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1、细胞生物学知识点细胞生物学知识点 绪论 一、 细胞生物学研究的内容和现状 1、 细胞生物学是现代生命科学的重要根底学科 什么是细胞生物学? 细胞生物学是研究细胞根本生命活动规律的科学,它是在不同层次显微、亚显微与分子程度上以研究细胞构造与功能、细胞增殖、分化、衰老与凋亡、细胞信号传递、真核细胞基因表达与调控、细胞起与进化等为主要内容。核心问题是将遗传与发育在细胞程度上结合起来。二、细胞生物学的主要研究内容 1、细胞核、染色体以及基因表达的研究 2、生物膜与细胞器的研究 3、细胞骨架体系的研究 4、细胞增殖及其调控 5、细胞分化及其调控 6、细胞的衰老与凋亡 7、细胞的起与进化 8、细胞工程 三
2、、细胞生物学的开展趋势 从分子程度细胞程度,互相浸透交融 从细胞构造功能研究为主细胞重大生命活动为主 分析p 综合 功能基因组学研究是细胞生物学研究的根底与归宿 (应用)由基因治疗细胞治疗 四、当前细胞生物学研究的重点领域 染色体DNA与蛋白质互相作用关系 细胞增殖、分化、衰老及凋亡的调控及其互相关系 细胞信号转导 五、最近几年诺贝尔奖与细胞生物学20_-202220_:神经系统中的信号传递 20_1:控制细胞周期的关键物质 20_2: 细胞凋亡调节机制 20_3:细胞膜水通道及离子通道构造和机理 20_4:泛素调节的蛋白质降解系统 20_5:幽门螺旋杆菌 20_6:RNAi 20_7:基因敲
3、除小鼠 2022:绿色荧光蛋白 2022:端粒和端粒酶保护染色体的机理 2022:试管受精技术 20_1年,美国人LelandHartwell、英国人Paul Nurse、TimothyHunt因对细胞周期调控机理的研究而获诺贝尔生理医学奖。20_2年,英国人悉尼布雷诺尔、美国人罗伯特霍维茨和英国人约翰苏尔斯顿,因在器官发育的遗传调控和细胞程序性死亡方面的研究获诺贝尔诺贝尔生理学或医学奖。20_3年,美国科学家彼得阿格雷和罗德里克麦金农,分别因对细胞膜水通道,离子通道构造和机理研究而获诺贝尔化学奖。20_4年,美国人Richard A_el和Linda B.Buck获诺贝尔生理与医学奖,他们发
4、现气味受体和嗅觉系统的组成。20_5年Barry J.Marshall 和J.Robin Warren 获诺贝尔生理与医学奖,他们发现幽门螺杆菌及其在胃炎和胃溃疡方面的作用。20_年美国人Andrew Z.Fire和Craig C.Mello因对RNA干扰的研究而获诺贝尔生理与医学奖。2022年美国人Elizabeth Blackburn、Carol Greider、Jack Szostak获诺贝尔医学和生理学奖,他们发现了端粒和端粒酶保护染色体的机理。年度诺贝尔生理学或医学奖在瑞典首都斯德哥尔摩揭晓。被誉为“试管婴儿之父”的英国科学家罗伯特爱德华兹 (Robert G.Edwards),因“
5、在试管受精技术方面的开展”而被授予该奖项。第二节 细胞学与细胞生物学开展简史 细胞的发现 细胞学说的建立其意义 细胞生物学的研究内容分三个层次:1显微程度,光学显微镜下可见的构造。2超微程度,电子显微镜下可见的构造。3分子程度,细胞构造的分子组成,及其在生命活动中的作用。细胞生物学经历了四个主要开展阶段:11665-0s,细胞发现,显微生物学。20s-1930s,细胞学说,Cytology诞生 31930s-1970s,电镜技术应用, Cytology开展为细胞生物学。41970s以来,分子细胞生物学时代。一、细胞的发现 显微镜之于生物学,犹如望远镜之于天文学,细胞生物学的变革无不和显微技术的
6、改良息息相关。1590年J.和Z.Janssen父子制作第一台复式显微镜,放大倍数不超过10倍。1665年英国人Robert Hooke出版显微图谱。观察了软木,并首次用cells来描绘“细胞” 1680年荷兰学者A.van Leuwenhoek中选为英国皇家学会会员。他观察过植物、原生动物、水、鲑鱼的红细胞、牙垢中的细菌、唾液、血液、精液等等。0s消色差显微镜出现,人们才对细胞的构造和功能有了新的认识。1年R.Brown在兰科植物表皮细胞内发现了细胞核。_年GG.Valentin在动物神经细胞中发现了细胞核与核仁。这些工作对于细胞学说的诞生具有重要意义。二、 细胞学说的建立及其意义 8年Sc
7、hleiden发表“植物发生论” ,认为无论怎样复杂的植物都由细胞构成。但他以free-cell formation理论来解释细胞形成。Schwann提出了“细胞学说”Cell Theory) ;1939年发表了“关于动植物构造和生长一致性的显微研究”。Schwann提出:有机体是由细胞构成的;细胞是构成有机体的根本单位。但他也采用了的Schleiden细胞形成理论。1855 德国人R.Virchow 提出“一切细胞来于细胞”omnis cellula e cellula的著名论断;进一步完善了细胞学说。细胞学说是19世纪的重大发现之一,其根本内容有三条:1.认为细胞是有机体,一切动植物都是由
8、细胞发育而来,并由细胞和细胞产物所构成;2.每个细胞作为一个相对独立的单位,既有它“自己的”生命,又对与其它细胞共同组成的整体的生命有所助益;3.新的细胞可以通过老的细胞繁殖产生。三、 细胞学开展的经典时期 19世纪30年代至20世纪初,细胞学得到了蓬勃的开展。其研究方法主要是显微镜下细胞形态的描绘。研究的主要特点是应用生物固定和染色技术,在光学显微镜下观察细胞的形态和细胞的分裂活动。原生质理论的提出、细胞分裂活动的研究以及重要细胞器的发现等,构成了细胞学开展的经典时期。四、实验细胞学与细胞学的分支及其开展 从20世纪初到中叶,为实验细胞学的开展时期。这一时期细胞学研究的特点是由对细胞形态构造
9、的观察,深化到对其生理功能、生物化学、遗传发育机理的研究。1932年德国人E.Ruska和M.Knoll创造透射电镜,人类视野进入超微领域 。1939年Siemens公司消费商品电镜。1940-50s用电镜观察了各类细胞超微构造。并结合超速离心、电泳、无细胞体系等分析p 技术研究这些构造的功能。Cytology开展为Cell Biology。五、细胞生物学学科的形成和开展 从20世纪60年代起,细胞学开展成为细胞生物学。细胞生物学是随着分子生物学的开展而兴起的。1869年瑞士人F.Miescher 从脓细胞中别离出核酸,但未引起重视。1941年Beatle和Tatum提出了“一个基因一个酶”的
10、理论。1944年O.Avery等通过细菌转化试验,1952年M.Chase等通过噬菌体标记感染实验肯定了核酸与遗传的关系。1952年RE.Franklin拍摄到明晰的DNA晶体的_-衍射照片。1953年她认为DNA是一种对称构造,可能是螺旋。1953年,JD.Watson 和FHC.Crick提出DNA双螺旋模型。与Wilkins分享1962 年诺贝尔生理学与医学奖 。1958 年Crick 提出分子遗传的“中心法那么”。1961-1964年Nirenberg 等破译遗传密码。1972年DA.Jackson,RH.Symons和P.Berg创立DNA体外重组。1973年SN.Cohen和HW.
11、Boyer将外基因拼接在质粒中,并在大肠杆菌中表达。一系列技术和理论的提出,使细胞生物学与分子生物学的结合越来越严密。20世纪80年代以来,细胞生物学的主要开展方向是细胞的分子生物学,即在分子程度上探究细胞的根本生命规律,把细胞看成是物质、能量、信息过程的结合,并在分子程度上深化探究其生命活动的规律,深化性与综合性是细胞生物学进一步开展的特点。1983年,KB.Mullis创造PCR仪,于1993年获诺贝尔化学奖。1990年,美国国会正式批准的“人类基因组方案” Human Genome Project。我国于1993年参加该方案,承当其中1的任务,即人类3号染色体短臂上约30Mb的测序任务。
12、20_年6月27日科学家公布完成人类基因组草图。20_1年2月12日结合公布人类基因组图谱及分析p 结果。初步分析p 说明,人类基因组由31.647108bp组成,共有3万4万个基因。同年,美国国立卫生研究院给一名患有先天性重度结合免疫缺陷病的4岁女孩施行了首例基因治疗。这种疾病因腺苷脱氨酶ADA基因变异引起。199_年7月5日,世界上第一只克隆羊“多利”在英国苏格兰卢斯林研究所的试验基地诞生。目前细胞生物学研究的根本特点和趋势可归纳如下:细胞构造功能 细胞生命活动。细胞中单一基因与蛋白 基因组与蛋白质组及其在细胞生命活动中的协同作用。细胞信号转导途径 信号调控网络。体外研究 体内研究。静态已
13、经 活细胞的动态研究。研究为主 计算生物学更多地介入并与之结合。细胞生物学与生物学其他学科的浸透 与数、理、化及纳米科学等多学科的穿插。总的特点是从静态的分析p 到活细胞的动态综合,这在很大程度也反映了生命科学研究的趋势。第二章 细胞的统一性与多样性 第一节 细胞的根本概念 一、细胞是生命活动的根本单位 二、细胞的根本共性 一、细胞是生命活动的根本单位 1、一切有机体都由细胞构成,细胞是构成有机体的根本单位.2、细胞具有独立的、有序的自控代谢体系,细胞是代谢 与功能的根本单位 3、细胞是有机体生长与发育的根底 4、细胞是遗传的根本单位。细胞具有遗传的全能性 5、没有细胞就没有完好的生命 6.细
14、胞概念的一些新考虑 1细胞是多层次非线性的复杂构造体系 细胞具有高度复杂性和组织性 2细胞是物质构造、能量与信息过程精巧结合的综合体 1、细胞完成各种化学反响;2、细胞需要和利用能量;3、细胞参与大量机械活动;4、细胞对刺激作出反响;3细胞是高度有序的,具有自组装才能与自组织体系。1、细胞能进展自我调控;2、繁殖和传留后代;二、细胞的根本共性 1.所有的细胞都有相似的化学组成 2.脂-蛋白体系的生物膜 所有的细胞外表均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质构成的生物膜,即细胞膜。3.DNA-RNA的遗传装置 所有的细胞都有两种核酸,即DNA-与RNA,作为遗传信息复制与转录的载体。4.蛋白质合成的机器核
15、糖体 一切细胞均存在合成蛋白质的根本构造体核糖体。5.一分为二的分裂方式。原核细胞与真核细胞根本特征的比拟 原核细胞与真核细胞的遗传构造装置和基因表达的比拟 细胞的体积受什么因素控制? 可以从3个方面进展讨论:1、不管细胞体积相差多大,各种细胞核的大小相差不大。2、细胞的外表积限制了细胞的大小 1细胞体积相对细胞外表积呈反比关系,体积越大,外表积就越小 2细胞体积比外表积增大速度快 3、细胞内物质的交流运输与细胞体积有关,细胞内的物质从一端向另一端运输或扩散是有时间与空间关系的。4.细胞形态构造与功能的关系 细胞的形态有球形、星形、扁平、立方形、长柱形、梭形等。细胞形态构造与功能的相关性与一致
16、性是很多细胞的共同特点,在分化程度较高的细胞中更为明显,这是生物漫长进化过程的产物。5.植物细胞和动物细胞的比拟 第四章 细胞质膜 Plasm membrane 细胞质膜plasm membrane)曾称细胞膜(cell membrane),是指围绕在细胞最外层,由脂质(lipid)和蛋白质(protein)组成的生物膜。质膜不仅是细胞构造的边界,使细胞具有一个相对稳定的内环境,同时在细胞与环境之间的物质运输、能量转换及信息传递过程中也起着重要作用。细胞内的膜与细胞质膜统称为生物膜biomembrane)。它是围绕细胞的保护层,一层薄而透明的油层,允许食物,氧气和水份进入细胞,废物排出细胞。第
17、一节 细胞质膜的构造模型 生物膜的构造模型 膜脂 膜蛋白 一、生物膜的构造模型 单位膜模型(Unit membrane model) 用超薄切片技术获得了明晰的细胞膜照片,显示暗-明-暗三层构造,它由厚约3.5nm的双层脂分子和内外外表各厚约2nm的蛋白质构成,总厚约7.5nm。“生物膜的流动镶嵌模型” 这种模型认为细胞膜是由流动的脂双分层子和嵌在其中的蛋白质构成的。该模型主要强调:1膜的流动性,膜蛋白和膜脂均可侧向运动;2膜蛋白分布的不对称性,有的镶在膜外表 ,有的嵌入或横跨脂双分子层。K.Simons et al(1997): lipid rafts model脂筏模型生物膜构造的特征 具
18、有极性头部和非极性尾部的磷脂分子在水相中具有自发形成封闭的膜系统的性质。磷脂双分子层是组成生物膜的根本构造成分,尚未发现膜构造中起组织作用的蛋白;u 蛋白分子以不同方式镶嵌在脂双层分子中或结合在其外表,膜蛋白是赋予生物膜功能的主要决定者;生物膜可看成是在双层脂分子中嵌有蛋白质的二维溶液。二、膜的化学组成 Membrane Lipid膜脂 Phospholipids (phosphoglycerides,磷脂) Glycolipid 糖脂类Cholesterol胆固醇Membrane Protein(膜蛋白) Integral proteins 膜内在蛋白Channel Proteins 通道蛋
19、白Carrier Proteins 载体蛋白Peripheral proteins膜外周蛋白Lipid anchored proteins脂锚定蛋白Membrane Carbohydrates (膜碳水化合物) 1.膜脂(Membrane Lipid ) :膜脂主要包括磷脂、糖脂和胆固醇三种类型 磷脂 phospholipids :膜脂的根本成分50以上分为二类: 甘油磷脂(phosphoglycerides )和鞘磷脂 sphingolipids主要特征:具有一个极性头部和两个非极性的尾部心磷脂除外;脂肪酸碳链碳原子为偶数,大多数由16,18或20个组成;饱和脂肪酸(如软脂酸)及不饱和脂肪酸
20、(如油酸);糖脂glycolipids:糖脂普遍存在于原核和真核细胞的质膜上5以下,神经细胞膜上糖脂含量较高;胆固醇Cholesterol和中性脂质:存在于真核细胞膜上,其含量不超过膜脂的1/3。细菌质膜不含有胆固醇,但某些细菌的膜脂中含有甘油脂等中性脂。Features (特征): Found in animals , Smaller, Less hipathic Functions(功能) : 维持膜的流动性,增加膜的稳定性 如没有胆固醇,膜很容易分开 small hydrophilic 亲水性hydro_yl group 羟基toward the membrane surface 亲水的
21、羟基对着膜外表 the remainder of the molecule embedded in the lipid bilayer其余的部分埋在脂双层间 The Nature of the Lipid 膜脂的根本性质是两性物质, 可以自我装配成双层构造或自我封闭成球状。膜脂的功能 构成膜的根本骨架,去除膜脂,那么使膜解体; 是膜蛋白的溶剂,一些蛋白通过疏水端同膜脂作用,使蛋白镶嵌在膜上,得以执行特殊的功能; 膜脂为某些膜蛋白(酶)维持构象、表现活性提供环境, 一般膜脂本身不参与反响(细菌的膜脂参与反响); 膜上有很多酶的活性依赖于膜脂的存在。有些膜蛋白只有在特异的磷脂头部基团存在时才有功能
22、。2.膜脂的运动方式 Four kinds of movement: 沿膜平面的侧向运动(Lateral diffusion by e_changing places):根本运动方式,其扩散系数为10-8cm2/s;脂分子围绕轴心的自旋运动(Rotation about its long a_is );脂分子尾部的摆动(Wave);双层脂分子之间的翻转运动( Transverse diffusion, or “flip-flop” from one monolayer to the other):发生频率还不到脂分子侧向交换频率的1010。但在内质网膜上,新合成的磷脂分子翻转运动发生频率很高。
23、3.Liposome脂质体 脂质体是根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层膜的趋势而制备的人工膜。脂质体的应用:1研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质;2脂质体中裹入DNA可用于基因转移;3在临床治疗中,脂质体作为药物或酶等载体 (二) 膜蛋白Membrane ProteinThe “Mosaic” Part of the Model Functions: carry out most membrane functions Transporting particular nutrients 运输营养物质 Metabolites 代谢 Receptors 受体 Enzymes 酶 Ions acros
24、s the lipid bilayer 离子通过脂双层 Anchor the membrane to macromolecules 将膜与大分子物质连接 Content: about 50 of the mass of most plasma membranes in animals 在动物细胞中占50含量 Classification: according their relationship to lipid bilayer 按照它们和脂双层的关系划分 1.膜蛋白的类型 根据膜蛋白别离的难易程度及其与脂分子的进化方式分为:u外周膜蛋白(peripheral membrane protein
25、 );分布于细胞膜的内外外表,主要分布在细胞膜的内外表,约占膜蛋白总量的2030。为水溶性蛋白,靠离子键或其它弱键与膜外表的蛋白质分子或脂分子结合 易别离 整合膜蛋白(integral protein) 又称膜内在蛋白.1全部或部分插入细胞膜内,直接与脂双层的疏水区域互相作用。2两亲性(hipathic) 亲水性( Hydrophilic):forming functional domains outside of the bilayer 疏水性( Hydrophobic):anchoring them in the bilayer 3水不溶性蛋白,与膜结合严密,需用去垢剂使膜崩解后才可别离。
26、脂锚定蛋白(lipid anchored protein) 又称脂连接蛋白(lipid-linked proteins), 同脂的结合有两种方式:一种方式是通过一个糖分子间接同脂双层中的脂结合;一种是蛋白质直接与脂双层中的脂结合。2.内在膜蛋白与膜脂结合的方式 1膜蛋白的跨膜构造域与脂双层分子的疏水核心的互相作用。 2跨膜构造域两端携带正电荷的氨基酸残基与磷脂分子带负电的极性头形成离子键,或带负电的氨基酸残基通过Ca2+、Mg2+等阳离子与带负电的磷脂极性头互相作用。u3某些膜蛋白在细胞质基质一侧的半胱氨酸残基上共价结合脂肪酸分子,插入脂双层之间,进一步加强膜蛋白与脂双层的结合力,还有少数蛋白
27、与糖脂共价结合。3.去垢剂detergents) 去垢剂是一端亲水一端疏水的两性小分子,是别离与研究膜蛋白的常用试剂。离子型去垢剂(the ionic detergent SDS)和非离子型去垢剂 the nonionic detergent Triton _-100 膜蛋白的研究方法 用去垢剂别离小的跨膜蛋白, 是膜蛋白研究的重要手段:当它们与膜蛋白作用时,其疏水端与膜蛋白的疏水区域相结合,极性端指向水中,形成溶于水的去垢剂-膜蛋白复合物,从而使膜蛋白在水中溶解、变性、沉淀。当去除去垢剂并参加磷脂后,可使膜蛋白复性并恢复功能。有人用这种方法研究了膜中Na+-K+-ATP酶的功能 钠钾ATP酶
28、功能的研究图 (三) 膜碳水化合物Membrane Carbohydrates与脂类和蛋白质共价结合在脂双层的外外表 糖蛋白(Glycoproteins): have short , branched carbohydrates for interactions with other cells and structures outside the cell.糖脂(Glycolipids):have larger carbohydrate chains that may be cell-to-cell recognition sites.Functions 与其它细胞和构造互相作用 细胞与细胞
29、之间的识别位点 稳定细胞膜构造 识别激素和分子 第二节 生物膜根本特征与功能 (The properties and functions of membranes) 膜的流动性 膜的不对称性 细胞质膜的根本功能 一、 膜的流动性(Fluidity) 1.膜脂的流动性(Membrane lipids fluidity) 影响膜流动性的因素The factors affect on membrane fluidity: 1)脂肪酸链长度和不饱和程度 膜脂的流动性主要由脂分子本身的性质决定的,脂肪酸链越短,不饱和程度越高,膜脂的流动性越大。2) 温度(Temperature): 温度对膜脂的运动有明
30、显的影响。在细菌和动物细胞中常通过增加不饱和脂肪酸的含量来调节膜脂的相变温度以维持膜脂的流动性。相变温度transition temperature在生理条件下, 膜脂多呈拟液态liquid-like state。温度下降至某点, 那么变为晶态frozen crystalline gel。一定温度下, 晶态又可熔解再变成液晶态,这种临界温度称为相变温度。相变(phase transition) 在不同温度下发生的膜脂状态的改变称为相变。不同的膜脂由于成分不同而各有其相变温度。3)胆固醇 (Cholesterol ) 在动物细胞中,胆固醇对膜的流动性起重要的双向调节作用。在相变温度以上,它可使磷
31、脂分子的脂酰链末端的运动减小,即限制膜的流动性。在相变温度以下,可增加脂类分子脂酰链的运动,这样可以增强膜的流动性。4卵磷脂/鞘磷脂比值的影响 哺乳动物膜中,卵磷脂(phosphatidycholine)和鞘磷脂(sphingomyelin)的含量约占整个膜脂的50; 卵磷脂所含的脂肪酸链的不饱和程度高,链较短,相变温度低,因此卵磷脂含量高,流动性大; 而鞘磷脂的脂肪酸链的饱和程度高,相变温度也高,因此,鞘磷脂的含量高,流动性低。2.膜蛋白的流动(Movement of integral membrane proteins) 荧光抗体免疫标记实验 内在膜蛋白的运动方式 影响膜蛋白挪动的因素 整
32、合蛋白互相间的影响 膜骨架的影响 细胞外基质的影响 相邻细胞的影响 细胞外配体、抗体、及药物大分子的影响 细胞外基质对整合蛋白挪动的影响 膜骨架对膜蛋白流动性的影响 3.荧光漂白恢复技术 研究膜蛋白或膜脂流动性的根本实验技术之一。程序:根据荧光恢复的速度可推算出膜蛋白或膜脂扩散速度。The Importance of Membrane Fluidity 酶活性 物质运输 信号转导 细胞周期 在M期, 膜的流动性最大, 而在G1期和S期, 膜流动性最低; 能量转换 二、不对称性(The asymmetry of membranes) 1.细胞质膜各部分的名称 细胞质膜内外两个单层的组成、构造和功
33、能有很大的差异,把这种差异称为膜的不对称性。膜脂、膜蛋白和复合糖在膜上均呈不对称性分布,导致膜功能的不对称性和方向性。样品经冰冻断裂处理后,细胞膜可从脂双层中央断开,各断面命名为:ES,细胞外外表e_trocylasmic surface;EF,细胞外小页断面e_trocylasmic face;PS,原生质外表prolasmic surface;PF,原生质小页断面prolasmic face。2.膜脂的不对称性(The asymmetry of membrane lipid ) :同一种脂分子在脂双层中呈不均匀分布,组成膜两个单层的膜脂种类不同。例如在红细胞膜中:外层含鞘磷脂SM 、磷脂酰
34、胆碱PC较多;内层含磷脂酰乙醇胺PE 、磷脂酰丝氨酸PS较多。3.膜蛋白的不对称性(The asymmetry of membrane protein ):每种膜蛋白分子在细胞膜上都具有明确的方向性和分布的区域性。各种生物膜的特征及功能主要由膜蛋白决定,膜蛋白的不对称性是生物膜完成复杂的在时间与空间上有序的各种生理功能的保证。在膜两侧分布不对称,如:红细胞的血型糖蛋白分子伸向膜内、外侧面的氨基酸残基的数目不对称。血影蛋白分布在红细胞膜的内侧面。一般说,细胞质面的蛋白比外外表少,一些酶和受体多处于外外表,如:5-核苷酸酶、磷酸脂酶、Mg2+ -ATP酶、激素受体、生长因子受体位于外外表;腺苷酸环
35、化酶那么处于膜的内外表。4.复合糖的不对称性(The asymmetry of membrane carbohydrates ): 糖脂和糖蛋白只分布于细胞膜的外外表。糖脂的不对称分布是完成其生理功能的构造根底。膜糖分布的不对称性 The biological role of asymmetry 膜脂、膜蛋白及膜糖分布的不对称性导致了膜功能的不对称性和方向性,保证了生命活动的高度有序性。膜不仅内外两侧的功能不同, 不同区域的功能也不一样。造成这种功能上的差异,主要是膜蛋白、膜脂和膜糖分布不对称引起的。细胞间的识别、运动、物质运输、信号传递等都具有方向性。这些方向性的维持就靠分布不对称的膜蛋白、
36、膜脂和膜糖来提供。三、 细胞质膜的根本功能 ( Cell membrane Functions ) 1为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境; 2选择性的物质运输,包括代谢底物的输入与代谢产物的排出,并伴随着能量的传递; 3提供细胞识别位点,并完成细胞内外信息跨膜传递; 4为多种酶提供结合位点,使酶促反响高效而有序地进展; 5介导细胞与细胞、细胞与基质之间的连接; 质膜参与形成具有不同功能的细胞外表特化构造。膜蛋白可作为疾病治疗的药物靶标。扩散与浸透? 上:在简单扩散中,膜允许 溶质通过;溶质从浓度高 的一侧移向浓度低的一侧, 当到达平衡时,两侧的浓 度相等。下:在浸透中, 膜不允许溶质通过,但
37、是, 水可以从溶质浓度低的一 侧向溶质浓度高的一侧扩 散;当到达平衡时,两侧 溶质的浓度是相等的,但 含有过多水分的一侧具有 较高水压。Diffusion and Osmosis 扩散(Diffusion) 是指物质沿着浓度梯度从半透性膜浓度高的一侧向浓度低的一侧挪动的过程。扩散(Diffusion) 虽然这种挪动不需要消耗ATP,主要是依靠扩散物质自身的力量,但从热力学考虑,它利用的是自由能。假如改变膜两侧的条件,如加热或加压,就有可能改变物质的流动方向,其原因是改变了自由能。严格地说,扩散是物质从自由能高的一侧向自由能低的一侧流动。浸透(Osmosis) 是指水分子以及溶剂通过半透性膜的扩
38、散。浸透(Osmosis) 水的浸透同样是从自由能高的地方向自由能低的地方挪动,假如考虑到溶质的浓度,水是从溶质浓度低的地方向溶质浓度高的地方流动。例如:细胞的膨胀(Swell)或收缩(Shrink) 质壁别离plasmolysis) 根据水与水中溶质在膜通透性上的差异,将膜称为半透性的semipermeable)。高渗hypertonic) 低渗 (hypoosmotic) 等渗 (iso-osmotic) 动物细胞和植物细胞在不同浓度的蔗糖溶液中的行为 红细胞膨胀与收缩 1 .简单扩散Simple diffusion也叫自由扩散free diffusion,特点:沿浓度梯度或电化学梯度扩散
39、;不需要提供能量;没有膜蛋白的协助。质子通过电子转移而被挪动 质子如何被泵过膜? 质子被三个复合物泵出膜外 在三个大的复合物处都有一个大的电位变化,释放的能量可以用于将质子泵出。第七章 真核细胞内膜系统、蛋白质分选与膜泡运输 真核细胞在进化上一个显著特点就是形成了兴旺的细胞质膜系统,将细胞内环境分割成许多功能不同的区室。虽然这些区室具有各自独立的构造和功能,但它们有是亲密相关的,尤其是它们的膜构造式互相转换的,转换的机制那么是通过蛋白质分选和膜运输实现的。细胞内区室化 细胞内区室化是真核细胞构造和功能的根本特征之一。细胞内被膜区分为3类构造:细胞质基质(cylasmic matri_)、细胞内
40、膜系统(endomembrane system)和其他由膜包被的各种细胞器(诸如线粒体、叶绿体、过氧化物酶体和细胞核。一、 细胞质基质cylasmic matri_ or cytosol 细胞质基质是细胞的重要构造成分,其体积约占细胞质的一半。表7-1 肝细胞中细胞质基质及细胞其他组分的数目及所占的体积比 (一)细胞质基质的涵义 1.细胞质基质的概念 真核细胞的细胞质中除去细胞器和内含物以外的、较为均质半透明的液态胶状物质称为细胞质基质,也称胞质溶胶cytosol)或细胞液。2.细胞质基质的组成 中间代谢有关的酶类、细胞质骨架构造 3.特点 细胞质基质是一个高度有序的体系;通过弱键而互相作用途
41、于动态平衡的构造体系。(二) 细胞质基质的功能 1、 是细胞内物质代谢的重要场所 细胞内所有的中间代谢过程均发生在细胞质中,其中大部分是在细胞质基质中进展的,如糖酵解过程、磷酸戊糖途径、糖醛酸途径等.2.与细胞质骨架亲密相关 维持细胞形态、运动、胞内物质运输及能量传递等.3.在蛋白质的修饰、蛋白质寿命的控制以及蛋白质 选择性的降解等方面有重要作用 蛋白质的修饰 :磷酸化和去磷酸化、糖基化、N-端甲基化、酰基化 控制蛋白质的寿命 降解变性和错误折叠的蛋白质 帮助变性或错误折叠的蛋白质重新折叠 二、膜结合细胞器(Membrane-bounded organelles) 在细胞内的分布 膜结合细胞器
42、在细胞内是按功能、分层次分布的.膜结合细胞器在细胞的生命活动中具有重要作用。表7-2 真核细胞膜结合区室的主要功能 细胞器区室主要功能 内质网 大多数脂的合成场所,蛋白质合成和集散地 高尔基体 蛋白质和脂的修饰、分选和包装 溶酶体 细胞内的降解作用 胞内体 内吞物质的分选 过氧化物酶体 毒性分子的氧化 线粒体 通过氧化磷酸化合成ATP 叶绿体 进展光合作用 在这些膜结合的细胞器中,线粒体、叶绿体、过氧化物酶体独立性很强,并且有特别的功能;其他几种膜结合细胞器,如内质网、高尔基体、溶酶体和小泡,虽然有不同的构造和功能,但是它们都参与蛋白质的加工、分选和膜泡运输,形成了一个特别的细胞内系统。三、
43、细胞内膜系统Endomembrane System及其功能 定义:位于细胞质内,在构造、功能和发生上相关的由膜围绕的细胞器或细胞构造称为细胞内膜系统,主要包括内质网、高尔基体、溶酶体、胞内体和分泌泡等。功能:区隔化;增加内外表积,进步代谢和调节才能。从系统发生来看内膜系统起于质膜的内陷和内共生。从个体发生来看新细胞的内膜系统来于原有内膜系统的分裂,具有核外遗传的特性。一内质网的形态构造与功能 K.R.Porter和A.D.Claude等于1945年发现于培养的小鼠成纤维细胞,因最初看到的是位于细胞质内部的网状构造,故名内质网endoplasmic reticulum,ER。内质网是由封闭的管状
44、或扁平囊状膜系统及其包被的腔形成互相沟通的三维网络构造。内质网通常占细胞膜系统的一半左右,体积约占细胞总体积的10以上。内质网是细胞内除核酸以外一系列重要的大分子如蛋白质、脂质和糖类合成的基地。1、 内质网的两种根本类型 根据内质网上是否附有核糖体,将内质网分为两类:糙面内质网(Rough ER)和光面内质网(Smooth ER) 。糙面内质网(rough endoplasmic reticulum, RER) 多呈大的扁平膜囊状, 在电镜下观察排列极为整齐。它是核糖体和内质网共同构成的复合机能构造, 普遍存在于分泌蛋白质的细胞中, 主要功能是合成分泌性的蛋白质、多种膜蛋白和酶蛋白。光面内质网
45、(smooth endoplasmic reticulum, SER) 无核糖体附着的内质网称为光面内质网, 通常为小的膜管和小的膜囊状, 而非扁平膜囊状, 广泛存在于各种类型的细胞中,包括合成胆固醇的内分泌腺细胞、肌细胞、肾细胞等。脂类合成的重要场所,它往往作为出芽的位点, 将内质网上合成的蛋白质或脂类转运到高尔基体。2、 内质网的功能 蛋白质的合成是糙面内质网的主要功能 细胞中的蛋白质都是在核糖体上合成的,并且起始于细胞质基质,但有些蛋白质在合成开场不久后便转在内质网膜上,继续进展蛋白质合成。这些蛋白主要有:向细胞外分泌的蛋白,如抗体、激素;膜的整合蛋白;构成内膜系统细胞器中的可驻留蛋白;需要进展修饰的蛋白,如糖蛋白。蛋白质的修饰与加工 包括糖基化、羟基化、酰基化、二硫键形成等,其中最主要的是糖基化,几乎