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1、第6章动物实验与血清学试验现在学习的是第1页,共31页主要内容实验动物的实验动物的实验动物的实验动物的抓取抓取抓取抓取方法方法方法方法12345实验动物的处死方法实验动物的处死方法实验动物的处死方法实验动物的处死方法 实验动物各种体液的采集方法实验动物各种体液的采集方法实验动物各种体液的采集方法实验动物各种体液的采集方法 实验动物血液的采集方法实验动物血液的采集方法实验动物血液的采集方法实验动物血液的采集方法 实验动物的麻醉方法实验动物的麻醉方法实验动物的麻醉方法实验动物的麻醉方法现在学习的是第2页,共31页进行实验操作前必须注意的事情进行实验操作前必须注意的事情1.实验动物作为人类的替难者进
2、行各种生物医学研究。试验中要从动实验动物作为人类的替难者进行各种生物医学研究。试验中要从动物福利和动物实验伦理学考虑,减少一些不必要的动物实验,如物福利和动物实验伦理学考虑,减少一些不必要的动物实验,如若不得不做的动物实验,要尽可能将动物的痛苦、压迫和不适降若不得不做的动物实验,要尽可能将动物的痛苦、压迫和不适降到最低。到最低。2.动物实验的实践性非常强,不能仅靠书本理论知识,需要通动物实验的实践性非常强,不能仅靠书本理论知识,需要通过反复实践加以掌握,以保证实验的顺利进行和减少动物过反复实践加以掌握,以保证实验的顺利进行和减少动物承受的痛苦承受的痛苦现在学习的是第3页,共31页国际上对动物实
3、验伦理有如下五项要求国际上对动物实验伦理有如下五项要求:动物居住空间应符合标准动物居住空间应符合标准,注意日常的饲育管理注意日常的饲育管理,不使动物饥饿、缺水和患病。不使动物饥饿、缺水和患病。尽可能地采用代替法最少地使用和牺牲动物。尽可能地采用代替法最少地使用和牺牲动物。使用犬、猫和猴时,实验前应进行训练,尽可能地减少动物的恐惧和不安。使用犬、猫和猴时,实验前应进行训练,尽可能地减少动物的恐惧和不安。实验结束和动物不可能恢复时,应采取安乐死。实验结束和动物不可能恢复时,应采取安乐死。要爱护试验动物和对由于实验死亡的动物应持有怜悯和感谢之情。要爱护试验动物和对由于实验死亡的动物应持有怜悯和感谢之
4、情。现在学习的是第4页,共31页一、动物的抓取一、动物的抓取现在学习的是第5页,共31页动物的抓取动物的抓取 小白鼠的捉持小白鼠的捉持 捉拿时可先用右手抓住并提起鼠尾,置于实验台或鼠笼上,并稍向捉拿时可先用右手抓住并提起鼠尾,置于实验台或鼠笼上,并稍向后拉;用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后颈背部的皮肤,将鼠置后拉;用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后颈背部的皮肤,将鼠置于左手心中,拉直后肢,以无名指及小指按住鼠尾或小鼠的左后肢于左手心中,拉直后肢,以无名指及小指按住鼠尾或小鼠的左后肢即可。即可。小鼠抓取方法现在学习的是第6页,共31页 大白鼠的捉持大白鼠的捉持 大白鼠的捉拿时,可戴上手套。实验者可
5、用右手捉住鼠尾,放在实验台或大白鼠的捉拿时,可戴上手套。实验者可用右手捉住鼠尾,放在实验台或鼠笼上,并稍向后拉;左手掌面向鼠背,食指和中指压住鼠的头顶,拇鼠笼上,并稍向后拉;左手掌面向鼠背,食指和中指压住鼠的头顶,拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入,将鼠的两前肢卡住;或拽紧鼠后颈指和无名指分别从鼠的两腋下插入,将鼠的两前肢卡住;或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。及后背皮肤即可。大鼠抓取方法动物的抓取动物的抓取现在学习的是第7页,共31页豚鼠的捉拿、固定豚鼠的捉拿、固定 豚鼠胆小易惊,抓取时必须稳、准、迅速。豚鼠胆小易惊,抓取时必须稳、准、迅速。先用手掌扣住鼠背,抓住其肩胛上方,将手张开,用手指环握颈部
6、,另一只手托住其臀部,先用手掌扣住鼠背,抓住其肩胛上方,将手张开,用手指环握颈部,另一只手托住其臀部,即可轻轻提起、固定。即可轻轻提起、固定。豚鼠抓取方法动物的抓取动物的抓取现在学习的是第8页,共31页家兔的捉持家兔的捉持用一手抓住家兔颈背部皮肤,将兔提用一手抓住家兔颈背部皮肤,将兔提起,另一手托其臀部,使兔呈坐位起,另一手托其臀部,使兔呈坐位姿势。姿势。犬抓取注意点犬抓取注意点不要轻易使用长柄铁钳,钳伤造成的伤不要轻易使用长柄铁钳,钳伤造成的伤害会使它对你更加恐惧,影响以后实验害会使它对你更加恐惧,影响以后实验的进行。的进行。抓取后用绳子将嘴绑住。抓取后用绳子将嘴绑住。狗嘴的捆绑方法家兔的抓
7、取 动物的抓取动物的抓取现在学习的是第9页,共31页二、实验动物的麻醉方二、实验动物的麻醉方法法现在学习的是第10页,共31页实验动物的麻醉方法实验动物的麻醉方法对对实实验验动动物物进进行行麻麻醉醉的的目目的的是是:消消除除实实验验过过程程中中引引起起的的痛痛苦苦和和不不适适,确确保保实实验验动动物物的的安安全全和和动动物物实实验验的的顺顺利利进进行行,是是动动物实验伦理的一个重要方面。物实验伦理的一个重要方面。应应结结合合实实验验目目的的、实实验验动动物物种种类类、日日龄龄及及健健康康状状况况等等因因素素进进行综合考虑,决定选用的麻醉剂和麻醉方法。行综合考虑,决定选用的麻醉剂和麻醉方法。麻麻
8、醉醉方方法法有有全全身身麻麻醉醉和和局局部部麻麻醉醉两两种种。在在实实验验动动物物的的麻麻醉醉中中绝绝大大多数采用全身麻醉。多数采用全身麻醉。现在学习的是第11页,共31页吸入麻醉法:用挥发吸入麻醉法:用挥发性麻醉药。性麻醉药。常用麻醉药:常用麻醉药:乙醚乙醚 氯仿氯仿全身麻醉全身麻醉注射麻醉法:用非挥发注射麻醉法:用非挥发性麻醉药。性麻醉药。常用麻醉药:常用麻醉药:戊巴比妥钠戊巴比妥钠 硫喷妥钠硫喷妥钠 氯氨酮氯氨酮 乌拉坦乌拉坦实验动物的麻醉方法实验动物的麻醉方法现在学习的是第12页,共31页常用非挥发性麻醉药的剂量 药物及常药物及常用的溶液用的溶液浓度浓度剂量(剂量(mg/kg)麻醉持续
9、时麻醉持续时间与特点间与特点小鼠小鼠大鼠大鼠 豚鼠豚鼠家兔家兔乌拉坦 (2025%)10001500(ip)10001500(ip)10001500(ip)10001200(iv)24小时。对呼吸和神经影响小,但可降低血压 10001500(ip)戊巴比妥钠 (14)4550(ip)4050(ip)4050(ip)3040(ip)24小时。注射后作用迅速,一般最常用,肌松不够完全。2025(iv)硫喷妥钠 (24)3040(iv)约半小时。实验动物的麻醉方法实验动物的麻醉方法现在学习的是第13页,共31页实验动物麻醉应注意的事项1.麻醉之前应禁食,准确称量动物体重,作为计算麻醉剂用量麻醉之前应
10、禁食,准确称量动物体重,作为计算麻醉剂用量的依据。的依据。2.应注意不同麻醉药对动物的作用是不同的,如戊巴比妥钠、硫贲妥应注意不同麻醉药对动物的作用是不同的,如戊巴比妥钠、硫贲妥钠等能抑制心肌收缩力,使肌肉松弛,而氯胺酮则相反。钠等能抑制心肌收缩力,使肌肉松弛,而氯胺酮则相反。3.大动物犬、猴、羊等麻醉前半小时应注射麻醉前给药如阿托品和苯大动物犬、猴、羊等麻醉前半小时应注射麻醉前给药如阿托品和苯巴比妥钠。巴比妥钠。4.静脉注射麻醉药是必须缓慢,边注射边观察动物。静脉注射麻醉药是必须缓慢,边注射边观察动物。5.在麻醉过程中密切观察动物的反应,在麻醉过程中密切观察动物的反应,动物在麻醉期间体温下降
11、,应动物在麻醉期间体温下降,应注意保温。注意保温。实验动物的麻醉方法实验动物的麻醉方法现在学习的是第14页,共31页三、实验动物血液的采集方三、实验动物血液的采集方法法现在学习的是第15页,共31页实验动物血液的采集方法实验动物血液的采集方法1、大鼠、小鼠的采血方、大鼠、小鼠的采血方法法尾部采血尾部采血眼眶后静脉丛采血眼眶后静脉丛采血颈颈(股股)静脉或颈静脉或颈(股股)动脉采动脉采血血摘眼球采血摘眼球采血断头采血断头采血心脏采血心脏采血尾部采血尾部采血心脏采血心脏采血现在学习的是第16页,共31页大小鼠不同采血方法的比较大小鼠不同采血方法的比较采血方法采血方法采血量(采血量(mlml)应应 用
12、用小鼠小鼠大鼠大鼠断头采血法断头采血法0.2-1.01.5-5.0大批动物集中处死采血,速度快摘眼球采血法摘眼球采血法0.2-1.51.0-8.0大批动物集中采血,若一次少量采,可反复几次尾静脉切割采血法尾静脉切割采血法0.01-0.050.1-0.5用于用血量少的检验,如血常规,能长时期反复多次采血眼眶后静脉采血法眼眶后静脉采血法0.02-0.10.2-1.0能反复多次采血腋窝动静脉采血法腋窝动静脉采血法0.5-1.51.0-5.0需处死动物,麻醉后采血心脏采血法心脏采血法-0.2-1.0腹主动脉采血法腹主动脉采血法-5.0-10.0需处死动物,麻醉后采血现在学习的是第17页,共31页2 2
13、、豚鼠采血方法、豚鼠采血方法耳缘切口采血耳缘切口采血背中足静脉采血背中足静脉采血 心脏采血心脏采血 3 3、兔的采血方法、兔的采血方法耳缘静脉采血耳缘静脉采血 耳中央动脉采血耳中央动脉采血 颈静脉采血颈静脉采血 颈动脉采血颈动脉采血心脏采血心脏采血实验动物血液的采集方法实验动物血液的采集方法现在学习的是第18页,共31页4 4、犬的采血方法、犬的采血方法 后肢外侧小隐静脉采血后肢外侧小隐静脉采血 前肢背侧皮下头静脉采血前肢背侧皮下头静脉采血 颈静脉采血颈静脉采血 股动脉采血股动脉采血前肢静脉采血前肢静脉采血后肢小隐静脉采血后肢小隐静脉采血实验动物血液的采集方法实验动物血液的采集方法现在学习的是
14、第19页,共31页 各种实验动物活体安全采血量和致死采血量各种实验动物活体安全采血量和致死采血量各种实验动物活体安全采血量和致死采血量各种实验动物活体安全采血量和致死采血量动物种类动物种类最大安全采血量最大安全采血量(mlml)最小致死采血量最小致死采血量(mlml)小鼠小鼠0.30.30.50.5大鼠大鼠2 25 5豚鼠豚鼠5 51010兔兔10104040犬犬5050300300猴猴15156060实验动物血液的采集方法实验动物血液的采集方法现在学习的是第20页,共31页四、动物各种体液的采集方法四、动物各种体液的采集方法现在学习的是第21页,共31页动物各种体液的采集方法1、尿液的采集方
15、法、尿液的采集方法 常用的采集方法较多,一般在实验前需给动物灌服一定量的水。常用的采集方法较多,一般在实验前需给动物灌服一定量的水。代谢笼法(代谢笼法(适用于大、小鼠适用于大、小鼠)导尿法(常用于雄性兔、狗导尿法(常用于雄性兔、狗)压迫膀胱法(适用于兔、狗等较大动物)压迫膀胱法(适用于兔、狗等较大动物)输尿管插管法输尿管插管法膀胱插管法膀胱插管法 膀胱穿刺法膀胱穿刺法剖腹采尿法剖腹采尿法反射排尿法反射排尿法 现在学习的是第22页,共31页2、消化液的采集、消化液的采集 唾液(直接抽取法;制造腮腺瘘法)唾液(直接抽取法;制造腮腺瘘法)胃液(直接收集胃液法;制备胃瘘法)胃液(直接收集胃液法;制备胃
16、瘘法)胰液和胆汁(通过对胰总管和胆总管的插管而获得)胰液和胆汁(通过对胰总管和胆总管的插管而获得)3、脑脊液的采集、脑脊液的采集 狗、兔脑脊液的采集通常采取脊髓穿刺法狗、兔脑脊液的采集通常采取脊髓穿刺法 大鼠脑脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法大鼠脑脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法4、其他体液的采集、其他体液的采集 胸水的采集胸水的采集 腹水的采集腹水的采集 骨髓的采集骨髓的采集 精液的采集精液的采集 阴道内液体的采集阴道内液体的采集 动物各种体液的采集方法现在学习的是第23页,共31页五、实验动物的处死方法五、实验动物的处死方法现在学习的是第24页,共31页实验动物的处死方法实验动物的处死方法
17、实验动物的处死方法实验动物的处死方法安死术安死术的概念的概念 “安安死死术术”是是指指以以人人道道的的方方法法处处死死动动物物的的过过程程。在在处处死死动动物物过过程程中中减少动物的惊恐或焦虑,安静地、无痛苦地死亡。减少动物的惊恐或焦虑,安静地、无痛苦地死亡。现在学习的是第25页,共31页1、大鼠小鼠处死方法、大鼠小鼠处死方法颈椎脱臼法颈椎脱臼法急性失血法急性失血法麻醉致死法麻醉致死法断头法断头法击打法击打法实验动物的处死方法实验动物的处死方法现在学习的是第26页,共31页2、犬、兔、豚鼠处死方法、犬、兔、豚鼠处死方法空气栓塞法空气栓塞法 优点:方法简单、迅速,优点:方法简单、迅速,缺点:动物
18、死于急性循环衰竭,各脏器凝血十分明显。缺点:动物死于急性循环衰竭,各脏器凝血十分明显。急性失血法急性失血法 先先行行麻麻醉醉,再再分分离离颈颈动动脉脉或或股股动动脉脉,将将一一根根较较粗粗的的塑塑料料管管插插入入动动脉脉内内放放血血。动动物物在在3 35min5min内即可死亡。内即可死亡。优优点点:动动物物十十分分安安静静,对对脏脏器器无无损损伤伤,对对活活杀杀采采集集病病理理切切片片标标本本是是一一种种比比较较好的方法。好的方法。化学药物致死法化学药物致死法 通过注射一定量的化学药物而使动物迅速致死。通过注射一定量的化学药物而使动物迅速致死。例如:例如:1010氯化钾溶液:氯化钾溶液:静脉注射,用量为犬静脉注射,用量为犬202030ml/30ml/只,兔只,兔5 510ml10ml只只实验动物的处死方法实验动物的处死方法现在学习的是第27页,共31页血清学试验现在学习的是第28页,共31页本质:抗原抗体在体外出现肉眼可见的特异性反应优点:特异性强、敏感性高、简便、快速血清学试验包括:血清学鉴定和血清学诊断现在学习的是第29页,共31页血清学鉴定用含已知特异性抗体的免疫血清(诊断血清)与分离培养出的未知纯种细菌或标本中的抗原,进行血清学反应,以确定病原菌的种或型。现在学习的是第30页,共31页直接凝集试验现在学习的是第31页,共31页