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1、 .1/9 Qubit 3.0 荧光定量仪操作与维护规程 一、目的 使 Qubit 3.0 荧光定量仪能够正确和正常的使用，保证系统的正常运行的准确性和精密度，以获得准确可靠的检验结果。二、适用围 可用于定量的 DNA,RNA,micro RNA 和蛋白质,使用高度敏感和准确的荧光技术量子位定量分析 三、工作原理 Qubit荧光定量仪采用荧光染料与特异性的靶分子结合。这些荧光染料只有与这些靶分子结合时才会发射荧光信号，即使在浓度很低时。Qubit3.0 荧光定量仪比传统的紫外吸光法更加准确。以往的紫光吸光法不具选择性，测量 260nm 所有分子的吸光值包含 DNA，RNA，蛋白质，游离核苷酸或
2、多余的盐离子。此外，紫外分光光度计的灵敏度不足，无法完成低浓度DNA和RNA的精确定量。使用Qubit荧光定量仪，将大大提升准确性。因为Qubit分析试剂盒里的荧光染料只与样品中的特异分子结合DNA,RNA 或蛋白，避免不准确测量带来的重复工作 四、职责 实验室负责该系统的日常维护保养，包括每周保养，以与需要时的保养工作。1.保证仪器设备在计量有效期使用，并配合完成计量相关工作。2.负责仪器设备的正确使用、妥善保管和精心维护。3.负责仪器设备的日常保养、定期校准。五、仪器特点 1.快速和高度精确的定量的 DNA，RNA 和蛋白质样品少于 5 秒。2.高水平的准确性只有 1 20 L 的样品，甚
3、至用很稀的样品 3.使用染料选择性的双链 Dna、RNA 或蛋白质样品中的污染物的影响降至最低。4.大型、先进的彩色触摸屏为简单工作流导航的。5.以图形方式显示达 20 的数据点 6.可以个性化仪器用户界面将显示只有常用的化验 六、使用要求 1.不要在直射下操作仪器 2.样品处理过程中需带无粉橡胶手套 .2/9 3.在室温使用的仪器(22-28C)4.测量之前已经进行校准 七、操作指南 仪器外观 7.1 仪器开启和关闭 1.该仪器在平坦的地方,水平,干燥的表面 2.将提供的电源线的一端插入 Qubit 3.0 荧光计 3.电源线另一端附加适当的插头适配器的，插在适宜的电源上 4.仪器自动开启,
4、首先显示闪屏,然后主屏幕 5.要关闭 Qubit 3.0 荧光计，直接拔下电源 7.2 仪器开机后，主屏幕自动显示，可以在屏幕上选择以下功能：1.选择一个定量测定：dsDNA,RNA,oligo(ssDNA),蛋白质,或离子球 2.选择荧光计模式 3.访问以前保存的数据 4.系统设置 7.3 屏幕设置（Instrument settings）1.睡眠模式 2.亮度设置 3.日期时间设置 4.恢复设置 5.语言设置 7.3.1 设置睡眠模式：样品室 USB 电缆接口 电源插口 USB 驱动器端口 触摸屏 .3/9 a.系统默认为 10 分钟进入睡眠模式，如要调整该项，在屏幕上点击“Sleep m
5、ode”b.点击文本框中得数字，然后更改，仪器设置围为 160 分钟 c.设置好后点击保存返回设置界面 7.3.2 设置亮度 a.屏幕上点击“Brightness”b.移动滑块按钮向上或向下调整显示器的亮度 c.设置好后点击保存返回设置界面 7.3.3 设置时间日期 a.屏幕上点击“Date/Time”b.选着日期时间格式然后进入下一步 c.点击相应的文本框进行设置 d.设置完成后点击保存返回设置界面 7.3.4 恢复设置：恢复出厂设置，删除所有保存的数据,用户定义的仪器设置和定制的化验，该选项请慎重选择 7.3.5 语言设置 a.屏幕上点击“Language”b.选择相应的选项 c.点击保存
6、返回设置界面 7.4 校准 .4/9 仪器工作原理是先使用标准浓度的试剂生成荧光值和浓度二维坐标轴，检测时测出溶液的荧光值，然后根据荧光值来换算浓度，所以进行测验时需要选择新校准或使用以前保存的校准（如该功能第一次使用或更换检测试剂盒就需重新校准）7.4.1 点选需要检测的项目，进入下一级目录 7.4.2 点选试验，如第一次选择会直接提示进行校准，如以前进行过校准，则会提示使用以前的或新进行校准，这里选择进行校准 7.4.3 出现下面界面，将试剂盒中用于校准的标准品 1#放入样品室，点击“Read standard”，大约 3 秒，读取完成进入到下一步，放入标准品 2#，点击“Read sta
7、ndard”（蛋白质校准还需放入标准品 3#）。7.4.4 校准完成后可以不将标准品 2#取出直接检测浓度，查看校准是否成功。如果校准成功,软件显示读取标准的屏幕,显示荧光与浓度图。.5/9 在荧光与浓度图:标准数据点被一条线连接。（圆圈表示正确的标准）如果校验不成功,软件显示“校准误差”消息，需重新进行校准 7.5 样品检测 7.5.1 将样品与反应液混合（混合方案具体见试剂盒）孵化一段时间（DNA 和 RNA 为 2 分钟，蛋白质需要 15 分钟）7.5.2 在阅读标准屏幕,点击运行样本 7.5.3 在样本体积屏幕,选择样本体积和单位 a.触摸+和-按钮在方向盘上选择样本体积添加到试验管(
8、1-20L)。b.从下拉菜单中,选择的单位输出样本的浓度 7.5.4 将样品管插入到样品室,关上盖子,然后点击读取管。大约需要 3 秒 .6/9 7.5.5 在屏幕上就会显示所需检测的浓度 7.5.6多个样品检测：a.相同体积和浓度单位：只需更换样品室中样品管，点击读取管 b.不同体积和浓度单位：重复上诉步骤更改体积和浓度单位 7.5.7 检测浓度存在一定围，如超出检测围会显示“超出围”7.5.7 可以点击屏幕上左右箭头进入体积浓度设置界面和荧光与浓度图 1.空心圆表示进行校准的标准品 2.大的灰色圆圈代表最新样品 3.蓝色圆圈代表在检测围 4.黄色圆圈代表在拓展围 5.红色圆圈代表在仪器检测
9、围外 .7/9 7.6 荧光模式 可以选择荧光模式来作为 mini 荧光计使用（光源通道蓝色(470 nm)或红色(635 nm)）7.6.1 主界面点击“Fluorometer”，进入下一级，选择相应的选项 7.6.2 放入样品，点击读取管 7.6.3 选择蓝光时，显示的结果有蓝光和红光检测数值，选择红光时，只显示红光的检测数值 7.7 数据管理 Qubit 3.0 机子本身可以存储 1000 样本数据，对保存的数据，可以进行以下操作：.8/9 a.针对每个样本查看详细的数据 b.重命名数据文件 c.可以保存数据，导出到 USB 存储器或电脑中 d.删除数据文件 7.7.1 从浓度检测界面、荧光与浓度图界面、主屏幕点击“Data”7.7.2 出现数据屏幕,点击想查看的数据集 7.7.3 点击想要查看的数据，就会出现以下详细的数据列表 7.7.4 如需更改数据显示名称，在详细数据界面点击数据名（上图红色框），在弹出的界面输入想要更改的即可 .9/9 7.7.5 如需导出数据，将 USB 存储器插入 Qubit 3.0USB 接口上，如果想导出的是数据集，则勾选该数据集；如需导出的是单个的数据，则点击数据集进入再勾选需要导出的数据 7.7.6 点击导出数据，数据就会以.CSV 格式保存到 USB 存储器