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1、HistoryofAntibiotics1495EuropeansMercury-syphilis（梅毒）ChineseMoldysoybeancurd-boils烫伤AmericanIndiansChewedbarkofcinchonatree-malarialfever（疟疾）1630EuropeansQuinine(barkofcinchona)-malaria第1页/共62页1877LouisPasteurInhibitionofsomemicrobesbyothers1908GelmoSynthesizedsulfanilamide磺胺(1stsulfonamide)第2页/共62页
2、1908-10PaulEhrlichSelectivestains;Synthesizedarseniccompoundarsphenamine;(NobelPrize)(606,Salvarsan)-syphilis(T.pallidum);Coinedtermsmagicbullet,chemotherapy,chemicalknife);第3页/共62页1928/9AlexanderFlemingInhibition of S.aureus coloniesbymoldPenicillium notatum;(NobelPrize)Discoveredmiracledrugpenicil
3、lin第4页/共62页1939 G.Domagk Therapeutic value of sulfonamides(磺胺);(Nobel Prize)Streptococcus and broad range antimicrobial activities 第5页/共62页1944/5SelmanWaksmanIsolatedstreptomycin（氯霉素）fromStreptomyces griseus(soilmicrobes);(NobelPrize)Proposedtermantibiotic=chemicalcompoundmadebyamicroorganismthatinh
4、ibitsorkillsothermicroorganismsatlowconcentrations第6页/共62页1945Florey&ChainReinvestigated,isolatedandcharacterizedpenicillin;(NobelPrize)Demonstratedpracticalclinicalvalueasbettermeanstopreventdeathfrominfectionofwarwounds第7页/共62页Asporethatdriftedintohislabandtookrootonaculturedishstartedachainofeven
5、tsthatalteredforeverthetreatmentofbacterialinfections(Alexander Fleming,Nobel Prize winner)第8页/共62页Today,thepenicillinclassofantimicrobialsisa cornerstoneofantibiotictherapy,andpenicillinanditsderivativesaresomeofthemanybroad-spectrumdrugsavailableforphysiciansandotherstoprescribe.第9页/共62页青霉素类抗生素抗菌作
6、用：革兰阳性菌：链球菌、葡萄球菌、破伤风、白喉、肺炎球菌、炭疽、消化链球菌；革兰阴性球菌：脑膜炎球菌；淋球菌嗜血杆菌属：百日咳杆菌、流感杆菌；其它：螺旋体。作用机理：干扰细菌细胞壁的合成。不良反应：毒性反应，变态反应，赫氏反应，二重感染。第10页/共62页头孢菌素类优点：抗菌作用强，耐青霉素酶，临床疗效高，毒性低，过敏反应较青霉素少见。第11页/共62页第一节第一节 概述概述抗生素的定义 “antibiotics”originated from“anti”and“bio”抗生素是指在低微浓度下即可对某些生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称。第12页/共62页抗生素的来源1.1.生物合成
7、（发酵）2.2.化学合成或半合成特点：1.化学纯度较低（三多）2.活性组分易发生变异 3.稳定性差第13页/共62页发酵液中杂质 无机盐、脂肪、各种蛋白质、各种降解产物、色素、热原、毒性物质 第14页/共62页鉴别试验1.官能团的显色反应2.光谱法3.色谱法4.生物学法第15页/共62页除有关物质外，增加异常毒性、细菌内毒素、热原、降压物质、无菌、聚合物 检查第16页/共62页含量测定方法（一）生物学方法（根据量反应平行线原理设计）第17页/共62页当抗生素在菌层培养基中扩散时，会形成抗当抗生素在菌层培养基中扩散时，会形成抗生素浓度由高到低的自然梯度，即扩散中心浓度高生素浓度由高到低的自然梯度
8、，即扩散中心浓度高而边缘浓度低。因此，当抗生素浓度达到或高于而边缘浓度低。因此，当抗生素浓度达到或高于MICMIC（最低抑制浓度（最低抑制浓度）时，试验菌就被抑制而不能）时，试验菌就被抑制而不能繁殖，从而呈现透明的抑菌圈。根据扩散定律的推繁殖，从而呈现透明的抑菌圈。根据扩散定律的推导，抗生素总量的对数值与抑菌圈直径的平方成线导，抗生素总量的对数值与抑菌圈直径的平方成线性关系。性关系。第18页/共62页测定抗生素抑菌或杀菌的能力优点1、与临床效果一致2、灵敏度高3、干扰物质少缺点1、操作繁琐2、培养时间长2、测定误差大第19页/共62页（二）化学及物理化学方法 根据抗生素的分子结构特点，利用其特
9、有的化学或物理化学性质。UV第20页/共62页以理化方法测定主药含量优点1.准确度高。2.简单、快速。1.不一定代表生物效价。缺点2.易受杂质干扰。第21页/共62页抗生素活性表示方法 效价单位 即指每毫升或每毫克中含有某种抗生素的有效成分的多少。用u表示例如 1mg青霉素钠为1670 u 1mg庆大霉素为590 u第22页/共62页抗生素的分类（按结构与性质）：内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类 林可霉素类、其他抗生素类第23页/共62页第二节第二节 内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素 青霉素类第24页/共62页头孢菌素类第25页/共62页酸性结构与性质一、Na
10、Na与碱金属(Na+、K+)成盐 （一）羧基 易溶于水 第26页/共62页与有机碱(普鲁卡因)成盐 难溶于水普鲁卡因青霉素第27页/共62页（二）手性C(5%头孢唑啉钠溶液 1824)头孢菌素类 C6 C7青霉素类 C3 C5 C6 旋光性 第28页/共62页 （三）共轭体系头孢菌素类 母核有共轭体系 青霉素类 母核无明显UV 多数有苯环取代基 UV第29页/共62页青霉素钠UV7-20第30页/共62页第31页/共62页（四）内酰胺环水溶液 不稳定 不稳定性因素四元环张力大 酰胺键易水解 第32页/共62页（某些金属离子）（温度）某些氧化剂第33页/共62页二、K+、Na+反应（一）鉴别 焰
11、色鲜黄色 +醋酸氧铀锌黄 Na+焰色紫色 +0.1%四苯硼钠+Ac白 K+第34页/共62页（二）呈色反应第35页/共62页1.羟肟酸铁反应-内酰胺类NaOH呈色Fe3+/3H+第36页/共62页2、与H2SO4-HNO3反应头孢菌素类第37页/共62页3.茚三酮反应 -氨基第38页/共62页（三）沉淀反应第39页/共62页1.遇酸在过量HCl或有机溶剂中溶解第40页/共62页2.有机胺盐反应（1）重氮化-偶合反应 重氮化重氮化-偶合反应偶合反应芳伯氨基第41页/共62页(四)色谱法HPLC比较供试品和对照品的保留时间(t)是否一致。TLC比较供试品和对照品的Rf值是否一致。第42页/共62页
12、（五）光谱法1.IR2.UV第43页/共62页IR法法-内酰胺环内酰胺环酰胺酰胺第44页/共62页三、特殊杂质的检查抗生素的特殊杂质主要有高分子聚合物，有关物质，异构体等。第45页/共62页（一）聚合物即药物中高分子杂质，分子量一般在10005000，个别可至10000。是内酰胺类药物过敏反应的主要原因。来源：外源性和内源性，前者包括蛋白，多肽等，后者指药物本身的聚合物。第46页/共62页方法：HPLC法例：头孢他啶中头孢他啶聚合物的测定色谱柱：葡聚糖凝胶G10为填充剂的色谱柱检测波长：254nm对照品溶液：头孢他啶外标法：头孢他啶聚合物以头孢他啶计算不得超过0.3第47页/共62页（二）有关
13、物质例：头孢呋辛酯中有关物质和异构体的检查HPLC自身对照法第48页/共62页步骤一：头孢呋辛酯异构体的制备步骤二：供试品溶液的制备步骤三：对照品溶液的制备（供试品溶液稀释100倍）步骤四：HPLC测定步骤五：根据标准比较色谱峰面积是否超过规定第49页/共62页三、含量测定(一)高效液相色谱法（HPLC）特点：能有效分离供试品中可能存在的降解产物、未除尽的原料及中间体等杂质。第50页/共62页示例：头孢克洛的测定(外标法)色谱条件：色谱柱：ODS流动相：磷酸二氢钾溶液（pH3.4）乙腈（92：8）检测波长：254nm第51页/共62页对照品供试品第52页/共62页第三节第三节 氨基糖苷类抗生素
14、氨基糖苷类抗生素链霉素链霉素 双氢链霉素双氢链霉素新霉素新霉素 卡那霉素卡那霉素庆大霉素庆大霉素 巴龙霉素巴龙霉素第53页/共62页链霉素链霉素链霉胍链霉胍+链霉糖链霉糖+N-甲基甲基-L-葡萄葡萄糖胺糖胺苷元苷元糖糖链霉双糖胺链霉双糖胺第54页/共62页一、结构与性质 碱性水溶性抗生素 多与硫酸成盐链霉素 3个庆大霉素 5个碱性中心溶解度与碱性（一）旋光性：（二）第55页/共62页链霉素 pH57.5庆大霉素 pH212 稳定UV（三）稳定性（四）链霉素水解产物反应（五）链霉素在230nm 有吸收第56页/共62页二、鉴别 茚三酮反应（一）羟基胺结构第57页/共62页（二）二）MolischMolisch试验试验 糖的性质糖的性质氨基糖苷类氨基糖苷类（羟甲基糠醛）第58页/共62页 麦芽酚反应（四）链霉糖特有反应H+分子重排第59页/共62页UV法（五）IR法（六）庆大霉素无UV吸收（七）色谱法：TLC：多以硅胶为薄层板，氯仿甲醇浓氨水为展开剂，茚三酮或碘蒸汽为显色剂 HPLC第60页/共62页含量测定本类抗生素的效价测定目前各国主要采用微生物检定法,HPLC法。由于此类抗生素多无紫外吸收，不能直接用紫外检测器，多采用柱前衍生化法（如茚三酮）。第61页/共62页感谢您的观看。第62页/共62页