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1、L/O/G/O超高压液相色谱超高压液相色谱基本内容基本内容概述概述 原理原理 特点特点 应用用 4223145 不足不足超高压液相色谱（超高压液相色谱（UPLC）超高压液相色谱（UPLC）是指一种采用小粒径填料色谱柱(100MPa)的新型液相色谱技术，可显著改善色谱的分离度和检测灵敏度，同时大大缩短分析周期，特别适用于微量复杂混合物的分离和高通量研究。组成：进样系统、输液系统、分离系统、检测系统、数据处理系统原理原理 UPLC保持了传统HPLC的基本原理，但其分 离效能和分析速度却得到了全面提升，这归功于其独特的小颗粒色谱填料技术。在HPLC的速率理论中，Van Deemter方程可简化为：H
2、=A+Bv+Cv (1)其中：H理论塔板高度 v流动相的平均线速A、B、C均为常数，其中：A涡流扩散项系数B分子扩散项系数C传质阻力项系数各项均与固定相粒度(dp)相关如仅考虑dp对H的影响，(1)式可表示为：H=a(dp)+bv+c(dp)2v (2)由（2）H=a(dp)+bv+c(dp)2v 可知：在相同线速度下，填料粒径（dp）越小，理 论塔板高度越小，柱效越高。小颗粒填料的另一个重要特征是：当增加流量(线速度)时塔板高度没有明显的增大，且维持在一定范围内，即在较大流量范围内保持较高的柱效。因此，可以通过增加流量来加快分离速度，同时维持较高的柱效和良好的分离效果。特点特点与其他液相色谱
3、相比较，与其他液相色谱相比较，UPLC具有以下几个特点：具有以下几个特点：1、填料粒径小，压力大、填料粒径小，压力大 UPLC HPLC 粒径粒径 100MPa 3060MPa2、检测灵敏度高，重现性好。如采用、检测灵敏度高，重现性好。如采用UPLCMS MS分析大鼠血浆中的混合药物时灵敏度提高了分析大鼠血浆中的混合药物时灵敏度提高了倍。倍。3、快速、高效、高分辨的色谱模式、快速、高效、高分辨的色谱模式4、进样系统、进样系统 一般常采用静态切割、压力平衡（采一般常采用静态切割、压力平衡（采用一强一弱的双溶剂进样）和自动进样三用一强一弱的双溶剂进样）和自动进样三种方式；种方式；5、输液系统、输液
4、系统 具有耐压性能、各部分之间要有良好具有耐压性能、各部分之间要有良好的密封；的密封；6、检测系统、检测系统 使用高频检测器（短时间内出现的许使用高频检测器（短时间内出现的许多色谱峰需要更快的数据采集速率相适应；多色谱峰需要更快的数据采集速率相适应；需要降需要降低样品在检测池内的驻留时间）。低样品在检测池内的驻留时间）。应用应用 超高压液相色谱（超高压液相色谱（UPLC）是一种新型的色）是一种新型的色谱分析技术，可以单独使用，也可以和其他谱分析技术，可以单独使用，也可以和其他色谱如质谱联用（色谱如质谱联用（UPLCMS）。主要应用）。主要应用有：有：中药复杂成分的分析，环境监测，农药残留中药复
5、杂成分的分析，环境监测，农药残留物的检测及蛋谢组学等领域，且具有很好的物的检测及蛋谢组学等领域，且具有很好的推广价值。推广价值。一、压力高，溶剂的粘度会上升，流量降低（可根一、压力高，溶剂的粘度会上升，流量降低（可根据设定的流量与实际流量进行流量补偿）据设定的流量与实际流量进行流量补偿）二、流动相以较高速度流过固定相时，因摩擦可产生二、流动相以较高速度流过固定相时，因摩擦可产生热量，加之流动相和固定相的导热性能较差，可导热量，加之流动相和固定相的导热性能较差，可导致温度梯度的出现，造成峰展宽和柱效的下降（流致温度梯度的出现，造成峰展宽和柱效的下降（流动相预冷）。动相预冷）。三、在超高压下运行的色谱柱可能发生液体喷射和管三、在超高压下运行的色谱柱可能发生液体喷射和管壁迸裂。（不常发生）壁迸裂。（不常发生）四、分析中药的柱子容易堵柱，而化学药则很少出现四、分析中药的柱子容易堵柱，而化学药则很少出现这种现象。这种现象。不足不足LOGO