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1、基因工程及其应用基因工程及其应用高中二年级下学期人教版生物第六章第二节怎样让奶牛产出人奶呢？怎样让奶牛产出人奶呢？人的细胞人的细胞人乳铁蛋人乳铁蛋白基因白基因奶牛的奶牛的细胞细胞目的基因目的基因供体细胞供体细胞受体细胞受体细胞剪刀剪刀运载体运载体针线针线一、基因工程的基本步骤一、基因工程的基本步骤（一）（一）、提取目的基因、提取目的基因（二）目的基因与运载体结合（二）目的基因与运载体结合（三）将目的基因导入受体细胞（三）将目的基因导入受体细胞（四）目的基因的检测和表达（四）目的基因的检测和表达 1 1、要想获得目的基因必须用限制酶切要想获得目的基因必须用限制酶切几个切口？几个切口？思考与讨论思
2、考与讨论:目的基因目的基因目的基因目的基因黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端GCTATAGCTATA 2 2、会产生几个黏性末端？、会产生几个黏性末端？思考与讨论思考与讨论:目的基因目的基因基因的运载体基因的运载体G C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同种限制酶切割用同种限制酶切割G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GDNA连接酶连接酶作为运载体必须具备哪些条件？作为运载体必须具备哪些条件？1.能够在宿主细胞中能够在宿主细胞中复制并稳定地保存复制
3、并稳定地保存。2.具具多个限制酶切点多个限制酶切点，以便与外源基因连接。，以便与外源基因连接。3.对宿主细胞无毒害作用。对宿主细胞无毒害作用。4.具有某些具有某些标记基因标记基因，便于进行，便于进行筛选筛选。1、常用的受体细胞：、常用的受体细胞：大肠杆菌、枯草杆菌、大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植物细胞等酵母菌、动植物细胞等2、常用微生物作受体细胞的原因：、常用微生物作受体细胞的原因：微生物增殖快、代谢快、目的产物多。微生物增殖快、代谢快、目的产物多。3、若运载体是质粒，受体细胞为细菌应作何处理：、若运载体是质粒，受体细胞为细菌应作何处理：应用应用CaCl2处理处理目的是：目的是：增大细胞壁的
4、通透性增大细胞壁的通透性操作过程中用操作过程中用到哪些工具？到哪些工具？（一）、基因的（一）、基因的“剪刀剪刀”、分布：、分布：主要在微生物中主要在微生物中专一性专一性3,5-3,5-磷酸二酯键磷酸二酯键一般产生黏性末端（或产生平末端）一般产生黏性末端（或产生平末端）限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶 二、基因工程的工具二、基因工程的工具、结果：、结果：3 3、切割具体部位：、切割具体部位：、作用特点：、作用特点：（二）、基因的针线（二）、基因的针线DNA连接酶连接酶GCTATAGCTATA作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的使之成为
5、一个完整的DNADNA分子。分子。连接的是什么部位连接的是什么部位?3,5-3,5-磷酸二酯键磷酸二酯键DNADNA聚合酶和聚合酶和DNADNA连接酶的比较连接酶的比较不不同同点点相同点相同点DNA聚合酶聚合酶DNA连接酶连接酶连接连接DNA片段片段不需要模板不需要模板连接的是游离的连接的是游离的脱氧核苷酸脱氧核苷酸需要模板需要模板连接不同脱氧核苷酸之间的磷酸和连接不同脱氧核苷酸之间的磷酸和脱氧核糖，形成磷酸二酯键脱氧核糖，形成磷酸二酯键（三）、基因的运输工具（三）、基因的运输工具运载体运载体1 1、功能、功能：2 2、常用的运载体、常用的运载体：3 3、必须具备的条件、必须具备的条件4 4、
6、运载体和载体的比较、运载体和载体的比较运载体运载体分布分布载体载体成分成分相同点相同点蛋白质蛋白质细胞膜上细胞膜上作为物质运输的工具作为物质运输的工具 原理：原理：基因重组基因重组DNADNA分子水平分子水平定向地改造生物的遗传性状，获得定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。人类所需要的品种。三、基因工程的概念三、基因工程的概念体外体外结结 果：果：操作环境：操作环境：操作水平：操作水平：、基因工程与作物育种、基因工程与作物育种生长快、肉质好的转基因生长快、肉质好的转基因鱼鱼(中国中国)转基因的紫番茄转基因的紫番茄2 2、基因工程与药物研制、基因工程与药物研制3 3、环境保护、环境保护超级细菌超级细菌讨论：转基因食品安全吗？讨论：转基因食品安全吗？第二节第二节 基因工程及其应用基因工程及其应用莆田第五中学莆田第五中学生物组生物组何庆燕何庆燕