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1、摘要摘要 目前研究维生素C测定方法的报道较多，如滴定法、光度分析法、高效液相色谱法等，各种方法各有特点。特别是高效液相色谱法是近年来发展较快的一种方法。本文对近年来有关维生素C的测定方法进行了综述。第1页/共50页关键词 维生素维生素C 滴定法滴定法 光度分析法光度分析法 高效液相色普法等高效液相色普法等 第2页/共50页概述 维生素C是可溶于水的无色结晶，是一种分子结构最简单的维生素。维生素C有防治坏血病的功能，所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。维生素C能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态，起解毒作用等。其广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食
2、品中含量尤为丰富。准确测定维生素C的含量，对饮食健康、医疗保健都具有十分重要的意义。近年来报道的测定方法主要有滴定法、光度法、高效液相色谱法等。第3页/共50页维生素维生素C的结构式的结构式 维生素C：六碳的多羟基内酯第4页/共50页第5页/共50页1 滴定法测定维生素C 1.1 21.1 2，6 6一二氯靛酚法一二氯靛酚法 1.2 1.2 微量滴定法微量滴定法第6页/共50页2,6-2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素二氯酚靛酚滴定法测定维生素C C含含量量其能还原2,6-二氯酚靛酚染料。维生素C具有还原性的烯二醇基，我们通过氧化还原滴定来测定维生素C第7页/共50页 维生素C 2,6-二氯酚
3、靛酚 维生素C 2,6-二氯酚靛酚（还原型）（氧化型，粉红色）（氧化型）（还原型）+=2,6-二氯酚靛酚染料的钠盐在水溶液中显蓝色，在酸性溶液中呈红色，被还原后红色消失。第10页/共50页碘量法碘量法原理：由于维生素C分子中的烯二醇基有极强的还原性，能被碘氧化，用碘滴定VCEC6H6O6/C6H8O6=0.18 ,EI2/I-=0.535 终点：淀粉为指示剂，溶液出现稳定的蓝色即为终点反应式：第11页/共50页碘量法碘量法碘的浓度由已知浓度的Na2S2O3标准溶液标定反应式：计算式：Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc)*100%第12页/共50页碘量法碘量法注意！测定时：加HAC
4、使溶液呈弱酸性 原因:(1)Vc还原性很强，在空气中很容易被氧化，在碱性介质中更甚(2)I2在碱性介质中会发生歧化反应加HAC可减少VC的副反应，避免实验误差第13页/共50页电位滴定法电位滴定法原理：根据滴定过程中电池电动势的变化来确定反应终点.Pt为指示电极，甘汞作参比电极E池E+-E-+E液接电位EI2/I-+k(常数)第14页/共50页电位滴定法电位滴定法原理(具体来说:)随着滴定剂的加入，由于发生化学反应，待测离子浓度将不断变化；从而指示电极电位发生相应变化；导致电池电动势发生相应变化；计量点附近离子浓度发生突变；引起电位的突变，因此由测量工作电池电动势的变化就能确定终点。第15页/
5、共50页 电位滴定法电位滴定法u右图：电位滴定法基本仪器装置计算式：(与碘量法相同)Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc)*100%优点：解决了滴定分析中遇到有色或浑浊溶液时无法指示终点的问题第16页/共50页2 2 分光光度测定维生素C C2.1 22.1 2，4 4一二硝基苯肼分光光度法2.2 2.2 钼蓝比色法2.3 2.3 其他方法第17页/共50页2，4一二硝基苯肼分光光度法 原理：维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸反应式：第18页/共50页2，4一二硝基苯肼分光光度法pH5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古洛糖酸二酮古洛糖酸第19页/共50页2,4
6、一二硝基苯肼分光光度法脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎脎在500nm波长有最大吸收脎的结构：第20页/共50页分光光度法分光光度法样品溶液与VC标准溶液按上述方法同样处理500nm处测吸光度下图：721型分光光度计第21页/共50页钼蓝比色法 马占玲等用钼蓝比色法测定青椒中还原型维生素C含量的基本原理和方法。测定波长839 nm，维生素C含量在00040024 mgmL范围内呈线性关系，回收率为972。该方法简单、快速、准确。第22页/共50页钼蓝比色法逯家辉等提出了一种测定维生素C的新方法，它是基于Folin B试剂与抗坏血酸在pH=3的三氯乙酸酸性介质中反
7、应生成脱氢抗坏血酸，反应产物在910 nm波长处有最大吸光度进行定量分析。该方法的线性范围为0500gmL，相关系数r=0999 86，回收率为981210215。第23页/共50页差示旋光法差示旋光法选定选定pH为为2.2和和6.2第27页/共50页3 高效液相色谱法测定维生素C3.1 HYPERSIL3.1 HYPERSILC8C8色谱柱法色谱柱法3.2 VenusilXBP3.2 VenusilXBPC18C18柱法柱法3.3 3.3 其他方法其他方法第34页/共50页HYPERSILHYPERSILC8C8色谱柱法色谱柱法 采用HYPERSILC 8色谱柱，用01低浓度的草酸作流动相，
8、陈昌云等采用005 molL磷酸二氢钾缓冲液：甲醇=80：20(vv)作流动相。流速为10mLmin，二极管阵列检测器，检测波长为254 nm。第35页/共50页3.2 VenusilXBPC18柱法 系统采用VenusilXBPC18柱(46x250 mm，5g)，用02的偏磷酸的水溶液作为流动相，流速1 mlmin，检测波长240 nm；维生素C浓度在01-10 mgmL范围内有良好的线性关系。该方法回收率9989，标准偏差091，操作简便、灵敏、可靠 第36页/共50页薄层扫描法原理 维生素C具有 较强还原性，可使蓝色染料2，6-二氯靛酚钠定量地还原成无色的酚亚胺，而本身被氧化成去氢抗坏
9、血酸，利用此特征进行薄层扫描法测定含量。第37页/共50页结束语总之，维生素C的测定方法很多，各种方法各有特点，常用的滴定法方法简单，但在滴定有色物质终点不易判断，分光光度法操作费时，高效液相色谱法是目前发展较快的一种方法，方法灵敏，选择性好，有较好的发展前景。毛细管电泳n51是近几年新兴的分析方法，具有效率高、分析时间短、样品处理简单等特点，但有待于进一步完善。第45页/共50页参考文献参考文献1吴春艳水果中维生素C含量的测定及比较J武汉理工大学学报，2oo7，29(3)：90912王元秀，庄海燕微量滴定法测定猕猴桃中维生素C的含量J1济南大学学报(自然科学版，2001，15(4)：374，
10、3张颖，等不同产地枸杞子中维生素C含量测定J中国医院药学杂志，2004，24(8)：5005014袁叶飞，甄汉深，欧贤红分光光度法测定大枣中的维生素C含量J安徽中医学院学报，2006，25(2)：40-415马占玲，等青椒中还原型维生素C含量的测定J渤海大学学报(自然科学版)，2006，27(2)：111-113第46页/共50页参考文献参考文献6逯家辉，等F0lin B分光光度法测定蔬菜中维生素C的含量J分析检测，2oo5，26(8)：1711727王艳颖，等高效液相色谱法测定草莓中维生素C含量J大连大学学报，2006，27(2)：21228姜波，范圣第，刘长建，花艳红菠萝中维生素C的高效液
11、相色谱分析J大连民族学院学报，2003，5(1)：52539刘长建青椒中维生素C的高效液相色谱分析J大连轻工业学院学报，2004，23(3)：22923010陈昌云，李小华，刘莉莉高效液相色谱法测定蜜柚中维生素C的含量J化工时刊，2oo7，21(8)：1921第47页/共50页参考文献参考文献11王爱月，张向兵，李发生高效液相色谱法测定食品及保健品中维生素C含量的研究J】中国卫生检验杂志，2006，16(10)：1175-117612雍莉，等高效液相色谱法快速测定保健食品和果蔬中的VitCJ现代预防医学，2005，32(3)：24724813胡志群，王惠聪，胡桂兵高效液相色谱测定荔枝果肉中的糖
12、、酸和维生素CJ果树学报，2005，22(5)：58214张秀梅，等高效液相色谱法测定菠萝果实维生素C含量J福建果树，2oo7，140(1)：202115杨建洲，张荣莉毛细管区带电泳分析果蔬中的维生素C含量J分析化学，2oo2，30(1)：120第48页/共50页谢词本文是在徐洁老师的精心指导下独立完成的。为此，我首先要感谢徐老师，她对我的论文提出了实践性的建议，徐老师教学严谨，踏踏实实，对我的影响极大。从她身上我知道了该如何对待自己的工作，该如何做好自己的工作，为我以后踏上工作岗位有很大的帮助，使我对工作有了更新的态度，在以后的学习工作中我会加倍努力以回报老师的辛勤。再次感谢徐老师的言传身教。第49页/共50页感谢您的观看。第50页/共50页