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1、会计学1探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量(shling)的变化的变化第一页，共30页。2、种群、种群(zhnqn)数量的变化数量的变化种群种群(zhnqn)数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等“S”型曲线有一个型曲线有一个K值，即环境容纳量。值，即环境容纳量。种群种群(zhnqn)数量的增长也受到许多环境因素（如温度、培数量的增长也受到许多环境因素（如温度、培养液的养液的pH、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等）的影响。、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等）的影响。第2页/共30页第二页，共30页。探究探究探究探究(tnji)(tnj
2、i)过程过程过程过程n n1 1提出问提出问题：题：n n2 2作出假作出假设：设：n n3 3设计实设计实验：验：n n4 4进行实进行实验：验：n n5 5分析结分析结果果(ji gu)(ji gu)和和n n 表达表达交流：交流：n n6 6得出结得出结论：论：培养液中酵母菌种群培养液中酵母菌种群(zhn qn)的数量是怎样随时间变化的？的数量是怎样随时间变化的？酵母菌在开始一段时间呈酵母菌在开始一段时间呈“J J”型增长，随着时间的推移，型增长，随着时间的推移，由于资源和空间有限，呈由于资源和空间有限，呈“S S”型增长。型增长。连续培养连续培养5 5天，每天用显微镜和血球计数板天，每
3、天用显微镜和血球计数板计数出酵母菌种群密度计数出酵母菌种群密度各小组汇报实验结果，结合前各小组汇报实验结果，结合前4 4天的结果，画天的结果，画出酵母种群增长的出酵母种群增长的曲线图曲线图并进行分析。并进行分析。酵母菌在开始一段时间呈酵母菌在开始一段时间呈“J J”型增长，但随型增长，但随着时间的推移，由于资源和空间有限，将呈着时间的推移，由于资源和空间有限，将呈“S S”型增长，并最终将全部死亡。型增长，并最终将全部死亡。第3页/共30页第三页，共30页。3 3 3 3设计设计设计设计(shj)(shj)(shj)(shj)实实实实验：验：验：验：n n将将将将10mL10mL10mL10m
4、L无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中；无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中；无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中；无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中；n n将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀；将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀；将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀；将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀；n n将试管在将试管在将试管在将试管在28282828条件下连续培养条件下连续培养条件下连续培养条件下连续培养5d5d5d5d；n n每天取样每天取样每天取样每天取样(qyng)(qyng)(qyng)(qyng)计数酵母菌数量；计数酵母菌数量；计数酵母菌数量；计数酵母菌
5、数量；n n分析结果，得出结论。分析结果，得出结论。分析结果，得出结论。分析结果，得出结论。是否设置是否设置(shzh)对照组和多组重复实对照组和多组重复实验？验？为什么要连续培养？为什么要连续培养？如何取样计数如何取样计数？记录表怎样设计记录表怎样设计？计数时有哪些注意事项计数时有哪些注意事项？第4页/共30页第四页，共30页。计数计数(j sh)室室计计数数室室（中中间间大大方方格格(fn(fn)）的的长长和和宽宽各各为为1mm1mm，深深度度为为0.1mm0.1mm，其其体体积积为为_mm3 _mm3，合，合_mL_mL。1mm0.1110-4血球计数板血球计数板:一种专门一种专门(zh
6、unmn)计数较计数较大单细胞微生物的仪器大单细胞微生物的仪器第5页/共30页第五页，共30页。计数计数(j sh)室室计数计数(j sh)(j sh)室分为室分为2525中格（双线边）中格（双线边）每一中格又分为每一中格又分为(fn wi)16(fn wi)16小格小格计数室是由计数室是由_个小格组成个小格组成2516=400第6页/共30页第六页，共30页。如何如何(rh)计数？计数？五五 点点 取取 样样(qyng)(qyng)法法样样 方方 法法(fngf)(fngf)每每mL培养液中酵母菌数量培养液中酵母菌数量=A(平均每个中格酵母细胞数平均每个中格酵母细胞数)25104稀释倍数稀释
7、倍数A1A2A5A3A4第7页/共30页第七页，共30页。第第 1 1 天天第8页/共30页第八页，共30页。第第 4 4 天天第第 6 6 天天第9页/共30页第九页，共30页。第第 7 7 天天死亡死亡(swng)第10页/共30页第十页，共30页。酵母菌数量酵母菌数量(shling)变化记录表变化记录表第11页/共30页第十一页，共30页。计数计数(j sh)时有哪些注意事项？时有哪些注意事项？从试管从试管(shgun)(shgun)中吸出培养液进行计数之前，要将试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管(shgun)(shgun)轻轻震轻轻震荡几次；荡几次；如果酵母菌浓度过大，应先稀释。如
8、果酵母菌浓度过大，应先稀释。对于压在中格界线上的酵母菌，一般只取相邻两边对于压在中格界线上的酵母菌，一般只取相邻两边(lingbin)(lingbin)及夹角计数；及夹角计数；对于已经出芽的酵母菌，对于已经出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两时，即可作为两个菌体计算；个菌体计算；已死亡的酵母菌不计数已死亡的酵母菌不计数。每个样品一般计数三次，取其每个样品一般计数三次，取其平均值平均值。第12页/共30页第十二页，共30页。培养液中酵母菌种群数量培养液中酵母菌种群数量(shling)(shling)的变化的变化 第13页/共30页第十三页，共30页。第14页/
9、共30页第十四页，共30页。死亡死亡(swng)第15页/共30页第十五页，共30页。在计数前，还应有哪些在计数前，还应有哪些在计数前，还应有哪些在计数前，还应有哪些(n(n xi)xi)步骤？需注意些什步骤？需注意些什步骤？需注意些什步骤？需注意些什么？么？么？么？n n培养液培养液配制配制n n灭菌灭菌(mi jn)n n接种接种n n培养培养无菌操作无菌操作无菌操作无菌操作(cozu)(cozu)培养条件培养条件培养条件培养条件第16页/共30页第十六页，共30页。试管试管编号编号培养液培养液/mL/mL无菌水无菌水/mL/mL酵母菌母酵母菌母液液/mL/mL温度温度（）A A10100
10、.10.12828B B10100.10.15 5C C10100.10.12828 针对针对“培养液中酵母菌种群数量培养液中酵母菌种群数量(shling)(shling)的动态变化的动态变化”，有人提出了新的问，有人提出了新的问题，某同学按下表完成了有关实验。题，某同学按下表完成了有关实验。第17页/共30页第十七页，共30页。温度温度(wnd)(wnd)、营养物质对酵母菌生长的影响、营养物质对酵母菌生长的影响 第18页/共30页第十八页，共30页。试管试管编号编号培养液培养液/mL/mL无菌水无菌水/mL/mL酵母菌母酵母菌母液液/mL/mL温度温度（）A A10100.10.12828B
11、 B10100.10.15 5C C10100.10.12828第19页/共30页第十九页，共30页。以计数酵母菌为例以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小以每小方格内含有方格内含有4-5个酵母细胞为宜个酵母细胞为宜,一般稀释一般稀释10倍即可倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加在中央的计数室上加盖专用的厚玻片盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻用吸管吸
12、取一滴置于盖玻片的边缘片的边缘,使菌液缓缓渗入使菌液缓缓渗入,多余多余(duy)的菌液用吸水的菌液用吸水纸吸取纸吸取,捎待片刻捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内使酵母菌全部沉降到血球计数室内.血球计数血球计数(j sh)板的使用板的使用第20页/共30页第二十页，共30页。第21页/共30页第二十一页，共30页。(5)计数时计数时,如果使用如果使用16格格25格规格的计数室格规格的计数室,要按对角要按对角线位线位,取左上取左上,右上右上,左下左下,右下右下4个中格个中格(即即100个小格个小格)的酵的酵母菌数母菌数.如果规格为如果规格为25格格16格的计数板格的计数板,除了取其除了取其4
13、个对个对角方位外角方位外,还需再数中央的一个中格还需再数中央的一个中格(即即80个小方格个小方格)的酵的酵母菌数母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上一般只计数大方格的上方和左方线上的酵母细胞方和左方线上的酵母细胞(7)对每个样品计数三次对每个样品计数三次,取其平均值取其平均值,按下列按下列(xili)公式公式计算每计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数菌液中所含的酵母菌个数.第22页/共30页第二十二页，共30页。3.计算公式计算公式(1)16格格25格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式:酵母细胞酵母细胞(xbo)数数/ml=100小格内
14、酵母细胞小格内酵母细胞(xbo)个数个数/100400104稀释倍数稀释倍数(2)25格格x16格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式:酵母细胞酵母细胞(xbo)数数/ml=80小格内酵母细胞小格内酵母细胞(xbo)个数个数/80400104稀释倍数稀释倍数第23页/共30页第二十三页，共30页。1 1怎样怎样(znyng)(znyng)进行酵母菌的计数？进行酵母菌的计数？对一支试管中的培养液对一支试管中的培养液(可定为可定为10ml)10ml)中的酵母菌逐个中的酵母菌逐个计数计数(j sh)(j sh)是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：先将盖玻
15、片放在计数先将盖玻片放在计数(j sh)(j sh)室上，用吸管吸取培养液，室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数(j sh)(j sh)室底部，将计数室底部，将计数(j sh)(j sh)板放在载物台的中央，计数板放在载物台的中央，计数(j(j sh)sh)一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算计一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算计算中的酵母菌总数，盖玻片下，培养液厚度为算中的酵母菌总数，盖玻片下，培养液厚度
16、为0.1mm0.1mm，可算，可算出出10ml10ml培养液中酵母菌总数的公式：培养液中酵母菌总数的公式：2.5104x(x2.5104x(x为小方格为小方格内酵母菌数内酵母菌数)第24页/共30页第二十四页，共30页。2 2从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻振荡从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么？几次。这是为什么？3 3本探究需要设置对照吗？如果本探究需要设置对照吗？如果(rgu)(rgu)需要请讨论对照组应需要请讨论对照组应怎样设计和操作；如果怎样设计和操作；如果(rgu)(rgu)不需要，请说明理由。不需要，请说明理由。4 4需要做重复实验
17、吗？需要做重复实验吗？目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，以保证估目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，以保证估算算(sun)(sun)的准确性，减少误差。的准确性，减少误差。不需要，本实验不需要，本实验(shyn)(shyn)旨在探究培养液中酵母旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化，只要分组实验菌在一定条件下的种群数量变化，只要分组实验(shyn)(shyn)，获得平均数值即可。，获得平均数值即可。不用重复，只要分组实验获得平均值即可。不用重复，只要分组实验获得平均值即可。第25页/共30页第二十五页，共30页。5 5、怎样记录结果？记录表怎样设计？、怎样记录结果？记录表怎样设计？如果
18、一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应采取如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应采取(ciq)(ciq)怎样怎样的措施？的措施？第第1 1天天第第2 2天天第第3 3天天第第4 4天天第第5 5天天第第6 6天天第第7 7天天第第1 1组组第第2 2组组第第3 3组组-第第n n组组平均值平均值 摇匀试管取摇匀试管取1mL1mL酵母菌培养液稀释酵母菌培养液稀释n n倍后，再倍后，再用血球用血球(xuqi)(xuqi)计数板计数，所得数值乘以计数板计数，所得数值乘以n2.5104n2.5104，即为，即为10mL10mL酵母菌液中酵母菌个数。酵母菌液中酵母菌个数。只计数相邻只计数相邻(xin l
19、n)(xin ln)两边及其顶角的酵母菌数。两边及其顶角的酵母菌数。7 7 对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？第26页/共30页第二十六页，共30页。设计设计(shj)实验：实验：A组为实验组，装培养液组为实验组，装培养液10mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,环境温度环境温度28。B组装培养液组装培养液10mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,环境温度环境温度5，与，与A组形成温度条件对照。组形成温度条件对照。C组不装培养液，只装无菌水组不装培养液，只装无菌水10mL,酵母菌母液酵母菌母液0.1mL,环境温度环境温度28，与，与A组
20、形成营养条件对照。组形成营养条件对照。第27页/共30页第二十七页，共30页。计数计数计数：首先取样，每计数：首先取样，每天取样时间大体一致，并要遵守无菌操天取样时间大体一致，并要遵守无菌操作规范。每次取样前要试管振荡摇匀，正确作规范。每次取样前要试管振荡摇匀，正确(zhngqu)地使用地使用1mL刻度吸管将刻度吸管将lmL酵母菌培养液移入酵母菌培养液移入1支干净的试管里，然后用支干净的试管里，然后用滴管吸取滴管吸取1滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上的盖玻片的边滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上的盖玻片的边缘，待培养液自行渗入并充满网格后，再放在显微镜下进行细胞缘，待培养液自行渗入并充满网格后，再放在显微镜下进行细胞计数，后立即将数据填到记录表格中。如计数，后立即将数据填到记录表格中。如记数时发现，细胞数较记数时发现，细胞数较多，不易分辨，吸取的样液应当稀释。多，不易分辨，吸取的样液应当稀释。参考参考1：一次实验数据记录表：一次实验数据记录表参考参考2：出：出A、B、C各个处理的曲线图各个处理的曲线图第28页/共30页第二十八页，共30页。第29页/共30页第二十九页，共30页。感谢您的观看感谢您的观看(gunkn)！第30页/共30页第三十页，共30页。