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1、第十四章 细菌感染的检查方法细菌感染的检查方法与防治原则与防治原则 1一、病原菌检测一、病原菌检测(一)(一)标本的采集和运送标本的采集和运送 第一节第一节 细菌感染的检查细菌感染的检查早期早期早期早期无菌无菌无菌无菌不同时期不同标本不同时期不同标本尽快送检尽快送检尽快送检尽快送检2(二)细菌分离培养与鉴定(二)细菌分离培养与鉴定 1.1.形态结构检查形态结构检查2.2.分离培养鉴定分离培养鉴定 3.3.生化试验生化试验4.4.血清学鉴定血清学鉴定5.5.动物试验动物试验6.6.药物敏感试验药物敏感试验31.1.形态结构检查形态结构检查一般程序:一般程序:标本涂片标本涂片 固定固定 染色染色
2、镜检镜检(观察镜下特征:菌体形态、排列、染色性及特殊结构等)初步鉴定 456 2.2.分离培养与鉴定分离培养与鉴定 标本(或增菌后)接种标本(或增菌后)接种普通琼脂平板普通琼脂平板血琼脂平板血琼脂平板选择培养基平板选择培养基平板 培养特征:培养特征:生长条件生长条件 菌落特征菌落特征 溶血环特征等溶血环特征等73.3.生化试验生化试验 Sugar Fermentation H2S Test Citrate utilization84.4.血清学鉴定血清学鉴定 用已知用已知AbAb检测未知的纯培养细菌,以确检测未知的纯培养细菌,以确定细菌的种、型。定细菌的种、型。95.5.动物试验动物试验 分离
3、、鉴定细菌,分离、鉴定细菌,测定细菌毒力。测定细菌毒力。6.6.药敏试验药敏试验10一般程序一般程序标本(或增菌后)接种普通琼脂平板血琼脂平板选择培养基平板 培养特征:培养特征:生长条件 菌落特征 溶血环特征等染色镜检:根据形态特征初步鉴定初步鉴定生化反应:如肠道杆菌的乳糖发酵试验11血清学鉴定:鉴定细菌的种、型毒力鉴定内、外毒素检测动物试验:家兔、豚鼠等药敏试验纸片法:只可定性试管法:可定量(测MBC、MIC)E-test:可定量(只可测MIC)12(三)病原菌抗原的检测(三)病原菌抗原的检测 EIA,IF,Western blotting(四)检测病原菌核酸四)检测病原菌核酸 核酸杂交核酸
4、杂交 PCR 基因芯片(基因芯片(gene chips)13二、血清学诊断二、血清学诊断 用已知的细菌或其特异性抗原用已知的细菌或其特异性抗原去检测患者体液中有无相应抗体以及抗去检测患者体液中有无相应抗体以及抗体效价的动态变化可作为感染性疾病的体效价的动态变化可作为感染性疾病的辅助诊断。辅助诊断。主要适用于抗原性较强的细菌和病主要适用于抗原性较强的细菌和病程较长的感染性疾病的诊断。程较长的感染性疾病的诊断。14标本:标本:血清和其他体液血清和其他体液标本要求标本要求:双份血清双份血清(早期;恢复期早期;恢复期)诊断:诊断:恢复期或一周后血清恢复期或一周后血清AbAb效价比早期升高效价比早期升高
5、4 4 倍及倍及4 4倍以上倍以上 现症感染现症感染15凝集试验:凝集试验:肥达试验肥达试验(Widal test)-诊断伤寒、副伤寒诊断伤寒、副伤寒 外斐试验外斐试验(Well-Felix)-诊断立克次体病诊断立克次体病中和试验:中和试验:-诊断链球菌性风湿病诊断链球菌性风湿病补体结合试验:补体结合试验:-检测检测Q Q热柯克斯体热柯克斯体ELISAELISA:-检测炭疽芽胞杆菌保护性抗体检测炭疽芽胞杆菌保护性抗体 血清学诊断常用方法:血清学诊断常用方法:16致病菌的检验程序致病菌的检验程序:17第二节第二节 细菌感染的特异性细菌感染的特异性预防预防一、人工主动免疫一、人工主动免疫 (一)疫苗(一)疫苗 死疫苗死疫苗 减毒活疫苗减毒活疫苗 亚单位疫苗亚单位疫苗 重组载体疫苗重组载体疫苗 基因工程疫苗基因工程疫苗 核酸疫苗核酸疫苗 (二)类毒素(二)类毒素 18二、人工被动免疫二、人工被动免疫 抗毒素抗毒素 血清丙种球蛋白血清丙种球蛋白 其他免疫制剂其他免疫制剂:IFN-IFN-,CSFCSF等。等。19思考题思考题1.试述检测病原菌的基本程序和原则?2.对已经分离出的细菌菌落,怎样从微生物学角度去进一步鉴定?3.试述疫苗研制及其发展的主要阶段?20