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1、山东大学 基础医 学院 人体结构与功能II 实验课程教学大纲编写人： 苏擘 审定人：编制时间： 2017-09 审定时间：一、课程基本信息课程名称人体结构与功能II 神经系统英文名称System of the Body II-The Nervous System课程编码sd02331591开课单位基础医学院实验类型R专业基础实验 专业实验 综合实验 创新实验 开放实验课程性质R必修 选修实验类别R独立设课 非独立设课学分总学时36实验学时36适用专业临床医学八年制先修课程人体解剖学、细胞分子遗传学课程网站二、课程描述本课程理论课程是医学基础实验课程整合的基础上，理论课程整合，将组织学与胚胎学、
2、生理学、生物化学（部分）、病理学、病理生理学、药理学、神经生物学和诊断学等相关内容进行整合，按照器官系统的顺序重新编排，形成了系列课程人体结构与机能（英文名称 System of the Body）I-IV，本课程是该系列课程的第二部分，重点讲授神经系统理论部分。The System of the Body II course is the second part of System of the Body series, which are integrated medical foundation courses for students majoring in clinical medi
3、cine. The related content of histology and embryology, physiology, biochemistry (part), pathology, pathophysiology, pharmacology, neurobiology and diagnostics were integrated and carried out in accordance with the organ system arrangement, forming a series of course System of the Body I - IV. System
4、 of the Body II covers the basic science required to understand the structure and function of the nervous system, and its major pathologies. The early chapters introduce the development and organization of the nervous system, and the cellular and molecular mechanisms that govern its function. The ot
5、her chapters are devoted to the disorders and clinical examination of the nervous system.三、课程性质和教学目标【教学目标】1、 能掌握部分神经系统经典实验技术方法，通过实验掌握神经系统的基本概念及原理，。2、 紧密结合临床，初步了解一些常见神经系统疾病发生时的诊断方法。3、 应用生理学、病理学、药理学、解剖学、组织胚胎学、诊断学等理论及实验方法，提出相应的科学问题并进行探讨。【教学要求】教学要求1、知识点的掌握教学要求2、实验技能培养，理解、综合、分析等能力。教学要求3、培养创新能力、批判思维、沟通协作、
6、和终身学习能力等。四、课程教学内容及学时分配实验一：神经系统观察（4学时）【教学目标和要求】充分发挥学生学习的积极性和主动性，把所学知识消化吸收，转化为自己的知识，将所学知识和平时PBL教学和临床实践结合起来，在实践中巩固提高。1.掌握大脑皮质的神经元分层 2.掌握小脑皮质的神经元分层 3.了解脊髓灰质的结构【主要仪器设备和药品】一仪器设备：光学显微镜二.医学形态学数字化教学平台组织学切片库：神经系统三.观察切片1.大脑皮质(cerebralcortex)取材：大脑垂直切片固定：Bouin染色：H & E肉眼观：标本外周染成紫色的为皮质，中央染色稍呈红色的为髓质，在皮质表面有许多凹凸不平的沟与
7、回。低倍镜观：在H & E染色切片上，只能观察皮质中神经细胞的分层状态，各种神经元的外部形态需用特殊染色方法才能显示。找一个大脑回进行观察，根据细胞体的大小及排列的疏密进行分层。皮质可分为六层，但各层无明显分界，而是互相移行的。最好先找出两层细胞体较小且排列较密的区域即浅层的外颗粒层(第二层)和深层的内颗粒层(第四层)，然后再分别观察其它各层的形态结构。也可先找出主要具有中、小型锥体细胞的区域和具有分散的巨大的锥体细胞的区域，即浅层的外锥体细胞层(第三层)和深层的内锥体细胞层(第五层)。细观各层特点，由浅到深为：第一层：分子层，在外颗粒层表面，染色浅，细胞小而少。第二层：外颗粒层，细胞小而密集
8、，染色较深，此层可见许多小锥体细胞的胞体。第三层：外锥体细胞层，在内外颗粒层之间，主要由中、小型锥体细胞组成。第四层：内颗粒层，细胞比较密集，可见一些形态不规则的星形细胞胞体。第五层：内锥体细胞层，可见分散的巨大的锥体细胞。第六层：多形层，细胞形态不一，排列稀疏，与第五层分界不明显，主要可见梭形细胞体。2.小脑皮质(cerebellar cortex)取材：小脑垂直切片固定：Bouin染色：H & E肉眼观：小脑皮质表面有凹凸不平的沟与小叶片，其表面染成粉红色的为分子层，深部紫色的为颗粒层，再向内方的紫红色区域为髓质。低倍镜及高倍镜观：从表面依层次观察，小脑皮质共分三层：(1)分子层：表面染色
9、较浅的一层，比较厚。此层内细胞成分较少，主要是无髓神经纤维。(2)蒲肯野细胞层：在分子层下方是一层排列较稀、胞体大呈梨形的细胞层，可见细胞有23个树突伸入分子层内。(3)颗粒层：在蒲肯野细胞层深面，细胞排列很密，主要由颗粒细胞所组成。3.脊神经节(spinal ganglion)取材：脊神经节纵断面固定：Bouin染色：HE低倍镜及高倍镜观：脊神经节外面包有结缔组织被膜，内有许多神经节细胞和一些神经纤维。神经节细胞的胞体呈圆形，体积较大，大小不等，成群分布，细胞质染成淡紫红色，细胞核大而圆，异染色质少，故呈空泡状，核仁明显，每个神经节细胞体的周围可见到很多圆形或卵圆形的卫星细胞核。神经节细胞的
10、突起多被切断。神经纤维多为有髓神经纤维。4.交感神经节(sympathetic ganglia)取材：交感神经节纵切面固定：Bouin染色：H & E低倍镜及高倍镜观：其结构与脊神经节大致相同，观察时注意和脊神经节区别。可从神经纤维的类型、神经节细胞的大小、分布及卫星细胞的多少，同脊神经节比较。实验二：耳蜗微音器电位和听神经动作电位（4学时）【教学目标和要求】目标：1.掌握打开鼓室的方法。2.掌握微音器电位的引导方法。3.理解微音器电位的原理。4.通过本次实验进一步掌握听觉产生的传导路径，学习耳蜗部位产生发生器电位的原理,了解外界声音在耳蜗部位如何转变为电信号并最终产生听觉的机制。【主要仪器设
11、备和药品】1. 小动物手术器械一套、探针银丝-银球电极（裸露银球部，电极其余部分表面绝缘，可用适当粗细塑料管绝缘） 、参考电极（可用针灸针代替） BL-420 生物机能实验系统（或双线示波器、前置放大器、刺激器、监听器）。 2. 药品：20%氨基甲酸乙酯溶液。【实验要求】实验的难点和重点、实验安全和环保要求等。1.挑选豚鼠时选择 300400g耳廓反应良好的幼年豚鼠为宜，因其耳蜗位置较浅，骨质松，有利于手术操作。 2.骨孔周围组织必须刮净，避免产生渗液进入鼓室而影响实验。 3.安放引导电极要谨慎精确，不可反复多次插入，最好先找准位置后再安放。 4.电极安放好后，用棉球盖住骨孔，保持鼓室内温度和
12、湿度，也要给动物保温。 5.观察短声微音器电位与听神经动作电位时房间应安静，以免形成白噪声对听神经动作电位的掩蔽效应。实验三：药物的镇痛作用（4学时）【教学目标和要求】目标：1.掌握动物实验的常用致痛方法，具体本实验为扭体法。2. 掌握镇痛药物的研究方法。3.通过本次实验学习不同类型镇痛药的镇痛原理，锻炼解决实际问题的能力。【主要仪器设备和药品】1. 仪器设备：天平，注射器，小鼠笼，计时器。2. 药品：0.6%醋酸溶液，生理盐水，2mg/ml盐酸曲马多溶液，2mg/ml罗通定溶液，30mg/ml苦味酸溶液。【实验要求】10.6% 醋酸溶液宜现用现配，因存放过久常使其作用减弱。2观察扭体反应时，
13、应将小鼠放于小鼠笼中观察，切忌放于平滑桌面上。3. 观察扭体反应（腹部内凹、后肢伸张、臀部高起、躯体扭曲）的阳性标准应保持一致。4为避免主观因素对实验结果的影响，可采取单盲法，即不告知学生各药名称，而以甲、乙、丙代替，待实验观察完毕，通过分析实验结果，再明确所用药物。5为减少组间差异，可将学生分为6组，每个实验小组从3组动物中分别取3只小鼠进行观察，最后汇总整个实验室结果进行分析。实验四：药物对离体豚鼠回肠的作用（4学时）【教学目标和要求】目标：1.掌握离体器官体外生存的基本三要素。2.掌握离体豚鼠回肠标本的制作方法。3.掌握胆碱能系统和肾上腺素能系统药物的作用及作用机制。4.通过本次实验掌握
14、离体实验的相关实验方法，学习根据实验结果分析药物的作用机制，锻炼学生的独立思考问题及根据实验现象推测作用机制的能力。【主要仪器设备和药品】1. 仪器设备：BL-420生物机能实验系统，超级恒温水浴，双层浴管，张力换能器，L型钩，线钩，空气泵，加样器，手术器械，铁支架，双凹夹，螺旋夹，培养皿，小烧杯，量筒，手术器械。2. 药品：10-3M乙酰胆碱， 510-3 M 阿托品，0.1mg/ml肾上腺素，10mg/ml酚妥拉明，10mg/ml普萘洛尔，新斯的明，去甲肾上腺素，氯化钡，台式液。【实验要求】实验的难点和重点、实验安全和环保要求等。1制备肠段标本时动作要轻柔，避免损伤肠段。悬挂肠段时动作要迅
15、速，尽量减少肠段的缺氧时间。2. 悬挂标本时注意对角悬挂，并注意链接标本的丝线必须与换能器的连线垂直，且不可与浴管的管壁接触。3. 加药时注意直接加到液面上，加药时不可触碰丝线。实验五：海马毁损对大鼠空间记忆的影响（4学时）【教学目标和要求】不能仅说明掌握、了解等低阶目标，要突出能力和素质培养。目标：1.掌握定点毁损不同脑区的方法，具体本实验为毁损大鼠海马脑区。2.掌握Morris水迷宫实验研究空间学习记忆的实验方法。3.掌握联合学习记忆的原理和方法，具体本实验为声音关联的条件恐惧记忆模型。4.通过本次实验了解与学习记忆相关的脑内结构，学习确定相关脑区具体功能的逻辑思维方法，锻炼解决实际问题的
16、能力。【主要仪器设备和药品】1. 仪器设备：数字式脑立体定位仪，手术器械一套，颅钻，微量注射器，微量输液泵，天平，Morris水迷宫，惊恐条件反射装置，灌注针，注射器，输液器，恒冷切片机2. 药品： 1戊巴比妥钠，3双氧水，骨蜡，生理盐水， 20g/l NMDA，4多聚甲醛，30蔗糖缓冲液，苏木素溶液，伊红溶液，0.5%盐酸酒精，70、80% 、95%、100%酒精，二甲苯，封片剂。【实验要求】实验的难点和重点、实验安全和环保要求等。1避免过度麻醉造成动物死亡或麻醉太浅动物活动而影响定位的准确性。2海马损伤时严格按照提供数据进行，避免损伤其它脑组织。3药物微量注射时速度不宜过快，注射完毕后留针
17、5分钟后拔出，防止药物外漏。4水迷宫实验时水温应不低于20度，以免影响大鼠的运动，并对水进行处理使之不透明，保证实验的准确性。5应在迷宫周围提供一些可见标志，并且在实验期间位置保持不变，以便大鼠建立空间记忆。6惊恐条件反射实验中通电电流，时间严格按照实验数据进行设置，防止过强或过弱影响实验的准确性。7惊恐条件反射实验时，更换测试动物前应使用70乙醇彻底清洁实验装置，以免遗留的气味影响动物行为。8用盐酸酒精分化时间要严格掌握，需要显微镜下观察。9伊红染色要适中，不可染色太深。10在染色过程中不要让切片干燥，以免切片收缩、变形，影响神经元形态。实验六：大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的制备【教学目标
18、和要求】目标：1.掌握线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。2. 了解局灶性脑缺血模型的常用制备方法。3.了解大鼠局灶性脑缺血模型制备成功的标志。4. 通过本次实验，将目前常用的脑缺血经典动物模型介绍给学生，激发学生们的创新思维，为学生提供新的研究方法，对研究脑缺血再灌注损伤的发生发展的机制和预防治疗等都具有非常重要的意义。【主要仪器设备和药品】1. 仪器设备：手术器械，尼龙栓线，脑模具，恒温水浴，2. 药品：1% TTC溶液，生理盐水，戊巴比妥钠【实验要求】实验的难点和重点、实验安全和环保要求等。1. 分离颈总动脉及颈内颈外动脉时动作尽量轻柔，钝性分离，以免手术视野出血影响栓线插入。2.
19、 麻醉动物时不宜麻醉过深3. 栓线插入时注意不要插入太深，以免引起蛛网膜下腔出血。五、实验教学要求对应关系教学要求1教学要求2教学要求3实验一XXX实验二XX实验三XXX实验四XXX实验五XX实验六XX六、教材及参考书目【教材】 编著者，教材名，出版社，出版年，教材类别（规划、获奖教材等）1. 高英茂主审，李和，李继承主编，组织学与胚胎学，人民卫生出版社，2005年8月第一版，2015年8月第三版， （“十二五”普通高等教育本科国家级规划教材；国家卫生和计划生育委员会“十二五”规划教材；全国高等医药教材建设研究会“十二五”规划教材）2. 李瑞峰 主编，医学技能学实验（第二版），科学出版社，2013年【参考书】3-5本相关的教材或者专著、杂志或网络资源1. junqueira s basic histology 13th edition；2. 唐军民主编，组织学与胚胎学(全英文) , 北京大学医学出版社, 2011年01月出版3.医学院国外教材网