第07讲临床专用自动生化分析仪分析技术课件.ppt

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1、第七章第七章临床专用自动生化分析仪分析技术临床专用自动生化分析仪分析技术广州医学院医学检验系广州医学院医学检验系 刘忠民刘忠民全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术教学目标与要求教学目标与要求v掌握:掌握:浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪分析技术浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪分析技术的基本原理和方法。的

2、基本原理和方法。v熟悉:熟悉:浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的结构组浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的结构组成特点,仪器的维护保养,质量控制和临床应用。成特点,仪器的维护保养,质量控制和临床应用。v了解:了解:浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的分类。浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的分类。2全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术目目 录录浊度自动化分析技术浊度自动化分析技术1电解质自动化分析技术电解质自动化分析技术2血气自动

3、化分析技术血气自动化分析技术3电泳自动化分析技术电泳自动化分析技术4小结与展望小结与展望5返回总目录返回总目录3全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第一节第一节浊度自动化分析技术浊度自动化分析技术4全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术前言前言y浊度分析浊度分析通过检测溶液

4、浊度通过检测溶液浊度,对物质含量进行分析的方法。对物质含量进行分析的方法。临床上多用于特定蛋白的分析。临床上多用于特定蛋白的分析。y特定蛋白特定蛋白在机体内在机体内具有某种生理功能,疾病状态时又有着具有某种生理功能,疾病状态时又有着特定的病理生理意义的蛋白质,临床上常被称为特定的病理生理意义的蛋白质,临床上常被称为特定蛋白(特定蛋白(special protein)。)。5全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术一、浊度分析的基本原理和

5、方法一、浊度分析的基本原理和方法6全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)浊度分析的基础理论(一)浊度分析的基础理论y1.1.胶体溶液胶体溶液粒子对光具有反射、折射、散射和吸收等作用。粒子对光具有反射、折射、散射和吸收等作用。y2.2.光透射理论光透射理论朗伯朗伯-比尔(比尔(Lambert-Beer)定律:)定律:y3.3.光散射理论光散射理论雷莱(雷莱(Rayleigh)公式:)公式:7全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国

6、高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术该公式来自气溶胶悬浮微粒,用于溶液时需进行校正。该公式来自气溶胶悬浮微粒,用于溶液时需进行校正。当使用高强度光源(如激光)时,液相悬浮颗粒与非偏当使用高强度光源(如激光)时,液相悬浮颗粒与非偏振光源的散射作用公式为:振光源的散射作用公式为:公式可见,散射光强度与颗粒的浓度和分子量有关。公式可见,散射光强度与颗粒的浓度和分子量有关。8全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验

7、 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y雷莱公式与修正公式雷莱公式与修正公式雷莱公式雷莱公式v仅适合直径仅适合直径110入射光波长的小颗粒入射光波长的小颗粒Debye修正公式修正公式v适合于颗粒直径略小于入射光波长的溶液适合于颗粒直径略小于入射光波长的溶液Mie修正公式修正公式v适合于颗粒直径等于或大于入射光波长的溶液适合于颗粒直径等于或大于入射光波长的溶液9全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动

8、生化分析仪分析技术y4.4.免疫浊度分析免疫浊度分析在一定条件下,可溶性抗原与抗体在液相中特异在一定条件下,可溶性抗原与抗体在液相中特异结合,形成有一定大小的抗原结合,形成有一定大小的抗原-抗体免疫复合物抗体免疫复合物颗粒,使反应液出现浊度;颗粒,使反应液出现浊度;当光线通过介质中的复合物颗粒时,可形成光的当光线通过介质中的复合物颗粒时,可形成光的吸收、透射、散射和折射;吸收、透射、散射和折射;通过测量透射光或散射光信号强弱,从而推算出通过测量透射光或散射光信号强弱,从而推算出被测物的量。被测物的量。10全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验

9、临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)浊度分析的基本方法(二)浊度分析的基本方法y浊度分析方法的分类浊度分析方法的分类根据检测器的位置及其接收光信号的性质分:根据检测器的位置及其接收光信号的性质分:v透射免疫浊度法(透射免疫浊度法(turbidimetry immunoassay)v散射免疫浊度法(散射免疫浊度法(nephelometry immunoassay)根据复合物形成速度和测定方式分:根据复合物形成速度和测定方式分:v终点浊度法终点浊度法v速率浊度法速率浊度法根据根据浊度形成的原理浊度形成的原理分分:v沉淀

10、反应免疫浊度法沉淀反应免疫浊度法:灵敏度低:灵敏度低v胶乳凝集比浊(或粒子强化免疫浊度法):灵敏度高胶乳凝集比浊(或粒子强化免疫浊度法):灵敏度高11全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.透射免疫浊度法透射免疫浊度法指在光源的光路指在光源的光路0o角方向上测量透射光强度,并角方向上测量透射光强度,并研究其与被检测溶液微粒浓度关系的方法。研究其与被检测溶液微粒浓度关系的方法。y2.2.散射免疫浊度法散射免疫浊度法指在光路的指在

11、光路的5o90o角的方向上测量散射光强度,角的方向上测量散射光强度,并研究其与被测溶液中微粒浓度关系的方法。并研究其与被测溶液中微粒浓度关系的方法。12全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术免疫浊度分析法测定光路图免疫浊度分析法测定光路图 13全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分

12、析技术y1.1.终点散射浊度法终点散射浊度法检测反应终点与起始点之间信号变化的方法为终检测反应终点与起始点之间信号变化的方法为终点测定法。点测定法。y2.2.速率散射浊度法速率散射浊度法所谓速率即指在抗原抗体结合反应过程中,单位所谓速率即指在抗原抗体结合反应过程中,单位时间内两者结合成复合物的量。时间内两者结合成复合物的量。速率散射浊度法是在抗原与抗体反应的最高峰测速率散射浊度法是在抗原与抗体反应的最高峰测定其复合物形成的量,该峰值的高低与抗原的量定其复合物形成的量,该峰值的高低与抗原的量成正比。成正比。14全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学

13、检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y粒子强化免疫浊度法粒子强化免疫浊度法为一种带载体的免疫浊度法,其敏感度较高。该为一种带载体的免疫浊度法,其敏感度较高。该方法选择一种大小适中、均匀一致的胶乳颗粒,方法选择一种大小适中、均匀一致的胶乳颗粒,吸附或交联抗体;当遇到相应抗原时,则发生聚吸附或交联抗体;当遇到相应抗原时,则发生聚集。集。单个胶乳颗粒在入射光波长之内,光线可透过。单个胶乳颗粒在入射光波长之内,光线可透过。当两个或更多胶乳颗粒凝聚时,透过光减少,光当两个或更多胶乳颗粒凝聚时,透过光减少,光减少的程度与胶乳凝集

14、量成正比。减少的程度与胶乳凝集量成正比。15全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术二、浊度分析仪的分类和基本结构二、浊度分析仪的分类和基本结构16全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)浊度分析仪分类(一)浊度分析仪分类y1.1.分光光度仪分光光度仪采用终点法作免疫浊度分

15、析的测定仪。采用终点法作免疫浊度分析的测定仪。y2.2.自动生化分析仪自动生化分析仪目前较流行的大型多通道自动生化分析仪多专门目前较流行的大型多通道自动生化分析仪多专门编有或可自编透射浊度分析程序。编有或可自编透射浊度分析程序。y3.3.散射浊度分析仪散射浊度分析仪应用较为普遍的有固定时间散射分析仪、速率散应用较为普遍的有固定时间散射分析仪、速率散射分析仪和双光路自动免疫浊度分析仪。射分析仪和双光路自动免疫浊度分析仪。17全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床

16、专用自动生化分析仪分析技术(二)自动散射浊度分析仪的结构(二)自动散射浊度分析仪的结构y主要由分析系统、计算机系统组成。主要由分析系统、计算机系统组成。分析系统分析系统v用于加样、稀释、保温和测试等;用于加样、稀释、保温和测试等;v包括散射测浊仪、加液系统、试剂转盘、样品转盘、包括散射测浊仪、加液系统、试剂转盘、样品转盘、卡片阅读器以及软盘驱动器等;卡片阅读器以及软盘驱动器等;计算机系统计算机系统v用于输入病人数据、选择程序菜单、计算参考曲线和用于输入病人数据、选择程序菜单、计算参考曲线和储存测试结果;储存测试结果;v包括计算机主机、包括计算机主机、CRT显示屏和键盘等。显示屏和键盘等。18全

17、国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术散射浊度分析仪散射浊度分析仪光路示意图光路示意图 19全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术三、浊度分析仪的保养三、浊度分析仪的保养20全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检

18、验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术常规保养常规保养y1.日保养日保养关机前冲洗管道,以防止管道阻塞。关机前冲洗管道,以防止管道阻塞。开机前应检查注射器,防止漏液。开机前应检查注射器,防止漏液。检查稀释液、缓冲液及抗体试剂中液体的体积。检查稀释液、缓冲液及抗体试剂中液体的体积。检查废液桶中的废液是否已经装满。检查废液桶中的废液是否已经装满。在做标本之前必须对所有光路进行光路校正。在做标本之前必须对所有光路进行光路校正。y2.周保养周保养更换流动比色杯和小磁棒。更换流动比色杯和小磁棒。用纱布蘸用纱布蘸 10%漂白溶液清洁探针的外部。漂白

19、溶液清洁探针的外部。检查蠕动泵和钳制阀控制着管路中液体的流动情况。检查蠕动泵和钳制阀控制着管路中液体的流动情况。21全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术常规保养常规保养y3.月保养月保养更换注射器插杆顶端;更换注射器插杆顶端;空气过滤网冲洗;空气过滤网冲洗;疏通标本和抗体探针的内部。疏通标本和抗体探针的内部。y4.半年保养半年保养更换钳制阀上管道和泵周管道;更换钳制阀上管道和泵周管道;给机械传动部分的螺丝上润滑油。给机械传动部分的螺

20、丝上润滑油。22全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术四、浊度分析的质量控制四、浊度分析的质量控制23全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)抗原过剩校正(一)抗原过剩校正y免疫浊度分析的基本要求免疫浊度分析的基本要求:始终保持反应体系中抗体适量过剩。始终保持反应体系中抗

21、体适量过剩。y抗原过剩的检测方法:抗原过剩的检测方法:连续监测抗原抗体反应曲线,当抗原过剩时,连续监测抗原抗体反应曲线,当抗原过剩时,反应曲线呈现异常。反应曲线呈现异常。反应体系中追加抗体,如果浊度继续增大则提反应体系中追加抗体,如果浊度继续增大则提示抗原过剩。示抗原过剩。待测标本用两种稀释度测定,浓度高的样本浊待测标本用两种稀释度测定,浓度高的样本浊度反而降低则提示抗原过剩。度反而降低则提示抗原过剩。24全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析

22、仪分析技术(二)减少伪浊度(二)减少伪浊度y伪浊度伪浊度:在反应体系中,除待测抗原抗体免疫复合物产生在反应体系中,除待测抗原抗体免疫复合物产生的浊度外,其它可引起透射光或散射光发生变化的浊度外,其它可引起透射光或散射光发生变化的浊度都称为伪浊度。的浊度都称为伪浊度。y减少产生伪浊度的方法:减少产生伪浊度的方法:1.标本:采用新鲜、合格标本。标本:采用新鲜、合格标本。2.检测体系:保持比色杯和稀释杯清洁。检测体系:保持比色杯和稀释杯清洁。3.试剂:使用合格的抗体试剂。试剂:使用合格的抗体试剂。4.增浊剂浓度:严格控制增浊剂的浓度。增浊剂浓度:严格控制增浊剂的浓度。25全国高等医药院校医学检验专业

23、规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(三)选择合适的入射光波长(三)选择合适的入射光波长y无论是散射比浊还是透射比浊,入射光波长的选择无论是散射比浊还是透射比浊,入射光波长的选择原则原则:除了抗原抗体免疫复合物外,反应体系中的其他除了抗原抗体免疫复合物外,反应体系中的其他成分对入射光的干扰应为最小,因为如果反应体成分对入射光的干扰应为最小,因为如果反应体系中其他成分吸收了部分入射光,透射比浊法测系中其他成分吸收了部分入射光,透射比浊法测定结果将使抗原浓度偏高,

24、而散射比浊法测定将定结果将使抗原浓度偏高,而散射比浊法测定将使抗原浓度偏低。使抗原浓度偏低。26全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(四)仪器校正(四)仪器校正y1.1.选择合适的校准品选择合适的校准品y2.2.校准曲线的绘制校准曲线的绘制校准曲线的形状取决于抗血清和促聚剂的浓度的校准曲线的形状取决于抗血清和促聚剂的浓度的选择,也与所用免疫浊度法类型、校正方法及校选择,也与所用免疫浊度法类型、校正方法及校准品的质量有关。准品的质量有

25、关。多推荐多推荐5 5点或点或6 6点定标。点定标。选择适当的数学方法进行曲线拟合。选择适当的数学方法进行曲线拟合。27全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术五、特定蛋白浊度分析的五、特定蛋白浊度分析的临床应用临床应用28全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术特定蛋白临床常规

26、项目特定蛋白临床常规项目29全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术免疫功能监测免疫功能监测y项目项目免疫球蛋免疫球蛋白(白(IgG、IgM、IgA)、补体()、补体(C3、C4)y临床意义临床意义IgG、IgA、IgM检测有助于了解机体抗感染能力,有助检测有助于了解机体抗感染能力,有助于疾病的正确诊断和有效治疗。于疾病的正确诊断和有效治疗。在免疫复合物疾病中,在免疫复合物疾病中,C3、C4检测可以了解其消耗程度。检测可以了解其消耗程度

27、。y适应症适应症免疫力低,反复感染病人;免疫力低,反复感染病人;自身免疫性疾病;自身免疫性疾病;多多发性骨髓瘤;发性骨髓瘤;慢性肝病;慢性肝病;非何杰金氏淋巴瘤;非何杰金氏淋巴瘤;白白血病;血病;良性单克隆免疫球蛋白病;良性单克隆免疫球蛋白病;先天性或获得性先天性或获得性低免疫球蛋白血症;低免疫球蛋白血症;对白、球蛋白比例异常者的随访;对白、球蛋白比例异常者的随访;术后感染、移植排斥反应。术后感染、移植排斥反应。返回章目录返回章目录30全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析

28、技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第二节第二节电电解质自动化分析技术解质自动化分析技术31全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术前言前言y电解质电解质在溶液中能解离成带电离子而具有导电性能的一类在溶液中能解离成带电离子而具有导电性能的一类物质。物质。主要指体液中最主要指体液中最常测定的常测定的Na+、K+、Cl-、Ca2+、Mg2+、HCO3-和无机磷等。和无机磷等。y电解质分析仪(电解质分析仪(electrolyte anal

29、yzer)是采用是采用ISE测量溶液中离子浓度的仪器。测量溶液中离子浓度的仪器。广泛应用于各级临床实验室,可直接测量患者血液、广泛应用于各级临床实验室,可直接测量患者血液、脑脊液、稀释尿等体液中的电解质脑脊液、稀释尿等体液中的电解质离子浓度。离子浓度。32全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术一、电解质分析的原理和方法一、电解质分析的原理和方法33全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检

30、验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)离子选择电极电位分析理论(一)离子选择电极电位分析理论y离子选择性电极(离子选择性电极(ion selective electrode,ISE)是一类用特殊敏感膜制成,对溶液中某种特定离是一类用特殊敏感膜制成,对溶液中某种特定离子具有选择性响应的电化学传感器。子具有选择性响应的电化学传感器。在临床实验室,常用于测量离子的活度或浓度。在临床实验室,常用于测量离子的活度或浓度。34全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学

31、检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术1.1.ISE基本结构基本结构y通常由电极管、内电极、电极内充溶液和电极膜通常由电极管、内电极、电极内充溶液和电极膜(或称敏感膜)四个部分组成。(或称敏感膜)四个部分组成。35全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术2.2.电极电位产生电极电位产生y大多数电极膜电位的产生是基于膜材料与溶液界面发生的离大多数电极膜电位的产生是基于膜材料与溶液

32、界面发生的离子交换反应。子交换反应。当电极置于溶液中时,由于离子交换和扩散作用,改变当电极置于溶液中时,由于离子交换和扩散作用,改变了二相中原有的电荷分布,因而形成双电层,其间产生了二相中原有的电荷分布,因而形成双电层,其间产生一定的电位差即膜电位。一定的电位差即膜电位。ISE的电位与溶液中特定离子活度的对数呈线性关系。的电位与溶液中特定离子活度的对数呈线性关系。Nernst方程式:方程式:阴离子时为,阳离子时为:阴离子时为,阳离子时为 36全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析

33、仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术3.3.电极电位测量电极电位测量yISE的的EISE值不能直接测定值不能直接测定必须将必须将ISE与参比电极共同浸入待测样品中组成与参比电极共同浸入待测样品中组成一个原电池,通过测量一个原电池,通过测量E电池电池来测定来测定E EISEISE值。值。y电池的电动势电池的电动势在一定条件下,原电池的电动势与被测离子活度在一定条件下,原电池的电动势与被测离子活度的对数呈线性关系。的对数呈线性关系。37全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析

34、仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)(二)ISEISE电位分析方法电位分析方法y1.1.定量方法定量方法(1 1)标准比较法(或直读法)标准比较法(或直读法)v指在指在pH计或离子计上直接读出数值的方法,适用于少计或离子计上直接读出数值的方法,适用于少量样本的分析。量样本的分析。(2 2)标准曲线法)标准曲线法v适用于大批量的试样分析。适用于大批量的试样分析。(3 3)标准加入法)标准加入法v当待测溶液组分较复杂,很难控制相同的离子强度时,当待测溶液组分较复杂,很难控制相同的离子强度时,选用标准加入法。选用标准加入法。38全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学

35、检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)(二)ISEISE电位分析方法电位分析方法y2.2.样本测定方式样本测定方式直接法直接法v指样本不经稀释直接由电极测量离子活度;指样本不经稀释直接由电极测量离子活度;v优点是可采用全血测定,它迅速方便,结果准确,不会因血清中优点是可采用全血测定,它迅速方便,结果准确,不会因血清中水体积所占比例改变而影响结果。水体积所占比例改变而影响结果。间接法间接法v指样本经一定离子强度缓冲溶液稀释后由电极测量离子活度。指样本经一定离子强度缓冲溶液稀释后由电极测

36、量离子活度。v与直接法相比,间接法样品用量少;由于样品预先进行稀释,不与直接法相比,间接法样品用量少;由于样品预先进行稀释,不易堵塞管道;降低了血脂、不溶性蛋白质对电极的污染,以及对易堵塞管道;降低了血脂、不溶性蛋白质对电极的污染,以及对电极的损耗,使寿命延长。电极的损耗,使寿命延长。直接法比间接法测定结果高直接法比间接法测定结果高35,因为血脂及蛋白质等不包含,因为血脂及蛋白质等不包含有有K、Na。39全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪

37、分析技术二、电解质分析仪分类和结构二、电解质分析仪分类和结构40全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)电解质分析仪的分类(一)电解质分析仪的分类y1.1.按自动化程度分类按自动化程度分类分为半自动和全自动电解质分析仪。分为半自动和全自动电解质分析仪。y2.2.按工作方式分类按工作方式分类分为湿式和干式电解质分析仪。分为湿式和干式电解质分析仪。y3.3.按仪器的功能分类按仪器的功能分类可分为电解质分析仪、含电解质分析的血气分析可分

38、为电解质分析仪、含电解质分析的血气分析仪、含电解质分析的自动生化分析仪等。仪、含电解质分析的自动生化分析仪等。41全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)电解质分析仪的基本结构(二)电解质分析仪的基本结构y湿式电解质分析仪湿式电解质分析仪一般由离子选择性电极组、液路系统、电路系统、一般由离子选择性电极组、液路系统、电路系统、程序控制模块和显示操作系统等组成程序控制模块和显示操作系统等组成42全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国

39、高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术湿式电解质分析仪结构框图湿式电解质分析仪结构框图 43全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y1.1.离子选择性电极组离子选择性电极组电极组包括指示电极和参比电极。电极组包括指示电极和参比电极。ISE的构成的构成v通常采用流动式毛细管结构,即在毛细管的侧臂开多通常采用流动式毛细

40、管结构,即在毛细管的侧臂开多个小孔,孔里插入各种离子选择性电极。个小孔,孔里插入各种离子选择性电极。v在真空泵的负压作用下,待测样被吸入毛细管中,与在真空泵的负压作用下,待测样被吸入毛细管中,与各个插入电极接触,并将溶液浓度的变化转换成电极各个插入电极接触,并将溶液浓度的变化转换成电极电位的变化。电位的变化。v一次进样可完成多个参数的测量。一次进样可完成多个参数的测量。44全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术电极结构示意图电极结构示

41、意图45全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y钠、钾、氯电极钠、钾、氯电极钠电极是一种含铅硅酸钠的玻璃膜电极;钠电极是一种含铅硅酸钠的玻璃膜电极;钾电极为由缬氨霉素和聚氯乙烯(钾电极为由缬氨霉素和聚氯乙烯(PVC)等组成)等组成的膜电极;的膜电极;氯电极由一个银氯化银电极组成。氯电极由一个银氯化银电极组成。46全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二

42、版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.2.液路系统液路系统通常由标本盘、溶液瓶、驱动电机、采样针、电通常由标本盘、溶液瓶、驱动电机、采样针、电极系统、蠕动泵、三通阀、管道等组成。极系统、蠕动泵、三通阀、管道等组成。主要用于将检测样品、定标液和缓冲稀释液等按主要用于将检测样品、定标液和缓冲稀释液等按工作要求吸取和输送至电极管道中,并完成冲洗工作要求吸取和输送至电极管道中,并完成冲洗电极管道、排除废液的工作。电极管道、排除废液的工作。47全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)

43、(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.3.电路系统电路系统一般由微处理器模块、信号放大及数据采集模块、一般由微处理器模块、信号放大及数据采集模块、蠕动泵和三通阀控制模块、输入输出模块、电源蠕动泵和三通阀控制模块、输入输出模块、电源电路模块等五大模块组成。电路模块等五大模块组成。共同完成对仪器各部件的动作进行控制,并对前共同完成对仪器各部件的动作进行控制,并对前置放大器采集的电极置放大器采集的电极mVmV值进行处理和计算,完成值进行处理和计算,完成仪器设定的工作程序,并将运算、处理后结果送仪器设定的工作程序,并将运算、处理后结果送显示单元显示或打

44、印输出。显示单元显示或打印输出。48全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y4.4.程序控制系统程序控制系统主要包括仪器微处理系统程序、仪器设定程序、主要包括仪器微处理系统程序、仪器设定程序、仪器测定程序和自动清洗程序等。仪器测定程序和自动清洗程序等。y5.5.显示操作系统显示操作系统轻触键盘用于控制仪器工作和输入数据。轻触键盘用于控制仪器工作和输入数据。液晶显示器用于显示输出测量结果,仪器操作提液晶显示器用于显示输出测量结果,仪器操

45、作提示等。示等。在分析检测样品时,操作者可以通过按键操作控在分析检测样品时,操作者可以通过按键操作控制分析检测过程。制分析检测过程。49全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术三、电解质分析仪的维护和保养三、电解质分析仪的维护和保养50全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一

46、)日常维护(一)日常维护yl.l.每日维护每日维护检查试剂量,如不足检查试剂量,如不足14液面,应及时更换;清液面,应及时更换;清洁仪器表面灰尘及吸样探针,保持探针的畅通;洁仪器表面灰尘及吸样探针,保持探针的畅通;及时弃去废液瓶中的废液。及时弃去废液瓶中的废液。y2.2.每周维护每周维护清洗仪器流路,除去蛋白质、脂类沉积和盐类结清洗仪器流路,除去蛋白质、脂类沉积和盐类结晶。晶。51全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y3.3.每月维

47、护每月维护用酒精棉球清洁泵管和不锈钢转轴,在泵管的弯用酒精棉球清洁泵管和不锈钢转轴,在泵管的弯处涂硅油或白色凡士林等润滑剂。处涂硅油或白色凡士林等润滑剂。y4.4.每季度进行每季度进行MV值试验值试验电极的电极的MV值由仪器使用说明书给出。值由仪器使用说明书给出。52全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(二)仪器的保养(二)仪器的保养y1.1.电极系统的保养电极系统的保养定期更换电极膜和电极内充液。定期更换电极膜和电极内充液。定期进

48、行去蛋白清洗及电极的活化。定期进行去蛋白清洗及电极的活化。y2.2.流路系统的保养流路系统的保养 保证流路中没有蛋白质、脂类沉积和盐类结晶。保证流路中没有蛋白质、脂类沉积和盐类结晶。每天工作结束关机前,都要进行管路的清洗。每天工作结束关机前,都要进行管路的清洗。冲洗完毕,应当对仪器进行重新定标。冲洗完毕,应当对仪器进行重新定标。53全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术四、电解质分析的质量控制四、电解质分析的质量控制54全国高等医药院

49、校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术(一)分析前质量控制(一)分析前质量控制y1.样本的采集与处量样本的采集与处量采血用器材必须干燥、清洁,最好选用一次性用品。采血用器材必须干燥、清洁,最好选用一次性用品。减少输液对结果减少输液对结果的影响。的影响。采血中应避免溶血。采血中应避免溶血。应尽快送检,不能剧烈振荡,不能长时间被日光照射;应尽快送检,不能剧烈振荡,不能长时间被日光照射;不能立即测定时应分离血清,置于不能立即测定时应分离血清,置于4冰箱中

50、保存。冰箱中保存。当血样与空气接触时,可造成血样中的当血样与空气接触时,可造成血样中的CO2浓度偏低,浓度偏低,pH值升高,进而使钙离子浓度降低。值升高,进而使钙离子浓度降低。55全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术y2.抗凝剂与药物的影响抗凝剂与药物的影响抗凝剂抗凝剂v血样不能血样不能使用使用EDTA、柠檬酸盐或草酸盐等抗凝剂。、柠檬酸盐或草酸盐等抗凝剂。v即使用肝素,其浓度通常也不超过即使用肝素,其浓度通常也不超过20U/ml血

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