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1、实验六培养基的配置及灭菌实验六培养基的配置及灭菌第1页，本讲稿共12页一、实验目的一、实验目的v了了解解配配制制培培养养基基的的原原理理，并并掌掌握握配配制制培培养养基基的的一一般般方方法法和步骤；和步骤；v了解高压蒸汽灭菌的原理，并掌握其具体操作方法了解高压蒸汽灭菌的原理，并掌握其具体操作方法第2页，本讲稿共12页二、实验原理二、实验原理l培养基 由人工配制的适合微生物生长、繁殖或适合积累代谢产由人工配制的适合微生物生长、繁殖或适合积累代谢产物的营养基质。物的营养基质。l培养基用途1、菌种分离、培养和分类鉴定；、菌种分离、培养和分类鉴定；2、菌种保藏；、菌种保藏；3、生理生化性质的研究；、生
2、理生化性质的研究；4、发酵生产、发酵生产第3页，本讲稿共12页二、实验原理二、实验原理l培养基配置需满足的条件：物质条件：六大营养要素-C源、N源、能源、无机盐、生长因子、水；理化条件：pH、aw、Eh等第4页，本讲稿共12页高 压 蒸 汽 灭 菌 锅注意事项：排净冷空气；灭菌终了，缓慢降压；压力降为0，取出物品。l灭菌锅的原理第5页，本讲稿共12页三、实验器材三、实验器材l材料 牛肉膏蛋白胨培养基药品；马丁孟加拉红-链霉素培养基药品l仪器 电子天平；高压蒸汽灭菌锅l其他 三角瓶，试管，培养皿，移液管第6页，本讲稿共12页四、实验步骤四、实验步骤（一）培养基的配制从培养基的物理状态可分为：1.
3、液体培养基：不加凝固剂的液体状态培养基。2.固体培养基：在液体培养基中加入1.52%左右的凝固剂3.半固体培养基：在液体培养基中加入0.20.7%凝固剂而成的半固体状培养基。第7页，本讲稿共12页培养基的配制方法和步骤l称 量：按照配方正确称取各种原料(除了琼脂)放于搪瓷杯中。l溶 化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅匀，溶解。l调pH值：用2N NaOH或2N HCl调pH，用pH试纸对照。l分 装：注意不要污染棉塞。l包扎成捆，做好标记，注明班级，组别，何种培养基等。第8页，本讲稿共12页两种培养基的配方1、牛肉膏蛋白胨培养基100mll牛肉膏 0.3g 蛋白胨 1g 氯化钠 0.5g 琼脂
4、 2g 水 100mL pH 7.27.4 灭菌 121126，20min第9页，本讲稿共12页2、马丁-孟加拉红培养基100mlKH2PO4 0.1gMgSO47H2O 0.05g蛋白胨 0.5g葡萄糖 1.0g琼脂 2g水 100mlpH 自然孟加拉红溶液 0.75ml灭菌(含葡萄糖）112115 30min第10页，本讲稿共12页其他器材的准备（一）制备无菌水 试 管：14支，毎支试管装9ml自来水 三角瓶：一只，装99ml自来水并加玻璃珠。（二）包吸管及平皿 吸 管：13支 平 皿：14个（三）制作三角瓶塞3个第11页，本讲稿共12页灭菌锅的使用方法l加水煮沸；l把待灭菌的物品放入灭菌锅；l加盖l密封l排气l灭菌2030minl降压l开盖取物第12页，本讲稿共12页