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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 第一章绪论学习必备欢迎下载微生物学一般定义为讨论肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动的科学微生物丰富的多样性以及特殊的生物学特性(个体小、繁衍快、分布广等)使其在整个生命科学中占据着举足轻重的位置;表 1-1 重大大事1928 Griffith 发觉细菌转化(对其鼓励的讨论导致 1929 Fleming 发觉青霉素DNA 是遗传物质的确证)1944 Avery 等证明转化过程中 DNA 是遗传信息的载体 1953 DNA 双螺旋结构 1995 第一个独立生活的细菌(流感嗜血杆菌)全基因组序列测定完成 1996 第一个自养生活的古生菌(詹氏甲烷球
2、菌)基因组测序完成 1997 第一个真核生物(啤酒酵母)基因组测序完成 巴斯德1)完全否定了“ 自生说”曲颈瓶试验2)免疫学预防接种 3)证明发酵是于微生物引起的 4)其它奉献 巴斯德消毒法 柯赫1)微生物基本操作技术 a)固体培育基分别纯化微生物(细菌纯培育方法的建立)b)配置培育基(试验室内对各种微生物培育)c)流淌蒸汽灭菌 d)染色观看和显微摄影 2)病原细菌讨论 a)证明炭疽病菌是炭疽病的病原菌 b)发觉了肺结核的病原菌(诺贝尔奖)c)柯赫原就 证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原就 微生物的生物学特性1)极端环境下生存繁衍 2)代谢途径和功能(化能养分,厌氧生活,生物固氮,不释
3、放氧的光合作用)共有的基本生物学特性:生长繁衍代谢共用一套遗传密码,同源基因易操作性:个头小,结构简洁,生长周期短,易大量培育,易变异,重复性强等优势 其次章 微生物的纯培育和显微技术 无菌操作(火焰邻近进行 无菌箱或操作室内无菌环境进行)无菌技术 用于分别, 培育微生物的器具事先不含任何微生物;在转接, 培育微生物时防止 其它微生物的生长常用灭菌方法高压蒸汽灭菌(杀灭全部微生物(休眠体);养分成分不被破坏)高温干热灭菌(玻璃器皿)固体培育基获得纯培育的方法 不同微生物在特定培育基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳固的特点,可以成为对该微 生物进行分类、鉴定的重要依据;名师归纳总结 涂布平板使
4、用较多但有时涂布不匀称第 1 页,共 7 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 稀释倒平板学习必备欢迎下载操作较麻烦,对好氧菌热敏菌成效不好平板划线稀释摇管法挑选培育 富集培育微生物的保藏技术(干燥保藏法)常用方法:沙土管储存(产孢子的微生物,芽孢杆菌放线菌等)和冷冻真空保藏冷冻保藏使其代谢作用停止爱护剂(降低脱水作用防止细胞膜冻伤)一般光学显微镜辨论率最小可辨论距离=0.5/(nsin )提高辨论率的方法油镜? n 变大? 为物镜镜口角的半数,它取决于物镜的直径和工作距离 光学显微镜的制样 活体观看(压滴法,悬滴法,菌丝埋片法)染色观看打算显微镜性能的
5、因素?细菌染色法1)死菌 A)正染色 a)简洁染色法b)鉴别染色法(革兰氏染色法等)B)负染色:荚膜染色法等 2)活菌:用美篮或 TTC等作活菌染色 细菌的形状和排列:球状(不同种的球菌在细胞分裂时会形成不同的空间排列方式;常被作 为分类依据)杆状(排列方式常因生长阶段和培育条件而发生变化;一般不作为分类依据)螺旋状 放线菌的形状结构 孢子丝的形状结构?原核生物的细胞大小球菌( 0.5-1 m 直径)杆菌( 0.2-1 m 直径1-80 m 长度)螺旋菌(0.3-1 m 直径 1-80 m 长度 两端之间距离而非实际长度)测量细菌大小的方法 1)显微镜测微尺 2)投影法或显微照相后依据放大倍数
6、运算 表示大小的方法 球菌直径 杆菌螺旋菌长度和宽度 测量单位 m?霉菌的形状结构霉菌菌体分支或不分枝菌丝构成菌丝呈管状无隔膜菌丝有隔膜菌丝酵母菌形状结构 以芽殖或裂殖来进行无性繁衍的单细胞真菌,极少可产生子囊孢子进行有性繁衍 一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬形 第三章 微生物细胞的结构与功能 原核生物特点和种类特点:一大类细胞微小、细胞膜无核膜包裹(只有称作核区的暴露DNA)、的原始单细胞生物;1)基因组由无核膜包裹的双链环状DNA 组成 2)缺乏由单位膜分隔、包围的细胞器3)核糖体为 70S 型种类: 2 个 1)域细菌域a)狭义的细菌b)放线菌 c)蓝细菌 d)支原体 e)立克次氏体f)
7、衣原体;共同特点:细胞壁含有特殊肽聚糖(支原体无壁)细胞膜含有酯键连接的脂质,DNA 序列中一般没有内含子;细胞壁功能 1)固定形状,提高机械强度,免受渗透压等外力损耗 2)为细胞的生长、分裂和鞭毛运动所必需 3)阻拦酶蛋白和某些抗生素等大分子物质(分子质量大于 800)进入细胞,免受溶菌酶消化酶青霉素等损耗 和噬菌体的敏锐性;4)给予细菌具有特定的抗原性、致病性以及对抗生素名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 7 页精选学习资料 - - - - - - - - - 革兰氏阳性菌细胞壁组成学习必备欢迎下载c)肽桥或肽间桥1)肽聚糖 a)双糖单位b)四肽尾或四肽侧链2)磷酸壁
8、a)壁磷酸壁b)膜磷酸壁3)外膜蛋白4)周知阴性菌细胞壁组成1)肽聚糖2)外膜 a)脂多糖 b)磷脂 c)脂蛋白空间,外膜与细胞膜之间的狭窄空间,呈胶状,存在多种周质蛋白;合位点(直接接触点)区分 表 3-1 P52or46 革兰氏染色的机理5)外膜与内膜间的黏细胞壁化学成分的差异引起物理特性(脱色才能)的不同结晶紫初染碘液媒染乙醇脱色沙黄复燃 青霉素溶菌酶的作用机制 肽聚糖?古生菌细胞壁与真细菌不同的地方1)假肽聚糖细胞壁 -1,3 糖苷键(不被溶菌酶水解)2)特殊多糖细胞壁3)硫酸化多糖细胞壁 4)糖蛋白细胞壁5)蛋白质细胞壁缺壁细菌: 1)L 型细菌 2)原生质体衣原体不同点p55?G+
9、3)球状体 G- 4)支原体革兰氏阳性菌和阴性菌的细胞壁的特殊成分 肽聚糖?原核生物细胞膜(一般不含胆固醇,能量代谢的地方 真核不同含有呼吸光合作用有关的蛋白质)与古生菌细胞质膜与真细菌比较 1)醚键连接亲水头和疏水尾 2)疏水尾的长链烃异戊二烯的 重复单位 3)特殊的单分子层膜或单、双分子层混合膜 4)甘油 C3 分子,连接不同基团 5)多种特殊脂质 细胞质与内含物 贮藏物 P53or59 表 原核生物细胞核特点:核区又称拟核,指原核生物所特有的无核膜结构、无固定形状的原 始细胞核;不能与细胞浆完全分开?芽孢 某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极
10、强的休眠体 产芽孢细菌种类 能形成芽孢的细菌有什么 芽孢抗药机制?确定不是耐热伴孢晶体在形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体* 内毒素 糖被 包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的胶状物质 荚膜(负染色)鞭毛(运动)阳性菌和阴性菌鞭毛结构不同之处 基体(不一样)钩形鞘鞭毛丝(一样)如何在没显微镜的情形下判定细菌有无鞭毛 1)穿刺法 扩散区 2)平板培育基 菌落形状 细菌毛的概念和功能 长在细菌体表的纤细、中空、短直、数量较多的蛋白质类附属物,具有使菌体附着于物体表面的功能;黏膜上),进一步定殖治病;第四章 微生物的养分 碳源 速效碳源 迟效碳源坚固粘附于(宿主的呼吸道
11、、消化管、泌尿生殖道等的氮源 生理酸性盐生理碱性盐缓冲物质碳氮比 C/N 适当的碳氮比有助于微生物发酵分解调剂无机盐生理功能作为酶活性中心的组成部分,维护生物大分子和细胞结构的稳固性,并维护细胞的渗透压平稳,掌握细胞的氧化仍原电位,作为某些微生物生长的能源物质;名师归纳总结 大量元素磷硫镁钙钠钾铁微量元素锌锰钼硒钴铜钨镍第 3 页,共 7 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载生长因子微生物生长所必需且需要量很少,但微生物自身不能合成或合成量不足以满意机体生长需要的有机化合物;1)维生素酶的辅基或辅酶参加新陈代谢2)氨基酸正常生长3)嘌
12、呤和嘧啶酶的辅酶或辅基,合成核苷核苷酸和核酸水 水活度 aw 微生物的养分类型自养 /异养 光能 / 化能 无机 /有机 无机自养 有机异养 表 4-9 养分缺陷性 某些菌株发生突变后,失去合成某种对该菌株生长必不行少的物质的才能,必须从外界环境获得该物质才能生长繁衍配置培育基的原就 1)挑选相宜的养分物质 2)养分物质浓度及配比 3)掌握 pH 条件 4)控制氧化仍原电位 5)原料来源的挑选 6)灭菌处理培育基的类型 依据成分 自然培育基 合成培育基物理性状 固体 半固体 液体 半固体培育基中凝固剂含量比固体培育基少 作用区分 固体分别鉴定活菌计数菌种保藏 半固体 观看微生物的运动特点,分类
13、鉴定噬菌体效价滴定的用途分类 基础培育基 加富培育基 鉴别培育基(加入某种特别化学物质与某种代谢产物化学反应 特点性变化,区分开来 快速分类鉴定分别和挑选)挑选培育基(从混杂的微生物群体中分别 加入相应的特别养分物质或化学物质)鉴别与挑选区分养分物质进入细胞的方式:扩散、主动运输、基团转位 各自特点第五章 微生物的代谢发酵 糖酵解 4 种途径 EMP 途径、 HM 途径、 ED途径、磷酸解酮酶发酵的生理功能 .供应 ADP 和 NADH 酵母的发酵类型?同型异型乳酸发酵 双歧发酵无氧呼吸 电子受体 NO3-,NO2-,SO42-S2O32-等外源受体自养微生物的生物氧化 类型 氨 硫 氢 铁能
14、量转换 底物水平磷酸化 氧化磷酸化 光合磷酸化 1)环式光合磷酸化 2)非环式光合磷酸化 3)嗜盐菌紫膜的光合作用次级代谢与次级代谢产物(抗生素、激素、生物碱、毒素、维生素)P129or144 第六章 微生物的生长繁衍及其掌握繁衍方式:细菌:二分裂 酵母菌 真菌(霉菌)?微生物的生长规律 1)延缓期 2)对数生长期 3)稳固生长期 4)衰亡期 生长曲线主要特点如何缩短延缓期 1)转变遗传特性 2)利用对数生长期的细胞作为“ 种子”3)接种前后培育基尽可能相像 4)适当扩大接种量稳固生长期哪些代谢产物?收成期?衰亡期哪些代谢产物?运算产量常数 K 值公式 K=总生长量 /所消耗基质的总量同步生长
15、 群体细胞能处于同一生长阶段,并同时进行分裂的生长方式获得同步生长的方法 1)机械法 a)离心法 b)过滤分别法 c)硝酸纤维素滤膜法 2)环境条件掌握技术 a)温度 b)培育基成分掌握 c)其他连续培育 微生物以恒定的比生长速率生长并能连续生长下去丝状真菌的生长繁衍方式:菌丝的断片生长繁衍断裂增殖 自然界无性和 (或) 有性孢子生长繁衍酵母菌:芽殖裂殖养分物质、水活度、温度、pH 和氧环境对微生物生长的影响150 页表 6-6 微生物与氧的关系名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 7 页精选学习资料 - - - - - - - - - 微生物生长的测定:计数法(直接学习必备
16、欢迎下载活菌死菌误差?间接)测量结果的区分重量法 生理指标法微生物生长繁衍的掌握:抗微生物剂: 抑菌剂(非挑选性消毒防腐,挑选性)、杀菌剂、 溶菌剂常用消毒物质浓度 (表6-8) 作用机制抗代谢物 磺胺 结构类似物取代正常成分,代谢紊乱抑制生长抗生素: 产生抗生素的细菌?作用机理 抑制细胞壁合成、破坏细胞质膜、 作用于呼吸链以干扰氧化磷酸化、抑制蛋白质和核酸合成( 156 页图 or175 页)抗性菌株抗性机理 1)2)3)4) 如何防止抗药菌显现 1)2)3)4)5)高温灭菌机理?常用高温杀菌方法(煮沸法 间歇灭菌法 84 消毒法?)高压蒸汽灭菌法:温度压力时间?辐射灭菌:紫外线使 DNA
17、分子中相邻的嘧啶形成嘧啶二聚体,抑制 DNA 复制与转录 杀菌波长 机制?过滤除菌 高渗作用 超声波 干燥第七章 病毒病毒定义特点: 1)具有化学大分子特点 2)只含一种核酸 3)没有酶或酶系极不完全 4)严格的活细胞内寄生 5)个体微小 6)抗生素不敏锐干扰素敏锐 又具有生命基本特性 既具有细胞外的感染性颗粒形式,又具有细胞内的繁衍性基因形式的特殊生物类群病毒的宿主范畴分类 噬菌体植物病毒动物病毒形状、结构、基因组、化学组成、对脂溶剂的敏锐性 讨论病毒的方法分别与纯化测定噬菌斑(噬(蚀)斑测定?琼脂叠层法)包含体?包涵体?壳体的结构 壳体蛋白单体分子(蛋白质亚基)以次级键结合 包膜结构 病毒
18、以芽出方式成熟时,由细胞膜衍生而来;脂双层膜,包膜糖蛋白 毒粒的结构类型 4 种暴露(有包膜)的二十面体、暴露(有包膜)的螺旋动物病毒: DNA 以双链为主 RNA 以单链为主?病毒的蛋白质类型 结构蛋白 1)壳体蛋白 2)包膜蛋白 3)毒粒酶病毒的复制 一步生长曲线 埋伏期隐藏期 病毒的复制周期 1)吸附 2)侵入 3)脱壳 4)病毒大分子的合成,病毒基因组的表达与复制 5)装配与释放 图 7-12? 7-8 非增殖性感染的类型:流产感染、限制性感染、埋伏感染整合的病毒基因组温顺噬菌体溶源性反应溶源性(以溶源状态存在的噬菌体不能完成复制循环,噬菌体基因组长期存在与宿主细胞内,没有成熟噬菌体产
19、生;动物病毒的整合感染:逆转录病毒 = 反转录 亚病毒因子:卫星病毒朊病毒 不设科、属第 8 章 微生物遗传) 溶源性噬菌体3 个经典试验Griffith 的转化试验Avery 挑选性破坏细胞成分试验T2 噬菌体的感染试验证明核酸是遗传物质名师归纳总结 微生物基因组结构特点原核 真核?大肠杆菌啤酒酵母第 5 页,共 7 页质粒(独立于染色体外自主复制)和转录因子 (位于染色体或质粒上的一段能转变自身位置的 DNA 序列)细胞中除染色体以外的遗传因子质粒的类型1)致育因子2)抗性因子3)Col 质粒 4)毒性质粒5)代谢质粒6)隐秘质粒质粒提取( 212 页上方?)=琼脂糖凝胶电泳电泳提取显现的
20、特性?基因突变和修复基因突变类型1)碱基变化a)同义突变b)错义突变c)无义突变d)移- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载码突变 2)表型变化 a)养分缺陷型 如何挑选(影印平板)b)抗药性突变型如何挑选(加有相应抗生素的平板上)c)条件致死突变型 d)形状突变型基因突变的分子基础 证明基因突变非对称性的 3 个试验 变量试验、涂布试验、影印试验1)自发突变 a)特性 b)分子基础 2)诱发突变 常用诱变剂 a)碱基类似物 b)插入染料 c)直接起化学反应的诱变剂 d)辐射和热 紫外线诱变的机理和留意事项?e)生物诱变因子 3)埃姆斯试
21、验和用途(检测环境中存在的致癌物质)DNA 损耗的修复 光复合作用细菌基因水平转移 1)F+*F-杂交 2)Hfr*F- 杂交 3)F转导 特点?转导(局限性与普遍性的区分)1)被转导的基因共价地与噬菌体 DNA 连接,与噬菌体 DNA一起进行复制、包装以及被导入受体细胞 定的个别基因导入个体;2)局限性转导颗粒携带特别的染色体片段并将固细菌的遗传转化:感受态 如何获得人工感受态239 页:微生物育种 常用微生物育种方法 原生质体融合概念第 10 章267 页:微生物与基因工程的关系(6 点) 1)基因资源 2)基因工程载体 3)基因工程工具酶 4)基因克隆的宿主 5)基因表达的生物反应器 6
22、)基因工程理论讨论 常用载体 工具酶 宿主:大肠杆菌酵母菌枯草杆菌常用挑选方法1)抗生素抗性挑选法2)插入失活法3)显色法第 11 章微生物在生态系统中的作用 1)有机物的主要分解者 2)物质循环中的重要成员 3)生态系统中的初级生产者 4)物质和能量的贮存者 5)地球生物演化中的先锋种类碳循环 氮循环 1)固氮 2)氨同化 3)氨化作用 4)硝化作用 5)硝酸盐仍原 6)反硝化作用生物固氮特点硫循环状态(3 点)环境中的微生物:微生物种群的相互作用 各种相互作用的概念极端环境下的微生物动物体中的微生物人体微生物的分布共生固氮根瘤菌和共生植物的共生关系专一性的酶促反应污水处理过程中微生微生物与
23、环境爱护:微生物对污染物的生物降解:物的组成( 319 页)异样细菌数量最多作用最大活性污泥法 生物膜法第 12 章rRNA 作为进化的指征 1)rRNA 参加生物蛋白质的合成过程,必不行少,功能保持不变 2)16SrRNA分子既含有高度保守序列区域,又有中度保守和高度变化的序列区域,亲缘关系研究 3)16SrRNA 相对分子质量大小适中,便于序列分析系统发育树的提出者伍斯域(三域三界)4)测量各类生物进化的工具微生物分类1)古生菌 2)细菌 3)真核生物培育物:肯定时间肯定空间内微生物的细胞群或生长物; 菌株:从自然界中分别得到的任何一种微生物的纯培育物都可以称为微生物的一个菌株;名师归纳总
24、结 微生物的命名原就:双名法?双名法又称二名法,以拉丁文表示, 通常以斜体字或下划第 6 页,共 7 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载双线以示区分;第一个是属名,是主格单数的名词,第一个字母大写;后一个是种名,常为形容词,须在词性上与属名相符,小写;只鉴定到属可用 sp 表示微生物分类鉴定的特点和技术 1)形状学特点易于观看和比较;依靠于多基因的表达,具有相对的稳固性;2)生理生化特点与微生物的酶和调剂蛋白质的本质和活性直接相关核酸的碱基组成和分子杂交DNA 的碱基组成【(G+C) %】 用途稳固的特点?核酸分子杂交 1)DNA-
25、DNA 杂交 2)DNA-rRNA 杂交 核酸探针微生物鉴定试验 常规鉴定大致的工作步骤第 14 章 感染与免疫感染途径 1呼吸道感染 2消化管感染 3创伤感染 4接触感染 5)垂直传播细菌的致病性 1)侵袭力病原菌突破宿主防线,并能于宿主体内定居、繁衍、扩散的才能 2)毒素内毒素外毒素微生物的种类特点分别纯化培育基第3章 原核生物第4章 养分和培育基第5章 微生物的特别代谢类型:有氧和无氧氧化第六章第七章 形状结构增值复制第八章 微生物基因组结构特点质粒类型基因水平转移突变 表型变化埃姆斯试验第九章 不考第十章 微生物在生态系统中的位置作用氮循环微生物与环境间的相互作用明白微生物的分布活性污泥方法处理污水分类鉴定的命名原就分类鉴定中G+C的意义第十一章 rRNA 作为进化指正系统发育树第十四章 复习到炎症之前第十五章 微生物生物技术重要产物宿主 酶第十六章名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页,共 7 页