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1、肾上腺素和去甲肾上腺素对心脏和血管的比较第1页/共22页实验目的观察肾上腺素和去甲肾上腺素对心脏和血管的作用，比较和分析其作用机制第2页/共22页实验原理激素部位综合受体产生作用肾上腺素心脏1三正效应血管皮肤，胃，肾 皮肤，肠，血管平滑肌血管收缩骨骼肌，肝大剂量血管收缩小剂量 2血管舒张去甲肾上腺素心脏1三正效应（弱）血管全身血管血管收缩第3页/共22页实验材料与试剂实验1实验对象 家兔 试剂20%氨基甲酸乙脂，0.5%的肝素，生理盐水，5:100000肾上腺素，1:10000去甲肾上腺素实验2实验对象：蟾蜍试剂：任氏液，5:100000肾上腺素，1:10000去甲肾上腺素第4页/共22页实验
2、仪器与设备 实验1哺乳动物手术器械一套 生物信号采集处理系统张力换能器 兔手术台 动脉夹 动脉导管 铁支架 丝线 注射器实验2蛙类手术器械一套 生物信号采集处理系统 铁支架张力换能器 双凹夹 试管夹 蛙心插管 滴管 丝线第5页/共22页实验方法实验1动物的分组与处理：取8只身体状况基本相同的家兔，随机等分为两组，一组为在体实验组，另一组为在体对照组指标的观察：以动脉血压为指标，分析肾上腺素和去甲肾上腺素对血管活动的调节实验2 取8只身体状况基本相同的蟾蜍，随机等分为两组，一组为在体实验组，另一组为在体对照组第6页/共22页实验2取8只身体状况基本相同的蟾蜍，随机等分为两组，一组为在体实验组，另
3、一组为在体对照组指标的观察：以心率，心肌收缩力为指标，分析肾上腺素和去甲肾上腺素对心脏活动的调节第7页/共22页实验技术路线1，麻醉：家兔称重后，耳缘静脉缓慢注射20氨基甲酸 乙酯（戊巴比妥钠（乙酯（5 mlkg-1）进行麻醉。当动物 四肢松软，呼吸变深变慢，角膜反射迟钝时，表明动物已被麻醉，即可停止注射。2：动物的固定：将麻醉的家兔仰卧位固定于兔手术台上。第8页/共22页实验技术路线3,手术操作剪去颈前部兔毛，沿正中线切开皮肤5-7cm，用止血钳纵向分离皮下组织于正中线分开颈部肌肉，暴露气管。在气管下方穿一根线备用，在甲状软骨下约1cm处剪一倒“T”型切口，插入气管插管，用备用线结扎并固定。
4、在气管两侧找到并辨认迷走神经，交感神经，减压神经（即家兔的主动脉神经）以及颈总神经。用玻璃分针先仔细分离右侧减压神经，然后分离右侧迷走神经，交感神经和颈总神经。分别在各神经、血管下穿一根不同颜色的丝线备用。第9页/共22页动脉插管分离左侧颈总动脉2-3cm(尽可能向头端游离)，远心端穿线并结扎，近心端用动脉夹夹闭，在血管下穿线备用。在耳缘静脉注射0.5肝素生理盐水2ml，并在动脉导管尖端注入0.5%肝素生理盐水0.1ml。用眼科剪在结扎线的近端动脉上剪一斜切口，向心脏方向插入已准备好的动脉导管（注意管内不应有气泡），结扎固定。压力换能器与动物心脏应保持在同一水平。第10页/共22页观察项目1，
5、记录正常血压放开动脉夹，记录静息状态下家兔动脉血压曲线，观察正常血压波动曲线。2，静脉注射小剂量肾上腺素耳缘静脉注射小剂量肾上腺素溶液，观察血压变化3，静脉注射大剂量肾上腺素待动脉血压曲线恢复正常后，耳缘静脉注射大剂量的肾上腺素溶液观察血压的变化4，静脉注射去甲肾上腺素耳缘静脉注射去甲肾上腺素溶液0.20.3ml,观察血压变化第11页/共22页实验仪器连接与调试及装置1，仪器装置将动脉导管与压力换能器相连，通过三通开关用生理盐水冲灌压力换能器和动脉导管。排尽压力换能器与动脉导管中的气泡。然后关闭三通开关备用，若压力换能器没有定标，要对压力换能器定标。2仪器连接将压力换能器与生物信号采集系统相连
6、，将刺激电极输入端与刺激输出端相连，将刺激电极输出端与保护电极相连3调零，压力定标和制压实验前，一般已调整好测量系统，实验过程中，勿轻易改动。第12页/共22页实验21，备用线将前后腔静脉和左右肺静脉一起结扎(注意勿结扎住静脉窦).将心脏回复指原位1，取蟾蜍一只，用探针捣毁脑和脊髓，将其仰卧固定在蛙板上。用镊子夹起皮肤，然后将胸部剑突软骨下方的皮肤剪出一个“V”字形切口，暴露出剑突。用镊子夹住剑突下端，在肌肉层上剪出“V”形切口。再用粗剪刀沿正中线剪开胸骨，并把左右两侧胸骨完全剪掉，眼科剪仔细剪开心包膜，暴露心脏。2，仔细识别心房、心室、动脉圆锥、主动脉、静脉窦、前后腔静脉等。3，结扎血管：在
7、右主动脉下穿一根线并结扎，再在左右主动脉下穿一根线备用。用玻璃分针将心尖向上翻至背面，以备用线将前后腔静脉和左右肺静脉一起结扎(注意勿结扎住静脉窦).将心脏回复指原位。第13页/共22页蛙心插管在左主动脉下穿两根线。用一根线结扎左主动脉远心端，另一线备用。提起左主动脉远端缚线，用眼科剪在左主动脉上靠近动脉圆锥处剪一“V”形切口，将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主动脉，插至动脉圆锥时，略向后退，在心室收缩时，沿心室后壁方向下插，经主动脉瓣插入心室腔内（不可插入过深，以免心室壁堵住插管下口）。若插管成功进入心室，管内液体会随着心室搏动而上下移动。用左主动脉近心端的备用线结扎插管，并将结扎线固定
8、于插管侧面的小突起上。第14页/共22页游离心脏提起插管，在接线远端分别剪断主动脉左右分支；剪短左右肺动脉和前后腔静脉，将心脏离体。用滴管吸进插管内的余血加入新鲜任氏液反复冲洗数次，直至液体完全澄清。保持灌流液面高度恒定（1-2cm），即可进行试验。第15页/共22页仪器连接用试管夹将制备好的离体蛙心固定于支架上，在心脏舒张期用蛙心夹夹住心尖部，并连接到张力换能器上（勿将心脏受到过度牵拉）。将张力换能器的输出线与生物信号采集处理系统相连。第16页/共22页观察项目1，描记正常蛙心收缩曲线幅度：代表心脏波动的强弱。疏密：代表心率。规律性：代表心脏波动的节律性。顶点水平：代表心脏收缩的程度。基线：
9、代表心脏舒张的程度。2，肾上腺素的影响 在任氏液中滴加1-2滴5:100000去甲肾上腺素溶液，观察曲线的变化。出现效应后，用新鲜任氏液换洗，直至心跳曲线恢复正常。3，去甲肾上腺素的影响 在任氏液中滴加1-2滴1:10000去甲肾上腺素溶液，观察曲线的变化。第17页/共22页实验预期结果实验1器官加入试剂预期现象心脏肾上腺素溶液0.5mi心脏活动加强，心率加快去甲肾上腺素溶液0.5mi心脏活动加强，心率加快肠系膜动脉小剂量肾上腺素溶液0.1mi血管收缩去甲肾上腺素溶液0.1mi血管收缩大剂量肾上腺素溶液0.5mi血管收缩去甲肾上腺素溶液0.5mi血管收缩肝动脉小剂量肾上腺素溶液0.1mi血管收
10、缩去甲肾上腺素溶液0.1mi血管收缩大剂量肾上腺素溶液0.5mi血管舒张去甲肾上腺素溶液0.5mi血管收缩第18页/共22页实验21，滴加肾上腺素溶液后，心率加快，心肌收缩力增强2，滴加去甲肾上腺素溶液后，心率变慢第19页/共22页实验分析1，静脉注射氨基甲酸乙酯溶液时，刚开始小兔子异常兴奋，为使兔子快速镇静下来，注射前3ml时应迅速，但不可过速防止兔子死亡，若兔子在注射时出现异常情况，应停止注射观察5分钟后再做决定。2，静脉注射时针不易扎入血管，静脉注射时应该从耳缘静脉远心端开始进针，先进入静脉下端然后在任氏液中滴加1-2滴1:10000去甲肾上腺素溶液，观察曲线的变化。3，插蛙心插管时，稍有不慎，蛙心可能停止跳动而使实验失败，所以插蛙心插管要小心，先使蛙心插管进入动脉圆锥，在向下进入左心室，实验中保持心脏处于任氏液环境中，还有如果蛙心插管稍插入左心室，蛙心搏动就发生很大变化，那么将蛙心稍插入左心室即可，但不过实验过程会变慢。4，为什么用蟾蜍做肾上腺素和去甲肾上腺素对心脏作用的影响的比较？答：最主要的原因是因为蟾蜍是两栖动物，体外条件下易维持其正常的生理环境，从而使实验难度大大降低，更易获得成功。第20页/共22页第21页/共22页感谢您的观看！第22页/共22页