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1、2.(2008)2.(2008)已知某种限制性内切酶在一线性DNADNA分子上有3 3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNADNA分子在3 3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a a、b b、c c、d d四种不同长度的DNADNA片段。现有多个上述线性DNADNA分子，若在每个DNADNA分子上至少有一个酶切位点被该酶切断，则理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNADNA分子最多能产生长度不同的DNADNA片段种类数是A.3 B.4 C.9 D.12C第1页/共25页3.限制性内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切，不同的限制性内切酶可以对不同的核苷酸序列进行剪切。现以三种不同的限制性内
2、切酶对长度为8kb大小的DNA进行剪切后，用凝胶电脉分离各核酸片断，实验结果如图所示。请问：三种不同的限制性内切酶在此DNA片断上相应切点的位置是（）C第2页/共25页4 4、(高考试题：高考试题：20072007广东生物)7.)7.现有一长度为10001000碱基对(by(by）的DNADNA分子，用限制性核酸内切酶EcoR1EcoR1酶切后得到的DNADNA分子仍是1000 by1000 by，用Kpn1Kpn1单独酶切得到400 by400 by和600 by600 by两种长度的DNADNA分子，用EcoRI,KpnlEcoRI,Kpnl同时酶切后得到200 by200 by和600
3、by600 by两种长度的DNADNA分子。该DNADNA分子的酶切图谱正确的是【答案】D D第3页/共25页2.获取目的的基因技术例：如果所需要的目的基因的序列完全不知，或只知道目的基因的一段，或想从一种生物体内获得很多基因，选用下列方法可以获得目的基因的是()A.直接从含有目的基因的生物体内获取B.构建基因文库C.利用PCR技术扩增D.通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成答案：B解析：若目的基因序列完全不知，或只知道基因序列的一段，就无法利用A、C、D三项所述方法获得，而只能采用构建基因文库的方法获取目的基因。第4页/共25页5Ti质粒上有TDNA，这种DNA可以转移到受体细胞，并且整合
4、到受体细胞染色体的DNA上。这种质粒存在于()A大肠杆菌B农杆菌C酵母菌D苏云金芽孢杆菌B第6页/共25页6基因与载体结合所需的条件有()同一种限制酶具有某些标记基因的质粒RNA聚合酶目的基因DNA连接酶 四种脱氧核苷酸ATPABC DB第7页/共25页7关于关于DNA重组技术基本工具的说法正确的重组技术基本工具的说法正确的是是 ()ADNA连接酶只能连接双链连接酶只能连接双链DNA片段互补片段互补的黏性末端的黏性末端B细菌细胞中含有的限制酶不能对自身细菌细胞中含有的限制酶不能对自身DNA进行剪切进行剪切C限制酶切割限制酶切割DNA后一定能产生黏性末端后一定能产生黏性末端D天然的质粒就可以用来
5、作为载体天然的质粒就可以用来作为载体B第8页/共25页8、苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花植株后是否已表达，从生物个体水平进行检测的方法()A是否有抗药性B是否有相应的抗虫性状C是否能检测至标记基因D是否能分离到目的基因B第9页/共25页9、如果科学家通过转基因工程，成功地把一名女性血友病患者的造血细胞进行改造，使其凝血功能恢复正常。那么，她后来所生的儿子中：（）A全部正常B一半正常C全部有病D不能确定C第10页/共25页1010、我国科学工作者经研究发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金芽孢杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死，而此毒蛋白对人畜无害。通过科技攻关，我国科工作者已成功地将该毒蛋白基因
6、导人棉花植株体内并实现了表达。由于棉铃虫吃了新品种“转基因抗虫棉”植株后就会死亡，所以该棉花新品种在近年推广后，已收到了很好的经济效益，请据以上所给材料回答下列问题：(1)(1)害虫抗药性的增强是 的结果(2(2）“转 基 因”抗 虫 棉 新 品 种 的 培 育 应 用 了 新技术(3)(3)在培育新基因抗虫棉新品种过程中，所用的基因的“剪刀”是 ，基因的“针线”是 ，基因的“运载工具”是 (5)“(5)“转基因抗虫棉”抗害虫的遗传信息传递过程可以表示为 (6)(6)该科技成果在环保上的重要作用是 自然选择基因工程(或DNADNA重组技术)限制酶DNADNA连接酶；运载体抗虫基因 mRNA m
7、RNA 毒蛋白减少农药对环境的污染，保护了生态环境第11页/共25页11、番茄在运输和贮藏过程中，由于过早成熟而易腐烂，应用基因工程技术，通过抑制某种促进果实成熟激素的合成能力，可使番茄贮藏时间延长，培育成耐贮藏的番茄新品种，这种转基因番茄已于1953年在美国上市，请回答：(1)在培育转基因番茄的基因操作中，所用的基因的“剪刀”是，基因的“针线”是,基因的“运输工具”是(2)与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优点是限制酶DNA连接酶运载体 目的性强，育种周期短；克服远缘杂交不亲和的障碍第12页/共25页1212、（2005江苏生物38）(9分)在植物基因工程中，用土壤农杆
8、菌中的Ti质粒作为运载体把目的基因重组人Ti质粒上的T-DNA片段中，再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中。(1)科 学 家 在 进 行 上 述 基 因 操 作 时，要 用 同 一 种 分别切割质粒和目的基因，质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过而黏合。(2)将携带抗除草剂基因的重组Ti质粒导入二倍体油菜细胞，经培养、筛选获得一株有抗除草剂特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的T-DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交F1代中，仍具有抗除草剂特性的植株占总数的，原因是(3)种植上述转基因油菜，它所携带的目的基因可以通过花粉传
9、递给近缘物种，造成“基因污染”。如果把目的基因导人叶绿体DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是限制酶3/4雌雄配子各有12含抗除草剂基因；受精时，雌雄配于随机结合。叶绿体遗传表现为母系遗传，目的基因不会通过花粉传递并在下一代中显现出来。碱基互补配对第13页/共25页1313（1212分）某质粒上有SalSal、HinHindd、BamBamH H I I三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。第14页/共25页将含有目的基因的DNA与质粒分别用Sal I酶切，酶切产物用_催化连接后，两个DNA片段的连接结果有
10、种。DNA连接酶3第15页/共25页在构建重组质粒时，应选用_两种酶对进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。Sal、Hind质粒和含抗盐基因的质粒和含抗盐基因的DNADNA某质粒上有某质粒上有SalSal、HinHindd、BamBamH IH I三种限制酶切割位点三种限制酶切割位点第16页/共25页为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加入，理由是。氨苄青霉素氨苄青霉素重组质粒中含抗氨苄青霉素基因而抗四环素基因被破坏重组质粒中含抗氨苄青霉素基因而抗四环素基因被破坏第17页/共25页将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用技术，愈伤组织经进而形成完整植株，此过程除营养物质外还必须
11、向培养基中添加。植物组织培养植物组织培养植物激素植物激素细胞增殖和分化细胞增殖和分化（生长调节剂（生长调节剂或或生长素和细胞分裂素）生长素和细胞分裂素）第18页/共25页14、应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，过程需要的工具酶是 ，过程常用的方法是 。目目的的基基因因人的生长人的生长激素基因激素基因转人生长激素基因牛转人生长激素基因牛无限增殖调控无限增殖调控基因（基因（prGprG）导入筛选体外培养体外培养单克隆抗体单克隆抗体棉花受体细胞棉花受体细胞抗虫棉抗虫棉抗虫基因抗虫基因重组重组TiTi质粒质粒受精卵受精卵检测v拓
12、展练习限制酶、DNA连接酶显微注射法第19页/共25页（2 2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有激素基因的首端必须含有 。过程培过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用 技术，培育出多头相同的转基因犊牛。技术，培育出多头相同的转基因犊牛。启动子启动子目目的的基基因因人的生长人的生长激素基因激素基因转人生长激素基因牛转人生长激素基因牛无限增殖调控无限增殖调控基因（基因（prGprG）导入筛选体外培养体外培养单克隆抗体单克隆抗体棉
13、花受体细胞棉花受体细胞抗虫棉抗虫棉抗虫基因抗虫基因重组重组TiTi质粒质粒受精卵受精卵检测胚胎分割和胚胎移植胚胎分割和胚胎移植第20页/共25页（3 3）prGprG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，最可能是最可能是 细胞，细胞，代表的细胞具有代表的细胞具有 的特点。的特点。目目的的基基因因人的生长人的生长激素基因激素基因转人生长激素基因牛转人生长激素基因牛无限增殖调控无限增殖调控基因（基因（prGprG）导入筛选体外培养体外培养单克隆抗体单克隆抗体棉花受体细胞棉花受体细胞抗虫棉抗虫棉抗虫基因抗虫基因
14、重组重组TiTi质粒质粒受精卵受精卵检测效应效应B B既能无限增殖又能产生特异性抗体既能无限增殖又能产生特异性抗体第21页/共25页（4 4）在抗虫棉培育过程中，）在抗虫棉培育过程中，过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是叶肉细胞相比较，其优点是 ，过程采用的技术是过程采用的技术是 。目目的的基基因因人的生长人的生长激素基因激素基因转人生长激素基因牛转人生长激素基因牛无限增殖调控无限增殖调控基因（基因（prGprG）导入筛选体外培养体外培养单克隆抗体单克隆抗体棉花受体细胞棉花受体细胞抗虫棉抗虫棉抗虫基因抗虫基因重组重组T
15、iTi质粒质粒受精卵受精卵检测全能性高全能性高植物组织培养植物组织培养第22页/共25页4.蛋白质工程例：蛋白质工程中，需要直接操作的对象是()A.氨基酸结构 B.蛋白质的空间结构C.基因结构 D.肽链结构答案：C解析：蛋白质工程目标是对蛋白质进行分子设计，但因为基因决定蛋白质，因此归根到底还需对相应的基因进行设计。第23页/共25页15、科学家将干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达，使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸，结果大大提高干扰素的抗病性活性，并且提高了储存稳定性，该生物技术为（）A.基因工程 B.蛋白质工程C.基因突变 D.细胞工程B第24页/共25页谢谢您的观看！第25页/共25页