蛋白质 13.(1)核移植是把体细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中。(2)囊胚期才有内细胞团。(3)可依据目的基因的核苷酸序列设计引物,要把目的基因和表达载体直接连接,目的基因和表达载体应具有相同酶的酶切位点。(4
20、)欲检测 Rag2 基因的表达状况,需提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,进行抗原抗体杂交试验。14.(2022 安徽，30，14 分)胰岛细胞的内分泌活动的协调有利于维持血糖平衡。(1)支配胰岛细胞的交感神经兴奋时,其末梢释放的去甲肾上腺素促进胰岛A细胞的分泌,却抑制胰岛B细胞的分泌,缘由是_。(2)胰岛素可通过作用于下丘脑神经元抑制胰高血糖素的分泌,验证此现象的试验思路是:将大鼠随机分成两组,一组在其下丘脑神经元四周施加适量的胰岛素溶液,另一组施加_,测定并比较施加试剂前后血液中胰高血糖素的浓度。为使试验结果更明显,试验过程中应将血糖维持在比正常浓度_(填“稍高”或“稍低”)的水平。(3)用高
21、浓度的糖溶液饲喂一只动物后,每隔 30 min 检测其血糖浓度,结果见下表。请在下方的坐标图上绘制血糖浓度变化的曲线图,并依据血糖浓度变化在同一坐标图上画出胰岛素浓度变化趋势的曲线图。时间/min 0 30 60 90 120 150 血糖浓度/mgmL-1 0.75 1.25 1.10 0.90 0.75 0.75 (4)胰岛 B 细胞含有与某病毒相像的_,若人体感染该病毒,自身免疫系统在毁灭病毒时可破坏胰岛 B 细胞,引起型糖尿病,该病可通过注射胰岛素治疗。用基因工程技术生产胰岛素的主要步骤:猎取胰岛素 A、B 链基因,构建_,将其导入_的大肠杆菌,筛选可稳定表达的菌株。14.(14 分)
22、(1)胰岛 A、B 细胞与去甲肾上腺素结合的受体不同(2)等体积生理盐水 稍低(3)如图所示 (4)抗原 含目的基因的表达载体 感受态 14.(1)同种神经递质与不同种的细胞上的不同受体结合引起的作用不同。(2)作为空白对比组,另一组应施加等量的生理盐水。低血糖是诱导胰高血糖素分泌的重要因素,故血糖应维持稍低的水平,试验结果才会更明显。(3)依据表格中的数据,直接把时间对应的血糖浓度点标出,连接成线,即可得血糖浓度变化曲线图;胰岛素是降低血糖的一种激素,其浓度比血糖浓度低,随血糖浓度的上升而上升,血糖浓度下降是由胰岛素浓度上升所致,所以胰岛素浓度的峰值应落后于血糖浓度的峰值,随血糖浓度的降低而
23、降低,然后再维持不变。(4)由于胰岛 B 细胞与某些病毒有相像的抗原,自身免疫系统不能辨别二者,在毁灭病毒时可破坏胰岛 B 细胞,引起型糖尿病;基因工程的步骤包括:猎取目的基因,目的基因与运载体结合,将目的基因导入受体细胞,目的基因的检测与鉴定;大肠杆菌常用 Ca2+处理,使其处于感受态,以利于目的基因的进入。15.(2022 山东，36，12 分)人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转 htPA 基因母羊的羊乳中获得。流程如下:(1)htPA 基因与载体用_切割后,通过 DNA 连接酶连接,以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞 DNA,可接受_技术。(2)
24、为猎取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其_。采集的精子需要经过_,才具备受精力量。(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是_。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行_。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的_。(4)若在转 htPA 基因母羊的羊乳中检测到_,说明目的基因成功表达。15.(1)同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶)DNA 分子杂交(或核酸探针)(2)超数排卵 获能(处理)(3)显微注射法 性别鉴定 全能性(4)htPA(或人组织纤溶酶原激活物)15.(1)目的基因和载体先用同种限制酶切割后,再用 DNA 连接酶连接
25、,以构建基因表达载体;推断受体细胞的 DNA 是否插入目的基因可接受 DNA 分子杂交技术。(2)利用促性腺激素处理供体母羊可使其产生更多的卵母细胞;精子必需获能后才具备受精力量。(3)将重组表达载体导入动物受精卵常用的方法是显微注射法。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定。(4)若在转 htPA 基因母羊的羊乳中检测到人组织纤溶酶原激活物,说明目的基因成功表达。16.(2022 天津，8，12 分)嗜热土壤芽胞杆菌产生的-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:.利用大肠杆菌表达 BglB 酶(1)PCR 扩增 bglB
26、 基因时,选用_基因组 DNA 作模板。(2)上图为质粒限制酶酶切图谱。bglB 基因不含图中限制酶识别序列。为使 PCR 扩增的 bglB 基因重组进该质粒,扩增的 bglB 基因两端需分别引入_和_不同限制酶的识别序列。(3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述构建好的表达载体后则获得了降解纤维素的力量,这是由于_。.温度对 BglB 酶活性的影响(4)据图 1、2 可知,80 保温 30 分钟后,BglB 酶会_;为高效利用 BglB 酶降解纤维素,反应温度最好把握在_(单选)。A.50 B.60 C.70 D.80 注:酶的热稳定性是酶在肯定温度下,保温一 段时间后通过其活性的保持程度来
27、反映的.利用分子育种技术提高 BglB 酶的热稳定性 在 PCR 扩增 bglB 基因的过程中,加入诱变剂可提高 bglB 基因的突变率。经过筛选,可获得能表达出热稳定性高的 BglB 酶的基因。(5)与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比,上述育种技术猎取热稳定性高的 BglB 酶基因的效率更高,其缘由是在 PCR 过程中_(多选)。A.仅针对 bglB 基因进行诱变 B.bglB 基因产生了定向突变 C.bglB 基因可快速累积突变 D.bglB 基因突变不会导致酶的氨基酸数目转变 16.(12 分)(1)嗜热土壤芽胞杆菌(2)Nde BamH(3)转基因的大肠杆菌分泌出有活性的 BglB
28、 酶(4)失活 B(5)A、C 16.(1)BglB 由嗜热土壤芽胞杆菌产生,故 PCR 扩增 bglB 基因时,应选用嗜热土壤芽胞杆菌基因组 DNA 作模板。(2)目的基因在与质粒连接时,需连接在启动子和终止子之间,且所用限制酶不能破坏启动子、终止子和标记基因,所以切割质粒应选用 Nde和BamH两种酶,则扩增的 bglB 基因两端需分别引入 Nde和 BamH两种酶的识别序列。(3)转基因大肠杆菌含有的 bglB 基因表达,合成了耐热的纤维素酶,所以其获得了降解纤维素的力量。(4)由图 2 可知,80 保温 30 分钟后,BglB 酶的相对活性为 0,所以此时该酶失活;由图 1 可知:60
29、 70 时 BglB 酶的相对活性最高。70 时,该酶活性易降低,所以为高效利用 BglB 酶降解纤维素应最好将温度把握在 60 。(5)在 PCR 扩增 bglB 基因时加入诱变剂仅对该基因进行诱变,可快速累积突变,但诱发基因突变时,突变仍是不定向的,且突变的结果可以转变酶中氨基酸的数目。若用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌,可诱发其内的任一基因突变,不能快速积累 bglB 基因突变,故 A、C 正确,B、D 错误。17.(2022 课标全国卷，40，15 分)植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。回
30、答下列问题:(1)理论上,基因组文库含有生物的_基因;而 cDNA 文库中含有生物的_基因。(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物的基因组文库,再从中_出所需的耐旱基因。(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过农杆菌转化法将其导入植物_的体细胞中,经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的_,假如检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株的_是否得到提高。(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为31时,则可推想该耐旱基因整合到了_(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。17.(15 分)
31、(1)全部(2 分)部分(2 分,其他合理答案也给分)(2)筛选(2 分,其他合理答案也给分)(3)乙(2 分)表达产物(2 分,其他合理答案也给分)耐旱性(2 分)(4)同源染色体的一条上(3 分)17.(1)基因组文库包含某种生物的全部基因,cDNA 文库又称为部分基因文库,含有生物的部分基因。(2)植物甲基因组文库中有该种植物的全部基因,从中可筛选出耐旱基因。(3)植物乙的耐旱性低,所以植物乙体细胞作为受体细胞;要确定耐旱基因是否正确表达,应检测该基因的表达产物,对于个体水平的检测,应在干旱的田间进行试验,检测植物乙耐旱性是否得到了提高。(4)将耐旱基因看作 A,不耐旱基因看作 a,Aa
32、Aa耐旱与不耐旱数量比为 31,则耐旱基因整合到了同源染色体的一条上。18.（湖北八校 2022 级高三其次次联考）（15 分）图示为应用生物工程获得人们需要的生物新品种或新产品的方案。请回答下列问题：（1）方案中，通常利用 Ti 质粒将抗虫基因导入棉花受体细胞，为了使抗虫基因顺当连接到受体染色体基因组中，抗虫基因通常位于 Ti 质粒的_片段中。从分子水平检测抗虫棉是否培育成功的方法是：_。（2）推想方案中 prG 基因最可能的作用是_。（3）方案中的转抗血栓基因山羊可以通过分泌乳汁来生产抗血栓药物。在构建的相应基因表达载体中，抗血栓基因的首端必需含有使其仅能在山羊_细胞中特异性表达的_，人们
33、通常将此类转基因动物称为_。（4）方案中的早期胚胎在移植入受体母羊子宫之前，必需对胚胎进行性别鉴定，一般是取处于_时期的_细胞进行检测。18.（共 15 分,除标记外每空 2 分）（1）T-DNA 抗原-抗体杂交法（2）调控细胞（无限）增殖（3）乳腺 启动子 乳腺生物反应器（4）囊胚 滋养层（1 分）18.（1）农杆菌侵染植物后，Ti 质粒中的 T-DNA 区段脱离质粒而整合到受体植物的染色体上，因此，假如把外源基因插入 T-DNA 中，就有可能携带进入受体植物并整合到染色体上；抗虫棉是否培育成功的标志是是否具有抗性，即是否有抗虫蛋白质表达，检测蛋白质常用的方法是抗原-抗体杂交法。（2）能产生
34、单克隆抗体的细胞是杂交瘤细胞，即能无限增殖，又能产生抗体，向免疫过的 B 细胞导入 prG 基因后，能产生单克隆抗体，说明该细胞具有杂交瘤细胞的特点，所以 prG 基因能激发细胞不断分裂。19.（黑龙江省哈三中 2022 届高三下学期第一次高考模拟考试理综试题）【生物一选修 1：生物技术实践】（15 分）酒精浓度过高会抑制酵母菌的生长繁殖，影响酒精产量。为此，争辩人员将酒精耐受基因转入野生型酵母菌中，经筛选得到了耐高浓度酒精的酵母菌。过程如图甲所示，请据图回答下列问题：（1）通过筛选得到耐高浓度酒精酵母菌的技术是_。、过程需要重复几次，目的是_。某同学尝试过程的操作，其中一个平板经培育后的菌落
35、分布如图乙所示。该同学的接种方法是_。（2）为证明分别纯化得到的酵母菌能提高酒精产量，可将等量的_和耐高浓度酒精的酵母菌分别接种于含等量葡萄糖的 A、B 两组发酵装置中，在_条件下_（填“密闭”或“充气”）培育。一段时间后取样，用_检测，若试验结果为_，则说明耐高浓度酒精的酵母菌能提高酒精产量。19.（15 分）（1）基因工程（转基因或基因拼接计算）（1 分）进一步分别纯化获得耐酒精力量强的酵母菌（2 分）稀释涂布平板（2 分）（2）野生型酵母菌（2 分）18-25（2 分）密闭（2 分）重铬酸钾（2 分）B 组的灰绿色比 A 组深（2分）19.（1）由图中过程，可以看出获得耐受高浓度酒精酵母
36、菌的过程，通过导入酒精耐受基因，构建重组质粒，导入酵母菌，筛选，该过程属于基因工程；、过程为筛选、接种和接种到新的培育基，重复该过程，是为了进一步分别纯化获得耐酒精力量强的酵母菌；由图乙中的菌落分布特点为左边多，右边少，该同学的接种方法是稀释涂布平板法。（2）为证明分别纯化得到的酵母菌能提高酒精产量，需要有对比组，对比组选择野生型酵母菌；酵母菌生长的最适温度在 20左右，所以将发酵装置放在 18-25条件下；酒精发酵须在无氧条件下进行，所以需要密闭培育；酸性重镉酸钾与酒精反应消灭灰绿色，颜色越浓酒精越多。20.（石家庄 2022 届高中毕业班教学质量检测）（15 分）科学工作者通过基因工程制造
37、出了“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于很多重要的特种工业领域。请回答：（1）为保证明验成功，产生蛛丝蛋白的基因需要从 （基因组c DNA）文库中猎取，并与 等调控组件重组在一起，然后与载体相连构建成表达载体；再通过 方法，将表达载体导入羊的 ，获得重组细胞。（2）将获得的重组细胞培育成早期胚胎后，移植到经过 处理的受体母羊子宫内。由于我们对细胞所需的养分条件还没有完全争辩清楚，所以在早期胚胎的培育中，往徒还需要添加 。若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊”可将早期胚胎进行_ 处理。（3）若所得到的“蜘蛛羊”（已知表达载体已进入细胞）乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，科学家为推断问
38、题所在，应当接受 技术来检测。20.（除标注外，每空 2 分，共 15 分）（1）cDNA 羊的乳腺蛋白基因的启动子 显微注射 受精卵（2）同期发情 动物血清（动物血浆）胚胎分割（胚胎分割移植）（3）分子杂交（1 分）20.（1）cDNA 文库是利用 mRNA 逆转录获得的，除去了基因结构中内含子的干扰；为让目的基因在羊的乳腺中表达，应使用羊的乳腺蛋白基因的启动子，构建基因表达载体；基因表达载体常用显微注射技术导入受精卵，获得重组细胞。（2）重组细胞培育成早期胚胎后，进行胚胎移植时，对受体要进行同期发情处理；早期胚胎的培育中，除基本养分成格外，还需要添加动物血清；使用胚胎分割移植技术，可一次产
39、生多头转基因“蜘蛛羊”。（3）基因表达载体已进入细胞，但乳汁中没有检测到蜘蛛丝蛋白，基因可能没有表达，可接受分子杂交法测定 mRNA，用抗原-抗体特异性结合检测蛋白质，并找出缘由。21.（河北衡水中学 2022 届高三二调）【生物-现代生物科技专题】（15 分）依据所同学物学学问回答下列问题：（1）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌 Ti 质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过 DNA 重组将目的基因插入植物细胞的 上。（2）目前临床上使用的红细胞生成素（一种糖蛋白，用于治疗肾衰性贫血）主要来自基因工程技术生产的重组人红细胞生成素（rhEPO）。检测r
40、hEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的 细胞，可由 rhEPO 免疫过的小鼠 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成，在融合过程中至少需要进行 次筛选。（3）在“试管牛”的培育过程中，接受激素处理可使良种母牛一次排出多枚卵母细胞，最常用的激素是 。从良种公牛采集的精子需 后才能进行受精作用；防止多精入卵的两道屏障依次为 、。（4）生态系统内即使某个物种由于某种缘由而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置，从而避开系统结构或功能失衡。这体现了生态工程的什么原理 A协调与平衡原理 B 物种多样性原理 C物质循环再生原理 D 整体性原理（5）左下表为几种限制性核酸内切
41、酶识别的序列和切割的位点。右下图，已知某 DNA 在目的基因的两端 1、2、3、4 四处有 BamH或 EcoR或 Pst的酶切位点。现用 BamH和 Pst两种酶同时切割该 DNA 片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点状况中，可以防止酶切后单个含目的基因的 DNA片段自身连接成环状的是 。A1 为 Pst，2 为 EcoR，3 为 EcoR，4 为 BamH B1 为 EcoR，2 为 BamH，3 为 BamH，4 为 Pst C1 为 BamH，2 为 EcoR，3 为 BamH，4 为 Pst D1 为 EcoR，2 为 Pst，3 为 Pst，4 为 BamH
42、（6）运用基因工程技术已经制造出了“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于很多重要的特种工业领域。为保证明验成功，产生蛛丝蛋白的基因需从 cDNA 文库中猎取，并与_等调控组件重组在一起，然后与载体相连构建成为表达载体；再通过_方法，将表达载体导入羊的_，获得重组细胞。将获得的重组细胞培育成早期胚胎后，移植到经过_处理的受体母羊子宫内。由于我们对细胞所需的养分条件还没有完全争辩清楚，所以在早期胚胎的培育中，往往还需要添加_。21.（15 分）（1）TDNA 染色体 DNA （2）杂交瘤 2（3）促性腺激素 获能 透亮 带反应、卵黄膜封闭作用 （4）B （5）A（6）羊的乳腺
43、蛋白基因的启动子 显微注射 受精卵 同期发情 动物血清 21.农杆菌转化法是现将目的基因组合到农杆菌 Ti 质粒的 TDNA 上，然后把重组质粒导入到农杆菌细胞中，利用农杆菌感染植物细胞，将目的基因插入植物细胞染色体 DNA 上。单克隆抗体的制备流程：首先用相应的抗原免疫小鼠，并从免疫的小鼠的脾脏中提取 B 淋巴细胞，然后让 B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，融合的细胞在特定的选择培育基上筛选出杂交瘤细胞，然后在通过克隆化培育和抗体检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，用该细胞进行体内培育或体外培育获得单克隆抗体。促性腺激素可促进超数排卵；精子获能后才具备与成熟卵子受精的力量；防止多精受精的两
44、道屏障：透亮 带反应、卵黄膜封闭作用。由“生态系统内即使某个物种由于某种缘由而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置”可知这里主要体现的是物种的多样性，所以该生态工程的原理为物种多样性原理。（5）防止酶切后单个含目的基因的 DNA 片段自身连接成环状，则酶切后，形成的黏性末端不能进行碱基互补配对即可，B 和 C 选项中的酶切后，目的基因的两端都是 BamH切割的序列，目的基因可以成环；D 选项的酶切后，目的基因两端是 Pst切割后的序列，目的基因可以自身连接成环；而 A 选项中酶切后，目的基因的一端是 Pst切割后的序列，另一端是 BamH切割的序列，二者不同，不能互补，所以自身不能连接
45、成环状。（6）为了让目的基因在转基因养的乳腺细胞中表达，需要在重组质粒中添加羊的乳腺蛋白基因的启动子；培育转基因动物的受体细胞为受精卵，导入目的基因常用显微注射法；将获得的重组细胞培育成早期胚胎后，移植到经过同期发情处理的受体母羊子宫内；由于我们对细胞所需的养分条件还没有完全争辩清除，所以在早期胚胎的培育中，往往还需要添加动物血清。22.（福州 2022 届高中毕业班质量检测）【生物现代生物技术专题】(1O 分)将 PVY 病毒外壳蛋白基因(PVY-CP)导人马铃薯，并使之表达即可获得抗 PVY 病毒马 铃薯。图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作，PVY-CP 可以从质粒 A 中猎取；质粒 B 是
46、选用的运载体，另已知部分限制酶识别序列和切割位点：BamH I Hind Bgl II Sma I GGATCC CCTAGG AACCTT TTCGAA AGATCT TCTAGA CCCGGG GGGCCC 请结合图像，运用所学学问回答问题：(1)含有 PVY-CP 的质粒 A 保存在某细菌群体中，各个细菌含有相关不同的基因，这样 的细菌群体称为 。(2)关于步骤中 Klenow 酶的猜想，合理的是 。A.催化合成的片段起引物作用 B.可以将 DNA 片段的粘性末端变成平末端 C.能催化 DNA 链的合成 D.与 DNA 连接酶的功能相同(3)步骤中应当使用的限制酶是 。(4)利用农杆菌转
47、化法进行转化，首先需要将质粒 C 导人 中，进而转化马铃薯，然后通过 技术获得抗 PVY 病毒马铃薯苗，最终进行相关的鉴定。22.（10 分、每空 2 分）（1）基因文库（部分基因组文库、基因组文库给分）。（2）BC（3）Bgl、Sma(仅答出一种酶给 1 分)（4）农杆菌 植物组织培育 22.将含有某种生物不同基因的很多 DNA 片段，导入受体菌群体储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，为基因文库。据图分析，该过程表示 PCR 技术，该 DNA 片段是要获得 PVYCP；Klenow 酶将 DNA 的粘性末端变成平末端，需要合成新 DNA 片段与之配对；没有起到连接 DNA 片段作用。
48、据表格分析，质粒 B 用 Bgl和 Sma切割后，刚好一端为平末端，与步骤DNA 的平末端互补；另一端粘性末端，与步骤DNA 的粘性末端互补，再用 DNA 连接酶连接为重组质粒。利用农杆菌转化法进行转化，首先需要将质粒 C 导入农杆菌，进而转化马铃薯，然后通过植物组织培育植物组织培育。23.（北京东城区 2022 届高三 3 月质量调研）（18 分）一般番茄细胞中含多聚半乳糖醛酸酶基因（用 A 表示），把握细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄易软化，不耐贮存。抗多聚半乳糖醛酸酶基因可以使番茄不再产生多聚半乳糖醛酸酶，从而使番茄长时间抗软化，简洁储存和运输。下图是通过基因工程培育抗
49、软化耐贮存番茄的过程及原理。请分析回答下列问题：（1）一般番茄（AA）也可以通过_育种的方法，最终获得基因型为 aa（不能合成多聚半乳糖醛酸酶）的抗软化.耐储存的番茄。（2）利用基因工程将目的基因导入植物细胞，目前接受最多的方法是_，该方法中用到的目的基因载体是_，目的基因需插入到该基因载体的_上。（3）将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞所需要的工具酶有_。（4）图 1 中获得导入抗多聚半乳糖醛酸酶基因的番茄细胞，需要经过_技术获得转基因番茄，这个过程需要在 条件下进行，细胞先经脱分化形成_，再形成丛芽和根。（5）依据图 2 分析抗多聚半乳糖醛酸酶基因能使番茄抗软化的原理是两个基因分别转录出
50、的 mRNA_，从而阻断了_过程。23.（除注明外，其余每空 2 分）（1）诱变 （2）农杆菌转化法 Ti 质粒 T-DNA（3）限制酶和 DNA 连接酶（4）植物组织培育（1 分）无菌 愈伤组织（1 分）（5）结合形成双链 RNA 多聚半乳糖醛酸酶基因的表达 23.要想利用一般番茄（AA）获得基因型为 aa 的抗软化.耐储存的番茄，也可以实行诱变育种的方法，使 A基因突变成 a 基因，从而获得所需要的品种。目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法；农杆菌中的 Ti 质粒是目的基因表达载体；Ti 质粒上的一段 T-DNA 能转移到受体细胞的染色体 DNA 上，因此目的基因必需插入 T-D