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1、风湿三项检验科 周存敏三 C反应蛋白（CRP）二 抗链球菌溶素O抗体（ASO）一 类风湿因子（RF）一 、类风湿因子概念及生概念及生理作用理作用RF临床意义临床意义 检测方法检测方法（1）类风湿因子概念）类风湿因子概念 类风湿因子（RF）是在类风湿性关节炎（RA）病人血清中发现，是一种以变性IgG为靶抗原的自身抗体。主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液中，它是一种抗变性IgG的抗体。1、概念及生理作用 它是由于感染因子（细菌、病毒等）引起体内产生的以变性IgG（一种抗体）为抗原的一种抗体，故又称抗抗体。常见的类风湿因子有IgM型、IgG型、IgA型和IgE型。IgM型RF阳性率为60%-
2、78%。1、概念及生理作用Diagram（2）生理作用1调节体内免疫反应；2激活补体，加快清除微生物感染；3清除免疫复合物使机体免受循环复合物的损伤。2、检测方法 RA病人和约50%的健康人体内都存在有产生RF的B细胞克隆，在变性IgG（或与抗原结合的IgG）或EB病毒直接作用下，可大量合成RF。健康人产生RF的细胞克隆较少，且单核细胞分泌的可溶性因子可抑制RF的产生，故一般不易测出。Table检测方法检测方法检测方法检测方法ELISAELISA胶乳凝集法胶乳凝集法胶乳凝集法胶乳凝集法免疫比浊法免疫比浊法免疫比浊法免疫比浊法胶乳凝集试验：将变性IgG包被于聚苯乙烯胶乳颗粒上，此致敏胶乳在与待测
3、血清中的RF相遇时，即可发生肉眼可见的凝集。2、检测方法免疫浊度测定的基本原理是：反应试剂中有一定浓度的变性IgG（人、兔或羊），加入含RF的待测血清后，RF与试剂中变性IgG结合，形成变性IgG-抗变性IgG自身抗体（RF）免疫复合物，引起溶液中浊度的变化。用透射或散射比浊法即可测定出RF的浊度。2、检测方法透射光和散射光测定比较1抗原或抗体量大大过剩时易出现可溶性复合物，造成测定误差，测定单克隆蛋白时这种更易出现2应维持反应管中抗体蛋白量始终过剩，使仪器的测定范围在低于生理范围到高于正常范围之间3受血脂的影响，尤其是低稀释度时，脂蛋白的小颗粒可形成浊度，使测定值假性升高。3、临床意义 RF
4、主要为IgM类自身抗体，但也有IgG类、IgA类和IgE类。各类RF临床意义有所不同。未经治疗的类风湿性关节炎患者其阳性率为80%，且滴定度常在1：160以上。临床上动态观察滴定度多少，可作为病变活动及药物治疗后疗效的评价。其他风湿性疾病如SLE阳性率20%25%；硬皮病与皮肌炎阳性率为10%24%，滴定度较低。多数作者认为，IgM类RF的含量与RA的活动性无密切关系；IgG类RF的含量与RA患者的滑膜炎、血管炎和关节外症状密切相关。IgA类RF见于RA、硬皮病、Felty综合征和SLE，是RA临床活动的一个指标。IgD类RF研究甚少。IgE类RF除RA患者外，也见于Felty综合征和青年型R
5、A。在RA患者，高效价的RF存在并伴有严重的关节功能受限时，常提示预后不良。在非类风湿患者中，RF的阳性率随年龄的增加而增加，但这些人以后发生RA者极少。二、抗链球菌溶素O抗体（ASO）1、概念2、临床意义1、概念链球菌溶血素O：A组链球菌的代谢产物之一，可以溶解人红细胞，具有很强的抗原性。抗链球菌溶血素O：机体因咽炎、扁桃体炎、猩红热、丹毒、脓皮病、风湿热等感染A组链球菌后，可产生链球菌溶血素O抗体，即“Anti-Streptolysin O（ASO）”。溶血性链球菌感染可引起上呼吸道感染、风湿性心脏病、感染性心内膜炎、心瓣膜病变（心瓣膜狭窄或关闭不全）、急性肾小球肾炎等。2、各疾病检测AS
6、O临床意义（1）急性肾小球肾炎（2）急性风湿热（3）类风湿性关节炎（1）急性肾小球肾炎a、概述 急性肾小球肾炎是一种常见的肾脏病，以儿童及青年多见。绝大多数发生在感染后。其中以急性链球菌感染后肾小球肾炎最为常见，其病理表现为弥漫性毛细血管内增生性肾炎。（1）急性肾小球肾炎b、发病机制 常发生于A组溶血性链球菌感染后2-3周，因体内产生的抗链球菌抗体与链球菌抗原结合成IC，沉积在肾小球基底膜所致。此型肾炎占肾小球肾炎的80%以上。（1）急性肾小球肾炎 A组12型溶血型链球菌与人类肾小球基底膜有共同抗原，故链球菌感染后产生的抗体可与肾小球基底膜发生交叉反应，导致肾小球肾炎。此类肾炎又称“肾毒型肾炎
7、”，约占肾小球肾炎的15%左右。（1）急性肾小球肾炎c、检测ASO的临床意义：此检测可提示前驱的链球菌感染。但ASO滴度升高，仅表明近期内曾有链球菌感染，与急性肾小球肾炎发病的可能性及疾病的严重性不直接相关。ASO滴度不高也不能排除急性肾小球肾炎的诊断，如感染早期使用有效抗生素治疗可影响其阳性率。脓包病引起的急性肾小球肾炎滴度可不升高;某些链球菌菌株因不产生溶血素，ASO可始终为阴性；高脂血症也可以影响ASO检测结果。（2）急性风湿热a、概述 风湿热是指一种与链球菌感染有关的自身免疫性结缔组织疾病。其特征为全身结缔组织呈非化脓性炎症，主要累及心脏和关节，其次为皮肤，浆膜和血管，偶可侵犯中枢神经
8、系统。临床主要表现为心脏炎，关节炎，环形红斑和舞蹈症等，常伴有发热。（2）急性风湿热b、发病机制1、分子模拟 （1）荚膜与人体关节、滑膜有共同抗原。（2）细胞壁外层中M蛋白及M相关蛋白、中层多糖中N-乙酰萄糖胺等与人体心肌和心瓣膜有共同抗原。（3）细胞膜的脂蛋白与人体心肌肌膜和丘脑下核、尾状核之间有共同抗原。机体的抗链球菌免疫反应可与人体组织产生免疫交叉反应，导致器官损害，是风湿热发病的主要机制。2、自身免疫反应 （1）免疫复合物病：与链球菌抗原模拟的自身抗原与抗链球菌抗原可形成循环免疫复合物沉积于人体关节滑膜、心肌、心瓣膜，激活补体成分产生炎性病变。（2）细胞免疫反应异常。3、遗传背景。4、
9、毒素。（2）急性风湿热c、检测ASO的临床意义 为诊断风湿热最常用的辅助检验项目，患者一般可出现抗体滴度升高，但抗体升高并不能确诊风湿热，且升高的程度与病情的严重程度不呈正比。（3）类风湿性关节炎a、发病机制 在病毒，细菌，支原体持续感染的情况下，体内IgG分子发生了变性，从而刺激机体产生了抗变性IgG的IgM类抗体，即类风湿因子。RF与变性IgG结合，形成IC沉积于小关节滑膜后引起炎症损害。风湿性关节炎和类风湿性关节炎风湿性关节炎和类风湿性关节炎的区别的区别 风湿性关节炎是风湿热的一种表现。风湿热是由A组乙型溶血性链球菌感染所引起的全身变态反应性疾病，病初起时常有咽峡炎、丹毒等感染病史。风湿
10、热起病较急，且多见于青少年。风湿性关节炎可侵犯心脏，引起风湿性心脏病，并有发热、皮下结节和皮疹等表现。风湿性关节炎有两个特点：一是关节红、肿、热、痛明显，不能活动，发病的部位常常是膝、髋、踝等下肢大关节，其次是肩、肘、腕关节，手足的小关节少见；二是疼痛游走不定，一段时间是这个关节发作，一段时间是那个关节不适，但疼痛持续时间不长，几天就可消退。血化验血沉加快，抗“O”滴度升高，类风湿因子阴性。治愈后很少复发，关节不遗留畸形，有的病人可遗留心脏病变。类风湿性关节炎则属于自身免疫性疾病，虽不属于遗传性疾病，但可能与遗传因素有关，多发生于2040岁女性。早期症状多为关节疼痛、肿胀、发僵、活动不便，时轻
11、时重，反复发作，迁延不愈，常遗留骨关节强直畸形。虽然少数病人可有心血管疾病，但绝大多数病人无心脏症状，类风湿因子阳性。2、ASO临床意义将类风湿的将类风湿的ASO分为四种血清类型：分为四种血清类型：（1）抗链球菌溶血素型：ASO升高、RF阴性时，见于风湿病，（2）凝集型：ASO正常、RF阳性时，表示预后不良；（3）混合型：ASO升高，RF阳性，见于类风湿；（4）正常型：ASO阴性、RF阴性，可排除类风湿。2、ASO临床意义 ASO测定对于诊断A组链球菌感染很有价值，其存在及含量可反映感染的严重程度。A组链球菌感染后1周，ASO即开始升高，46周可达高峰，并能持续数月，当感染减退时，ASO值下降
12、并在6个月内回到正常值，如果ASO滴度不下降，提示可能存在复发性感染或慢性感染。多次测定，抗体效价逐渐升高对诊断有重要意义，抗体效价逐渐下降，说明病情缓解。三、C反应蛋白（CRP）1、概念及生物学功能2、CRP临床意义1、概念及生物学功能概念概念 C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）是人类重要的急性期反应蛋白，急性期浓度可升高上千倍，循环中的CRP半衰期为19小时。人类CRP是由肝脏产生，由五个相同的亚基依靠非共价键形成的环状五聚体，这一特征性结构使其归类于五聚素（一组具有免疫防御特性的钙结合蛋白）家族。生物学功能生物学功能 Ca 2+存在下与磷酸胆碱、DNA、组蛋白等结
13、合。CRP 可与凋亡坏死细胞膜脂质双层结构破坏时暴露的磷脂或外部侵入的细菌、真菌、寄生虫的细胞壁磷酸胆碱结合,激活补体,调理吞噬功能,促使内源性或外源性配体物质的清除 。1、概念及生物学功能 a、识别外来物质，激活补体系统。b、增强调理作用，增强吞噬细胞吞噬作用 c、与血小板激活因子（RAF）结合，降低炎症反应。d、与染色体结合，消除坏死组织里的细胞DNA。CRP在炎症开始数小时就升高，48小时即可达峰值，随着病变消退、组织、结构和功能的恢复降至正常水平。此反应不受放疗、化疗、皮质激素治疗的影响。因此，CRP的检测在临床应用相当广泛，包括急性感染性疾病的诊断和鉴别诊断，手术后感染的监测；抗生素疗效的观察；病程检测及预后判断等。与心血管与心血管疾病疾病关系关系CRP与与感染性感染性疾病疾病CRP与与妊娠糖尿妊娠糖尿病病CRP临床意义临床意义123CRP与感染性疾病与感染性疾病感染的鉴别感染的鉴别病情的监测病情的监测疗效的判定疗效的判定CRP与感染与感染性疾病性疾病CRP与心血管疾病与心血管疾病与心血管与心血管疾病疾病关系关系动脉粥样动脉粥样硬化硬化心房颤动心房颤动冠心病冠心病CRP与妊娠糖尿病与妊娠糖尿病