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1、医学微生物学细菌生理消毒 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望一、一、细菌的理化性状细菌的理化性状q细菌的化学组成：水、无机盐、蛋白质、糖类、脂细菌的化学组成：水、无机盐、蛋白质、糖类、脂质和核酸等。质和核酸等。q细菌的物理性状细菌的物理性状：光学性质光学性质细菌为半透明体。细菌为半透明体。带电现象带电现象均带负电。其带电现象与染色反应、均带负电。其带电现象与染色反应、凝集反应、抑菌和杀菌作用等密切相关。凝集反应、抑菌和杀菌作用等密切相关。半透性半透性细
2、菌的细胞壁和细胞膜都有半透性。细菌的细胞壁和细胞膜都有半透性。渗透压渗透压菌体内为高渗透压。菌体内为高渗透压。二、二、细菌的生长繁殖细菌的生长繁殖 根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型分为两大营养类型自养菌自养菌和和异养菌异养菌。自养菌自养菌(autotroph)：以简单的无机物为原料，合成菌以简单的无机物为原料，合成菌体成分。体成分。异养菌异养菌(heterotroph)：以多种有机物为原料，合成菌以多种有机物为原料，合成菌体成分并获得能量。所有的病原菌都是异养菌。体成分并获得能量。所有的病原菌都是异养菌。营养物质营养物质 水、碳源
3、、氮源、无机盐、生长因子水、碳源、氮源、无机盐、生长因子酸碱度酸碱度(pH)温度温度气体环境气体环境 专性需氧菌：专性需氧菌：兼性厌氧菌：大多数病原菌属于此。兼性厌氧菌：大多数病原菌属于此。专性厌氧菌：专性厌氧菌：细菌生长繁殖的条件细菌生长繁殖的条件为为什什么么厌厌氧氧菌菌在在有有氧氧情情况下不能生长？况下不能生长？原因：原因：1.缺乏氧化还原电势高的酶；缺乏氧化还原电势高的酶；2.缺乏分解有毒基团的酶。缺乏分解有毒基团的酶。细菌的生长细菌的生长细菌个体的生长细菌个体的生长 细菌以简单的二分裂方式进行繁殖。细菌以简单的二分裂方式进行繁殖。繁殖一代所需时间约繁殖一代所需时间约20-30min。但
4、少数细菌时间较长，如结核分枝杆菌一代为但少数细菌时间较长，如结核分枝杆菌一代为18小时。小时。细菌群体的生长细菌群体的生长 迟缓期迟缓期(lag phase)对数期对数期(logarithmic phase)稳定期稳定期(stationary phase)衰亡期衰亡期(decline phase)细菌的生长曲线细菌的生长曲线分解代谢产物和细菌的生化反应分解代谢产物和细菌的生化反应糖发酵试验糖发酵试验VP试验试验甲基红试验甲基红试验枸橼酸盐利用试验枸橼酸盐利用试验吲哚试验吲哚试验硫化氢试验硫化氢试验三、三、细菌的新陈代谢细菌的新陈代谢糖糖发发酵酵试试验验不不同同的的细细菌菌分分解解糖糖的的能能力
5、力和和代代谢谢产产物不同，可以鉴别细菌。物不同，可以鉴别细菌。VP试试验验大肠杆菌大肠杆菌产气杆菌产气杆菌分解葡萄糖产酸产气分解葡萄糖产酸产气丙酮酸丙酮酸乙酰甲基甲醇乙酰甲基甲醇甲酸、乙酸甲酸、乙酸二乙酰二乙酰碱性环境氧化碱性环境氧化胍基胍基红色化合物（红色化合物（VP试验阳性）试验阳性）产气杆菌产气杆菌大肠杆菌大肠杆菌阴性阴性阳性阳性大肠杆菌：大肠杆菌：产气杆菌：产气杆菌：甲甲基基红红试试验验大肠杆菌：大肠杆菌：产气杆菌：产气杆菌：产产气气杆杆菌菌使使丙丙酮酮酸酸脱脱羧羧，形形成成中中间间产产物物，培培养养液液pH5.4，指指示示剂剂呈呈黄黄色色（阴阴性性）；大大肠肠杆杆菌菌分分解解葡葡萄萄
6、糖糖产产生生丙丙酮酮酸酸，培培养养液液pH5.4，指指示示剂剂红红色色（阳性）。（阳性）。阳阳性性阴阴性性对对照照枸枸橼橼酸酸利利用用试试验验大肠杆菌：大肠杆菌：产气杆菌：产气杆菌：有些细菌能分解培养基中的枸橼酸盐，有些细菌能分解培养基中的枸橼酸盐，作为唯一的碳源生成碳酸盐，使培养作为唯一的碳源生成碳酸盐，使培养基变碱性，由绿色变深蓝色。基变碱性，由绿色变深蓝色。阳阳性性吲吲哚哚试试验验大肠杆菌：大肠杆菌：产气杆菌：产气杆菌：大大肠肠杆杆菌菌，变变形形杆杆菌菌等等含含有有色色氨氨酸酸酶酶，分分解解培培养养基基中中的的色色氨氨酸酸产产生生靛靛基基质质（吲吲哚哚无无色色）。加加入入对对二二甲甲基基
7、氨氨基基苯苯甲甲醛醛生生成玫瑰色吲哚。成玫瑰色吲哚。H2S试验试验变形杆菌等能分解胱氨酸，产生硫化氢变形杆菌等能分解胱氨酸，产生硫化氢与培养基中的醋酸铅或硫酸亚铁作用，与培养基中的醋酸铅或硫酸亚铁作用，生成硫化铅或硫化铁（黑色）生成硫化铅或硫化铁（黑色）。热原质热原质(pyrogen)：产生热原质的细菌大多是革兰产生热原质的细菌大多是革兰阴性菌，热原质即细胞壁的脂多糖。阴性菌，热原质即细胞壁的脂多糖。二、合成代谢产物二、合成代谢产物毒素与侵袭性酶：毒素与侵袭性酶：革兰阴性菌细胞壁的脂多糖，其毒性存在于类脂革兰阴性菌细胞壁的脂多糖，其毒性存在于类脂A的的部分，当菌体裂解后释放出来，故称部分，当菌
8、体裂解后释放出来，故称内毒素内毒素。革革兰兰阳阳性性和和少少数数革革兰兰阴阴性性菌菌在在代代谢谢过过程程当当中中，可可以以分泌有毒的蛋白质，称为分泌有毒的蛋白质，称为外毒素外毒素。某某些些细细菌菌还还能能产产生生侵侵袭袭性性的的酶酶，损损伤伤机机体体组组织织，促促进细菌侵袭扩散，如透明质酸酶。进细菌侵袭扩散，如透明质酸酶。色素：色素：水溶性色素和水溶性色素和脂溶性色素脂溶性色素。抗生素：抗生素：某些微生物代谢过程中产生的某些微生物代谢过程中产生的能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。的物质。细菌素：细菌素：某些菌株产生的一类具有抗菌某些菌株产生的一类具
9、有抗菌作用的蛋白质。作用的蛋白质。维生素：维生素：细菌能合成某些维生素除供细菌能合成某些维生素除供自身需要外，还能分泌到周围环境中。自身需要外，还能分泌到周围环境中。第三章第三章 消毒与灭菌消毒与灭菌Disinfection and Sterilization基本概念基本概念消毒消毒(disinfection)杀死物体上病原微生物的方法杀死物体上病原微生物的方法杀死物体上病原微生物的方法杀死物体上病原微生物的方法,并并并并不一定能杀死含芽不一定能杀死含芽不一定能杀死含芽不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。胞的细菌或非病原微生物。胞的细菌或非病原微生物。胞的细菌或非病原微生物。灭菌灭菌(st
10、erilization)杀灭物体上杀灭物体上杀灭物体上杀灭物体上所有微生物所有微生物所有微生物所有微生物的方法。的方法。的方法。的方法。抑菌抑菌(bacteriostasis)抑制体内或体外细菌的繁殖。抑制体内或体外细菌的繁殖。抑制体内或体外细菌的繁殖。抑制体内或体外细菌的繁殖。防腐防腐(antisepsis)防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。无菌无菌(asepsis)不存在活菌的意思不存在活菌的意思不存在活菌的意思不存在活菌的意思 。物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法热力灭菌法热力灭菌法干热灭菌法
11、干热灭菌法干热灭菌法干热灭菌法焚烧焚烧烧灼烧灼干烤（干烤（160170160170/2h/2h）红外线红外线湿热灭菌法湿热灭菌法巴氏消毒法巴氏消毒法pasteurizationpasteurization煮沸法煮沸法流动蒸气消毒法流动蒸气消毒法间歇蒸气灭菌法间歇蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法 121121,15,15个大气压个大气压,30,30分钟分钟同一温度下,湿热比干热效果好用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，而仍保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法。6230 或72 30辐射杀菌法辐射杀菌法紫外线紫外线 265266nm杀菌原理杀菌原理杀
12、菌原理杀菌原理用途与缺陷用途与缺陷用途与缺陷用途与缺陷电离辐射电离辐射 、射线射线滤过除菌法滤过除菌法 0.22um,不耐热血清等不耐热血清等,空气空气超声波杀菌法超声波杀菌法超声波杀菌法超声波杀菌法干燥与低温抑菌法干燥与低温抑菌法干燥与低温抑菌法干燥与低温抑菌法 冷冻真空干燥保存菌种冷冻真空干燥保存菌种冷冻真空干燥保存菌种冷冻真空干燥保存菌种化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法(外用外用)常用消毒剂的杀菌机制常用消毒剂的杀菌机制使菌体蛋白变性或凝固使菌体蛋白变性或凝固使菌体蛋白变性或凝固使菌体蛋白变性或凝固干扰微生物酶系统和影响其代谢干扰微生物酶系统和影响其代谢干扰微生物酶系统和影响其代谢干扰微生物
13、酶系统和影响其代谢损伤细胞膜损伤细胞膜损伤细胞膜损伤细胞膜选择原则选择原则效果好效果好毒力低毒力低便宜便宜消毒剂的主要种类消毒剂的主要种类类别类别作用机制作用机制常用种类常用种类酚类蛋白变性，细胞膜损伤石炭酸醇类蛋白变性乙醇氧化剂氧化、蛋白沉淀高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒重金属盐氧化、蛋白酶变性红汞、硫柳汞表面活性剂蛋白变性，细胞膜损伤新洁而灭染料干扰氧化、抑制繁殖龙胆紫酸碱类破坏膜、壁，蛋白凝固醋酸、生石灰烷化剂蛋白质、核酸烷基化环氧乙烷消毒剂的应用消毒剂的应用影响消毒灭菌效果的因素影响消毒灭菌效果的因素消毒剂的性质、浓度与作用时间消毒剂的性质、浓度与作用时间消毒剂的性质、浓度与作用时间消毒剂的性质、浓度与作用时间微生物的种类与数量微生物的种类与数量微生物的种类与数量微生物的种类与数量温度温度温度温度酸碱度酸碱度酸碱度酸碱度有机物有机物有机物有机物