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1、家兔急性肾功能不全家兔急性肾功能不全实验原理实验原理HgClHgCl2 2肾小管上皮细胞坏死肾小管上皮细胞坏死细胞碎片形成管型细胞碎片形成管型原尿回漏原尿回漏肾小管阻塞肾小管阻塞肾间质水肿肾间质水肿囊内压升高囊内压升高GFR实验步骤实验步骤n n急性肾功能不全动物模型的制备急性肾功能不全动物模型的制备n n称重、固定、颈部手术气管、称重、固定、颈部手术气管、A插管插管n n下腹部手术下腹部手术(暴露膀胱时取尿暴露膀胱时取尿5ml备用备用)n n耳缘静脉缓慢输耳缘静脉缓慢输10%葡萄糖液葡萄糖液50ml/kgn n尿常规检验（尿常规检验（尿液沉渣的镜检和尿蛋白定尿液沉渣的镜检和尿蛋白定性检查性检
2、查）n n血浆尿素氮测定血浆尿素氮测定实验后处理实验后处理n n列表显示实验结果列表显示实验结果动物动物血浆尿素氮血浆尿素氮（mg/ml）尿蛋白尿蛋白（）尿沉渣尿沉渣对照兔对照兔实验兔实验兔n n分析结果写出实验报告分析结果写出实验报告注意事项注意事项n n实验前一天给家兔注射氯化高汞以制备病实验前一天给家兔注射氯化高汞以制备病理模型。理模型。n n实验前要对试管和注射器做抗凝处理。不实验前要对试管和注射器做抗凝处理。不可用肝素。可用肝素。n n尿液加热时应缓慢转动试管，逐渐加热升尿液加热时应缓慢转动试管，逐渐加热升温，避免受热不均。试管口不可对人温，避免受热不均。试管口不可对人 n n取取5
3、ml尿液于离心管中，离心尿液于离心管中，离心5min、1500r/minn n上清夜做尿蛋白检查，取上清夜做尿蛋白检查，取3ml上清夜放入试管上清夜放入试管n n加热至沸腾，然后加入加热至沸腾，然后加入5 醋酸醋酸35滴，再滴，再加热加热至沸腾，在黑色背景下观察至沸腾，在黑色背景下观察n n离心管底部沉渣用生理盐水（离心管底部沉渣用生理盐水（1：3）稀释摇匀）稀释摇匀n n取一滴滴在载玻片上，盖上盖玻片进行取一滴滴在载玻片上，盖上盖玻片进行镜检镜检n n取取取取1ml1ml血液置于用草酸钾作抗凝处理的离心管内，血液置于用草酸钾作抗凝处理的离心管内，血液置于用草酸钾作抗凝处理的离心管内，血液置于
4、用草酸钾作抗凝处理的离心管内，离心离心离心离心5min5min、3000r/min3000r/minn n取血取血取血取血0.1ml0.1ml浆加入显色剂，在沸水中加热浆加入显色剂，在沸水中加热浆加入显色剂，在沸水中加热浆加入显色剂，在沸水中加热10min10minn n取出置于冷水中冷却，用分光光度计测定尿素氮取出置于冷水中冷却，用分光光度计测定尿素氮取出置于冷水中冷却，用分光光度计测定尿素氮取出置于冷水中冷却，用分光光度计测定尿素氮的浓度（波长的浓度（波长的浓度（波长的浓度（波长520nm520nm）试管试管血浆血浆标准液标准液蒸馏水蒸馏水显色剂显色剂空白管空白管标准管标准管测定管测定管0.10.10.1101010尿蛋白定性检查结果判断标准尿蛋白定性检查结果判断标准结果结果符号符号蛋白质的大约含量（蛋白质的大约含量（）无混浊无混浊微混浊微混浊混浊混浊颗粒状混浊颗粒状混浊絮状混浊絮状混浊凝聚成块凝聚成块无无0.01以下以下0.010.050.050.200.200.500.50以上以上红细胞管型红细胞管型白细胞管型白细胞管型上皮细胞管型上皮细胞管型透明管型透明管型颗粒管型颗粒管型脂肪管型脂肪管型尿酸结晶尿酸结晶磷酸钙结晶磷酸钙结晶草草酸酸钙钙结结晶晶