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1、DNADNA复制的基本特征复制的基本特征 小组成员：李斯斯 黄艳梅 马玉梅 苏倩uDNA 是绝大多数生物体遗传信息的载体，1953 年Watson&Crick 提出DNA 双螺旋结构模型。u1958 年，Crick 提出了“中心法则”(Central dogma)揭示了遗传信息的传递规律。u 生物的遗传信息以密码的形式储存在DNA 分子上，表现为特定的核苷酸排列顺序。在细胞分裂的过程中，通过DNA 复制把亲代细胞所含的遗传信息忠实地传递给两个子代细胞。复制方式复制方式复制模板、原料和酶复制模板、原料和酶复制所需的引物复制所需的引物复制方向复制方向复制起始区特点复制起始区特点半不连续性半不连续性
2、 高度忠实性高度忠实性 DNA复制的基本特征复制的基本特征 DNA的半保留复制oDNA复制可能的三种方式DNA的半保留复制的半保留复制生物学最美丽的实验-Meselon&Stahl 1963年，J.Cairns用放射自显影第一次观察到完整的正在复制的大肠杆菌染色体的DNA。后来，Herbret Taylor在植物根尖细胞使用放射自显影证明真核细胞的DNA复制方式也是半保留的。DNA 在复制时，两条链解开分别作为模板，在DNA聚合酶的催化下按碱基互补的原则合成两条与模板链互补的新链，以组成新的DNA 分子。这样新形成的两个DNA 分子与亲代DNA 分子的碱基顺序完全一样。由于子代DNA 分子中一
3、条链来自亲代，另一条链是新合成的，这种复制方式称为半保留复制。DNA聚合酶DNADNA聚合酶聚合酶 1956 年，Kornberg 领导的小组从E.coli 首次分离到了一种DNA 聚合酶，具有催化合成DNA 分子的能力。由于后来发现了其它DNA 聚合酶，故将Kornberg 发现的这个酶叫做DNA 聚合酶。DNA聚合酶异二聚体DNA 聚合酶催化反应的机制oDNA 聚合酶催化链的延长反应是靠引物3-OH 的亲核性质与5-dNTP 的-磷酸基结合；oDNA 聚合酶催化链的延长是按53方向进行；DNA复制需要引物 DNA复制以游离3-OH 端的RNA 短链作为引物，少数为蛋白质。在pol的催化下，
4、把dNTP 单体加到引物3OH 端上，使新的DNA 链延伸，直到另一个RNA 引物的5端为止。复制到一定阶段后，RNA 引物被切除，由pol的53外切酶活性执行，缺口的填补由pol的53聚合酶活性完成。DNA复制方向53由于生物体中主要为游离的由于生物体中主要为游离的5-5-磷磷酸核糖酸核糖(即用于合成核酸的单核即用于合成核酸的单核苷酸为苷酸为55核苷酸核苷酸)，因此，核苷，因此，核苷酸链的合成方向是由酸链的合成方向是由5 35 3。55端端3端端CGA复制起始于特定区域，终止位置不固定o复制起始区 体内DNA复制具有相对固定的起点，复制起点的核苷酸序列o复制叉 DNA复制从起始区起动，该区域的DNA首先发生解链，形成叉状结构。一般为双向复制o几乎所有DNA为双向复制，形成两个复制叉。o少数DNA进行单向复制，形成一个复制叉。o通过放射自显影的实验可以判断复制的单、双向性。DNA复制的半不连续性冈崎片段冈崎片段复复制制叉叉移移动动方方向向DNA复制的高度忠实性oDNA 复制过程是一个高度精确的过程，据估计，大肠杆菌DNA 复制5 x109 碱基对仅出现一个误差，保证复制忠实性的原因主要有以下三点:oDNA 聚合酶的高度专一性（严格遵循碱基配对原则，但错配率为7 x 10-6）oDNA 聚合酶的校对功能（错配碱基被35 外切酶切除）o起始时以RNA 作为引物谢谢观看！