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1、1.纸片扩散法2.稀释法3.E试验4.联合药敏实验药敏试验常用方法第1页/共20页了解：了解：1 1稀释法、稀释法、E-TESTE-TEST的原理、方法的原理、方法2 2联合药敏试验的结果判读和临床意义联合药敏试验的结果判读和临床意义理解：理解：纸片扩散法（纸片扩散法（K-BK-B法）原理和注意事项法）原理和注意事项掌握：掌握：纸片扩散法（纸片扩散法（K-BK-B法）的操作方法、结果的判读和法）的操作方法、结果的判读和临床意义临床意义 目的要求重点重点难点难点第2页/共20页实验材料菌株菌株大肠埃希菌大肠埃希菌培养基培养基水解酪蛋白琼脂（水解酪蛋白琼脂（MHMH琼脂）琼脂）纸片纸片环丙沙星、头
2、孢唑啉、万古霉素环丙沙星、头孢唑啉、万古霉素其他其他载玻片、无菌生理盐水、镊子、无菌棉签、游载玻片、无菌生理盐水、镊子、无菌棉签、游标卡尺（毫米尺）标卡尺（毫米尺）第3页/共20页CIZ50ug/ml CIZ50ug/ml实验原理贴药敏纸片贴药敏纸片药物扩散药物扩散形成抑菌圈形成抑菌圈第4页/共20页实验内容一、操作方法挑混比涂贴量第5页/共20页实验内容二、纸片扩散法结果判读及临床意义二、纸片扩散法结果判读及临床意义用游标卡尺量取抑菌圈直径用游标卡尺量取抑菌圈直径参照标准解释结果，按抗菌药物敏感性分为敏参照标准解释结果，按抗菌药物敏感性分为敏感、中介和耐药。感、中介和耐药。抗菌药物抗菌药物含
3、药量含药量抑菌直径（抑菌直径（mmmm）耐药耐药中介中介敏感敏感头孢唑林头孢唑林30ug30ug1414151715171818庆大霉素庆大霉素10ug10ug1212131413141515环丙沙星环丙沙星50ug50ug1515162016202121该抗菌药物在该抗菌药物在常规给药剂量常规给药剂量时达到的体内时达到的体内浓度能抑制或浓度能抑制或杀灭被测菌杀灭被测菌 常规剂量的抗常规剂量的抗微生物药物通微生物药物通常达到的全身常达到的全身浓度不能抑制浓度不能抑制杀灭被测菌，杀灭被测菌，临床治疗无效临床治疗无效 抗菌药物对被抗菌药物对被测菌测菌MICMIC接近接近于血液和组织于血液和组织中可
4、达到的水中可达到的水平，高于正常平，高于正常给药量进行治给药量进行治疗疗 第6页/共20页实验内容三、注意事项1、培养基的质量，如pH、厚度、表面湿度和保存等均会影响抑菌圈大小；2、药敏纸片的药量、吸水性、直径、保存等会影响测定结果；3、接种菌量也是影响结果的重要因素；4、采用标准菌株同时进行药敏试验作为质控；5、操作因素第7页/共20页24mm15mm第8页/共20页思 考 题1.如何评价抗生素的敏感性？2.常用体外药敏试验方法的比较。第9页/共20页稀释法第10页/共20页稀释法第11页/共20页结合稀释法和扩散法原理对微生物药敏试验直接定量的技术结合稀释法和扩散法原理对微生物药敏试验直接
5、定量的技术E-TEST第12页/共20页E-TEST第13页/共20页联合药敏试验第14页/共20页联合药敏试验第15页/共20页联合药敏试验第16页/共20页第17页/共20页抗菌药物敏感试验的意义可预测抗菌治疗的效果;指导抗菌药物的临床应用;监测细菌耐药性,分析耐药菌的变迁,掌握耐药菌感染的流行病学,以控制和预防耐药菌感染的发生和流行。第18页/共20页将定量抗菌药敏纸片贴在已接种的测试菌的MH琼脂平板上，纸片所含药物吸收琼脂水分溶解并不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌范围内测试菌生长被抑制而形成的无菌生长抑菌圈，抑菌圈大小反应测试菌对测定药物的敏感性。纸片琼脂扩散法原理第19页/共20页感谢您的观看！第20页/共20页