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1、直接计数法及酵母菌的测定食品微生物第1页，本讲稿共12页Ppt出自江苏食品学院食品与营养工程学院 -食检112班u杨双茹(11)u吴海珍(12)u王婷(09)第2页，本讲稿共12页实验方向分为1.目的要求2.实验原理3.实验器材4.操作方法及报告5.思考题第3页，本讲稿共12页1.实验的目的要求:l了解血球计数板测定微生物数量的原理.l了解血球计数板的结构，学习并掌握利用血球计数板进行酵母菌记数的方法，包括样品的点样、菌数计数的方法与计算。第4页，本讲稿共12页2.实验原理 微生物常用的计数方法有两种，即直接计数法和间接计数法。前者利用 血球计数板 在显微镜下直接计数，能立即得到数值。后者是在
2、平板上长成菌落后再计数，反应较真实，但费时太长。第5页，本讲稿共12页3.实验器材l菌种：酵母菌液l仪器：显微镜，血球计数板、盖玻片（22mm*22mm）、吸水纸、计数器、滴管、擦镜纸等。第6页，本讲稿共12页4.酵母细胞数测定具体的操作方法p血球计数板的构造图示第7页，本讲稿共12页酵母菌数量的测定取洁净的血球计数板一块，在技术室上盖一块盖玻片。摇匀酵母菌液，用滴管滴在计数板中间两侧的沟槽内滴一滴，使渗入计数室，勿产生气泡，保证计数板干净后，然后盖上盖玻片（勿产生气泡）静置五分钟，先用低倍镜找到计数室再转换高倍镜观察计数计数时用16中格的计数板，要按对角线方位，取左上、左下、右上、右下的4个
3、中格（即100小格）的酵母菌数。如果是25中格计数板。除数上述四格外，还需数中央1中格的酵母菌数（即80小格）。由于菌体在计数室中处于不同的空间位置，要在不同的焦距下才能看到，因而观察时必须不断调节微调螺旋，方能数到全部菌体，防止遗漏。如菌体位于中格的双线上，计数时则数上不数下，数左不数右，以减少误差凡酵母菌的芽体达到细胞大小一半时，可作为两个菌体计算。血球计数板用后，应用水洗干净切勿洗刷，一面损坏网格刻度，洗净后晾干即可。第8页，本讲稿共12页第9页，本讲稿共12页实验报告填入下列表格计数次数每个大方格均数稀释倍数总菌数平均值12345第一次第二次第10页，本讲稿共12页5.思考题根据你的体会，说明用血细胞计数板计数的误差主要来自哪些方面？应如何尽量减少？第11页，本讲稿共12页第12页，本讲稿共12页