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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 专题一 传统发酵技术的应用课题 1 果酒和果醋的制作3制作葡萄酒时, 为什么要将温度掌握在18 250C？制作葡萄醋时, 为什么要将温度掌握在30350C？1果酒制作的原理对温度是酵母菌生长和发酵的重要条件；20 0C 左右最适合酵母菌繁衍,因此需要将温度掌握在其最（1）人类利用微生物发酵制作果酒,该过程用到的微生物是,适温度范畴内；而醋酸菌是嗜温菌,最适生长温度为30350C,因此要将温度掌握在30350C；它的代谢类型是,与异化作用有关的方程式有4制葡萄醋时,为什么要适时通过充气口充气？；醋酸菌是好氧菌,再将酒精变成醋酸时需要养的参加,因此
2、要适时向发酵液中充气；生活状态：进行发酵,产生大量；P4: （2）果酒制作条件A 同学：每次排气时只需拧松瓶盖,不要完全掀开瓶盖；制醋时,再将瓶盖打开,盖上一层纱布,进传统发酵技术所使用的酵母菌的来源是；行葡萄醋的发酵；酵母菌生长的最适温度是； PH 呈；来防止发酵液被污染,由于操作的每一步都可能混入杂菌（3）红色葡萄酒出现颜色的缘由是：酒精发酵过程中,随着的提高,红色葡萄皮的B 同学：分析果酒和果醋的发酵装置中充气口、排气口和出料口分别有哪些作用；为什么排气口要通进入发酵液,使葡萄酒呈色；过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接？（4）在、的发酵液中,酵母菌可以生长繁衍,而绝大多数其它微充气口：是在醋
3、酸发酵时连接充气泵进行充气用的；生物都因无法适应这一环境而受到抑制；排气口：是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的；2果醋的制作原理出料口：是用来取样的；（1）果醋发酵菌种是,新陈代谢类型；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的是防止空气中微生物的污染；使用该装置（2）当氧气和糖源充分时醋酸菌将糖分解成,当糖源不足时醋酸菌将变为制酒时,应当关闭充气口；制醋时,应将充气口连接气泵,输入氧气；再变成醋酸,其反应式；课题 2 腐乳的制作3操作过程应留意的问题1.制作原理（1）为防止发酵液被污染,发酵瓶要用消毒；（1）经过微生物的发酵,豆腐中的蛋白质被分解成小分子的和,脂肪被分解成（2）葡萄汁装入
4、发酵瓶时,要留出大约的空间；和,因而更利于消化吸取；（3）制作葡萄酒时将温度严格掌握在,时间掌握在 d左右,可通过（2）腐乳的发酵有多种微生物参加,如、等,其中发酵的情形进行准时的监测；起主要作用的是；它是一种丝状,常见、（4）制葡萄醋的过程中,将温度严格掌握在,时间掌握在 d,并留意适时在上；充气；（3）现代的腐乳生产是在严格的条件下,将优良菌种直接接种在豆腐上,4酒精的检验这样可以防止其他菌种的,保证产品的质量；（1）检验试剂：；2. 腐乳制作的试验流程：（2）反应条件及现象：在条件下,反应出现；让豆腐长出密封腌制；5. 制作果酒、果醋的试验流程3. 试验留意事项选择葡萄（1）在豆腐上长出
5、毛霉时,温度掌握在,自然条件下毛霉的菌种来自空气中的；果酒果醋（2）将长满毛霉的豆腐块分层加盐,加盐量要随着摆放层数的加高而,近瓶口的P4 旁栏摸索题表层要；加盐的目的是使豆腐块失水,利于,同时也能的生长；盐的浓度过低,；盐的浓度过1你认为应当先洗葡萄仍是先除去枝梗,为什么？高,；应当先冲洗葡萄,然后再除去枝梗,以防止除去枝梗时引起葡萄破旧,增加被杂菌污染的机会；（3）卤汤中酒精的含量应掌握在左右, 它能微生物的生长, 同时也与豆腐2你认为应当从哪些方面防止发酵液被污染？乳特殊的形成有关；酒精含量过高,；酒精含量过需要从发酵制作的过程进行全面的考虑,由于操作的每一步都可能混入杂菌；例如：榨汁机
6、、发低,；香辛料可以调制腐乳的风味,同时也有作用；1 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - （ 4）瓶口密封时,最好将瓶口,防止瓶口污染；质亚硝胺,亚硝胺对动物有致畸和致突变作用；P6 旁栏摸索题3泡菜制作大致流程：原料处理装坛成品；温度,1. 你能利用所学的生物学学问,说明豆腐长白毛是怎么一回事？（1）配制盐水：清水和盐的比例为,盐水后备用；豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝；严格地说是直立菌丝,在豆腐中仍有匍匐菌丝；（2）装坛：蔬菜装至时加入香辛料, 装至时加盐水,盐水要2. 王致和为什么要撒很多盐,将长毛的豆腐腌起
7、来？盖好坛盖；坛盖边沿水槽中,保证坛内环境；盐能防止杂菌污染,防止豆腐腐败；（3）腌制过程种要留意掌握腌制的、和3你能总结出王致和做腐乳的方法吗？过高、食盐用量不足10%、过短,简洁造成,让豆腐长出毛霉加盐腌制密封腌制；4测亚硝酸盐含量的原理是；P7 旁栏摸索题将显色反应后的样品与已知浓度的进行比较,可以大致1. 我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳？出泡菜中亚硝酸盐的含量；制备样品处理液含水量为 70%左右的豆腐适于作腐乳；用含水量过高的豆腐制腐乳,不易成形；测定步骤：配定溶液2. 吃腐乳时,你会发觉腐乳外部有一层致密的“ 皮” ；这层“ 皮” 是怎样形成的呢？它对人体有害吗？它的作用是什么
8、？P9 旁栏摸索题：“ 皮” 是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝）,它能形成腐乳的“ 体” ,使腐乳成 为什么含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶？形；“ 皮” 对人体无害；酸奶的制作依靠的是乳酸菌的发酵作用；抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长,因此含有抗生素P8 练习 的牛奶不能发酵成酸奶；1. 腌制腐乳时 , 为什么要随豆腐层的加高而增加盐的含量？为什么在接近瓶口的表面要将盐厚铺 P10 旁栏摸索题：一些？1为什么日常生活中要多吃新奇蔬菜,不宜多吃腌制蔬菜？越接近瓶口,杂菌污染的可能性越大,因此要随着豆腐层的加高增加盐的用量,在接近瓶口的表 面,盐要铺厚一些,以有效防止杂菌污染；2怎样用
9、同样的原料制作出不同风味的腐乳？（可以不看）有些蔬菜,入小白菜和萝卜等,含有丰富的硝酸盐；当这些蔬菜放置过久发生变质（发黄、腐烂）或者煮熟后存放太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物仍原成亚硝酸盐,危害人体健康；2为什么泡菜坛内有时会长一层白膜？你认为这层白膜是怎么形成的？在酒和料上作变动 形成白膜是由于产膜酵母的繁衍；酵母菌是兼性厌氧微生物,泡菜发酵液养分丰富,其表面氧气红腐乳：又称红方,指在后期发酵的汤料中,配以着色剂红曲,酿制而成的腐乳；含量也很丰富,适合酵母菌繁衍；白腐乳：又称白方,指在后期发酵过程中,不添加任何着色剂,汤料以黄酒、白酒、香料为主酿 P12 练习：制而成的腐乳, 在酿制过程中
10、因添加不同的调味辅料,使其出现不同的风味特色,目前大致包括糟方、2你能总结果酒、果醋、腐乳、泡菜这几种发酵食品在利用微生物的种类和制作原理方面的不同吗？油方、霉香、醉方、辣方等品种；你能总结出传统发酵技术的共同特点吗？青腐乳：又称青方,俗称“ 臭豆腐” ,指在后期发酵过程中,以低度盐水为汤料酿制而成的腐乳,具有特有的气味,表面呈青色；酱腐乳：又称酱方,指在后期发酵过程中,以酱曲（大豆酱曲、蚕豆酱曲、面酱曲等）为主要辅果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精发酵,果醋的制作利用的是醋酸菌将酒精转变成醋酸的代谢,腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶类,料酿制而成的腐乳；泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳
11、酸发酵；传统的发酵技术都奇妙的利用了自然菌种,都为特定的菌种供应了良好的生存条件,最终的发酵课题 3 制作泡菜并检测亚硝酸盐含量产物不是单一的组分,而是成分复杂的混合物；专题二微生物的培育与应用1乳酸菌代谢类型为,在情形狂下,将葡萄糖分解为乳酸；在自然界中分布广泛,在、内都有分布；常见的乳酸菌有课题 1 微生物的试验室培育和两种,其中常用于生产酸奶；1依据培育基的物理性质可将培育基可以分为和2亚硝酸盐为,易溶于,在食品生产中用作；一般不会危害人体2培育基一般都含有、四类养分物质,另外仍健康,但当人体摄入硝酸盐总量达g 时,会引起中毒；当摄入总量达到g 时,会需要满意微生物生长对、以及的要求；引
12、起死亡；在特定的条件下,如、和的作用下,会转变成致癌物3获得纯洁培育物的关键是；2 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 4消毒是指 P18 平板划线操作的争论灭菌是指 1. 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作终止时,仍旧需要灼烧5日常生活中常用的消毒方法是,此外,人们也常使用化学药剂进行消毒,如用、接种环吗？为什么？等；常用的灭菌方法有、,此外,试验室里仍用 或 操作的第一步灼烧接种环是为了防止接种环上可能存在的微生物污染培育物；每次划线前灼烧接进行消毒；种环是为了杀死上次划线终止后,接种
13、环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源6制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的方法步骤是,于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐步削减,以便得到菌落；,；划线终止后灼烧接种环,能准时杀死接种环上残留的菌种,防止细菌污染环境和感染操作者；7微生物接种的方法中最常用的是 和；平板划线 2. 在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线？是指；稀释涂布平板 以免接种环温度太高,杀死菌种；法指；3. 在作其次次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开头划线？8菌种的保藏：划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开头,能使细菌的数
14、（ 1）暂时保藏：将菌种接种到试管的,在合适的温度下培育,长成后,目随着划线次数的增加而逐步削减,最终能得到由单个细菌繁衍而来的菌落；放入 冰箱中保藏,以后每 3 6 个月,转移一次新的培育基；P19 涂布平板操作的争论缺点是：储存时间,菌种简洁被 或产生变异；涂布平板的全部操作都应在火焰邻近进行；结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,（ 2）长期储存方法：法,放在 冷冻箱中储存；第 2 步应如何进行无菌操作？应从操作的各个细节保证“ 无菌” ；例如,酒精灯与培育皿的距离要合适、吸管头不要接触任何P15 旁栏摸索题：其他物体、吸管要在酒精灯火焰四周；等等；1 2 d 后无菌落生长,说明
15、培育基的制备是胜利的,否就需无菌技术除了用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外,仍有什么目的？P20 六、课题成果评判无菌技术仍能有效防止操作者自身被微生物感染；1.培育基的制作是否合格P16 旁栏摸索题：假如未接种的培育基在恒温箱中保温请你判定以下材料或用具是否需要消毒或灭菌；假如需要,请选择合适的方法；要重新制备；（1） 培育细菌用的培育基与培育皿2.接种操作是否符合无菌要求（2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管假如培育基上生长的菌落的颜色、外形、大小基本一样,并符合大肠杆菌菌落的特点,就说明接（3） 试验操作者的双手种操作是符合要求的；假如培育基上显现了其他菌落,就说明接种过程中,无菌操作
16、仍未达到要求,并（ 1）、（ 2）需要灭菌；（3）需要消毒；需要分析缘由,再次练习；P17 倒平板操作的争论3.是否进行了准时细致的观看与记录1. 培育基灭菌后,需要冷却到50 左右时,才能用来倒平板；你用什么方法来估量培育基的温培育 12 h 与 24 h 后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,准时观看记录的同学会发觉这一点,度？能观看到其他一些微小的变化；这一步的要求主要是培育同学良好的科学态度与习惯；可以用手触摸盛有培育基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板P20 练习了；1. 提示：可以从微生物生长需要哪些条件的角度来摸索；例如,微生物的生长需要水、空气、适2.
17、 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培育基；3. 平板冷凝后,为什么要将平板倒置？宜的温度,食品储存可以通过保持干燥、真空的条件,以及冷藏等方法来阻挡微生物的生长；2. 提示：可以从这三种培育技术的原理、操作步骤等方面分别进行总结归纳；例如,这三种培育 技术都需要为培育物供应充分的养分,但无土栽培技术的操作并不需要保证无菌的条件,而其他两种平板冷凝后,皿盖上会凝聚水珠,凝固后的培育基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使 技术都要求严格的无菌条件；培育基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培育基,造成污染；4. 在倒平板的过程中,假如不当心将培育
18、基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板仍能用来培育3. 提示：这是一道开放性的问题,答案并不惟一,重点在于勉励同学积极参加,从不同的角度思 考问题；例如,正是由于证明白微生物不是自发产生的,微生物学才可能进展成为一门独立的学科；微生物吗？为什么？巴斯德试验中用到的加热灭菌的方法导致了有效的灭菌方法的显现,而这一灭菌原理也适用于食品的空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生,因此最好不要用这个平板培育微生物；储存等；3 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 课题 2 土壤中分解尿素的细菌的分别与计数P22 旁栏摸索
19、题1尿素只有被分解成之后, 才能被植物吸取利用；选择分解尿素细菌1. 想一想,如何从平板上的菌落数估量出每克样品中的菌落数？答：统计某一稀释度下平板上的菌落数,最好能统计3 个平板,运算出平板菌落数的平均值,然后按的培育基特点：惟一氮源,按物理性质归类为培育基；2PCR（）是一种在体外将；此项技术的自动课本旁栏的公式进行运算；化,要求使用耐高温的DNA 聚合酶；P22 106 的培育集中,得到以3 试验室中微生物的选择应用的原理是：人为供应有利于生长的条件（包括两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数下两种统计结果：1. 第一位同学在该浓度下涂布了一个平板,统计的菌落
20、数为230； 2. 其次位同学在等）,同时抑制或阻挡其他微生物生长；4选择培育基是指；该浓度下涂布了三个平板 第一位同学只涂布了一个平板,没有设置重复组,因此结果不具有说服力；其次位同学考虑到设5常用来统计样品中活菌数目的方法是；即当样品的稀释度足够高时,培育基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的；通过统计平板上的菌落数,就能估量出样置重复组的问题,涂布了3 个平板,但是,其中1 个平板的计数结果与另2 个相差太远,说明在操作品中大约含有多少活菌；为了保证结果精确,一般选择菌落数在过程中可能显现了错误,因此,不能简洁地将3 个平板的计数值用来求平均值；的平板进行计数,计数公式是；利用稀释涂
21、布平板法胜利统计菌落数目的关P22 设置对比 A 同学的结果与其他同学不同,可能的说明有两种；一是由于土样不同,二是由于培育基污染或键是；另外,也是测定微生物数量的常用方法；6一般来说,统计的菌落数往往比活菌的实际数目；这是由于；因此,统计结果一般用 而不是活菌数来表示；7设置对比试验的主要目的是,提高试验结果的可信度；对照试验是；满意该条件的称为,未满足该条件的称为；8试验设计包括的内容有：、和,具体的试验步骤以准时间支配等的综合考虑和支配；9不同种类的微生物, 往往需要不同的培育 和培育；在试验过程中,一 般 每 隔 24 小 时 统 计 一 次 菌 落 数 目 , 选 取 菌 落 数 目
22、 稳 定 时 的 记 录 作 为 结 果 , 这 样 可以；10土壤有“” 之称,同其他生物环境相比,土壤中微生物、；11土壤中的微生物约 是细菌,细菌相宜在酸碱度接近 潮湿土壤中生长；土壤中微生物的数量不同,分别不同微生物采纳的 的稀释度不同；12一般来说,在肯定的培育条件下,同种微生物表现出稳固的菌落特点；这些特点包括菌落的、和等方面；13在进行多组试验过程中,应留意做好标记,其目的是14对所需的微生物进行初步选择,只是分别纯化菌种的第一步,要对分别的菌种进行一步的鉴定,仍需要借助 的方法；15在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的 将尿素分解成了；氨会使培育基的碱性,PH ；因此,我们可
23、以通过检测培育基 变化来判定该化学反应是否发生；在以 为唯独氮源的培育基中加入 指示剂；培育某种细菌后,假如 PH 上升,指示剂将变,说明该细菌能够；4 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 仍应参照厌氧菌的培育方法进行试验设计；的另一缺点是：有些微生物具有降解色素的才能,它们在长时间培育过程中会降解刚果红形成明显的 透亮圈,与纤维素分解菌不易区分；课题 3 分解纤维素的微生物的分别2. 为什么选择培育能够“ 浓缩” 所需的微生物？在选择培育的条件下,可以使那些能够适应这种养分条件的微生物得到快速繁衍,而那些不适应 这
24、种养分条件的微生物的繁衍被抑制,因此可以起到“ 浓缩” 的作用；P29 六、课题成果评判 1.培育基的制作是否合格以及选择培育基是否选择出菌落：对比的培育基在培育过程中没有菌落1纤维素是类物质,是自然界中纤维素含量最高的自然产物,此外,木材、作物秸秆等也富含纤维素；2 纤 维 素 酶 是 一 种酶 , 一 般 认 为 它 至 少 包 括 三 种 组 分 , 即、和,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成；正是在这三种酶的协同作用下,纤维素最终被水解成葡萄糖,为微生物的生长供应养分,同样,也可以为人类 所利用；生长就说明培育基制作合格；假如观看到产生透亮圈的菌落,就说明可能获得
25、了分解纤维素的微生物；2.分别的结果是否一样：由于在土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌的数量,因此最简洁分 离得到的是细菌；但由于所取土样的环境不同,同学也可能得到真菌和放线菌等不同的分别结果；P30 练习 2. 答：流程图表示如下；土壤取样选择培育（此步是否需要,应依据样品中目的菌株数量的多少来确定）梯度稀释将菌悬液涂布到有特定选择作用的培育基上选择单菌落发酵培育 专题三 植物的组织培育技术 课题 1 菊花的组织培育3选择纤维素分解菌可以用法,这种方法能够通过直接对微生物进行选择；可以与像纤维素这样的多糖物质形成,但并不和水解后的和发生这种反应；纤维素分解菌能产生分解纤维素,从而使菌落四周
26、形成；4分别分解纤维素的微生物的试验流程图如下：梯度稀释；5为确定得到的菌是否是纤维素分解菌,仍学进行的试验；纤维素酶的发酵方法有发酵和发酵；测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的1有某种生物全套的任何一个活细胞,都具有发育成的才能,即每个生物细胞进行定量测定；P28 旁栏摸索题都具有；但在生物体的生长发育过程中并不表现出来,这是由于在条件下,通过基因的,构成不同组织和器官；1. 本试验的流程与课题2 中的试验流程有哪些异同？2. 植物组织培育技术的应用有：实现优良品种的；培育作物；制作种子；培本试验流程与课题2 的流程的区分如下；课题2 是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为惟一
27、育作物以及细胞产物的等；氮源的选择性培育基上,直接分别得到菌落；本课题通过选择培育,使纤维素分解菌得到增殖后,再 将菌液涂布在选择培育基上；其他步骤基本一样；2. 为什么要在富含纤维素的环境中查找纤维素分解菌？由于生物与环境的相互依存关系,在富含纤维素的环境中,纤维素分解菌的含量相对提高,因此 从这种土样中获得目的微生物的几率要高于一般环境；3. 将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应当埋进土壤多深？3. 细胞分化：个体发育中细胞在上显现差异的过程；4. 愈伤组织是通过形成的,其细胞排列,高度呈状态的细胞；5. 植物组织培育的过程可简洁表示为：（脱分化）愈伤组织（）（生长）新个体将滤纸埋在土
28、壤中能使纤维素分解菌相对集合,实际上是人工设置纤维素分解菌生存的相宜环境；6. 材料：植物的种类、材料的和等都会影响试验结果；菊花组织培育一般一般应将纸埋于深约10 cm 左右腐殖土壤中；选择作材料；P29 旁栏摸索题7. 养分：常用的培育基是培育基,其中含有的大量元素是,微量元素1想一想, 这两种方法各有哪些优点与不足？你准备选用哪一种方法？（两种刚果红染色法的比是,有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等；较）方法一是传统的方法,缺点是操作繁琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样 显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用；方法二的优点是操作简便,不存在菌落混杂问题,缺点是
29、由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀 粉类物质,可以使能够产生淀粉酶的微生物显现假阳性反应；但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透 明圈较为模糊,由于培育基中纤维素占主要位置,因此可以与纤维素酶产生的透亮圈相区分；方法二8. 激素：在培育基中需要添加和等植物激素,其、等都影响结果；9. 环境条件： PH、等环境条件；菊花组培所需PH为,温度为,光照条件为；10. 配制各种母液：将各种成分按配方比例配制成的浓缩液；使用时依据母液的,运算用量,并加稀释；5 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 11. 配制培育基：应加入的物质有
30、琼脂、大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液,2. 你准备做几组重复？你准备设置对比试验吗？并用定容到毫升；在菊花组织培育中,可以不添加,缘由是菊花茎答：老师可以支配同学分组,做不同的材料或配方,最终分别汇报成果；但每种材料或配方至少 要做一组以上的重复；设置对比试验可以取用一个经过灭菌的装有培育基的锥形瓶,与接种操作后的 锥形瓶一同培育,用以说明培育基制作合格,没有被杂菌污染；（二）练习 1. 答：植物组织培育所利用的植物材料体积小、抗性差,对培育条件的要求较高；用于植物组织 培育的培育基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长；而培育物一旦受到微生物 的污染,就会导致试验前
31、功尽弃,因此要进行严格的无菌操作；2. 答：外植体的生理状态是胜利进行组织培育的重要条件之一；生长旺盛的嫩枝生理状况好,容 易诱导脱分化和再分化；课题 2 月季的花药培育 1. 段组织培育比较简洁；12. 灭菌：实行的灭菌方法是；13发酵操作13.1 前期预备：用消毒工作台,点燃酒精灯；留意全部接种工作都必需在酒精灯旁进行,器械使用前后都要用火焰灼烧；13.2 接种操作：接种过程中插入外植体时朝上,每个锥形瓶接种个外植体；外植体接种与细菌接种相像之处是；13.3 培育过程应当放在中进行,并定期进行消毒,保持相宜的和；13.4 移栽前应先打开培育瓶的,让其在培育间生长几日,然后用流水清洗根部培育
32、基；然后将幼苗移植到等环境中生活一段时间,进行壮苗；最终进行露天栽培；课题成果评判（一）对接种操作中污染情形的分析小孢子母细胞（2n）（）个精子 n （）分裂（）分裂（）时期（ n）（）细胞（ n）（）细胞（ n）接种 34 d 后,在接种操作中被杂菌污染的培育物会表现出被污染的现象；请同学适时统计污染率,分析接种操作是否符合无菌要求；单核（）期（ n）（）细胞核（ n） （）细胞核（ n）（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化单核（）期（ n）分裂双核期观看试验结果,看看是否培育出了愈伤组织,记录多长时间长出愈伤组织；统计更换培育基后愈伤组织进一步分化成根和芽的比例和时间；（三）是否进行
33、了统计、对比与记录 做好统计和对比,填好结果记录表,培育严谨的科学态度；从试验的第一步开头就要求同学做好 试验记录,可以让同学分组配制不同培育基,如诱导愈伤或直接分化丛芽的培育基,然后做不同配方 的比较；（四）生根苗的移栽是否合格 生根苗移栽技术的关键是既要充分清洗根系表面的培育基,又不能伤及根系；一般使用无土栽培2.育被子植物花粉的发育要经受、和等阶段；花粉是由花粉母细胞经过而形成的,因此花粉是；3.在正常情形下, 一个小孢子母细胞可以产生个精子；在一枚花药中可以产生个花粉；4.产生花粉植物的两种途径花药中的花粉脱分化（）丛芽诱导生根移栽花药中的花粉脱分化（）丛芽的方法； 培育基质要提前消毒
34、,可以向培育基质喷洒质量分数为5%的高锰酸钾, 并用塑料薄膜掩盖12 h；掀开塑料薄膜后24 h 才能移栽；新移栽的组培苗要在温室过渡几天,等壮苗后再定植大田或进行5.诱 导 花 粉 植 株 能 否 成 功 及 诱 导 成 功 率 的 高 低 , 受 多 种 因 素 影 响 , 其 中 影 主 要 因 素 是 ：盆栽；同学可以在课后统计自己移栽的成活率,看看移栽是否合格；答案和提示（一）旁栏摸索题和等；6.材料的选择：从花药来看,应当选择（初花期 、盛花期、晚花期）的花药；1. 你能说出各种养分物质的作用吗？同专题2 中微生物培育基的配方相比,MS培育基的配方有哪从花粉来看,应当选择（四分体期
35、、单核期 、双核期、萌发期）的花粉；些明显的不同？答：微量元素和大量元素供应植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖供应碳源,同时能够维护细胞 的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满意离体植物细胞在正常代谢途径受到肯定影响后所产从花蕾来看,应当选择（完全未开放 、略微开放、完全盛开）的花蕾；7.选择花药时一般通过确定花粉发育时期,此时需要对花粉细胞核进行染色,最常用的染色剂是和,它们分别可以将细胞核染成色和色；生的特别养分需求；微生物培育基以有机养分为主；与微生物的培育不同,MS培育基就需供应大量无8.在使用焙花青铬钒溶液时,需要第一将花药用处理 20min；该试剂的配制方法是将机养分,无机盐混合
36、物包括植物生长必需的大量元素和微量元素两大类；按体积比为的比例混合匀称；6 名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 9. 消毒后的花蕾,要在 条件下除去花萼、花瓣；剥取花药时,一是留意不要损耗花药,缘由是； 二 是 要 彻 底 除 去 花 丝 , 原 因是；10. 剥取的花药要马上接种到 上；每个培育瓶接种 个花药； 花药培育利用的培育基是培育基, pH 为,温度为,幼苗形成之前（需要、不需要）光照；在花药培育基中,用量最高的激素是；在诱导丛芽或胚状体培育基中,用量最高的激素是；在诱导生根的培育基中,用量最高的激素是；1
37、1. 培育 2030d 后,花药开裂, 长出 或释放出胚状体；前者仍要转移到 上进行分化培育成再生植株；后者要尽快 并转移到新的培育基上；通过愈伤组织形成的植株,常常会显现 的变化,因而需要鉴定和选择；课题成果评判（一）选材是否恰当植 物 组 织 培 养菊 花 的 组 织概念：选材是否胜利是花药培育胜利的关键；同学应学会通过显微镜观看处于相宜发育期的花粉；原理：细胞的全能性基础：（二）无菌技术是否过关假如显现了污染现象,说明某些操作步骤,如培育基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题；条件：脱分化再分化（三）接种是否胜利植物组织培育的基本过程：外植体愈伤组织胚状体幼苗假如接种的花药长出愈伤组织或释放出胚
38、状体,花药培育的第一步就胜利了；要适时转换培育基,以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株；外植体的选择答案和提示影响植物组织培育的因素：养分、环境等（一）旁栏摸索题培 养植物激素的用法为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？答：花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难；月温度、 pH、光照等（二）练习试验操作：制备 MS 培育基外植体消毒接种培育移栽栽培1. 答： F2 代紫色甜玉米的基因型组成可能为Aasusu 或 AAsusu；假如运用常规育种方法,将F2被子植物花粉的发育：花粉母细胞减数分裂小孢子母细胞四分体时期代中的紫色甜玉米与白色甜玉米（aasusu ）进行测交,可以
39、选择出基因型为AAsusu 纯种紫色甜玉米；但这种方法比较繁琐,耗时也较长,需要至少三年的选种和育种时间；假如利用花药培育的技术,在单核期双核期精子F1 代产生的花粉中就可能有Asu 的组合,再将花粉植株进行染色体加倍,就可以直接得到紫色甜玉米产生花粉植株的两种途径：的纯合体（ AAsusu）；这种方法可以大大缩短育种周期；季 的 花 药 培 养花药中的花粉脱分化胚状体分化丛芽诱导生根移栽2. 答：植物组织培育技术与花药培育技术的相同之处是：培育基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同；两者的不同之处在于：花药培育的选材特别重要,需事先摸索时期相宜的花蕾；花药裂花药中的花粉脱分化愈伤组织再分化
40、丛芽开后释放出的愈伤组织或胚状体也要准时更换培育基；花药培育对培育基配方的要求更为严格；这些都使花药培育的难度大为增加；主要因素：材料的选择与培育基的组成影响花药培育的因素：重要因素：选择合适的花粉发育时期影响因素： 亲本植株的生长条件、低温处理和接种密度等专题 5 DNA 和蛋白质技术材料的选取：确定花粉发育时期的方法名师归纳总结 7 试验操作：材料的消毒：第 7 页,共 13 页接种和培育：- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - （一） DNA 的粗提取与鉴定（2）要提取洋葱等的DNA时,加入洗涤剂后,动作要,否就简洁产生大量的泡沫,1. 试验原理不利于
41、后续步骤地操作；DNA（3）加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要,以免,导致提取生物大分子的基本思路是；对于 DNA的粗提取而言,就是要利用与、等在物理和化学性质方面分子不能形成絮状沉淀；NaCl 溶的差异,提取DNA,去除其他成分；（4）二苯胺试剂要,否就会影响鉴定的成效；（1）DNA的溶解性（5）当 NaCl 溶液浓度低于0.14mol/L时,随浓度的上升,DNA的溶解度；当DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的液浓度高于0.14mol/L时,随浓度上升,DNA的溶解度；盐浓度就能使充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分别目的；DNA不溶于溶液,但是细胞中的某些蛋白质就溶于酒精；利用这一原理,可以将 DNA 与蛋白质进一步的分别；（2）DNA对酶、高温顺洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解,但是对没有影响；大多数蛋白质不能忍耐6080oC的高温,而DNA在才会变性；洗涤剂能够瓦解,但对DNA没有影响；（3）DNA的鉴定在条件下,DNA遇会被染成色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂；2.试验设计（1）试验材料的选取 凡是含有的生物材料都可以考虑,但是使用的生物组织,专题六植物有效成分的提取课题 1 植物芳香油的提取【导学诱思】1. 植物芳香油的来源自然香料的主要来源是 和；动物香料主要来源于麝、灵猫、海狸和抹香鲸等,植物香料的来源更为广泛；植