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1、全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）贵阳医学院医学检验系贵阳医学院医学检验系黄海黄海实验实验 27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验 .1全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验实验目的实验目的 v掌握：掌握：方法学方法学评评价价试验试验的原理和基本方法的原理和基本方法及及统计统计分析分析 v熟悉：熟悉：
2、方法学评价试验的具体操作。方法学评价试验的具体操作。.2全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验一、重复性实验一、重复性实验二、回收试验二、回收试验 三、干扰试验三、干扰试验四、方法比较试验四、方法比较试验五、方法性能决定图绘制五、方法性能决定图绘制六、最低检测限实验六、最低检测限实验.3全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）
3、实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验实验原理实验原理 批内重复性试验是指在同一条件下（用同样的批内重复性试验是指在同一条件下（用同样的方法，同一种试剂和标准品，同一台仪器，在同一方法，同一种试剂和标准品，同一台仪器，在同一实验室由同一人操作，并保持实验期间准确度不变）实验室由同一人操作，并保持实验期间准确度不变）对同一标本在尽可能短的时间内进行对同一标本在尽可能短的时间内进行m轮，每轮轮，每轮n次重复测定，以获得批内精密度数据的试验方法。次重复测定，以获得批内精密度数据的试验方法。其结果能反映测定方法的随机误差大小。其结果能反映测定方法的随机误差大小。一、重复性实
4、验一、重复性实验.4全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验试剂与器材试剂与器材 1.标本标本 采用血糖浓度约为采用血糖浓度约为6.7mmol/L的血清的血清 标本（收集无溶血、无脂浊、无肝炎病毒标本（收集无溶血、无脂浊、无肝炎病毒 污染的人混合血清或动物血清）。污染的人混合血清或动物血清）。2.GOD-POD试剂盒。试剂盒。.5全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床
5、生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验操作步骤操作步骤 将血清将血清标标本用本用GOD-POD法作法作5轮轮，每，每轮轮4次血糖次血糖测测定，即可定，即可获获得得20个个测测定数据。定数据。.6全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验计算计算1.检验检验20次测定数据中的离群值次测定数据中的离群值 如存在异常值如存在异常值时应剔除。对小样本测定来讲，可采用时应
6、剔除。对小样本测定来讲，可采用Grubbs检验，检验，该方法是最合理的检验方法该方法是最合理的检验方法。.7全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验计算计算 用用Grubbs检验准则，检验离群值的统检验准则，检验离群值的统计学公式是：计学公式是：式中，式中，Xd为离群值；为离群值；X为包括离群值在内为包括离群值在内的测定值的均数；的测定值的均数；s为包括离群值在内的测为包括离群值在内的测定值的标准差定值的标准差.8全国高等医药院
7、校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验 如计算的如计算的G值大于系数表中相应显著水平的值大于系数表中相应显著水平的a和和测定次数测定次数n时的临界值时的临界值Ga.n，则将，则将Xd作为异常值舍弃，作为异常值舍弃，可按下列三种情况来处理：可按下列三种情况来处理：（1）只有一个离群值的情况：设有）只有一个离群值的情况：设有n个测定数个测定数（X1X2X3X4Xn）其中）其中X1为离群值，即可为离群值，即可利用上述公式，直接对利用上述公式，直接
8、对X1进行检验。进行检验。计算计算.9全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验（2）如果离群值是两个或两个以上，但都分布）如果离群值是两个或两个以上，但都分布在均数在均数X的同一侧，例如的同一侧，例如X1、X2都是离群值，则都是离群值，则首先检验最内侧的一个数据（首先检验最内侧的一个数据（X2），即通过检验），即通过检验G2来决定来决定X2是否应该放弃。如果是否应该放弃。如果X2应该放弃，应该放弃，X1自然也应该放弃。如果自然也
9、应该放弃。如果X2不应舍去，则再检验不应舍去，则再检验X1。但在检验但在检验X1时测定次数不应作为少了一次。时测定次数不应作为少了一次。计算计算.10全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验（3）如果离群值有两个或两个以上。而且又分）如果离群值有两个或两个以上。而且又分布于均数两侧，例如布于均数两侧，例如X1和和Xn都属于离群值，则分都属于离群值，则分别检验别检验X1和和Xn，是否应该舍去。如果一个数据决，是否应该舍去。如果一个
10、数据决定舍去，那么再检验另一个数据时，测定次数应该定舍去，那么再检验另一个数据时，测定次数应该作为减少一次来处理；而且此时应该选择作为减少一次来处理；而且此时应该选择99%的置的置信水平。信水平。计算计算.11全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验2.按照批内精密度的计算公式计算按照批内精密度的计算公式计算5轮每轮轮每轮4次测定次测定值的平均数值的平均数(X)、标准差、标准差(s)和变异系数（和变异系数（CV%）。）。（1）（
11、2）式中式中为为5 轮轮各次各次测测定定值值的方差，即：公式的方差，即：公式 .12全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验 首先计算出每轮测定值的均数、标准差（首先计算出每轮测定值的均数、标准差（Si）及方差及方差S1、S2、S3、S4，并将数值填入表，并将数值填入表27-1内，内，再将再将5轮轮Si总和代入公式即可算出批内标准差总和代入公式即可算出批内标准差Sw。最后计算出变异系数（最后计算出变异系数（CV%）表表27-1
12、批内重复性批内重复性试验试验的数据的数据处处理理测测定定批数批数每每轮测轮测定次数（定次数（n）及）及测测定定值值（Xi）XiSiSi2123412345 合合计计.13全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验注意事项注意事项1.血糖的医学决定水平血糖的医学决定水平值为值为2.8 mmol/L、6.7 2.mmol/L和和8.9mmol/L。分析物。分析物浓浓度度应选择应选择医学决定水平才更具价医学决定水平才更具价值值。2.用于
13、用于评评价方法精密度的价方法精密度的变变异系数异系数应该应该是剔除离是剔除离群群值值后的后的计计算算结结果。果。.14全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验评价评价 批内不精密度的判断限是批内不精密度的判断限是1/4允允许误许误差范差范围围。批批间间不精密度的判断限是不精密度的判断限是1/3允允许误许误差范差范围围。允允许误许误差范差范围围可以根据可以根据CLIA88规规定的能力比定的能力比对试验对试验的的TEa确定。确定。返
14、回本实验目录返回本实验目录.15全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验实验原理实验原理 二、回收试验二、回收试验 回收试验是用以发现分析方法比例系统误回收试验是用以发现分析方法比例系统误差的有效评价方法。差的有效评价方法。即通过测定即通过测定GOD-POD法测定血糖的回收率，法测定血糖的回收率，能较确切地判断该分析方法比例系统误差的有无能较确切地判断该分析方法比例系统误差的有无或大小，从而评价方法的准确性。或大小，从而评价方法
15、的准确性。.16全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验试剂与器材试剂与器材 1.80mmol/L葡萄糖标准液葡萄糖标准液2.生理盐水生理盐水3.GOD-POD试剂盒试剂盒4.血清标本血清标本 收集无肝炎病毒、无溶血、无脂浊的收集无肝炎病毒、无溶血、无脂浊的人混合血清，先用人混合血清，先用GOD-POD法测定血糖浓度，法测定血糖浓度，再用生理盐水稀释血糖浓度至再用生理盐水稀释血糖浓度至2.2mmol/L备用。备用。.17全国高等
16、医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验操作步骤操作步骤 1.样样品制品制备备基基础样础样品：血清品：血清0.9ml+0.1ml生理生理盐盐水。水。回收回收样样品品：血清：血清0.9ml+0.01ml 80mmol/L葡萄糖葡萄糖标标准液准液+0.09ml生理生理盐盐水。水。回收回收样样品品：血清：血清0.9ml+0.06ml 80mmol/L葡萄糖葡萄糖标标准液准液+0.04ml生理生理盐盐水。水。回收回收样样品品：血清：血清0.9m
17、l+0.09ml 80mmol/L葡萄糖葡萄糖标标准液准液+0.01ml生理生理盐盐水。水。2.血糖血糖浓浓度度测测定定 按按GOD-POD法法测测定各制定各制备样备样品的血糖品的血糖浓浓度，度，每份每份样样品作双份品作双份检测检测，结结果取平均果取平均值值.18全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验计算计算 1.加入加入浓浓度度计计算算2.回收量回收量计计算算2.回收率回收率计计算算将各将各项计项计算算结结果填入表果填入表2
18、7-2。.19全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验表表27-2 回收回收试验试验的数据的数据处处理理样样品品测测定定浓浓度度（mmol/L）加入加入浓浓度度（mmol/L）回收回收浓浓度度（mmol/L）回收率回收率（%）基基础样础样品品回收回收样样品品回收回收样样品品回收回收样样品品平均回收率平均回收率.20全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验
19、指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验注意事项注意事项1.标标本加入本加入标标准液后，准液后，总浓总浓度度应应在在该该方法的分析方法的分析 范范围围内。最好使被内。最好使被测标测标本的本的浓浓度达到医学决定水度达到医学决定水 平，血糖平，血糖测测定的医学决定水平定的医学决定水平为为2.8 mmol/L、6.7 mmol/L、8.9mmol/L。2.纯标纯标准品溶液的加入体准品溶液的加入体积积不得超不得超过过血清血清样样品的品的 10%，若稀，若稀释过释过大，大，误误差将差将发发生改生改变变。3.准确加量是本准确加量是本试验试验最主要的技最主
20、要的技术术关关键键。.21全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验评价评价 一般一般检验检验方法，要求回收率在方法，要求回收率在95105%之之间间，最理想的回收率，最理想的回收率应为应为100%返回本实验目录返回本实验目录.22全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评
21、价试验三、干扰试验三、干扰试验实验原理实验原理 干干扰试验扰试验是是测测定特异性和干定特异性和干扰扰两者引两者引起的起的误误差。干差。干扰扰物物浓浓度一定度一定时时，产产生的生的误误差是恒定系差是恒定系统误统误差，差，误误差的差的实际实际大小随干大小随干扰扰物的物的浓浓度而异。度而异。.23全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验三、干扰试验三、干扰试验实验原理实验原理 选选用尿酸作用尿酸作GOD-POD法法测测定血糖的干定血糖
22、的干扰试扰试验验，尿酸可疑和，尿酸可疑和GOD反反应应生成的生成的H2O2发发生反生反应应，使部分使部分H2O2不能参与第二步不能参与第二步POD的耦的耦联联反反应应，从，从而降低而降低显显色色强强度，度，产产生生负负的的测测定定误误差。差。尿酸尿酸对该对该反反应应有干有干扰扰，但不是尿酸被，但不是尿酸被测测定。定。干干扰试验扰试验既用于既用于检测检测某方法的特异性，也用某方法的特异性，也用于于检测检测干干扰扰物物质对质对方法的干方法的干扰扰作用，以作用，以评评价分析价分析方法的准确性。方法的准确性。.24全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验
23、实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验试剂与器材试剂与器材1.血清标本血清标本 收集血糖浓度为收集血糖浓度为6.7mmol/L的混合血清的混合血清（要求同回收试验）。（要求同回收试验）。2.9.0mmol/L尿酸标准液。尿酸标准液。3.GOD-POD试剂盒。试剂盒。.25全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验操作步骤操作步骤1.样品制备样品制备
24、基础样品：血清基础样品：血清0.9ml+蒸馏水蒸馏水0.1ml 干扰样品干扰样品：血清：血清0.9ml+9.0mmol/L尿酸标准液尿酸标准液 0.05ml+蒸馏水蒸馏水0.05ml 干扰样品干扰样品：血清：血清0.9ml+9.0mmol/L尿酸标准液尿酸标准液0.1ml 尿酸样品：蒸馏水尿酸样品：蒸馏水0.9ml+9.0mmol/L尿酸标准液尿酸标准液0.1ml2.GOD-POD法测定各样品血糖。法测定各样品血糖。.26全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学
25、评价试验临床生化检验方法学评价试验计算计算1.干干扰扰物加入物加入值计值计算算 2.干干扰值计扰值计算算3.干干扰扰率率计计算算.27全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验将各项计算结果填入表将各项计算结果填入表27-3内内表表27-3 干干扰试验扰试验的数据的数据处处理理样样 品品葡萄糖葡萄糖测测定定值值（mmol/L）加入尿酸加入尿酸值值（mmol/L）干干扰值扰值（mmol/L）干干扰扰率率（%）基基础样础样品品干干扰样
26、扰样品品干干扰样扰样品品尿酸尿酸样样品品.28全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验注意事项注意事项1.可疑干可疑干扰扰物物浓浓度度 加入可疑干加入可疑干扰扰物的物的浓浓度度应应明明显显高于通常所高于通常所见浓见浓度的上限，最好达到度的上限，最好达到病理病理标标本的最高本的最高值值，尿酸升高的，尿酸升高的变动变动范范围围在在0.42mmol/L0.9mmol/L之之间间。2.干干扰扰物物对测对测定的影响与被分析物定的影响与被分
27、析物浓浓度无关，度无关，而与干而与干扰扰物本身的物本身的浓浓度有关，所以度有关，所以产产生的生的误误差是恒定系差是恒定系统误统误差。差。3.其他注意事其他注意事项项与回收与回收试验试验相同。相同。.29全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验评价评价 偏差偏差Bias允允许误许误差（差（EA）的）的临临界界值值，表明由于干表明由于干扰扰物引起的偏差物引起的偏差对临对临床床诊诊断和断和治治疗疗不不产产生不良影响，是可以被接受的。生
28、不良影响，是可以被接受的。血血2.8mmol/、6.7 mmol/和和8.9mmol/L时时的的EA为为0.56mmol/L。返回本实验目录返回本实验目录.30全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验四、方法比较试验四、方法比较试验实验原理实验原理 用两种方法同用两种方法同时检测时检测一批一批样样本，本，计计算出两种算出两种方法方法间测间测定定结结果的差异，用以估果的差异，用以估计试验计试验方法在方法在检检测样测样本本时时可能引
29、入的可能引入的误误差。当差。当选择选择准确度已知的准确度已知的常常规规方法作方法作为为比比较较方法方法时时，部分，部分误误差来自比差来自比较较方方法，其他部分法，其他部分误误差差则则来自来自试验试验方法。若方法。若选择选择准确准确度高的参考方法作度高的参考方法作为为比比较较方法，可把方法方法，可把方法间间的任的任何分析何分析误误差都差都归归于于试验试验方法。方法。本本实验实验以以HK法法测测定血糖的参考方法作定血糖的参考方法作对对比比来来评评价价GOD-POD法法测测定血糖的定血糖的总总系系统误统误差。差。.31全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化
30、学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验试剂与器材试剂与器材1.GOD-POD法法试剂试剂盒盒2.HK法法试剂试剂试剂试剂盒盒3.血清血清标标本本40份份 （其（其浓浓度尽可能覆盖度尽可能覆盖线线性范性范围围）。）。.32全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验操作步骤操作步骤1.取取40份血清份血清标标本，每份本，每份标标本用本用GOD-PO
31、D和和HK两种方法，分两种方法，分别别作双份作双份测测定。定。2.每次（天）每次（天）测测定定8个个标标本，双份本，双份测测定定时时第一第一次按次按顺顺序序1，2.7，8，第二，第二8，7.2，1，共，共测试测试5次（天）。并次（天）。并计计算两法各自算两法各自的的测测定定结结果。果。.33全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验计算计算1.将实验结果作散点图，图中以将实验结果作散点图，图中以x轴代表比较方法的测轴代表比较方法的
32、测定值，定值，y轴代表实验方法的测定值，在坐标纸上作图轴代表实验方法的测定值，在坐标纸上作图应散布于整个测定范围之内。应散布于整个测定范围之内。通过散点图可以观察到，测定数据的分布趋势，若通过散点图可以观察到，测定数据的分布趋势，若所有测定值在坐标图中大致呈所有测定值在坐标图中大致呈45角的直线分布，提角的直线分布，提示被实验方法与比较方法的测定结果之间存在密切示被实验方法与比较方法的测定结果之间存在密切的相关关系；若呈明显的曲线分布，虽然在统计学的相关关系；若呈明显的曲线分布，虽然在统计学上可按照非线性资料处理，但在这种情况下，实验上可按照非线性资料处理，但在这种情况下，实验方法被采用的可能
33、性极小。方法被采用的可能性极小。.34全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验计算计算2.如果如果x、y之间呈直线关系，可作直线回归的之间呈直线关系，可作直线回归的统计处理，计算：统计处理，计算：回归方程回归方程y=a+bx和相关系数和相关系数r。其结果可以显示实验方法的测定结果有无系统其结果可以显示实验方法的测定结果有无系统误差存在。误差存在。截距截距a反映恒定系统误差的大小；反映恒定系统误差的大小；斜率斜率b反映比例系统误差
34、的大小；反映比例系统误差的大小；相关系数相关系数r反映两种方法相关性的密切程度。反映两种方法相关性的密切程度。.35全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验 在评价一个实验方法时，最理想的情况是回归在评价一个实验方法时，最理想的情况是回归直线呈直线呈45角通过零点，这时角通过零点，这时a=0，b（x/y比值）比值）=1.0，表明恒定系统误差和比例系统误差均不存在。但，表明恒定系统误差和比例系统误差均不存在。但x和和y都会有随机误
35、差，都会有随机误差，a和和b只是估计值，会有所波动，只是估计值，会有所波动，只要偏离程度比较小，该方法就能用于临床检验的只要偏离程度比较小，该方法就能用于临床检验的常规分析。常规分析。计算计算.36全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验3.根据计算出的回归方程的根据计算出的回归方程的a、b值，可以计算候选值，可以计算候选方法系统误差（方法系统误差（SE）的大小，并与不同医学决定水）的大小，并与不同医学决定水平（平（Xc）的允许
36、误差（）的允许误差（EA）作比较，对被评价方法）作比较，对被评价方法的系统误差的可接受性作出判断。的系统误差的可接受性作出判断。SE的可接受性判的可接受性判断指标为断指标为 血糖测定的血糖测定的Xc=2.8 mmol/L、6.7mmol/L、8.9mmol/L时，时，Barnett提出的提出的EA值为值为0.56mmol/L。计算计算.37全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验4.作相关分析作相关分析 在方法比在方法比较试验较
37、试验中，相关系数（中，相关系数（r）可作可作为为被被评评价方法可否被接受的一价方法可否被接受的一项统计项统计学指学指标标。对对相关系数相关系数还应还应作相关系数的作相关系数的t检验检验。相关系数（相关系数（r）的）的t检验统计检验统计学公式是：学公式是：计算计算.38全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验5.方法比方法比较试验较试验的数据属于配的数据属于配对资对资料，因而可作配料，因而可作配对对t检验检验，其，其统计统计学公式
38、是：学公式是：式中式中:d代表候代表候选选方法与参考方法方法与参考方法测测定定值值的差的差值值(或正或或正或负负)；d为为差差值值之平均之平均值值；n为为配配对对数。数。计算计算.39全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验 在计算在计算t值公式中的分子部分是两种方法的偏差值公式中的分子部分是两种方法的偏差值，表明方法间系统误差的大小。值，表明方法间系统误差的大小。分母是平均偏差标准误，反映方法比较实验中分母是平均偏差标准误，反
39、映方法比较实验中随机误差的大小。随机误差的大小。因此因此t值时方法比较试验中系统误差和随机误差值时方法比较试验中系统误差和随机误差的比值。的比值。计算计算.40全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验注意事项注意事项1.选择试验样品选择试验样品 一般作一般作40100例，包括常规工作中可能例，包括常规工作中可能遇到的整个分析范围（其中遇到的整个分析范围（其中25%的标本低于的标本低于参考范围下限，参考范围下限，50%标本在参考范
40、围之内，标本在参考范围之内，25%标本高于参考范围），选择合适的样品标本高于参考范围），选择合适的样品分析范围比增加样品的数目更为重要。分析范围比增加样品的数目更为重要。.41全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验注意事项注意事项2.试验方法试验方法 一般每个样品用两种方法各测一次，最一般每个样品用两种方法各测一次，最好每个样品用两种方法各测定两次，在做双好每个样品用两种方法各测定两次，在做双份第二次测定时，标本顺序应全部倒过
41、来，份第二次测定时，标本顺序应全部倒过来，最好在最好在4h内完成。内完成。3.对比方法对比方法 对比方法的选择十分重要，一般应选参对比方法的选择十分重要，一般应选参考方法或决定性方法，这样方法间的任何分考方法或决定性方法，这样方法间的任何分析误差都可归于被评价的候选方法。析误差都可归于被评价的候选方法。返回本实验目录返回本实验目录.42全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验五、方法性能决定图绘制五、方法性能决定图绘制实验原理实
42、验原理 准确度和精密度是检测系统的两大最主要的性能指准确度和精密度是检测系统的两大最主要的性能指标，二者结合就是总误差（标，二者结合就是总误差（total error，TE）。）。当当TE小于允许总误差（小于允许总误差（allowable total error，TEa）时，则检测系统的性能合格。）时，则检测系统的性能合格。当当TE大于大于TEa时，则检测系统的性能不可接受。时，则检测系统的性能不可接受。.43全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床
43、生化检验方法学评价试验五、方法性能决定图绘制五、方法性能决定图绘制实验原理实验原理目前，有三种计算误差目前，有三种计算误差TE的方式的方式（bias代表不准确度，代表不准确度，s或或CV代表不精密度）：代表不精密度）：（1）TE=bias+2sTEa；或：；或：TE%=bias%+2CV%TEa%（2）TE=bias+3sTEa；或：；或：TE%=bias%+3CV%TEa%（3）TE=bias+4sTEa；或：；或：TE%=bias%+4CV%TEa%.44全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第
44、二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验 应用应用Westgard方法决定图（方法决定图（method decision chart,MDC），将不准确度和不精密），将不准确度和不精密度以图像的形式表达，在图上与要求的质量作度以图像的形式表达，在图上与要求的质量作比较，结果简单明了。比较，结果简单明了。根据以上几次的实验结果，应用根据以上几次的实验结果，应用MDC，可以对葡萄糖氧化酶法可以对葡萄糖氧化酶法(GOD-POD法法)的性能作的性能作一综合性的评价。一综合性的评价。五、方法性能决定图绘制五、方法性能决定图绘制实验原理实验原理.45全国高等医药院校医学检验
45、专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验操作步骤操作步骤1.实验数据采用前面实验的结果。实验数据采用前面实验的结果。重复性试验中得到的重复性试验中得到的CV作为横坐标，然后利用方法作为横坐标，然后利用方法比对实验中得到的回归方程比对实验中得到的回归方程y=a+bx，以重复性实验中，以重复性实验中标本均值为标本均值为Y值，求出对应的值，求出对应的X值，计算：值，计算：.46全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化
46、学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验操作步骤操作步骤2.取坐标纸，按图取坐标纸，按图27-1所示作图。所示作图。首先确定分析质量要求，以总允许误差首先确定分析质量要求，以总允许误差TEa表示。表示。本实验血糖的本实验血糖的TEa是是10%，在坐标纸上定义，在坐标纸上定义y轴为轴为允许不准确度（偏倚允许不准确度（偏倚%），从），从0到到Tea，最大刻度，最大刻度10%；定义定义x轴为允许不精密度（轴为允许不精密度（%，即，即CV），从），从0到到0.5 TEa，即最大刻度为，即最大刻度为5%。.47全国高等
47、医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验 从从y轴的轴的TEa（10）到）到x轴的轴的0.5TEa（5.0）即）即过（过（0，10.0；5.0，0）两点画一直线，为）两点画一直线，为偏倚偏倚+2s线线。从从y轴的轴的TEa（10）到）到x轴的轴的0.33TEa（3.3）即）即过（过（0，10.0；3.3，0）两点画一条线，为）两点画一条线，为偏倚偏倚+3s线线。从从y轴的轴的TEa（10）到）到x轴的轴的0.25TEa（2.5）即）即过
48、（过（0，10.0；2.5，0）两点画一直条线，为）两点画一直条线，为偏倚偏倚+4s线线。这三条分别把图划分成四个部分。这三条分别把图划分成四个部分。从上到下，分别代表性从上到下，分别代表性能差区能差区、临界性能区、临界性能区、性能良好区性能良好区和和性能优秀区性能优秀区。.48全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验3.方法性能判定的不同水平结果方法性能判定的不同水平结果 观察方法观察方法决定图上操作点的位置，判断方法性能。决
49、定图上操作点的位置，判断方法性能。四种可能分别为：四种可能分别为：性能差性能差，表明该测定方法不能满足质量，表明该测定方法不能满足质量要求，对于常规操作不能被接受。要求，对于常规操作不能被接受。操作步骤操作步骤.49全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验 临界性能临界性能，表明该性能尽管能满足临床，表明该性能尽管能满足临床要求，但很可能失控，日常操作中，需要全要求，但很可能失控，日常操作中，需要全面质量控制策略，增加训练有素的
50、操作者，面质量控制策略，增加训练有素的操作者，减少人员的轮转，增强仪器维护措施，小心减少人员的轮转，增强仪器维护措施，小心监测病人检测结果，持续努力地改善方法性监测病人检测结果，持续努力地改善方法性能。能。操作步骤操作步骤.50全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验良好良好，表明该测定方法能满足质量要求，表明该测定方法能满足质量要求，在日常工作中，只要小心计划统计质量程序且在日常工作中，只要小心计划统计质量程序且能运用每批能运