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1、紫外检测器紫外检测器 紫外吸收检测器紫外吸收检测器其检测原理和其检测原理和UV-VisUV-VisUV-VisUV-Vis方法一样。只是，此时方法一样。只是，此时所采用的吸收池为微量吸收池，通常其光程为所采用的吸收池为微量吸收池，通常其光程为2-102-102-102-10mmmmmmmm,体积体积约为约为110 110 110 110 L L L L。具有灵敏度高，线性范围宽，对流速和温度不具有灵敏度高，线性范围宽，对流速和温度不敏感等特点，它是液相色谱最常用的检测器。敏感等特点，它是液相色谱最常用的检测器。HPLC HPLC HPLC HPLC分析中，分析中，约有约有80%80%80%80
2、%的物质可以用紫外吸收检测器检测。的物质可以用紫外吸收检测器检测。在在实实际际工工作作，紫紫外外检检测测的的主主要要参参数数是是选选择择检检测测波波长长，它它应应考考虑虑溶溶质质和和流流动动相相的的吸吸收收特特性性，在在选选择择测测量量波波长长时时注注意意：溶溶剂剂必必须须能能让让所所选选择择的的光光透透过过，即即所所选选波波长长不不能能小小于于溶溶剂剂的的最最低低使用波长使用波长 固定波长型固定波长型 可变波长型可变波长型 二极管阵列二极管阵列 第1页/共15页固定波长型 结构紧凑结构紧凑 造价底造价底 操作维修方便操作维修方便 灵敏度高灵敏度高 适用于梯度洗脱适用于梯度洗脱第2页/共15页
3、可变波长型紫外可见分光紫外可见分光选择性大选择性大第3页/共15页二极管阵列 同时检测全波长的信号定量的同时也可光谱定性同时检测全波长的信号定量的同时也可光谱定性第4页/共15页波长波长可的松可的松氟美松氟美松皮质酮皮质酮快速扫描快速扫描光电二极管阵列（光电二极管阵列（PDA）检测所获得的三维色谱检测所获得的三维色谱-光谱图光谱图第5页/共15页第6页/共15页示差折射检测器示差折射检测器 示差折射检测器是通过连续监测参比池和测量池中溶液的折射率之差来测定溶质浓度。由于折射率是物质示差折射检测器是通过连续监测参比池和测量池中溶液的折射率之差来测定溶质浓度。由于折射率是物质的通用性质，示差折射检
4、测器是一种通用型的整体性质检测器的通用性质，示差折射检测器是一种通用型的整体性质检测器 第7页/共15页 原原理理：利利用用两两束束相相同同角角度度的的光光照照射射溶溶剂剂相相和和样样品品+溶溶剂剂相相，利利用用二二者者对对光光的的折折射射率率不不同同，其其中中一一束束（通通常常是是通通过过样样品品+溶溶剂剂相相）光光因因为为发发生生偏偏转转造造成成两两束束光光的的强强度度差差发发生生变化，将此差示信号放大并记录，该信号代表样品的浓度。变化，将此差示信号放大并记录，该信号代表样品的浓度。为为通通用用型型检检测测器器，灵灵敏敏度度为为10-7g/mL。但但对对温温度度变变化化敏敏感感(0.00X
5、 ），且且不不适适于梯度淋洗。于梯度淋洗。光源光源调零调零光学零光学零参比参比样品样品平面镜平面镜透镜透镜光电转换光电转换记录仪记录仪放大器放大器遮光板遮光板第8页/共15页荧光检测器荧光检测器 荧光检测器是一种很灵敏的荧光检测器是一种很灵敏的,有选择性的检测器有选择性的检测器,其灵敏度比其灵敏度比UV UV 高高101000101000101000101000倍倍,一般可测一般可测ppbppb级的化合物。级的化合物。它用于检测物质本身具有荧光或为了提高灵敏度将无荧光的物质衍生成荧光体。可用荧光检测的物质：如它用于检测物质本身具有荧光或为了提高灵敏度将无荧光的物质衍生成荧光体。可用荧光检测的物
6、质：如某些代谢物、食品、药物、氨基酸、多肽、胺类、维生素、石油高沸点馏分、生物碱和甾族化合物等。某些代谢物、食品、药物、氨基酸、多肽、胺类、维生素、石油高沸点馏分、生物碱和甾族化合物等。第9页/共15页第10页/共15页电化学检测器电化学检测器 对于具有电活性的物质对于具有电活性的物质,在液相色谱中可采用电化学检测器检测。它包括电导库仑、安培、极谱、电位和光在液相色谱中可采用电化学检测器检测。它包括电导库仑、安培、极谱、电位和光电导等形式电导等形式,其中其中,用得最多和最成功的是安培检测器用得最多和最成功的是安培检测器 第11页/共15页安培检测器安培检测器 由恒电位仪和一薄层反应池由恒电位仪
7、和一薄层反应池（体积为（体积为15 L）组成。如图。组成。如图。该检测器是利用待测物流入反该检测器是利用待测物流入反应池时在工作电极表面发生氧化应池时在工作电极表面发生氧化或还原反应，两电极间就有电流或还原反应，两电极间就有电流通过，此电流大小与待测物浓度通过，此电流大小与待测物浓度成正比。成正比。采用安培检测器时，流动相必采用安培检测器时，流动相必须含有电解质，且呈化学隋性。须含有电解质，且呈化学隋性。它最适于与反相色谱匹配。但此它最适于与反相色谱匹配。但此检测器只能检测具有电活性的物检测器只能检测具有电活性的物质。质。第12页/共15页液相色谱常用检测器的一般性质 检测器检测器 选择性选择
8、性 梯度梯度洗脱洗脱 线性线性范围范围 检测限检测限(g/ml)g/ml)敏感性敏感性 对流速对流速 对温度对温度 紫外紫外 紫外吸收紫外吸收 可以可以 10105 5 2102101010 不敏感不敏感 低低 示差示差 通用型通用型不行不行10104 42102107 7 不敏感不敏感 10104 4 荧光荧光 发荧光物质发荧光物质 可以可以 10103 3 10101111 不敏感不敏感 低低 电化学电化学 电活性电活性 不行不行10106 6 10101212 敏感敏感 1.5%1.5%第13页/共15页色谱数据处理和色谱工作站色谱数据处理和色谱工作站 早期的色谱仪采用记录仪，通常是一种
9、电子电位差计来记录色早期的色谱仪采用记录仪，通常是一种电子电位差计来记录色谱图。由色谱图量取两个最重要的色谱参数：保留值和峰面积。谱图。由色谱图量取两个最重要的色谱参数：保留值和峰面积。由于色谱分析的特殊性和电子技术的迅速发展，目前色谱分析由于色谱分析的特殊性和电子技术的迅速发展，目前色谱分析普遍使用色谱数据处理机获得色谱信息。大多数色谱数据处理普遍使用色谱数据处理机获得色谱信息。大多数色谱数据处理装置是由数字电子积分仪和微处理机系统组成。通过装置是由数字电子积分仪和微处理机系统组成。通过ADCADC转换器转换器,把模拟信号转换成数字信号把模拟信号转换成数字信号,然后再把峰持续时间内的数值贮存然后再把峰持续时间内的数值贮存起来进行计算起来进行计算,最后打印出分析报告。最后打印出分析报告。第14页/共15页感谢您的观看！第15页/共15页