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1、微生物工程微生物工程03培养基培养基发酵的一般流程种子扩大培养种子扩大培养培养基配制培养基配制空气除菌空气除菌培养基灭菌培养基灭菌发酵生产发酵生产下游处理下游处理发酵设备发酵设备二、淀粉水解糖的制备酸解法l反应原理:淀粉葡萄糖l优点:设备单一、时间短(几分钟)l缺点:对设备要求高(高温、高压、高腐蚀)副反应多,淀粉转化率低对原料要求高,淀粉颗粒大小均匀淀粉乳浓度不能太高酸(催化剂)高温高压StarchGlucose二、淀粉水解糖的制备酶解法(双酶水解法)反应原理:淀粉糊精、低聚糖 葡萄糖优点:对设备要求低,副反应少,产品纯度高,营养丰富对原料要求较低,淀粉乳浓度高缺点:所需设备较多反应时间较长
2、(2-3天)淀粉酶糖化酶液化糖化二、淀粉水解糖的制备酶酸结合法之一,酸酶法反应原理:淀粉糊精、低聚糖 葡萄糖优点:产品质量高,反应时间较短(糊精、低聚糖 葡萄糖优点:反应时间短(酸酶法酶酸法酸解法三、前体物质及促进剂三、前体物质及促进剂前体物质前体物质(Precursor):某些化合物加入培养某些化合物加入培养基后,能够直接在生物合成过程中结合到产物分基后,能够直接在生物合成过程中结合到产物分子中去,而自身的结构并未发生太大变化,却能子中去,而自身的结构并未发生太大变化,却能提高产物的产量。这类小分子物质被称为前体。提高产物的产量。这类小分子物质被称为前体。抗生素抗生素(Antibiotin)
3、发酵中常用的前体物质:发酵中常用的前体物质:抗生素前 体 物 质青霉素苯乙酸(或在发酵中生成苯乙酸的物质)链霉素肌醇、精氨酸、甲硫氨酸红霉素丙酸、丙醇、丙酸盐、乙酸盐三、前体物质及促进剂三、前体物质及促进剂影响前体物质效力的因素影响前体物质效力的因素l菌种的特性与菌龄菌种的特性与菌龄(Cell age)l前体物质的投入量前体物质的投入量(Inoculation concentration)l前体物质的毒性前体物质的毒性(Toxicity)苯乙酸用量()青霉素产量(单位/ml)青霉素比例()0.157.30.273.00.390.60.495.6三、前体物质及促进剂三、前体物质及促进剂促进剂促进
4、剂Accelerator(刺激剂(刺激剂Stimulant)的作用原理:)的作用原理:改变细胞的渗透改变细胞的渗透性,或性,或“启动启动”微生物体内的生产部位,否则这微生物体内的生产部位,否则这些部位是被阻遏的,因此促进剂的添加可以大些部位是被阻遏的,因此促进剂的添加可以大大提高产量。大提高产量。常用促进剂:常用促进剂:各种表面活性剂各种表面活性剂Surfactant(洗涤剂、吐温(洗涤剂、吐温80、EDTA、植酸等)、大豆、植酸等)、大豆油提炼物、甲醇等油提炼物、甲醇等三、前体物质及促进剂抑制剂抑制剂(Inhibitor)的作用原理:的作用原理:通过抑制通过抑制某些合成其它产物的途径而使所需产物的合成某些合成其它产物的途径而使所需产物的合成得到加强得到加强抗生素生产中的抑制剂:抗生素被抑制的产物抑制剂链霉素甘露糖链霉素甘露聚糖四环素金霉素溴化物、硫脲等头孢霉素C头孢霉素NL-蛋氨酸利福霉素B其它利福霉素巴比妥药物本章知识结构培养基的原料培养基的营养成分与功能培养基的配置原则培养基的类型与用途淀粉水解糖的制备酸解法、酶解法、酸酶法、酶酸法及其比较前体物质与促进剂前体物质,促进剂,抑制剂作用原理影响前体物质效力的因素常用前体物质、促进剂及抑制剂预习内容培养基灭菌与空气除菌培养基灭菌原理分批灭菌与连续灭菌空气过滤除菌流程与设备过滤介质与过滤除菌原理