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1、实验一毛细血管采血法计数第1页,本讲稿共14页一、毛细血管采血一、毛细血管采血1、采血部位:左手无名指尖内侧2、采血器材:一次性采血针血红蛋白吸管:拇指与中指握橡皮头,食指堵住橡皮拇指与中指握橡皮头,食指堵住橡皮头上的小窟窿,压迫皮头吸样(吸时手要缓缓放开,头上的小窟窿,压迫皮头吸样(吸时手要缓缓放开,否则血会吸入橡皮头中),吸到需要量时(或稍多)否则血会吸入橡皮头中),吸到需要量时(或稍多)时,时,将吸管的吸样端抵紧指端皮肤将吸管的吸样端抵紧指端皮肤,放开压迫的橡,放开压迫的橡皮头,将吸管擦净后放入试管底部,用上清洗涤吸皮头,将吸管擦净后放入试管底部,用上清洗涤吸管管3 3次)次)第2页,本
2、讲稿共14页3 3、实验步骤、实验步骤(1 1)75%75%酒精棉球消毒无名指头。酒精棉球消毒无名指头。(2 2)待酒精挥发(疼痛与稀释),皮肤干燥后,左手)待酒精挥发(疼痛与稀释),皮肤干燥后,左手拇、食指、中指固定病人无名指端,右手持采血针,拇、食指、中指固定病人无名指端,右手持采血针,迅速穿刺指端,深度为迅速穿刺指端,深度为2-3mm2-3mm。(3 3)擦去第)擦去第1d1d血(有组织液稀释与易凝),用采血管血(有组织液稀释与易凝),用采血管采集需要血量。采集需要血量。(4 4)擦净采血管外周的血液(量准确),并尽快将)擦净采血管外周的血液(量准确),并尽快将采血管插入已备好的稀释液中
3、,挤出血液到底部,采血管插入已备好的稀释液中,挤出血液到底部,并利用上清洗涤采血管并利用上清洗涤采血管3 3次,混匀。次,混匀。(5 5)采血完毕,以消毒干棉球压迫伤口,帮助止)采血完毕,以消毒干棉球压迫伤口,帮助止血。血。第3页,本讲稿共14页二、白细胞计数二、白细胞计数(一)原理(一)原理用稀醋酸溶液将血液用稀醋酸溶液将血液1:20倍稀释并倍稀释并破坏红细胞,白细胞形态更加清晰,破坏红细胞,白细胞形态更加清晰,滴入计数板中,用低倍镜数四角的滴入计数板中,用低倍镜数四角的四个大方格中白细胞总数,再算出四个大方格中白细胞总数,再算出每升血液中白细胞的数量。每升血液中白细胞的数量。第4页,本讲稿
4、共14页(二)试剂与器材(二)试剂与器材1、试剂:白细胞稀释液2、器材:血细胞计数板第5页,本讲稿共14页计数板的构造与使用第6页,本讲稿共14页第7页,本讲稿共14页第8页,本讲稿共14页(三)操作1.先吸取白细胞稀释液0.38ml。2.末梢采血法采血20ul加入稀释液中。3.混匀后,静置10分钟。4.充池到计数板中,静置5分钟。5.计数四个角上的四个大方格,白细胞为象句号大小的圆形小黑点。6.结果计算第9页,本讲稿共14页白细胞计算:X/410 20 106/L=白细胞/LX:为4个大方格内白细胞总数。4:为每大方格(即0.1ul)内白细胞平均数。10:1个大方格的容积为0.1ul,换算成
5、1ul。20:血液的稀释倍数。106:将ul换算成L第10页,本讲稿共14页镜下WBC示意图第11页,本讲稿共14页(四)注意事项1采第一滴血要擦去,因含组织液(稀释作用和促凝);采第一滴血要擦去,因含组织液(稀释作用和促凝);2吸样要准确,不能气泡,管外余血要擦掉;吸样要准确,不能气泡,管外余血要擦掉;3血红蛋白吸管要清洗干净;血红蛋白吸管要清洗干净;4充池要先混匀,充池不能有气泡,否则要重新充池;充池要先混匀,充池不能有气泡,否则要重新充池;5要注意白细胞与残渣的鉴别;要注意白细胞与残渣的鉴别;6.样本不能放置太长的时间,否则白细胞易崩解。样本不能放置太长的时间,否则白细胞易崩解。第12页,本讲稿共14页7、计数的方法与原则:按一定顺序按一定顺序计数计数压线细胞压线细胞数上不数下数上不数下数左不数右数左不数右第13页,本讲稿共14页三、参考值与临床意义三、参考值与临床意义第14页,本讲稿共14页