《酶的分离纯化 (5)精选课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《酶的分离纯化 (5)精选课件.ppt（11页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、关于酶的分离纯化关于酶的分离纯化(5)第一页，本课件共有11页n n抽提是要将酶从原料中抽提出来作成酶溶液；n n纯化则是要将酶和杂质分离开来，或者选择地将酶从包含杂质的溶液中分离出来，或者选择地将杂质从酶溶液中移除出去；n n制剂则是要将纯化的酶作成一定形式的制剂。第二页，本课件共有11页为了能够成功地进行酶的分离纯化，为了能够成功地进行酶的分离纯化，应注意以下问题。应注意以下问题。n n1防止酶变性失效n n2选择有效的纯化方法n n3酶活性的测定贯穿纯化过程的始终第三页，本课件共有11页二酶的抽提二酶的抽提n n一预处理和破细胞n n二抽提n n1pH 首先应考虑的是酶的酸碱稳定性，选择
2、的pH不能超过酶的稳定范围。n n2盐 抽提液一般采用等渗盐溶液，最普通的有0.0200.050mol/L的磷酸缓冲液，0.15mol/LNaCl溶液等。n n3温度 抽提温度一般控制在04.第四页，本课件共有11页n n三浓缩n n1蒸发n n2超过滤n n3胶过滤n n4反复冻融第五页，本课件共有11页三酶的纯化原理与方法三酶的纯化原理与方法n n1根据溶解度的不同进行的纯化n nA盐析法n nB有机溶剂沉淀法n nC共沉淀法n nD选择性沉淀法第六页，本课件共有11页n n2按照分子大小进行的纯化n nA胶过滤（层析）法n nB 超过滤法n nC超离心法第七页，本课件共有11页三根据电学
3、解离性质进行纯化三根据电学解离性质进行纯化n nA吸附层析法n nB离子交换层析法n nC电泳法n nD聚焦层析法n nE快速液相层析法n nF疏水层析法第八页，本课件共有11页四利用专一亲和作用进行纯化四利用专一亲和作用进行纯化n n1亲和层析法n n2亲和电泳法n n3融合蛋白亲和分离法n n4其他相关的亲和分离法n nA金属螯合层析法n nB共价层析法第九页，本课件共有11页n n五高效液相层析法n n六根据稳定性差别建立的纯化n n1选择性热变性n n2选择性酸碱变性法n n3表面变性法n n七结晶n n八纯化方法的排列顺序第十页，本课件共有11页感谢大家观看第十一页，本课件共有11页