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1、生命生命阳光阳光美康美康试剂盒基础知识.生命生命阳光阳光美康美康试剂盒所采用的测定方法特异性好、灵敏度、准确度、试剂盒所采用的测定方法特异性好、灵敏度、准确度、试剂盒所采用的测定方法特异性好、灵敏度、准确度、试剂盒所采用的测定方法特异性好、灵敏度、准确度、精密度符合卫生部临床检验中心、精密度符合卫生部临床检验中心、精密度符合卫生部临床检验中心、精密度符合卫生部临床检验中心、IFCCIFCC、WHOWHO等推荐等推荐等推荐等推荐的指标。的指标。的指标。的指标。试剂盒的储存期至少为试剂盒的储存期至少为试剂盒的储存期至少为试剂盒的储存期至少为1 1年。年。年。年。水溶性、低粘度、无腐蚀、无毒害、不爆
2、炸、不易燃、水溶性、低粘度、无腐蚀、无毒害、不爆炸、不易燃、水溶性、低粘度、无腐蚀、无毒害、不爆炸、不易燃、水溶性、低粘度、无腐蚀、无毒害、不爆炸、不易燃、不污染环境。不污染环境。不污染环境。不污染环境。所用标准品或标准参考物符合卫生部临床检验中心、所用标准品或标准参考物符合卫生部临床检验中心、所用标准品或标准参考物符合卫生部临床检验中心、所用标准品或标准参考物符合卫生部临床检验中心、IFCCIFCC、WHOWHO推荐的标准和要求。推荐的标准和要求。推荐的标准和要求。推荐的标准和要求。试剂盒的要求特异性：即专一性，指分析测定中只对某一物质起反应，对其他物质毫无影响或基本没有影响。例如，GLU的
3、HK法 灵敏度：化学反应中能检出的最小量 准确度：测定值与真值的相符合程度,常表示为真值与测定结果之差,单位与结果单位一致,或为真值的百分比,常以“不准确度”表示,目前使用标准差SD来评价精密度：同一标本用同一方法在同样条件下多次重复测定所得各次结果之间或各次结果与均值之间的相符合程度。精密度不能由数值表示,但以不精度方式进行定量表示,即一组重复测定结果的变异系数CV来表示。生命生命阳光阳光美康美康试剂盒的类型按剂型分类按剂型分类按剂型分类按剂型分类按试剂组成分类按试剂组成分类按试剂组成分类按试剂组成分类按发展阶段分类按发展阶段分类按发展阶段分类按发展阶段分类按是否为专用包装分类按是否为专用包
4、装分类按是否为专用包装分类按是否为专用包装分类按适用通道的不同分类按适用通道的不同分类按适用通道的不同分类按适用通道的不同分类生命生命阳光阳光美康美康按剂型分类干粉试剂干粉试剂干粉试剂干粉试剂 将各组份溶于液体中分装再冻干，或用球磨粉碎、或混合后将各组份溶于液体中分装再冻干，或用球磨粉碎、或混合后将各组份溶于液体中分装再冻干，或用球磨粉碎、或混合后将各组份溶于液体中分装再冻干，或用球磨粉碎、或混合后打成片剂，用前再加入指定量的缓冲液使其溶解（称复溶），打成片剂，用前再加入指定量的缓冲液使其溶解（称复溶），打成片剂，用前再加入指定量的缓冲液使其溶解（称复溶），打成片剂，用前再加入指定量的缓冲液使
5、其溶解（称复溶），这种类型的试剂称为干粉试剂。这种类型的试剂称为干粉试剂。这种类型的试剂称为干粉试剂。这种类型的试剂称为干粉试剂。液体试剂液体试剂液体试剂液体试剂 优点：液体试剂具有组份均一、瓶间差和批间差极其微小以优点：液体试剂具有组份均一、瓶间差和批间差极其微小以优点：液体试剂具有组份均一、瓶间差和批间差极其微小以优点：液体试剂具有组份均一、瓶间差和批间差极其微小以及使用方便（不必复溶，避免了复溶时所用蒸馏水中污染杂及使用方便（不必复溶，避免了复溶时所用蒸馏水中污染杂及使用方便（不必复溶，避免了复溶时所用蒸馏水中污染杂及使用方便（不必复溶，避免了复溶时所用蒸馏水中污染杂质的干扰）、操作误差
6、小等明显优势。质的干扰）、操作误差小等明显优势。质的干扰）、操作误差小等明显优势。质的干扰）、操作误差小等明显优势。缺点：许多酶类试剂盒受温度的影响保质期短。缺点：许多酶类试剂盒受温度的影响保质期短。缺点：许多酶类试剂盒受温度的影响保质期短。缺点：许多酶类试剂盒受温度的影响保质期短。浓缩试剂浓缩试剂浓缩试剂浓缩试剂 使用时只取很少的量，再加入重蒸水稀释（例如：使用时只取很少的量，再加入重蒸水稀释（例如：使用时只取很少的量，再加入重蒸水稀释（例如：使用时只取很少的量，再加入重蒸水稀释（例如：R-50R-50 l+l+重蒸水重蒸水重蒸水重蒸水-250-250 l l）配制成工作液。）配制成工作液。
7、）配制成工作液。）配制成工作液。生命生命阳光阳光美康美康按试剂组成分类单试剂单试剂单试剂单试剂 液体单试剂就是将某种生化检验项目所用到的试剂科学液体单试剂就是将某种生化检验项目所用到的试剂科学地混合在一起，组成为一种试剂。应用时，只须将标本地混合在一起，组成为一种试剂。应用时，只须将标本和试剂按一定比例混合，即可进行相应的生化反应，然和试剂按一定比例混合，即可进行相应的生化反应，然后用适当的方法检测结果。后用适当的方法检测结果。双试剂双试剂双试剂双试剂 液体双试剂就是将某些生化检测项目所用到的试剂，按液体双试剂就是将某些生化检测项目所用到的试剂，按用途科学地分成两类，分别配成两种试剂，通常第一
8、试用途科学地分成两类，分别配成两种试剂，通常第一试剂加入后可起到全部或部分消除某些内源性干扰的作用，剂加入后可起到全部或部分消除某些内源性干扰的作用，第二试剂为启动被检测物质反应的试剂，两种试剂混合第二试剂为启动被检测物质反应的试剂，两种试剂混合后才共同完成被检项目的生化反应。后才共同完成被检项目的生化反应。生命生命阳光阳光美康美康按试剂组成分类单试剂优缺点单试剂优缺点单试剂优缺点单试剂优缺点 优点：优点：优点：优点：操作简便适用于各类生化分析仪，节约试剂位操作简便适用于各类生化分析仪，节约试剂位操作简便适用于各类生化分析仪，节约试剂位操作简便适用于各类生化分析仪，节约试剂位 缺点：缺点：缺点
9、：缺点：配方复杂（稳定剂、掩蔽剂），稳定性差，不配方复杂（稳定剂、掩蔽剂），稳定性差，不配方复杂（稳定剂、掩蔽剂），稳定性差，不配方复杂（稳定剂、掩蔽剂），稳定性差，不 能完全避免内外源物质干扰。能完全避免内外源物质干扰。能完全避免内外源物质干扰。能完全避免内外源物质干扰。生命生命阳光阳光美康美康按试剂组成分类双试剂的特点双试剂的特点双试剂的特点双试剂的特点（1 1）可较彻底排除样品空白和内外源干扰物）可较彻底排除样品空白和内外源干扰物）可较彻底排除样品空白和内外源干扰物）可较彻底排除样品空白和内外源干扰物（2 2）更加符合酶偶联反应的特性和过程）更加符合酶偶联反应的特性和过程）更加符合酶偶联
10、反应的特性和过程）更加符合酶偶联反应的特性和过程（3 3）试剂配方简单）试剂配方简单）试剂配方简单）试剂配方简单（4 4）试剂稳定，便于储存，运输和使用）试剂稳定，便于储存，运输和使用）试剂稳定，便于储存，运输和使用）试剂稳定，便于储存，运输和使用（5 5）可用抑制法直接测定某些同工酶）可用抑制法直接测定某些同工酶）可用抑制法直接测定某些同工酶）可用抑制法直接测定某些同工酶生命生命阳光阳光美康美康液体双试剂的优点提高了抗干扰反应的能力提高了抗干扰反应的能力 在临床生化测定过程中，血标本除了含有待测物质外，在临床生化测定过程中，血标本除了含有待测物质外，还含有各种酶、有机物、无机盐等物质，这些物
11、质都会还含有各种酶、有机物、无机盐等物质，这些物质都会干扰或参与测试反应，引起非特异性反应干扰，而双试干扰或参与测试反应，引起非特异性反应干扰，而双试剂型试剂盒设计的一个主要目的就是为了克服这种干扰剂型试剂盒设计的一个主要目的就是为了克服这种干扰反应。反应。排除样品中非测定成分的干扰，提高准确性排除样品中非测定成分的干扰，提高准确性排除样品中非测定成分的干扰，提高准确性排除样品中非测定成分的干扰，提高准确性 例如：例如：例如：例如：ALTALT 内源性丙酮酸内源性丙酮酸内源性丙酮酸内源性丙酮酸+NADH +NADH LDH LDH 乳酸乳酸乳酸乳酸+NAD+NAD L-L-丙氨酸丙氨酸丙氨酸丙
12、氨酸+-+-酮戊二酸酮戊二酸酮戊二酸酮戊二酸+NADH +NADH ALT ALT 丙酮酸丙酮酸丙酮酸丙酮酸+L-+L-谷氨酸谷氨酸谷氨酸谷氨酸 丙酮酸丙酮酸丙酮酸丙酮酸+NADH+H+NADH+H+LDH LDH 乳酸乳酸乳酸乳酸+NAD+H2O+NAD+H2O生命生命阳光阳光美康美康增强了工作试剂的稳定性：增强了工作试剂的稳定性：试剂组分高度均一：不必冻干复溶，避免了干粉试剂复溶试剂组分高度均一：不必冻干复溶，避免了干粉试剂复溶时所用蒸馏水污染杂质的干扰作用。避免了干粉试剂盒分时所用蒸馏水污染杂质的干扰作用。避免了干粉试剂盒分装，冻干，复溶过程中引起的瓶间差，提高了测定的精密装，冻干，复溶
13、过程中引起的瓶间差，提高了测定的精密度和准确度度和准确度.液体双试剂的优点生命生命阳光阳光美康美康按发展阶段分类传统试剂盒传统试剂盒传统试剂盒传统试剂盒新型试剂新型试剂新型试剂新型试剂 快速反应试剂盒快速反应试剂盒 一步法试剂盒一步法试剂盒 多项同测组合试剂盒多项同测组合试剂盒 卡卡式试剂盒式试剂盒 浓缩试剂盒浓缩试剂盒生命生命阳光阳光美康美康按是否为专用包装分类专用包装试剂：专用包装试剂：专用包装试剂：专用包装试剂：70607060、71707170、贝克曼包装等、贝克曼包装等、贝克曼包装等、贝克曼包装等非专用包装试剂非专用包装试剂非专用包装试剂非专用包装试剂生命生命阳光阳光美康美康按适用通
14、道的不同分类封闭通道：如条码试剂。封闭通道：如条码试剂。封闭通道：如条码试剂。封闭通道：如条码试剂。开放通道开放通道开放通道开放通道生命生命阳光阳光美康美康试剂盒性能评价实用性实用性实用性实用性可靠性可靠性可靠性可靠性生命生命阳光阳光美康美康实用性标本类型标本类型标本类型标本类型操作要求操作要求操作要求操作要求服务要求：电力供应，通风环境，试剂处理等服务要求：电力供应，通风环境，试剂处理等服务要求：电力供应，通风环境，试剂处理等服务要求：电力供应，通风环境，试剂处理等消耗品要求消耗品要求消耗品要求消耗品要求技术职能要求技术职能要求技术职能要求技术职能要求成本成本成本成本分析速度分析速度分析速度
15、分析速度一般问题一般问题一般问题一般问题 如临床应用价值、试剂的效期、包装规格是否如临床应用价值、试剂的效期、包装规格是否如临床应用价值、试剂的效期、包装规格是否如临床应用价值、试剂的效期、包装规格是否多样、操作是否简便等。多样、操作是否简便等。多样、操作是否简便等。多样、操作是否简便等。生命生命阳光阳光美康美康可靠性（试剂盒基本性能指标）准确度：测定值与真值的相符合程度准确度：测定值与真值的相符合程度准确度：测定值与真值的相符合程度准确度：测定值与真值的相符合程度精密度：同一标本用同一方法在同样条件下多次重复测精密度：同一标本用同一方法在同样条件下多次重复测精密度：同一标本用同一方法在同样条
16、件下多次重复测精密度：同一标本用同一方法在同样条件下多次重复测定所得各次结果之间或各次结果与均值之间的相符合程定所得各次结果之间或各次结果与均值之间的相符合程定所得各次结果之间或各次结果与均值之间的相符合程定所得各次结果之间或各次结果与均值之间的相符合程度。度。度。度。线性范围（分析范围）线性范围（分析范围）线性范围（分析范围）线性范围（分析范围）干扰性干扰性干扰性干扰性灵敏度：化学反应中能检出的最小量灵敏度：化学反应中能检出的最小量灵敏度：化学反应中能检出的最小量灵敏度：化学反应中能检出的最小量稳定性稳定性稳定性稳定性特异性特异性特异性特异性方法学性能（方法学性能（方法学性能（方法学性能（I
17、FCCIFCC，酶法，酶法，酶法，酶法 ，HDLHDL，LDLLDL方法等）方法等）方法等）方法等）生命生命阳光阳光美康美康重点选择的几个指标准确度准确度 通常以回收率、定值血清的靶值范围、对照试验及干通常以回收率、定值血清的靶值范围、对照试验及干扰试验的结果来分析判断。扰试验的结果来分析判断。精密度精密度 试剂的瓶间差异、批内精密度和批间差异三组测定的试剂的瓶间差异、批内精密度和批间差异三组测定的平均值之间应无显著差异，否则，试剂盒的均一性不符平均值之间应无显著差异，否则，试剂盒的均一性不符合要求。合要求。线性范围线性范围 指该试剂盒按其说明使用时可准确测量的范围。指该试剂盒按其说明使用时可
18、准确测量的范围。抗干扰作用抗干扰作用 双试剂型试剂盒主要优点是抗干扰作用。双试剂型试剂盒主要优点是抗干扰作用。生命生命阳光阳光美康美康灵敏度灵敏度 采用蒸馏水（采用蒸馏水（5%5%牛血清白蛋白溶液）作为牛血清白蛋白溶液）作为 空白样空白样本，空白样本应不含被测物。在生化分析仪上连续检测本，空白样本应不含被测物。在生化分析仪上连续检测2020次，记录检测结果。计算次，记录检测结果。计算2020次结果的均值与标准差次结果的均值与标准差SDSD。以。以空白均值加两倍标准差作为报告方法的检测限。空白均值加两倍标准差作为报告方法的检测限。稳定性稳定性 试剂盒稳定性是指试剂盒在规定条件下储存仍保持其试剂盒
19、稳定性是指试剂盒在规定条件下储存仍保持其性能指标的期限。该期限应符合规定的储存期。方法有以性能指标的期限。该期限应符合规定的储存期。方法有以下三种。下三种。1 1原包装试剂的稳定性原包装试剂的稳定性 2 2复溶后试剂的稳定性复溶后试剂的稳定性3 3不同温度下的保存期不同温度下的保存期重点选择的几个指标生命生命阳光阳光美康美康化学试剂盒常用的反应原理比色法比色法比色法比色法 由单纯的化学物质参与反应，呈色，在一定波长下比色。由单纯的化学物质参与反应，呈色，在一定波长下比色。由单纯的化学物质参与反应，呈色，在一定波长下比色。由单纯的化学物质参与反应，呈色，在一定波长下比色。例如总蛋白的双缩脲比色法
20、、白蛋白的溴钾酚绿法。例如总蛋白的双缩脲比色法、白蛋白的溴钾酚绿法。例如总蛋白的双缩脲比色法、白蛋白的溴钾酚绿法。例如总蛋白的双缩脲比色法、白蛋白的溴钾酚绿法。酶法酶法酶法酶法 由特异性的酶来催化反应，在一定波长下比色。例如甘由特异性的酶来催化反应，在一定波长下比色。例如甘由特异性的酶来催化反应，在一定波长下比色。例如甘由特异性的酶来催化反应，在一定波长下比色。例如甘油三酯由甘油激酶和过氧化物酶来催化反应；尿素有脲油三酯由甘油激酶和过氧化物酶来催化反应；尿素有脲油三酯由甘油激酶和过氧化物酶来催化反应；尿素有脲油三酯由甘油激酶和过氧化物酶来催化反应；尿素有脲酶来催化反应进行。酶来催化反应进行。酶
21、来催化反应进行。酶来催化反应进行。免疫比浊法免疫比浊法免疫比浊法免疫比浊法 抗体（抗体（抗体（抗体（AbAb）与可溶性抗原（）与可溶性抗原（）与可溶性抗原（）与可溶性抗原（AgAg）反应，形成一定结构的）反应，形成一定结构的）反应，形成一定结构的）反应，形成一定结构的免疫复合物，成为悬浮于反应溶液中的微粒。这种在沉免疫复合物，成为悬浮于反应溶液中的微粒。这种在沉免疫复合物，成为悬浮于反应溶液中的微粒。这种在沉免疫复合物，成为悬浮于反应溶液中的微粒。这种在沉淀反应中形成的微粒具有特殊的光学性质。淀反应中形成的微粒具有特殊的光学性质。淀反应中形成的微粒具有特殊的光学性质。淀反应中形成的微粒具有特殊
22、的光学性质。生命生命阳光阳光美康美康常用监测物质的特性1 1NADHNADH辅酶辅酶辅酶辅酶I I或或或或NADPHNADPH辅酶辅酶辅酶辅酶IIII：乳酸脱氢酶（乳酸脱氢酶（乳酸脱氢酶（乳酸脱氢酶（LDHLDH）NAD+NAD+或或或或NADP+NADP+（altalt）苹果酸脱氢酶（苹果酸脱氢酶（苹果酸脱氢酶（苹果酸脱氢酶（MDHMDH）NAD+NAD+或或或或NADP+NADP+（co2co2）谷氨酸脱氢酶（谷氨酸脱氢酶（谷氨酸脱氢酶（谷氨酸脱氢酶（GLDHGLDH）NAD+NAD+或或或或NADP+NADP+（hcyhcy）生命生命阳光阳光美康美康常用监测物质的特性NADHNADH或或
23、或或NADPHNADPH在在在在340nm340nm有特征性光吸收，而它们的氧有特征性光吸收，而它们的氧有特征性光吸收，而它们的氧有特征性光吸收，而它们的氧化型化型化型化型NAD+NAD+或或或或NADP+NADP+则没有这个吸收峰，则没有这个吸收峰，则没有这个吸收峰，则没有这个吸收峰，340nm340nm波长处波长处波长处波长处的吸光度与的吸光度与的吸光度与的吸光度与NADNAD（P P）HH的浓度成正比。的浓度成正比。的浓度成正比。的浓度成正比。生命生命阳光阳光美康美康常用监测物质的特性例一：肌酸激酶（例一：肌酸激酶（例一：肌酸激酶（例一：肌酸激酶（CKCK）磷酸肌酸磷酸肌酸磷酸肌酸磷酸肌
24、酸ADP ADP CK CK 肌酸肌酸肌酸肌酸ATPATP 葡萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖ATP ATP HKHK 葡萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖-6-6-磷酸磷酸磷酸磷酸ADPADP 葡萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖-6-6-磷酸磷酸磷酸磷酸NADP NADP G6PDHG6PDH 6-6-磷酸葡萄糖酸磷酸葡萄糖酸磷酸葡萄糖酸磷酸葡萄糖酸NADPHNADPHH+H+例二：丙氨酸氨基转移酶（例二：丙氨酸氨基转移酶（例二：丙氨酸氨基转移酶（例二：丙氨酸氨基转移酶（ALTALT）丙氨酸丙氨酸丙氨酸丙氨酸-酮戊二酸酮戊二酸酮戊二酸酮戊二酸 ALTALT 丙酮酸谷氨酸丙酮酸谷氨酸丙酮酸谷氨酸丙酮酸谷氨酸 丙酮酸丙酮酸丙酮
25、酸丙酮酸NADHNADHH+H+LDHLDH 乳酸乳酸乳酸乳酸NAD+NAD+H2OH2O生命生命阳光阳光美康美康常用监测物质的特性2 2HH2 2OO2 2指示反应指示反应指示反应指示反应 葡萄糖氧化酶、尿酸酶、甘油氧化酶、胆固醇氧化酶：葡萄糖氧化酶、尿酸酶、甘油氧化酶、胆固醇氧化酶：葡萄糖氧化酶、尿酸酶、甘油氧化酶、胆固醇氧化酶：葡萄糖氧化酶、尿酸酶、甘油氧化酶、胆固醇氧化酶：用于葡萄糖、尿酸、甘油、胆固醇的测定，可使相应底用于葡萄糖、尿酸、甘油、胆固醇的测定，可使相应底用于葡萄糖、尿酸、甘油、胆固醇的测定，可使相应底用于葡萄糖、尿酸、甘油、胆固醇的测定，可使相应底物被物被物被物被O2O2
26、氧化成氧化成氧化成氧化成H2O2H2O2，H2O2H2O2可通过一系列指示反应来检可通过一系列指示反应来检可通过一系列指示反应来检可通过一系列指示反应来检测。测。测。测。生命生命阳光阳光美康美康常用监测物质的特性使单一的色素原显色。无色色素原过氧化物酶使单一的色素原显色。无色色素原过氧化物酶使单一的色素原显色。无色色素原过氧化物酶使单一的色素原显色。无色色素原过氧化物酶（PODPOD）存在下被）存在下被）存在下被）存在下被H2O2H2O2氧化后可生成有色的色素。氧化后可生成有色的色素。氧化后可生成有色的色素。氧化后可生成有色的色素。使成对的色素原显色。必须要两个色素原共同存在，使成对的色素原显
27、色。必须要两个色素原共同存在，使成对的色素原显色。必须要两个色素原共同存在，使成对的色素原显色。必须要两个色素原共同存在，再在指示酶再在指示酶再在指示酶再在指示酶PODPOD的催化下生成色素。的催化下生成色素。的催化下生成色素。的催化下生成色素。发光反应。发光反应。发光反应。发光反应。H2O2H2O2也可用化学发光反应来监测，它是凭也可用化学发光反应来监测，它是凭也可用化学发光反应来监测，它是凭也可用化学发光反应来监测，它是凭借某些荧光前身物在氧化后，处于激发状态的分子可发借某些荧光前身物在氧化后，处于激发状态的分子可发借某些荧光前身物在氧化后，处于激发状态的分子可发借某些荧光前身物在氧化后，
28、处于激发状态的分子可发射光子，光子量和射光子，光子量和射光子，光子量和射光子，光子量和H2O2H2O2的浓度成正比的浓度成正比的浓度成正比的浓度成正比。生命生命阳光阳光美康美康常用监测物质的特性例一：葡萄糖（例一：葡萄糖（例一：葡萄糖（例一：葡萄糖（GLUGLU）葡萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖O2O2H2O H2O 葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶 葡萄糖酸葡萄糖酸葡萄糖酸葡萄糖酸H2O2H2O2 H2O2 H2O2苯酚苯酚苯酚苯酚4-4-氨基安替比林氨基安替比林氨基安替比林氨基安替比林 过氧化物酶过氧化物酶过氧化物酶过氧化物酶 醌亚胺醌亚胺醌亚胺醌亚胺H2OH2O例二：例二：例二：
29、例二：甘油三酯（甘油三酯（甘油三酯（甘油三酯（TGTG）甘油三酯甘油三酯甘油三酯甘油三酯H2O H2O 脂蛋白脂酶脂蛋白脂酶脂蛋白脂酶脂蛋白脂酶 甘油脂肪酸甘油脂肪酸甘油脂肪酸甘油脂肪酸 甘油甘油甘油甘油ATP ATP 甘油激酶甘油激酶甘油激酶甘油激酶 -磷酸甘油磷酸甘油磷酸甘油磷酸甘油ADP ADP -磷酸甘油磷酸甘油磷酸甘油磷酸甘油O2 O2 甘油磷酸氧化酶甘油磷酸氧化酶甘油磷酸氧化酶甘油磷酸氧化酶 磷酸二羟丙酮磷酸二羟丙酮磷酸二羟丙酮磷酸二羟丙酮H2O2H2O2 H2O2+4-H2O2+4-氨基安替比林氨基安替比林氨基安替比林氨基安替比林+ESPAS +ESPAS 过氧化物酶过氧化物酶过
30、氧化物酶过氧化物酶 醌亚胺醌亚胺醌亚胺醌亚胺H2OH2O ESPAS:N-ESPAS:N-乙基乙基-N-(3-N-(3-磺丙基磺丙基)-)-间间-茴香胺茴香胺生命生命阳光阳光美康美康常用监测物质的特性3 3硝基苯衍生物硝基苯衍生物硝基苯衍生物硝基苯衍生物 芳香酯酶、磷酸酯酶和硫酸酯酶：对芳香酯酶、磷酸酯酶和硫酸酯酶：对芳香酯酶、磷酸酯酶和硫酸酯酶：对芳香酯酶、磷酸酯酶和硫酸酯酶：对-硝基酚和有机酸硝基酚和有机酸硝基酚和有机酸硝基酚和有机酸或无机酸形成的酯类或无机酸形成的酯类或无机酸形成的酯类或无机酸形成的酯类 糖苷酶：对硝基酚和糖苷衍生物糖苷酶：对硝基酚和糖苷衍生物糖苷酶：对硝基酚和糖苷衍生物
31、糖苷酶：对硝基酚和糖苷衍生物 -谷氨酰转肽酶、芳香酰胺酶和胰蛋白酶：对谷氨酰转肽酶、芳香酰胺酶和胰蛋白酶：对谷氨酰转肽酶、芳香酰胺酶和胰蛋白酶：对谷氨酰转肽酶、芳香酰胺酶和胰蛋白酶：对-硝基苯硝基苯硝基苯硝基苯胺的氨基酰衍生物胺的氨基酰衍生物胺的氨基酰衍生物胺的氨基酰衍生物生命生命阳光阳光美康美康常用监测物质的特性例一：碱性磷酸酶（例一：碱性磷酸酶（例一：碱性磷酸酶（例一：碱性磷酸酶（ALPALP）磷酸对硝基苯磷酸对硝基苯磷酸对硝基苯磷酸对硝基苯H2O H2O ALPALP 磷酸盐对硝基苯酚磷酸盐对硝基苯酚磷酸盐对硝基苯酚磷酸盐对硝基苯酚例一：例一：例一：例一：-谷氨酰转移酶（谷氨酰转移酶（谷
32、氨酰转移酶（谷氨酰转移酶（-GT-GT）-谷氨酰谷氨酰谷氨酰谷氨酰-3-3-羧基羧基羧基羧基-4-4-硝基苯胺硝基苯胺硝基苯胺硝基苯胺 双甘肽双甘肽双甘肽双甘肽 -GT-GT 谷氨酰基双甘肽谷氨酰基双甘肽谷氨酰基双甘肽谷氨酰基双甘肽5-5-氨基氨基氨基氨基-2-2-硝基安息香酸硝基安息香酸硝基安息香酸硝基安息香酸 生命生命阳光阳光美康美康试剂盒测定基本方法试剂盒测定基本方法四个区域三大方法生命生命阳光阳光美康美康试剂盒测定基本方法试剂盒测定基本方法四大区域四大区域四大区域四大区域 实时反应曲线：实时反应曲线：Real time reaction curve生命生命阳光阳光美康美康试剂盒测定基本
33、方法试剂盒测定基本方法四个区域四个区域 延迟区：延迟区：delay time,lag timedelay time,lag time；等速区：斜率相等的线性段；等速区：斜率相等的线性段；过渡区：两点固定时间法，可在此段开窗；过渡区：两点固定时间法，可在此段开窗；平衡区：终点法在此区内开窗；平衡区：终点法在此区内开窗；生命生命阳光阳光美康美康试剂盒测定基本方法试剂盒测定基本方法三大方法三大方法 速率法（速率法（RateRate）：亦称动力学法，连续监测法；）：亦称动力学法，连续监测法；固定时间法（固定时间法（Fixed timeFixed time）：亦称两点法；）：亦称两点法；终点法（终点法（
34、End PointEnd Point）：一点终点法、两点终点法（日）：一点终点法、两点终点法（日立系统）；立系统）；Olympus Olympus 只有终点法；只有终点法；Beckman Beckman 的终点法的终点法1 1（不减试剂空白）终点法（不减试剂空白）终点法2 2（减去试剂空白）（减去试剂空白）生命生命阳光阳光美康美康试剂盒测定基本方法试剂盒测定基本方法速率法（速率法（RateRate）：）：测光点一般设置在加入启动因子并孵育一段时间后开测光点一般设置在加入启动因子并孵育一段时间后开始，持续始，持续1-3min1-3min。一般应用于酶类项目。一般应用于酶类项目。可以使用因数法来计
35、算待测浓度。可以使用因数法来计算待测浓度。生命生命阳光阳光美康美康固定时间法固定时间法固定时间法固定时间法 测光点设置在加入启动因子后，分前后两点。测光点设置在加入启动因子后，分前后两点。多用于免疫比浊法类项目多用于免疫比浊法类项目终点法（终点法（End PointEnd Point）：）：按照测光点的个数分为：一点终点法、两点终点法。按照测光点的个数分为：一点终点法、两点终点法。两点终点法的测光点一般分别设置在加入启动因子前两点终点法的测光点一般分别设置在加入启动因子前后。后。多数基质类项目都采用这种方法。多数基质类项目都采用这种方法。试剂盒测定基本方法试剂盒测定基本方法生命生命阳光阳光美康
36、美康试剂盒说明书试剂盒说明书一一一一看反应原理，确定测定方法、反应方向、检测波长看反应原理，确定测定方法、反应方向、检测波长看反应原理，确定测定方法、反应方向、检测波长看反应原理，确定测定方法、反应方向、检测波长二看操作程序，确定试剂量、样本量、反应量二看操作程序，确定试剂量、样本量、反应量二看操作程序，确定试剂量、样本量、反应量二看操作程序，确定试剂量、样本量、反应量三看标准、质控的使用方式及货号三看标准、质控的使用方式及货号三看标准、质控的使用方式及货号三看标准、质控的使用方式及货号四看标本的要求，使用血清、血浆还是尿液及注意事项四看标本的要求，使用血清、血浆还是尿液及注意事项四看标本的要
37、求，使用血清、血浆还是尿液及注意事项四看标本的要求，使用血清、血浆还是尿液及注意事项五看试剂五看试剂五看试剂五看试剂/工作试剂的稳定性工作试剂的稳定性工作试剂的稳定性工作试剂的稳定性六看灵敏度、抗干扰性、线性范围等技术指标，观察与六看灵敏度、抗干扰性、线性范围等技术指标，观察与六看灵敏度、抗干扰性、线性范围等技术指标，观察与六看灵敏度、抗干扰性、线性范围等技术指标，观察与其它试剂比较的优缺点其它试剂比较的优缺点其它试剂比较的优缺点其它试剂比较的优缺点生命生命阳光阳光美康美康标准物质和质控品标准物质标准物质又称参考物质，是一类充分均匀，并具有一个又称参考物质，是一类充分均匀，并具有一个(或或多个
38、多个)确定的特性值的材料和物质。确定的特性值的材料和物质。作用：它用以校准仪器设备、评价测量方法，或给其它物作用：它用以校准仪器设备、评价测量方法，或给其它物质赋值。质赋值。标准物质的定值结果一般表示为：标准值标准物质的定值结果一般表示为：标准值总不确定度。总不确定度。生命生命阳光阳光美康美康理解标准品和校准品理解标准品和校准品标准品标准品 标准品的定值由称量和容积计算确定。检定不合格即标准品的定值由称量和容积计算确定。检定不合格即报废，决不可将实测值替代修正。报废，决不可将实测值替代修正。生命生命阳光阳光美康美康校准品校准品 为了克服因纯标准液和患者样品间的基体差异，对检为了克服因纯标准液和
39、患者样品间的基体差异，对检验结果的严重误差，验结果的严重误差，2020年前开始引用具有与患者样品基年前开始引用具有与患者样品基体相似的校准品替代标准品，用于日常工作。可是，尽体相似的校准品替代标准品，用于日常工作。可是，尽管校准品的主要来源是人的血清，为了使校准品内的一管校准品的主要来源是人的血清，为了使校准品内的一些分析物水平达到某个程度，而且形成稳定的产品，所些分析物水平达到某个程度，而且形成稳定的产品，所有的校准品、控制品、室间调查品等都是有的校准品、控制品、室间调查品等都是处理过的血清。处理过的血清。和原来的天然血清间又产生了新的基体差异和原来的天然血清间又产生了新的基体差异。理解标准
40、品和校准品理解标准品和校准品生命生命阳光阳光美康美康校准品的特点校准品的特点校准品的特点校准品的特点 校准值随方法而异校准值随方法而异 校准品中被检分析物的含量无法由称量法和容量法确校准品中被检分析物的含量无法由称量法和容量法确 定，只能倚赖于分析方法。校准品的校准值必须取决于定，只能倚赖于分析方法。校准品的校准值必须取决于分析方法或检测系列。分析方法或检测系列。新鲜患者标本是最佳校准品新鲜患者标本是最佳校准品 须明确的，所有用于检验中的检测方法、仪器、试剂等须明确的，所有用于检验中的检测方法、仪器、试剂等都是用来检测患者新鲜标本的，不是用来检测校准品这都是用来检测患者新鲜标本的，不是用来检测
41、校准品这样的处理过样品。样的处理过样品。理解标准品和校准品理解标准品和校准品生命生命阳光阳光美康美康质控品IFCCIFCC的定是专门用于质量控制目的的标本或溶液，不用的定是专门用于质量控制目的的标本或溶液，不用的定是专门用于质量控制目的的标本或溶液，不用的定是专门用于质量控制目的的标本或溶液，不用于校准，对稳定性、瓶间差要求高。分定值和不定值两于校准，对稳定性、瓶间差要求高。分定值和不定值两于校准，对稳定性、瓶间差要求高。分定值和不定值两于校准，对稳定性、瓶间差要求高。分定值和不定值两种。种。种。种。质控品选择质控品选择质控品选择质控品选择：应该选择有几个浓度的、浓度范围分布较宽的、最好应该选
42、择有几个浓度的、浓度范围分布较宽的、最好应该选择有几个浓度的、浓度范围分布较宽的、最好应该选择有几个浓度的、浓度范围分布较宽的、最好是医学决定水平的、有可报告范围范围是上下限值的质是医学决定水平的、有可报告范围范围是上下限值的质是医学决定水平的、有可报告范围范围是上下限值的质是医学决定水平的、有可报告范围范围是上下限值的质控品。控品。控品。控品。人血清基质，以减少基质效应；无传染性；成分分布人血清基质，以减少基质效应；无传染性；成分分布人血清基质，以减少基质效应；无传染性；成分分布人血清基质，以减少基质效应；无传染性；成分分布均匀，瓶间差小；液态及冻干品复溶后稳定性性对要好。均匀，瓶间差小；液
43、态及冻干品复溶后稳定性性对要好。均匀，瓶间差小；液态及冻干品复溶后稳定性性对要好。均匀，瓶间差小；液态及冻干品复溶后稳定性性对要好。生命生命阳光阳光美康美康理解室内质量控制理解室内质量控制 在全面质量管理体系中，室内质量控制（在全面质量管理体系中，室内质量控制（IQCIQC）是各实验室）是各实验室为了监测和评价本室工作质量，以决定常规检验报告能否发为了监测和评价本室工作质量，以决定常规检验报告能否发出所采取的一系列检查，控制手段。出所采取的一系列检查，控制手段。生命生命阳光阳光美康美康理解室间质量评价理解室间质量评价室间质量评价（室间质量评价（external quality assessme
44、ntexternal quality assessment，EQAEQA）是指多家实验室分析同一标本，由外部独立机构收集、是指多家实验室分析同一标本，由外部独立机构收集、分析和反馈实验室检测结果，评定实验室常规工作的质分析和反馈实验室检测结果，评定实验室常规工作的质量，观察试验的准确性，建立起各实验室分析结果之间量，观察试验的准确性，建立起各实验室分析结果之间的可比性。有两种类型的计划可进行室间质量评价，一的可比性。有两种类型的计划可进行室间质量评价，一种是能力比对检验，一种是区域性质控活动。种是能力比对检验，一种是区域性质控活动。生命生命阳光阳光美康美康此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢