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1、龙源期刊网 http:/抗双链抗双链 DNADNA 抗体(抗体(dsDNAdsDNA 抗体)检测及临抗体)检测及临床应用床应用作者:周福利来源:医学信息2015 年第 02 期摘要:目的 探讨抗双链 DNA抗体(dsDNA抗体)检测在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的意义。方法 酶联免疫吸附法联合间接免疫荧光发检测抗双链DNA抗体(dsDNA抗体)。结果 SLE组、其他风湿病组和健康对照组抗双链DNA抗体水平比较,差异均有统计学意义(P关键词:SLE dsDNA抗体系统性红斑狼疮(SLE):是一种自身免疫性疾病,它的发病与家族遗传、紫外线照射、体内雌激素水平、某些药物、食物及感染有关210。我们
2、分析 96例 SLE患者抗双链 DNA抗体(dsDNA抗体)检测结果,以探讨抗双链DNA抗体(dsDNA抗体)在 SLE诊断治疗中的临床应用 1资料与方法 1.1一般资料 我院 2011年 10月2014年 3月风湿免疫科门诊及病房SLE患者 96例(SLE组),SLE诊断标准符合美国风湿病学会SLE分类标准(2009年),年龄 4572岁,平均年龄(558)岁,其中男 25例,女 71例;其他风湿疾病对照组40例,年龄 4065岁,平均年龄(458)岁,其中男 15例,女 25例;健康对照组为 100名健康体检者,年龄4070 岁,平均年龄(5010)岁,其中男 25例,女 75例。1.2方
3、法和试剂 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测抗双链DNA抗体(dsDNA抗体),采用间接免疫荧光法检测抗双链DNA抗体(dsDNA抗体)。试剂盒由欧蒙公司提供。测定严格按试剂说明书操作。酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测抗双链 DNA抗体步骤:取 5l血清用 1.0ml样本缓冲液稀释并混匀,1:201倍稀释。按加样方案向相应微孔分别加100l标准品、阳性对照、阴性对照或稀释后的样本,加样时间不要超过15min。室温温育30min(+18到+25)。倒掉微孔板内液体,用稀释后的清洗缓冲液洗三次,300ul/次.滴加100ul酶结合物至每一微孔,室温温育30min(+18到+25)。倒掉微孔板内液体,如上述步骤清洗。滴加 100ul色原/底物液至每一微孔,室温避光温育30min(+18到+25)。倒掉微孔板内液体,如上述步骤清洗。滴加100ul终止也至每一微孔。450nm比色,参考波长620nm。采用欧蒙试剂,间接免疫荧光法(IIF)检测 dsDNA。加 1:10稀释的待检血清、阴性和阳性血清对照各 25ul到反应区。置于室温 30min后,放置 PBS洗液缸浸泡 5min。在每个反应