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1、血浆蛋白质以及非蛋白含氮化合物的代谢紊乱（一）、血浆蛋白质的功能和分类营养作用营养作用，修补组织蛋白，修补组织蛋白;维持血浆胶体渗透压；维持血浆胶体渗透压；作为激素、维生素、脂类、代谢作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、药物等的载体；产物、离子、药物等的载体；作为作为PHPH缓冲系统的一部分；缓冲系统的一部分；抑制组织蛋白酶；抑制组织蛋白酶；一些酶在血浆中起催化作用；一些酶在血浆中起催化作用；代谢调控作用；代谢调控作用；参与凝血与纤维蛋白溶解；参与凝血与纤维蛋白溶解；作为免疫球蛋白与补体等免疫分子，作为免疫球蛋白与补体等免疫分子，组成体液免疫防御系统。组成体液免疫防御系统。（二）、血浆蛋白
2、质的分类（二）、血浆蛋白质的分类 最简单的是将血浆蛋白质分为最简单的是将血浆蛋白质分为清蛋白和球蛋白两大类，目前仍较清蛋白和球蛋白两大类，目前仍较实用的是通过乙酸纤维素薄膜电泳实用的是通过乙酸纤维素薄膜电泳或琼脂糖凝胶电泳获得血浆蛋白质或琼脂糖凝胶电泳获得血浆蛋白质概貌的图谱。概貌的图谱。1.1.电泳分类法：利用乙酸纤维素薄电泳分类法：利用乙酸纤维素薄膜电泳将血浆蛋白质分为清蛋白膜电泳将血浆蛋白质分为清蛋白和和 1 1 、2 2 、球蛋白球蛋白5 5个个主要区带。主要区带。2.2.功能分类法功能分类法二、血清蛋白质电泳组分的临床分析二、血清蛋白质电泳组分的临床分析（一）血清蛋白质电泳的正常组分
3、（一）血清蛋白质电泳的正常组分 清蛋白清蛋白 1 1球蛋白球蛋白 2 2球蛋白球蛋白 球蛋白球蛋白 球蛋白球蛋白 用乙酸纤维素薄膜电泳测得血用乙酸纤维素薄膜电泳测得血清各区带蛋白质的参考值为清蛋白清各区带蛋白质的参考值为清蛋白（AlbAlb）：）：5757 6868、1 1球蛋白：球蛋白：1.01.0 5.75.7、2 2球蛋白：球蛋白：4.94.9 11.211.2、球蛋白：球蛋白：7 7 13%13%、球蛋白：球蛋白：9.89.8 18.218.2。若以。若以g/Lg/L表示，则表示，则AlbAlb和和 1 1 、2 2 、球蛋白分别为球蛋白分别为3535 52g/L52g/L、1.0 1
4、.0 4.0g/L 4.0g/L、4.0 4.0 8.0g/L8.0g/L、5.05.0 10.0g/L10.0g/L、6.06.0 13.0g/L13.0g/L。（二）异常电泳图谱的临床意义（二）异常电泳图谱的临床意义 异常血清蛋白电泳图谱分型异常血清蛋白电泳图谱分型 在疾病情况下血清蛋白质可以在疾病情况下血清蛋白质可以出现多种变化。根据它们在电泳图出现多种变化。根据它们在电泳图谱上的异常特征，不少学者将其进谱上的异常特征，不少学者将其进行分型，使其有助于临床疾病的判行分型，使其有助于临床疾病的判断。断。典型异常血清蛋白电泳图谱典型异常血清蛋白电泳图谱 在以上异常电泳图谱中，肾病在以上异常电
5、泳图谱中，肾病综合征、肝硬化和多发性骨髓瘤综合征、肝硬化和多发性骨髓瘤(M(M蛋白血症型蛋白血症型)最具有特征性，在临床最具有特征性，在临床上诊断意义最大。上诊断意义最大。三、血浆蛋白质及其异常三、血浆蛋白质及其异常1.1.前清蛋白（前清蛋白（PAPA）生理功能：作为组织修补材料和生理功能：作为组织修补材料和运载蛋白，可结合大约运载蛋白，可结合大约10%10%的的T4T4和和T3T3，对，对T3T3亲和力更大，还具有亲和力更大，还具有运载维生素运载维生素A A的作用。的作用。临床意义临床意义 作为营养不良的指标。作为营养不良的指标。作为肝功能不全的指标。作为肝功能不全的指标。在急性炎症、恶性肿
6、瘤、创伤等在急性炎症、恶性肿瘤、创伤等任何急需合成蛋白质的情况下，血任何急需合成蛋白质的情况下，血清清PAPA均迅速下降，均迅速下降，PAPA是负性急性时是负性急性时相反应蛋白。相反应蛋白。2.2.清蛋白（清蛋白（ALBALB）生理功能生理功能 （1 1）血浆中主要的载体蛋白）血浆中主要的载体蛋白 （2 2）维持血浆胶体渗透压）维持血浆胶体渗透压 （3 3）具有缓冲酸碱的能力）具有缓冲酸碱的能力 （4 4）重要的营养蛋白）重要的营养蛋白 临床意义临床意义（1 1）低清蛋白血症常见于以下疾病：）低清蛋白血症常见于以下疾病：1 1）清蛋白合成不足）清蛋白合成不足 2 2）清蛋白丢失清蛋白丢失清蛋白
7、丢失清蛋白丢失 3 3）清蛋白分解代谢增加）清蛋白分解代谢增加 4 4）清蛋白的分布异常）清蛋白的分布异常 5 5）无清蛋白血症）无清蛋白血症（2 2）血浆清蛋白增高）血浆清蛋白增高（3 3）由清蛋白含量估计其配体的存在）由清蛋白含量估计其配体的存在形式和作用形式和作用（4 4）作为个体营养状态的评价指标：）作为个体营养状态的评价指标：血浆清蛋白作为营养指标的评价标血浆清蛋白作为营养指标的评价标准：准：35g/L35g/L正常，正常，28-34g/L28-34g/L轻度缺轻度缺乏，乏，21-27g/L21-27g/L中度缺乏，中度缺乏，21g/L21g/L严严重缺乏。当清蛋白浓度低于重缺乏。当
8、清蛋白浓度低于28g/L28g/L时，时，会出现水肿。会出现水肿。3.3.1 1-抗胰蛋白酶（抗胰蛋白酶（AATAAT）生理功能：是蛋白酶的抑制物，生理功能：是蛋白酶的抑制物，含量虽比另一蛋白酶抑制物含量虽比另一蛋白酶抑制物2 2-巨球蛋白低，但巨球蛋白低，但AATAAT占血清占血清中抑制蛋白酶活力的中抑制蛋白酶活力的90%90%左右。左右。临床意义临床意义 AAT AAT缺陷：缺陷：ZZZZ表型、表型、SSSS型甚至型甚至 MS MS表型常伴有早年表型常伴有早年(20-30(20-30岁岁)出现出现的肺气肿。的肺气肿。急性时相反应时急性时相反应时AATAAT增加。增加。4.4.1 1-酸性糖
9、蛋白（酸性糖蛋白（AAGAAG）生理功能：生理功能：AAGAAG是主要的急性时是主要的急性时相反应蛋白，在急性炎症时增高，相反应蛋白，在急性炎症时增高，与免疫防御功能有关。与免疫防御功能有关。临床意义临床意义 AAG AAG目前主要作为急性时相反应目前主要作为急性时相反应的指标，在风湿病、恶性肿瘤及心的指标，在风湿病、恶性肿瘤及心肌梗死等炎症或组织坏死时一般增肌梗死等炎症或组织坏死时一般增加加3-43-4倍，倍，3-53-5天时出现浓度高峰；天时出现浓度高峰；AAGAAG增高是活动性溃疡性结肠炎最增高是活动性溃疡性结肠炎最可靠的指标之一。可靠的指标之一。5.5.5.5.结合珠蛋白（结合珠蛋白（
10、结合珠蛋白（结合珠蛋白（HpHpHpHp）在醋纤膜电泳及琼脂糖凝胶电泳在醋纤膜电泳及琼脂糖凝胶电泳在醋纤膜电泳及琼脂糖凝胶电泳在醋纤膜电泳及琼脂糖凝胶电泳 中位于中位于中位于中位于a a a a2 2 2 2区带。区带。区带。区带。5.5.结合珠蛋白（结合珠蛋白（HpHp）生理功能：生理功能：HpHp的主要功能是能与红的主要功能是能与红细胞中释放出的游离血红蛋白结合，细胞中释放出的游离血红蛋白结合，每分子每分子HpHp可结合两分子可结合两分子HbHb。HpHp可以可以防止防止HbHb从肾丢失而为机体有效地保从肾丢失而为机体有效地保留铁，并能避免留铁，并能避免HbHb对肾脏的损伤。对肾脏的损伤。
11、临床意义：临床意义：溶血性疾病如溶血性贫血、输血溶血性疾病如溶血性贫血、输血反应、疟疾时反应、疟疾时HpHp含量明显下降。含量明显下降。当烧伤和肾病综合征引起大量清当烧伤和肾病综合征引起大量清蛋白丢失的情况下，血蛋白丢失的情况下，血HpHp常明显增加。常明显增加。在严重肝病患者在严重肝病患者HpHp合成降低。合成降低。6.6.6.6.2 2 2 2-巨球蛋白（巨球蛋白（巨球蛋白（巨球蛋白（AMGAMGAMGAMG）a a a a2 2 2 2巨球蛋白是血浆中分子量最巨球蛋白是血浆中分子量最巨球蛋白是血浆中分子量最巨球蛋白是血浆中分子量最 大的蛋白质大的蛋白质大的蛋白质大的蛋白质。a a a a
12、2-2-2-2-MGMGMGMG是由肝细胞与是由肝细胞与是由肝细胞与是由肝细胞与 单核吞噬细胞系统合成。单核吞噬细胞系统合成。单核吞噬细胞系统合成。单核吞噬细胞系统合成。6.6.2 2-巨球蛋白（巨球蛋白（AMGAMG）生理功能：生理功能：AMGAMG的主要特性是能与的主要特性是能与多种离子和分子结合，特别是能与多种离子和分子结合，特别是能与蛋白水解酶如纤维蛋白溶酶、胃蛋蛋白水解酶如纤维蛋白溶酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶及组织白酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶及组织蛋白酶蛋白酶D D结合而影响这些酶的活性。结合而影响这些酶的活性。临床意义：低清蛋白血症，尤其临床意义：低清蛋白血症，尤其是肾病综合征时
13、，是肾病综合征时，AMGAMG含量可显著含量可显著增高，可能系一种代偿机制以保增高，可能系一种代偿机制以保持血浆胶体渗透压。持血浆胶体渗透压。7.7.铜蓝蛋白（铜蓝蛋白（CpCp）生理功能：生理功能：CpCp的主要生理功能与氧的主要生理功能与氧化还原反应有关，根据其他物质的化还原反应有关，根据其他物质的性质，它既能起氧化作用又能起抗性质，它既能起氧化作用又能起抗氧化作用。氧化作用。CpCp的生理功能还有抑制的生理功能还有抑制膜脂质氧化的作用。膜脂质氧化的作用。临床意义：临床意义：协助协助WilsonWilson病的诊断。病的诊断。Cp Cp也属于一种急性时相反应蛋白，也属于一种急性时相反应蛋白
14、，在感染、创伤和肿瘤时血浆浓度增在感染、创伤和肿瘤时血浆浓度增加。加。8.8.转铁蛋白（转铁蛋白（TRFTRF）转铁蛋白转铁蛋白(transferrin,TRF)(transferrin,TRF)分子量约分子量约79.5kD79.5kD，电泳位置在，电泳位置在区带，区带，TRFTRF主要由肝细胞合成，半主要由肝细胞合成，半寿期为寿期为7 7天。天。临床意义：临床意义：（）（）用于贫血的鉴别诊断。用于贫血的鉴别诊断。（）（）TRFTRF在急性时相反应中含量往在急性时相反应中含量往往降低。往降低。（）作为营养状态的一项指标，（）作为营养状态的一项指标，在营养不良及慢性肝脏疾病时下降。在营养不良及慢
15、性肝脏疾病时下降。9.9.C-C-反应蛋白（反应蛋白（CRPCRP）在急性炎症病人血清中出现在急性炎症病人血清中出现的可以结合肺炎球菌细胞壁的可以结合肺炎球菌细胞壁-多糖的蛋白质，命名为多糖的蛋白质，命名为C-C-反应反应蛋白（蛋白（CRPCRP）。）。生理功能：生理功能：CRPCRP不仅结合多种细胞、不仅结合多种细胞、真菌及原虫等体内的多糖物质，在真菌及原虫等体内的多糖物质，在钙离子存在下，还可以结合卵磷脂钙离子存在下，还可以结合卵磷脂和核酸。和核酸。CRPCRP可以引发对侵入细胞可以引发对侵入细胞的免疫调理作用和吞噬作用，结合的免疫调理作用和吞噬作用，结合后的复合体具有对补体系统的激活后的
16、复合体具有对补体系统的激活作用，表现炎症反应。作用，表现炎症反应。临床意义：临床意义：CRPCRP是第一个被认识的急是第一个被认识的急性时相反应蛋白，作为急性时相反应性时相反应蛋白，作为急性时相反应一个极灵敏的指标，血浆中一个极灵敏的指标，血浆中CRPCRP浓度浓度在急性心肌梗死、创伤、感染、炎症、在急性心肌梗死、创伤、感染、炎症、外科手术、肿癌浸润时迅速显著增高，外科手术、肿癌浸润时迅速显著增高，可达正常水平的可达正常水平的20002000倍。倍。CRPCRP是非特是非特异性指标，主要用于结合临床病史监异性指标，主要用于结合临床病史监测疾病。测疾病。四、急性时相反应蛋白四、急性时相反应蛋白
17、在急性炎症性疾病如手术、创伤、在急性炎症性疾病如手术、创伤、心肌梗死、感染、肿瘤等，心肌梗死、感染、肿瘤等，AATAAT、AAGAAG、HpHp、p p、CRPCRP，以及，以及1 1-抗糜蛋白酶、血红素抗糜蛋白酶、血红素结合蛋白、结合蛋白、C4C4、C3C3、纤维蛋白原等，这些、纤维蛋白原等，这些血浆蛋白浓度显著升高或升高；而血浆血浆蛋白浓度显著升高或升高；而血浆PAPA、ALBALB、TRFTRF则出现相应的低下。这些血则出现相应的低下。这些血浆蛋白质统称为急性时相反应蛋白浆蛋白质统称为急性时相反应蛋白（APRPAPRP），这种现象称为急性时相反应。），这种现象称为急性时相反应。PAPA、
18、ALBALB、TRFTRF一般称为负性急性时相反应一般称为负性急性时相反应蛋白。蛋白。急性时相反应蛋白升高的速度不急性时相反应蛋白升高的速度不同，同，CRPCRP和和1 1-抗糜蛋白酶首先升高，抗糜蛋白酶首先升高，在在1 1小时内小时内AAGAAG也升高，然后也升高，然后AATAAT、HpHp、C4C4和纤维蛋白原升高，最后是和纤维蛋白原升高，最后是C3C3和和CpCp升高，这些升高，这些APRAPR通常在天通常在天内达到最高值。检测内达到最高值。检测APRAPR有助于对炎有助于对炎症进程的监测和对治疗反应的判断，症进程的监测和对治疗反应的判断，尤其是检测那些升高最早和最多的蛋尤其是检测那些升
19、高最早和最多的蛋白质。白质。第二节第二节 氨基酸代谢紊乱氨基酸代谢紊乱一、苯丙酮酸尿症（一、苯丙酮酸尿症（PKUPKU）是主要由苯丙氨酸羟化酶缺乏是主要由苯丙氨酸羟化酶缺乏引起的常染色体隐性遗传病。我国引起的常染色体隐性遗传病。我国新生儿新生儿PKUPKU发病率为发病率为1/100001/100001/16000,1/16000,与国外报道的数字接近。与国外报道的数字接近。临床表现及治疗临床表现及治疗 PKU PKU患者有智力缺陷，其严重程度患者有智力缺陷，其严重程度与血苯丙氨酸升高的水平和持续时间与血苯丙氨酸升高的水平和持续时间有关，可能由于苯丙氨酸与其他氨基有关，可能由于苯丙氨酸与其他氨基
20、酸竞争载体，干扰了其他氨基酸通过酸竞争载体，干扰了其他氨基酸通过血血-脑屏障，因氨基酸不平衡而影响脑屏障，因氨基酸不平衡而影响了脑正常功能和发育。了脑正常功能和发育。PKUPKU患者还表患者还表现有毛发和皮肤色素较正常人略浅。现有毛发和皮肤色素较正常人略浅。型酪氨酸血症：是由于延胡索型酪氨酸血症：是由于延胡索酰乙酰乙酸酶活性降低所致，另酰乙酰乙酸酶活性降低所致，另外，对外，对-羟苯丙酮酸氨化酶活性羟苯丙酮酸氨化酶活性也有下降。也有下降。二、酪氨酸血症二、酪氨酸血症 型酪氨酸血症：由于肝脏胞浆酪型酪氨酸血症：由于肝脏胞浆酪氨酸转氨酶缺乏所致，血液酪氨酸氨酸转氨酶缺乏所致，血液酪氨酸水平增高，并从
21、尿中排出。该症患水平增高，并从尿中排出。该症患者有流泪、惧光、角膜混浊、皮肤者有流泪、惧光、角膜混浊、皮肤过度老化、智力发育不全等症状。过度老化、智力发育不全等症状。三、含硫氨基酸代谢紊乱三、含硫氨基酸代谢紊乱 含硫氨基酸代谢紊乱最多见的含硫氨基酸代谢紊乱最多见的是同型胱氨酸尿症，该症者先是同是同型胱氨酸尿症，该症者先是同型半胱氨酸增加，随之引起同型胱型半胱氨酸增加，随之引起同型胱氨酸增加，因此同型半胱氨酸代谢氨酸增加，因此同型半胱氨酸代谢紊乱与同型胱氨酸尿症密切相关。紊乱与同型胱氨酸尿症密切相关。同型半胱氨酸代谢紊乱同型半胱氨酸代谢紊乱 目前国内外逐渐把血浆目前国内外逐渐把血浆HCYHCY水
22、平水平检测作为心脑血管病临床常规检查检测作为心脑血管病临床常规检查指标。特别是对于那些血脂正常，指标。特别是对于那些血脂正常，胆固醇又不高的人群；有严重胆固醇又不高的人群；有严重ASAS性性疾病和家族史人群；有早期（疾病和家族史人群；有早期（5050岁）岁）CHDCHD、脑血管或外周血管病症状的人、脑血管或外周血管病症状的人群，应进行血浆群，应进行血浆HCYHCY检测。检测。四、继发性氨基酸代谢紊乱四、继发性氨基酸代谢紊乱 继发性高氨基酸血症或氨基酸继发性高氨基酸血症或氨基酸尿症主要发生在肝脏和肾脏疾患以尿症主要发生在肝脏和肾脏疾患以及烧伤等，其氨基酸异常是该类患及烧伤等，其氨基酸异常是该类患
23、者机体物质代谢普遍异常的一部分，者机体物质代谢普遍异常的一部分，体液氨基酸测定对诊治有参考意义。体液氨基酸测定对诊治有参考意义。第三节第三节 核苷酸代谢紊乱核苷酸代谢紊乱 嘌呤核苷酸合成和分解中最多见嘌呤核苷酸合成和分解中最多见的代谢紊乱是高尿酸血症，并由此导的代谢紊乱是高尿酸血症，并由此导致痛风。嘧啶核苷酸从头合成途径中致痛风。嘧啶核苷酸从头合成途径中的酶缺陷可引起乳清酸尿症。的酶缺陷可引起乳清酸尿症。一、嘌呤核苷酸代谢紊乱 高尿酸血症高尿酸血症 高尿酸血症由嘌呤代谢紊乱或高尿酸血症由嘌呤代谢紊乱或尿酸排泄障碍引起。尿酸排泄障碍引起。1.1.尿酸排泄障碍尿酸排泄障碍 2.2.尿酸生成过多尿酸
24、生成过多 痛风发生机制痛风发生机制 痛风是一组疾病，由于遗传性和痛风是一组疾病，由于遗传性和（或）获得性的尿酸排泄减少和（或）（或）获得性的尿酸排泄减少和（或）嘌呤代谢障碍，导致高尿酸症及尿酸嘌呤代谢障碍，导致高尿酸症及尿酸盐结晶形成和沉积，从而引起特征性盐结晶形成和沉积，从而引起特征性急性关节炎、痛风石、间质性肾炎，急性关节炎、痛风石、间质性肾炎，严重者呈关节畸形及功能障严重者呈关节畸形及功能障碍碍碍碍；常伴；常伴尿酸性尿路结石。高尿酸血症只有尿酸性尿路结石。高尿酸血症只有10%10%20%20%发生痛风。发生痛风。二、嘧啶核苷酸代谢紊乱二、嘧啶核苷酸代谢紊乱第四节 检测方法评价一、血清总蛋
25、白测定一、血清总蛋白测定 凯氏定氮法凯氏定氮法 凯氏定氮法于凯氏定氮法于18831883年建立，是年建立，是经典的蛋白质测定方法。根据蛋白质经典的蛋白质测定方法。根据蛋白质平均含氮量平均含氮量16%16%计算蛋白浓度。该法计算蛋白浓度。该法结果准确性好，精密度高，灵敏度高，结果准确性好，精密度高，灵敏度高，是公认的参考方法，目前用于标准蛋是公认的参考方法，目前用于标准蛋白质的定值和校正其他方法等。白质的定值和校正其他方法等。双缩脲法双缩脲法 该法对各种蛋白质呈色基本相同，该法对各种蛋白质呈色基本相同，特异性和准确度好，精密度好；显色特异性和准确度好，精密度好；显色稳定性好，试剂单一，方法简便；
26、灵稳定性好，试剂单一，方法简便；灵敏度虽不高，但对血清总蛋白定量较敏度虽不高，但对血清总蛋白定量较为适用。对蛋白质含量很低的其他体为适用。对蛋白质含量很低的其他体液如脑脊液、胸腹水和尿液等，不是液如脑脊液、胸腹水和尿液等，不是合适的定量方法。合适的定量方法。酚试剂法酚试剂法 本法测定纯单一蛋白质较合适，本法测定纯单一蛋白质较合适，如测定组织中某一蛋白抽提物；又如测定组织中某一蛋白抽提物；又如血清大部分蛋白经高氯酸沉淀去如血清大部分蛋白经高氯酸沉淀去除后，上清夜再被磷钨酸沉淀分离除后，上清夜再被磷钨酸沉淀分离得到的粘蛋白，也常用此法测定。得到的粘蛋白，也常用此法测定。本法易受还原性化合物的干扰。
27、本法易受还原性化合物的干扰。紫外分光光度法紫外分光光度法 芳香族氨基酸在芳香族氨基酸在280nm280nm处有一吸处有一吸收峰，可用于蛋白质测定。方法的准收峰，可用于蛋白质测定。方法的准确性受蛋白质分子中该种氨基酸的含确性受蛋白质分子中该种氨基酸的含量影响甚大。尿酸和胆红素在量影响甚大。尿酸和胆红素在280nm280nm附近有干扰，所以不适合血清等组成附近有干扰，所以不适合血清等组成复杂的蛋白质溶液测定，常用于较纯复杂的蛋白质溶液测定，常用于较纯的酶、免疫球蛋白等蛋白质测定。的酶、免疫球蛋白等蛋白质测定。染料结合法染料结合法 在酸性环境下，蛋白质分子可在酸性环境下，蛋白质分子可解离出带有正电荷
28、的解离出带有正电荷的-NH-NH3 3+，它可，它可与染料的阴离子产生颜色反应。常与染料的阴离子产生颜色反应。常用的染料有氨基黑、丽春红、考马用的染料有氨基黑、丽春红、考马斯亮蓝、邻苯三酚红钼等。前两种斯亮蓝、邻苯三酚红钼等。前两种常作为血清蛋白乙酸纤维素薄膜电常作为血清蛋白乙酸纤维素薄膜电泳或琼脂糖凝胶电泳的染料。泳或琼脂糖凝胶电泳的染料。考马斯亮蓝常用于需更高呈色考马斯亮蓝常用于需更高呈色灵敏度的蛋白电泳中，也可以用于灵敏度的蛋白电泳中，也可以用于测定尿液、脑脊液等的蛋白质，优测定尿液、脑脊液等的蛋白质，优点是简便、快速、灵敏，缺点是不点是简便、快速、灵敏，缺点是不同蛋白质与染料的结合力不
29、一致，同蛋白质与染料的结合力不一致，且试剂对比色杯有吸附作用。邻苯且试剂对比色杯有吸附作用。邻苯三酚红钼可用于测定尿液、脑脊液三酚红钼可用于测定尿液、脑脊液等蛋白质。等蛋白质。比浊法比浊法 该法优点是操作简便、灵敏度该法优点是操作简便、灵敏度高。缺点是影响浊度大小的因素较多，高。缺点是影响浊度大小的因素较多，包括加入试剂的手法、混匀技术、反包括加入试剂的手法、混匀技术、反应温度等，且各种蛋白质形成的浊度应温度等，且各种蛋白质形成的浊度亦有较大的差别。一般用于测定尿液、亦有较大的差别。一般用于测定尿液、脑脊液等蛋白质浓度较低的样品，其脑脊液等蛋白质浓度较低的样品，其标准品推荐使用含正常清标准品推
30、荐使用含正常清/球蛋白比球蛋白比值的血清蛋白标准品作适当稀释。值的血清蛋白标准品作适当稀释。二、血清清蛋白测定二、血清清蛋白测定 目前测定清蛋白的方法有电泳法、目前测定清蛋白的方法有电泳法、免疫法和染料结合法，电泳法已如前免疫法和染料结合法，电泳法已如前述；免疫法中有免疫扩散法、免疫比述；免疫法中有免疫扩散法、免疫比浊法和放射免疫法等，这类方法特异浊法和放射免疫法等，这类方法特异性好、灵敏度高，且清蛋白易纯化因性好、灵敏度高，且清蛋白易纯化因而其抗血清容易制备，但成本较高，而其抗血清容易制备，但成本较高，适合于尿液和脑脊液等微量清蛋白的适合于尿液和脑脊液等微量清蛋白的测定。测定。染料结合法最多
31、用，清蛋白具染料结合法最多用，清蛋白具有与阴离子染料溴甲酚绿有与阴离子染料溴甲酚绿(BCG)(BCG)和和溴甲酚紫溴甲酚紫(BCP)(BCP)结合的特性，而球结合的特性，而球蛋白基本不结合这些染料，故可直蛋白基本不结合这些染料，故可直接测定血清清蛋白。接测定血清清蛋白。BCGBCG法和法和BCPBCP法灵敏度高、操作简便、重复性好，法灵敏度高、操作简便、重复性好，能自动化。其中能自动化。其中BCGBCG法最常用。法最常用。三、血清蛋白电泳三、血清蛋白电泳 乙酸纤维素薄膜和琼脂糖凝胶乙酸纤维素薄膜和琼脂糖凝胶 是目前最广泛采用的两类介质。琼是目前最广泛采用的两类介质。琼 脂糖凝胶分辨能力强，区带
32、整齐，脂糖凝胶分辨能力强，区带整齐，吸附小，但电渗作用稍强，易使吸附小，但电渗作用稍强，易使-球蛋白区带轻微向阴极移动，也有球蛋白区带轻微向阴极移动，也有 较广泛的应用，二者所得到的电泳较广泛的应用，二者所得到的电泳 结果相似。结果相似。四、其他血清蛋白质的测定四、其他血清蛋白质的测定 血清中的蛋白质因为都是由氨血清中的蛋白质因为都是由氨基酸组成，性质相似，故除清蛋白基酸组成，性质相似，故除清蛋白等少数蛋白质有某种特性可利用，等少数蛋白质有某种特性可利用，因而能使用染料结合法等方法测定因而能使用染料结合法等方法测定外，其他都需制备特异的抗血清，外，其他都需制备特异的抗血清，采用免疫化学方法测定。采用免疫化学方法测定。五、氨基酸测定五、氨基酸测定 自动分析法自动分析法 氨基酸的纸层析和薄层层析氨基酸的纸层析和薄层层析 氨基酸的化学法测定氨基酸的化学法测定 氨基酸的酶法分析氨基酸的酶法分析小小 结结 此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢