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1、 外周血细胞检验程序外周血细胞检验程序 涂片、染色与镜检；外周血细胞形态检验报告涂片、染色与镜检；外周血细胞形态检验报告方式方式 外周血红细胞异常形态检验外周血红细胞异常形态检验 大小、形态、染色与结构异常；点彩红细胞大小、形态、染色与结构异常；点彩红细胞 外周血白细胞异常形态检验外周血白细胞异常形态检验 中性粒细胞异常变化；异常淋巴细胞中性粒细胞异常变化；异常淋巴细胞 血小板形态与寄生虫检验血小板形态与寄生虫检验 血小板大小、形态、数量变化；寄生虫血小板大小、形态、数量变化；寄生虫讲讲 授授 内内 容容第1页/共42页外周血细胞检验程序外周血细胞检验程序第2页/共42页血涂片的制备血涂片的制
2、备 器材器材 清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片。操作操作 在玻片近一端1/3处，加一滴血液，握住另一张边缘光滑的推片，以3045角使血滴沿推片迅速散开，快速、平稳地推动推片至载玻片的另一端。第3页/共42页 注意事项 血膜呈舌状，头、体、尾分明 空气中晃动，尽快干燥；37恒温箱中促干 涂片的厚薄、长度与血滴大小（1020l）与血片质量 1h内染色或在1h内甲醇固定 正确清洁玻片 抗凝血或毛细血管血涂片；EDTA能阻止PLT聚集 抗凝血液4h内涂片第4页/共42页血涂片染色血涂片染色 原理原理 瑞氏（瑞氏（Wright）染色法（经典染色法）染色法（经典染色法）瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应
3、，又有瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理物理 吸附作用。吸附作用。试剂试剂 瑞氏染液瑞氏染液 瑞氏染料瑞氏染料 0.1 g 甲醇（AR）60ml第5页/共42页pH6.8磷酸盐缓冲液（pH6.46.8）磷酸二氢钾（KH2PO4）0.3g 磷酸氢二钠（Na2HPO4）0.2g 加少量蒸馏水溶解，再加至1000ml。第6页/共42页 操作操作加瑞氏染液数滴，固定血膜约加瑞氏染液数滴，固定血膜约1min。滴加约等量的缓冲液与染液混合，滴加约等量的缓冲液与染液混合，室温下染色室温下染色510min。用流水冲去染液用流水冲去染液,待干燥后镜检。待干燥后镜检。第7页/共42页 注意事项注意事项
4、PH对细胞染色有影响。未干透的血膜不能染色。染色时间与染液浓度、染色时温度成反比。不能先倒掉染液，用流水冲去。血膜上有染料颗粒沉积，可加少许甲醇。第8页/共42页先在低倍镜下浏览全片，了解染色好坏和 细胞分布情况，观察有无异常细胞。选择涂片体尾交界处染色良好的区域，在 油镜下计数100个白细胞，按其形态特征 进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。血血 涂涂 片片 镜镜 检检第9页/共42页 注意事项注意事项分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈城垛状迂回移动，计数使不能重复和遗漏。白细胞数明显减少的血片，应检查多张血片。分类见有核红细胞，不计入100个白细胞内，以分类100个白细胞过程中
5、见到多少有核红细胞报告，并注明所属阶段。第10页/共42页除慢淋外，破碎细胞或不能识别细胞不超过白细胞总数的2%。若破碎细胞仍能明确鉴别，如破碎的嗜酸性粒细胞，应包括在分类计数中。在结果报告中应对破碎细胞或不能识别细胞作适当描述。分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、染色及分布情况，注意有无寄生虫和其他异常所见。白细胞形态变化较大，遇有疑问应请示上级主管或主任进行核实，以减少错误。第11页/共42页异常红细胞形态检查异常红细胞形态检查第12页/共42页大小异常大小异常 正常红细胞大小较为一致，直径正常红细胞大小较为一致，直径69um在各种贫血时，红细胞可出现大、小在各种贫血时，红细胞可出现
6、大、小不不一。直径一。直径10um为大红细胞，为大红细胞，15um为为巨红细胞，常见于巨幼贫、肝脏疾病巨红细胞，常见于巨幼贫、肝脏疾病等，等，直径直径6um为小红细胞，多见于缺铁性为小红细胞，多见于缺铁性贫贫血等血等。直径相差直径相差1 1倍以上为大小不均倍以上为大小不均 右图：大红细胞（上）右图：大红细胞（上）小红细胞（下）小红细胞（下）(中央苍白区扩大）中央苍白区扩大）第13页/共42页形形 态态 异异 常常 RBC直径通常直径通常2.6 um，呈小圆形，细呈小圆形，细胞中心区蛋白含量较正常多胞中心区蛋白含量较正常多。见于遗传性球形红细胞增。见于遗传性球形红细胞增多症多症（25%以上）以上
7、）、自身、自身免疫性溶贫和异常免疫性溶贫和异常Hb病病（HBS、HBC病等）。病等）。球形红细胞球形红细胞第14页/共42页 红细胞呈椭圆形，横短，长大，红细胞呈椭圆形，横短，长大，有时呈畸形。正常人可见到，有时呈畸形。正常人可见到，15%。见于以下疾病见于以下疾病:1 1、遗传性椭圆性、遗传性椭圆性RBC增多症，增多症，高高 于于 2550%才有诊断价值。才有诊断价值。2、大细胞性贫血时可达大细胞性贫血时可达25%。3、其他各类贫血有不同程度的其他各类贫血有不同程度的 增多增多。椭圆形红细胞第15页/共42页 比正常红细胞扁薄，中心有少比正常红细胞扁薄，中心有少许血红蛋白，部分可与周围的血许
8、血红蛋白，部分可与周围的血红蛋白连接，边缘部染色较中央红蛋白连接，边缘部染色较中央深，故呈靶状。主要见于以下疾深，故呈靶状。主要见于以下疾病病:1、珠蛋白生成障碍性贫血珠蛋白生成障碍性贫血 2、严重缺铁性贫血严重缺铁性贫血 3、一些血红蛋白病一些血红蛋白病（血红蛋白（血红蛋白C、D、E、S病）病）4、肝病、脾切除后及阻塞性黄肝病、脾切除后及阻塞性黄疸等。疸等。靶形红细胞第16页/共42页 细胞狭长似镰刀，也细胞狭长似镰刀，也可呈麦粒状或冬青叶可呈麦粒状或冬青叶样，主要见于遗传性样，主要见于遗传性镰形红细胞增多症镰形红细胞增多症 镰形红细胞镰形红细胞第17页/共42页 红细胞淡染区呈裂口状狭孔，
9、正常 5%。常见于感染（特别是急性化脓性感染）、急性中毒、急性失血及急性溶血等。如晚幼粒、中幼粒等细胞增多为极度左移，多见于类白血病反应或白血病。第31页/共42页 具体表现为：具体表现为：伴白细胞总数增高的核左移称再生性移，常见于急 性化脓性感染，如大叶性肺炎等。白细胞总数不增加或减低的核左移称退行性左移，常见于严重感染、机体抵抗力低下时，如伤寒、感 染中毒性休克的败血症等。第32页/共42页 中性粒细胞核出现4 4、5 5叶（正常时多为3叶，占5070%）或更多，其百分数 3%。这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。常见于巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。此外，在疾病进行期突然出现核象右移
10、，提示预后不良。核右移核右移第33页/共42页毒性变化毒性变化 严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等，中性粒细胞可出现形态变化。具体表现为：细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。中毒颗粒：细胞质中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的分布及大小等，可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致 第34页/共42页 可在细胞质或核中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪变性后未能着色所致。空空 泡泡第35页/共42页 细胞质内出现嗜碱性多呈斑块、梨形或云雾状，可能为核浆发育不平衡所致，为细胞严重毒性变的表现杜勒小体杜勒小体第36页/共42页 胞核有各种形态的芽状突出，临床意义尚
11、不明确，可能与中毒、癌转移、严重的放射损伤等有关。核棘突核棘突第37页/共42页退行性变退行性变 表现为胞体肿大，结构模糊，边缘不清。胞核可呈固缩、肿胀、破碎、溶解等变化，退行性变是细胞衰老死亡的表现。第38页/共42页淋巴细胞的异常变化淋巴细胞的异常变化 异形淋巴细胞：细胞大小为1025l，形态各异，呈圆形，卵圆形或不规则形。细胞核形各异，呈圆形、卵圆形、凹陷形、折叠形、裂隙形或分叶形，核染色质可为细致、中度致密或粗颗粒；副染色质无或少量，核仁无或偶见，大小和染色性各异。细胞质中等至大量；染灰色、淡蓝色或深蓝色；可见细胞边缘染色深，核周淡染；浆细胞样淋巴细胞常有核周淡染区和核窝；有时可见细小嗜天青颗粒；偶见空泡。第39页/共42页 异形淋巴细胞可见于各种病毒感染，如传染性单核细胞增多症时最为常见。此外，可见于疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等。按形态学特征分为型：I型型：空泡型或浆细胞型空泡型或浆细胞型 II型型：不规则型或单核细胞型不规则型或单核细胞型 III型型：幼稚型幼稚型第40页/共42页欢迎批评指正欢迎批评指正 谢谢 谢！谢！第41页/共42页谢谢您的观看！第42页/共42页